一种食品生产用生物酶制剂的制备方法与流程

1.本发明属于食品生产技术领域，具体是一种食品生产用生物酶制剂的制备方法。


背景技术：

2.生物酶是一种由活细胞产生的生物大分子，绝大多数的生物酶都是由蛋白质组成，也有少部分是由核酸组成，酶制剂是指从生物中提取的具有酶特性的一类物质，主要作用是对食品加工中的化学反应起催化作用，以此达到对食品加工方法的改进。
3.葡萄糖氧化酶是食品用生物酶的一种，它是一种需氧脱氢酶，可以除去食品和容器中的氧，从而防止食物的变质，并且针对面粉，能够在有氧环境下将葡萄糖转换为葡萄糖酸并生成过氧化氢，过氧化氢是一种很强的氧化剂，能够增强面筋的强度、提高面团延展性、增大面包体积，并且还可以取代对人体有致癌作用的溴酸钾，具有很高的价值。
4.葡萄糖氧化酶的应用无疑是十分广泛的，但是依旧存在着产量低和活性低的缺点，因此针对上述问题提出一种高产、高活的制备方法。


技术实现要素：

5.本发明的目的是针对以上问题，本发明提供了一种食品生产用生物酶制剂的制备方法，具有酶产量高活性高的优点。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种食品生产用生物酶制剂的制备方法，包括以下步骤：
7.第一步：选取菌种
8.选取点青霉作为培养菌种，培养前对点青霉营养体进行活性检测，选取活性高的点青霉营养体；
9.第二步：制取发酵液
10.a、选取无菌环境或者对环境进行消毒处理；
11.b、在上述环境中对点青霉营养体进行培养基培养，培养时环境温度保持在25℃～27℃，保持无光照环境；
12.c、培养2～3天时加入培养液，并且通入足量氧气，继续培养48～52小时，培养完成后得到发酵液；
13.第三步：制取粗酶液
14.a、对发酵液进行膜浓缩过滤处理，得到初步菌体滤液；
15.b、取部分上述所得菌体滤液进行样本保存检测查看其品质与产量，样本需在6℃～8℃环境中进行保存，并且保持无菌状态；
16.第四步：后期处理
17.a、选取无菌处理环境；
18.b、对所得菌体滤液进行提纯、精制、添加制剂等操作可得到不同状态的的酶制剂；
19.c、对制取完成的酶制剂进行封装保存，操作人员需利用医用酒精对手部进行消毒
处理，保证酶制剂的安全性。
20.作为本发明的一种优选技术方案，所述培养基中整体材料组成成分如下：葡萄糖4％～7％、硝酸钠0.1％～0.3％、硫酸镁0.01％～0.05％、磷酸二氢钾0.2％～ 0.3％、氯化钾0.05％～0.1％、硫酸亚铁0.07％～0.15％、烟酸0.01％～0.03％、琼脂2％～5％，其余为蒸馏水，此成分配方能够提供点青霉成长所需的一切物质并且对其生长具有较好的促进作用，成分在一定范围内可以进行调节，可针对具体情况进行调整，选用蒸馏水能够不引入新的杂质，保证可控性与安全性。
21.作为本发明的一种优选技术方案，所述培养液中整体材料组成成分如下：玉米粉6.3％～8.5％、麸皮4.5％～7％、豆芽汁13.5％～16.7％、其余为水；所述培养液分三次添加，第一次加入培养液总量的40％，第二次和第三次分别为30％，添加时通过搅拌棒沿培养基瓶内壁引流，防止培养液溅出；在加入培养液时需对操作人员进行消毒处理，消毒选用医用酒精，消毒后操作人员佩戴一次性橡胶手套，此阶段发酵速度增加，加入培养液能够促进发酵速度，提升酶的产量，以较小的成本达到较大的收获，分三次添加培养液，能够使发酵液内的点青霉营养体能够更加充分的对培养液进行吸收，培养效果好，消毒处理能够使得培养过程更加可控，防止引入病菌或杂质，影响发酵液的质量。
22.作为本发明的一种优选技术方案，所述膜浓缩处理所使用的膜为管式膜且为有机膜，所述膜的孔径在20～1000a
°
之间，所述膜浓缩的处理方式为超滤，管式膜是在玻璃纤维合成纸、无纺布、塑料、陶瓷或不锈钢等支撑体流延而成的，外型为圆柱体或类圆柱体的膜；膜浓缩能耗低、对产品影响小，工序简便，具有较好的浓缩效果，超滤器具有单位容器内填充密度高的优点，浓缩效率高。
