一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用的制作方法

1.本发明属于植物保鲜剂领域，具体涉及一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用。


背景技术：

2.梨炭疽病又称苦腐病，是由盘长孢状刺盘孢侵染所引起的、发生在梨上的病害。病原为盘长孢状刺盘孢(colletrichum gloeosporioidespenz.)。病原菌以菌丝体在僵果或病枝上越冬，第二年条件适宜时对梨树产生侵染。采摘后随梨子生活力降低而逐渐发病，往往在贮藏期间继续扩大甚至造成大量果实腐烂，造成一定的经济损失。梨炭疽病发生普遍，在世界各地梨产区均有发生。
3.梨轮纹病又称粗皮病，轮纹病菌是一种真菌，有性阶段属于子囊菌亚门，无性阶段属于半知菌亚门physalospora piricola nose、(macrophoma kuwatsukai hara)，梨轮纹病菌和苹果轮纹病菌是同一种可以互相侵染。果实染病后，于果面以皮孔为中心发生水渍状、褐色、近圆形的小斑点，迅速向四周扩展，形成深褐与浅褐色相间的轮纹型病斑，病斑不凹陷，呈软腐状，后期于病部散生小黑点，此为病菌的分生孢子器。病果很快腐烂，可流出茶色汁液，但仍保持果形不变，失水干缩后变僵果。病菌潜育期较长，从幼果期侵染，到近成熟期和贮藏期才表现出症状。是一种较为严重的贮藏期病害。
4.目前，梨贮藏保鲜方法有化学保鲜剂、天然保鲜剂、生物保鲜剂、气调贮藏等。使用化学保鲜剂具有低成本、高防效等优势，目前仍是一种重要的保鲜防腐手段。化学保鲜剂虽然能起到防腐保鲜作用，但大多具有不同程度的毒性和残留，对人体具有潜在的危害。
5.竹醋液属于天然保鲜剂，是竹材碳化、热解过程中产生的副产品，由有机酸、酚类、酮类、醇类及脂类等多种组分组成，对多种细菌和真菌具有较强的抑制作用，是一种良好的天然源防腐保鲜剂的开发材料。因此通过竹醋液与化学保鲜剂的复配，开发研制防治梨炭疽病的保鲜剂，对化学保鲜剂使用量的降低，增强保鲜效果起到积极的作用。


