普卡那肽的制备方法与流程

技术特征：
1.一种可溶性片段肽树脂，其结构为：mmsb-[lys(boc)]
n-树脂；其中，n＝2～10；所述树脂为wang树脂、rink树脂或2ctc树脂。2.根据权利要求1所述的可溶性片段肽树脂，其特征在于，其为mmsb-lys(boc)-lys(boc)-rink resin。3.权利要求1或2所述可溶性片段肽树脂的制备方法，其包括：树脂与fmoc-lys(boc)-oh偶联，制备h-[lys(boc)]
n-树脂；然后与mmsb偶联，制备mmsb-[lys(boc)]
n-树脂；其中，n＝2～10；所述树脂为wang树脂、rink树脂或2ctc树脂。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述树脂的替代度为0.2～1.0mmol/g。5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述偶联的溶剂选自四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、丙酮、乙醚、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、己烷、氯仿、二氯甲烷中至少一种。6.根据权利要求3～5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述偶联的偶联剂为hobt和dipcdi。7.普卡那肽的制备方法，其包括：步骤1：根据普卡那肽的肽序，在mmsb-[lys(boc)]
n-树脂的-oh端依次偶联各保护氨基酸残基，制备普卡那肽树脂；步骤2：使cys4与cys
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形成二硫键、cys7与cys
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形成二硫键；步骤3：脱除树脂和mmsb-[lys(boc)]
n-oh，获得普卡那肽粗肽；其中，n＝2～10；所述树脂为wang树脂、rink树脂或2ctc树脂。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述依次偶联的氨基酸原料为：fmoc-leu-oh、fmoc-cys(mmt)-oh、fmoc-gly-oh、fmoc-thr(tbu)-oh、fmoc-cys(acm)-oh、fmoc-ala-oh、fmoc-val-oh、fmoc-asn(trt)-oh、fmoc-val-oh、fmoc-cys(mmt)-oh、fmoc-leu-oh、fmoc-glu(otbu)-oh、fmoc-cys(acm)-oh、fmoc-glu(otbu)-oh、fmoc-asp(otbu)-oh、fmoc-asn(trt)-oh。9.根据权利要求7或8所述的制备方法，其特征在于，所述fmoc-leu-oh与mmsb-[lys(boc)]
n-树脂偶联的步骤中，偶联剂为dipcdi、hobt和dmap；其他氨基酸的偶联步骤中，偶联剂为dipcdi和化合物a的组合物或dipea、化合物a和化合物b的组合物；其中，化合物a为hoat或hobt，化合物b为pyaop、pybop、hatu、hbtu或tbtu。10.根据权利要求8～9任一项所述的制备方法，其特征在于，在步骤2与步骤1之间，还包括脱除cys残基的mmt保护基的步骤；所述脱除mmt保护基的试剂为tfa、tis和dcm的组合物。11.根据权利要求7～10任一项所述的制备方法，其特征在于，使所述cys4与cys
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形成二硫键的氧化剂为h2o2；使所述cys7与cys
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形成二硫键的氧化剂为i2。12.根据权利要求7～11任一项所述的制备方法，其特征在于，所述脱除树脂的试剂为tfa、tis和水的组合物；
所述脱除mmsb-[lys(boc)]
n-oh的试剂为nh4i和dms。13.根据权利要求7～12任一项所述的制备方法，其特征在于，所述还包括对普卡那肽粗肽纯化的步骤；所述纯化采用反相高压液相色谱法。14.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，所述反相高压液相色谱法的固定相为反相十八烷基硅烷，流动相中，a相为0.1％三氟乙酸水溶液,b相为乙腈。

技术总结
本发明涉及多肽制备技术领域，尤其涉及普卡那肽的制备方法。本发明利用可溶性片段肽树脂：Mmsb-[Lys(Boc)]


技术研发人员：邹卫星 尹传龙 唐洋明 余品香
受保护的技术使用者：深圳翰宇药业股份有限公司
技术研发日：2020.06.17
技术公布日：2021/12/16