23.作为本发明的一种优选技术方案，所述菌体滤液浓缩后可得到粗酶粉或者加入填充剂可得到液体酶，后期制取方式的不同可得到不同的酶制剂，用来针对不同的使用情况，适用范围广。
24.作为本发明的一种优选技术方案，所述菌体滤液提取后可得到粗纯酶粉，所述粗纯酶粉经过成型可得到粒状酶制剂，所述粗纯酶粉经过精制可得到精制酶。
25.作为本发明的一种优选技术方案，所述菌体滤液添加稳定剂和防腐剂后可得到稀酶液。
26.作为本发明的一种优选技术方案，所述制取粗酶液步骤中对发酵液的处理可由膜浓缩过滤替换为离心、絮凝、双水相萃取中的一种，上述方法均可以对发酵液进行浓缩处理得到粗酶液，区别在于其成本的高低。
27.与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
28.本发明通过对菌种的进行严格把控，选取优良的点青霉营养体进行培养，从源头进行质量把关，在培养时选用无菌环境，并选取了其最适宜的环境，在培养过程中添加培养液，能够在点青霉营养体生长繁殖时提供充足的营养成分，并且通入的氧气能够增加其活性，提高了发酵液的质量，整体操作均位于无菌环境下，具有较好的控制性，不会影响酶制剂的品质、产量和安全，本技术相对于现有技术而言具有酶产量高活性高的优点。
具体实施方式
29.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，
显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
30.本发明提供一种食品生产用生物酶制剂的制备方法，包括以下步骤：
31.第一步：选取菌种
32.选取点青霉作为培养菌种，培养前对点青霉营养体进行活性检测，选取活性高的点青霉营养体；
33.第二步：制取发酵液
34.a、选取无菌环境或者对环境进行消毒处理；
35.b、在上述环境中对点青霉营养体进行培养基培养，培养时环境温度保持在25℃～27℃，保持无光照环境；
36.c、培养2～3天时加入培养液，并且通入足量氧气，继续培养48～52小时，培养完成后得到发酵液；
37.第三步：制取粗酶液
38.a、对发酵液进行膜浓缩过滤处理，得到初步菌体滤液；
39.b、取部分上述所得菌体滤液进行样本保存检测查看其品质与产量，样本需在6℃～8℃环境中进行保存，并且保持无菌状态；
40.第四步：后期处理
41.a、选取无菌处理环境；
42.b、对所得菌体滤液进行提纯、精制、添加制剂等操作可得到不同状态的的酶制剂；
43.c、对制取完成的酶制剂进行封装保存，操作人员需利用医用酒精对手部进行消毒处理，保证酶制剂的安全性。
44.其中，培养基中整体材料组成成分如下：葡萄糖4％～7％、硝酸钠0.1％～ 0.3％、硫酸镁0.01％～0.05％、磷酸二氢钾0.2％～0.3％、氯化钾0.05％～0.1％、硫酸亚铁0.07％～0.15％、烟酸0.01％～0.03％、琼脂2％～5％，其余为蒸馏水，此成分配方能够提供点青霉成长所需的一切物质并且对其生长具有较好的促进作用，成分在一定范围内可以进行调节，可针对具体情况进行调整，选用蒸馏水能够不引入新的杂质，保证可控性与安全性。
45.其中，培养液中整体材料组成成分如下：玉米粉6.3％～8.5％、麸皮4.5％～ 7％、豆芽汁13.5％～16.7％、其余为水；培养液分三次添加，第一次加入培养液总量的40％，第二次和第三次分别为30％，添加时通过搅拌棒沿培养基瓶内壁引流，防止培养液溅出；在加入培养液时需对操作人员进行消毒处理，消毒选用医用酒精，消毒后操作人员佩戴一次性橡胶手套，此阶段发酵速度增加，加入培养液能够促进发酵速度，提升酶的产量，以较小的成本达到较大的收获，分三次添加培养液，能够使发酵液内的点青霉营养体能够更加充分的对培养液进行吸收，培养效果好，消毒处理能够使得培养过程更加可控，防止引入病菌或杂质，影响发酵液的质量。
