稻瘟灵含量检测用半抗原、制备方法及其应用与流程

技术特征：
1.一种稻瘟灵含量检测用半抗原，其特征在于，化学式为：2
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(2
‑
(1,3
‑
二异丙醚
‑
1,3
‑
二氧丙烷
‑2‑
亚基)
‑
1,3
‑
二硫戊环)乙酸；化学结构式为：2.一种如权1中所述半抗原的制备方法，包括以下步骤：在强碱反应环境下，以丙二酸二异丙酯为原料与二硫化碳和3,4
‑
二氯丁酸进行缩合反应，得到稻瘟灵含量检测用半抗原。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)丙二酸二异丙酯与二硫化碳在室温下搅拌混匀后，加强碱溶液后室温下搅拌1h后，加入3,4
‑
二氯丁酸并补加强碱溶液、四丁基溴化铵和乙腈，得到原料液；2)对原料液加热回流反应4h后停止反应，得到反应液；3)对所得反应液进行旋蒸、提纯分离得到所述稻瘟灵含量检测用半抗原。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中所述旋蒸操作包括以下步骤：旋蒸除去反应液中乙腈和二硫化碳后加水和酸溶液，调节反应液ph值到6；优选的，所用强碱溶液为2mol/l koh溶液；所述酸溶液为6mol/l hcl溶液；每次萃取所用溶剂的体积为100ml。5.一种稻瘟灵含量检测用抗原，其特征在于，为由如权利要求2～4中任一项所述方法制备得到的或如权利要求1中所述半抗原与载体蛋白偶联得到的偶联物。6.根据权利要求5所述的稻瘟灵含量检测用抗原，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白或血蓝蛋白。7.一种稻瘟灵含量检测用抗体，其特征在于，为由如权利要求5或6中任一项所述的抗原经动物免疫得到的抗体；所述抗体能与稻瘟灵发生特异性免疫反应。8.一种稻瘟灵酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所用抗体为权利要求7中所述稻瘟灵含量检测用抗体。9.根据权利要求8所述的稻瘟灵酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述稻瘟灵酶联免疫试剂盒检测样本为经过预处理的烟草样本。10.根据权利要求8所述的稻瘟灵酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述稻瘟灵酶联免疫检测试剂盒包括：酶标板、工作液；酶标板为上述抗原；工作液为用辣根过氧化物酶标记的上述抗体液体。11.根据权利要求8所述的稻瘟灵酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述稻瘟灵酶联免疫检测试剂盒包括：梯度浓度的稻瘟灵标准品溶液、底物显色a、b液、终止液、洗涤液、复溶液；所述梯度浓度的稻瘟灵标准品溶液的梯度浓度为0μg/l、0.1μg/l、0.3μg/l、0.9μg/l、
2.7μg/l、8.1μg/l；所述底物显色a、b液：a液为过氧化脲，b液为四甲基联苯胺；所述终止液为2mol/l硫酸；所述洗涤液为ph7.2，含0.8％～1.2％吐温
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20、0.01
‰
～0.03
‰
硫柳汞防腐剂、0.1～0.3mol/l的碳酸盐缓冲液；所述复溶液为ph 7.6，含8％～12％酪蛋白、0.1～0.3mol/l的磷酸盐缓冲液。

技术总结
本发明公开了一种稻瘟灵含量检测用半抗原、制备方法及其应用，具体涉及一种稻瘟灵酶联免疫检测用半抗原，本发明还公开了所述半抗原的制备方法及其在抗体、试剂盒方面的应用。基于稻瘟灵半抗原建立的酶联免疫试剂盒快速检测产品，使用方便、检测成本低、检测方法高效、准确、快速、可同时检测大批量的样本，适用于农产品尤其在烟草中稻瘟灵的现场监控和大量样本的筛查。量样本的筛查。


技术研发人员：王春琼 陈丹 张燕 秦世春 李苓 蔡洁云 张轲 张晓伟 彭丽娟 孙浩巍 杨艺敏 张庆刚
受保护的技术使用者：云南省烟草质量监督检测站
技术研发日：2021.10.15
技术公布日：2021/12/14