技术实现要素：

6.本发明提供一种可用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用。本发明提供如下技术方案：
7.一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂，保鲜剂中活性成分是由药剂a、b和竹醋液组成，药剂a和b组合为甲基硫菌灵和戊唑醇组合。本发明所述的保鲜剂中药剂a和药剂b的质量配比为25∶1～1∶10，化学农药质量百分含量为1～5％，竹醋液质量百分含量在60～80％。优选的药剂a和药剂b的质量配比为10∶1
‑
1∶10、5∶1
‑
1∶5。
8.本发明所述剂型为水悬浮剂，各组分的重量百分含量为：
[0009][0010]
本药剂组合物水悬浮剂的加工步骤为：先将助剂及水混合，经高速剪切混合均匀，加入药剂a和药剂b原药，在砂磨机中磨0.5～2小时，使微粒粒径全部在5μm以下，制得本发明所述的组合物水悬浮剂。
[0011]
本发明所述的溶剂是环己烷、二氯乙烷、正己烷、乙酸乙酯、三氯甲烷、环己烷、丙酮、n，n
‑
二甲基甲酰胺、甲苯、四氯化碳、乙二醇中的一种或几种。
[0012]
本发明所述的增稠剂是硅酸镁铝、黄原胶、羟甲基纤维素、阿拉伯树胶、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶中的一种或是几种。
[0013]
本发明所述的乳化剂是烷基酚聚氧乙烯醚磷酸盐、烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物、二苯基酚聚氧乙烯聚甲醛缩合物、二苯基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、吐温
‑
60、nno、moa
‑
7、601、a
‑
110、tx
‑
10、宁乳700#、5202中的一种或几种。
[0014]
本发明有益技术效果：
[0015]
本发明制备得到的保鲜剂可有效控制炭疽病、轮纹病对梨储藏期的危害，有效减少药剂的使用量，延缓炭疽病、轮纹病对抗药剂的抗药性，提高保鲜效果，降低贮藏损失，具有显著的经济和社会效益。
附图说明
[0016]
图1：复配组合2对梨炭疽病的保鲜效果图
[0017]
图2：复配组合4对梨轮纹病的保鲜效果图
具体实施方式
[0018]
下面通过实施例来具体说明本发明的内容。在本发明中，以下实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0019]
实施例1竹醋液及杀菌剂对供试植物病原菌的毒力
[0020]
供试作物病菌：梨炭疽病、轮纹病
[0021]
测定方法：采用菌丝生长速率法测定竹醋液及杀菌剂对供试植物病原菌的毒力。
[0022]
将供试竹醋液用无菌水稀释到适当浓度。取稀释后的竹醋液1ml，加入24ml pda培养基中混合均匀，倒入培养皿中制成含竹醋的培养平板。以加入同量无菌水的pda培养基平板作为空白对照(ck)。
[0023]
供试杀菌剂以乙腈溶解并稀释至适当浓度，分别取杀菌剂溶液1ml，与24mlpda培养基混合均匀，倒入培养皿中制成不同浓度的含药培养基。以加入同量乙腈的pda培养基平板作为空白对照(ck)。
[0024]
无菌环境下，用打孔器将固体pda培养基培养的供试菌种制成直径为5.0mm的菌饼。接种供试病原菌菌饼(菌丝面朝下)。将接种后的pda培养基平板倒置，放于28℃恒温箱中培养。培养至ck菌丝长至培养皿85％左右，用抗游标卡尺测量菌落直径。计算菌丝生长抑制率，求得各单剂毒力回归方程、相关系数和ec50。
[0025]
表1各单剂与竹醋液对梨炭疽病、轮纹病的毒力
[0026][0027]
实施例2复配组合联合作用测试
[0028]
根据各单剂和竹醋液的ec50，通过正交试验，设计各种配比组合，将各配比组合用无菌水稀释到适当浓度。取稀释后的竹醋液1ml，加入24ml pda培养基中混合均匀，倒入培养皿中制成含竹醋的培养平板。以加入同量无菌水的pda培养基平板作为空白对照(ck)。
[0029]
无菌环境下，用打孔器将固体pda培养基培养的供试菌种制成直径为5.0mm的菌饼。接种供试病原菌菌饼(菌丝面朝下)。将接种后的pda培养基平板倒置，放于28℃恒温箱中培养。培养至ck菌丝长至培养皿85％左右，用抗游标卡尺测量菌落直径。计算菌丝生长抑制率，求得各单剂毒力回归方程、相关系数、ec 50和共毒系数。
[0030]
以共毒系数ctc值评判复配剂的联合毒力作用。ctc值小于80为拮抗作用，80
‑
120之间时为相加作用，120
‑
200具有一定增效作用，大于200为明显增效。
[0031]
表2正交实验设计表
[0032]
实验号竹醋液药剂a药剂b11112123
313441425212622472338241931310321113321234413414144221543116443
[0033]
注：列表中的1、2、3、4代表ec50的倍数，以1号实验组为例a1b1c1表示实验各组分浓度比＝1倍竹醋液ec50∶1倍药剂aec50∶1倍药剂b ec50；a、b为甲基硫菌灵或戊唑醇。
[0034]
表3复配组合(甲基硫菌灵
·
戊唑醇
·
竹醋液)对梨炭疽病的毒力
[0035][0036][0037]
通过表3可以看出，复配组合(甲基硫菌灵
·
戊唑醇
·
竹醋液)联合毒力指数ctc大多大于120，说明复配剂具有明显的增效作用。
[0038]
表4复配组合(甲基硫菌灵
·
戊唑醇
·
竹醋液)对梨轮纹病的毒力
[0039][0040][0041]
通过表4可以看出，复配联合毒力指数ctc基本都大于120，说明复配剂4具有明显的增效作用。
[0042]
实施例3活体抑菌活性测定
[0043]
测试方法：实施例中配方与不同药剂进行浸果处理，晾干后每个果子扎孔(3mm深)，每个果子扎孔3个。每个孔中贴上5mm菌饼，每组处理6个梨子。室温培养6天，测定病斑直径，验证了药剂对炭疽病和轮纹病的防治效果。
[0044]
测试药剂：
[0045]
表5复配剂成分组成(1l)及防治对象
[0046]
复配组名称竹醋液甲基硫菌灵戊唑醇吡唑醚菌酯助剂剂型防治对象(复配剂2)甲基硫菌灵戊唑醇竹醋液876.5m143.8g9.7g/70g悬浮剂炭疽病(复配剂4)甲基硫菌灵
·
戊唑醇
·
竹醋液854.5ml74.3g2.9g/68.3g悬浮剂轮纹病
[0047]
对比药剂：43％戊唑醇乳油、70％甲基硫菌灵可湿性粉剂
[0048]
测试结果
[0049]
表6：复配剂2及对照组活体实验防治效果分析表
[0050][0051]
通过表6可以看出，复配剂2按照800稀释时，在防治效果上与70％甲基硫菌灵800倍和43％戊唑醇4000倍相当；按照800倍稀释时，防治效果略高于于43％戊唑醇5000倍。
[0052]
复配剂2的800倍稀释药液，每升中含0.055g甲基硫菌灵和0.012g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵800倍稀释药液，每升含0.875g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了92.4％；相对于单剂戊唑醇4000倍稀释药液，每升含0.107g戊唑醇，化学农药有效成分总量减少了37.8％；
[0053]
复配剂2的1000倍稀释药液，每升中含0.044g甲基硫菌灵和0.010g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵1200倍稀释药液，每升含0.583g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了90.8％；相对于单剂戊唑醇5000倍稀释药液，每升含0.107g戊唑醇，化学农药有效成分总量减少了37.8％；
[0054]
说明复配剂2对梨炭疽病具有良好的防治效果的同时达到农药减量化的目的。
[0055]
表7：复配剂4及对照组活体实验防治效果分析表
[0056][0057]
通过表7可以看出，复配剂4按照100稀释时，在防治效果上与70％甲基硫菌灵800倍和43％戊唑醇4000倍相当；按照200倍稀释时，防治效果略高于于43％戊唑醇5000倍。
[0058]
复配剂4的100倍稀释药液，每升中含0.743g甲基硫菌灵和0.029g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵800倍稀释药液，每升含0.875g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了11.8％；
[0059]
复配剂4的200倍稀释药液，每升中含0.372g甲基硫菌灵和0.015g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵1200倍稀释药液，每升含0.583g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了33.8％；说明复配剂4对梨轮纹病具有良好的防治效果。
[0060]
实施例4竹醋液对杀菌组合联合作用测试
[0061]
表8：复配2中加竹醋液与不加竹醋液对梨炭疽病的毒力对比
[0062]
实验组回归方程相关系数共毒系数加竹醋液y＝2.15x
‑
2.06380.9774295.40不加竹醋液y＝1.5582x
‑
0.32740.97993217.25
[0063]
竹醋液ec50∶甲基硫菌灵ec50∶戊唑醇ec50＝4∶3∶1
[0064]
本研究发明首次以竹醋液为主体配置的农药，通过表8可以看出，在复配2中竹醋液的使用明显提高了农药的共毒系数。
[0065]
表9：复配4中加竹醋液与不加竹醋液对梨炭疽病的毒力对比
[0066]
实验组回归方程相关系数共毒系数加竹醋液y＝2.644x
‑
3.58860.9929226.47不加竹醋液y＝1.4893x
‑
0.14610.9681140.59
[0067]
竹醋液ec50∶甲基硫菌灵ec50∶戊唑醇ec50＝1∶1∶3
[0068]
本研究发明首次以竹醋液为主体配置的农药，通过表9可以看出，在复配4中竹醋液的使用明显提高了农药的共毒系数。