46.其中，膜浓缩处理所使用的膜为管式膜且为有机膜，膜的孔径在20～ 1000a
°
之间，膜浓缩的处理方式为超滤，管式膜是在玻璃纤维合成纸、无纺布、塑料、陶瓷或不锈钢等支撑体流延而成的，外型为圆柱体或类圆柱体的膜；膜浓缩能耗低、对产品影响小，工序简
便，具有较好的浓缩效果，超滤器具有单位容器内填充密度高的优点，浓缩效率高。
47.其中，菌体滤液浓缩后可得到粗酶粉或者加入填充剂可得到液体酶，后期制取方式的不同可得到不同的酶制剂，用来针对不同的使用情况，适用范围广。
48.其中，菌体滤液提取后可得到粗纯酶粉，粗纯酶粉经过成型可得到粒状酶制剂，粗纯酶粉经过精制可得到精制酶。
49.其中，菌体滤液添加稳定剂和防腐剂后可得到稀酶液。
50.其中，制取粗酶液步骤中对发酵液的处理可由膜浓缩过滤替换为离心、絮凝、双水相萃取中的一种，上述方法均可以对发酵液进行浓缩处理得到粗酶液，区别在于其成本的高低。
51.实施例一
52.本发明提供一种食品生产用生物酶制剂的制备方法，包括以下步骤：
53.第一步：选取菌种
54.选取点青霉作为培养菌种，培养前对点青霉营养体进行活性检测，选取活性高的点青霉营养体；
55.第二步：制取发酵液
56.a、选取无菌环境或者对环境进行消毒处理；
57.b、在上述环境中对点青霉营养体进行培养基培养，培养时环境温度保持在25℃，保持无光照环境；
58.c、培养2天时加入培养液，并且通入足量氧气，继续培养49小时，培养完成后得到发酵液；
59.第三步：制取粗酶液
60.a、对发酵液进行膜浓缩过滤处理，得到初步菌体滤液；
61.b、取部分上述所得菌体滤液进行样本保存检测查看其品质与产量，样本需在6℃环境中进行保存，并且保持无菌状态；
62.第四步：后期处理
63.a、选取无菌处理环境；
64.b、对所得菌体滤液进行提纯、精制、添加制剂等操作可得到不同状态的的酶制剂；
65.c、对制取完成的酶制剂进行封装保存，操作人员需利用医用酒精对手部进行消毒处理，保证酶制剂的安全性。
66.实施例二
67.本发明提供一种食品生产用生物酶制剂的制备方法，包括以下步骤：
68.第一步：选取菌种
69.选取点青霉作为培养菌种，培养前对点青霉营养体进行活性检测，选取活性高的点青霉营养体；
70.第二步：制取发酵液
71.a、选取无菌环境或者对环境进行消毒处理；
72.b、在上述环境中对点青霉营养体进行培养基培养，培养时环境温度保持在27℃，保持无光照环境；
73.c、培养2.5天时加入培养液，并且通入足量氧气，继续培养51小时，培养完成后得
到发酵液；
74.第三步：制取粗酶液
75.a、对发酵液进行膜浓缩过滤处理，得到初步菌体滤液；
76.b、取部分上述所得菌体滤液进行样本保存检测查看其品质与产量，样本需在7℃环境中进行保存，并且保持无菌状态；
77.第四步：后期处理
78.a、选取无菌处理环境；
79.b、对所得菌体滤液进行提纯、精制、添加制剂等操作可得到不同状态的的酶制剂；
80.c、对制取完成的酶制剂进行封装保存，操作人员需利用医用酒精对手部进行消毒处理，保证酶制剂的安全性。
81.实施例三
82.包括以下步骤：
83.第一步：选取菌种
84.选取点青霉作为培养菌种，培养前对点青霉营养体进行活性检测，选取活性高的点青霉营养体；
85.第二步：制取发酵液
86.a、选取无菌环境或者对环境进行消毒处理；
87.b、在上述环境中对点青霉营养体进行培养基培养，培养时环境温度保持在26℃，保持无光照环境；
88.c、培养3天时加入培养液，并且通入足量氧气，继续培养50小时，培养完成后得到发酵液；
89.第三步：制取粗酶液
90.a、对发酵液进行膜浓缩过滤处理，得到初步菌体滤液；
91.b、取部分上述所得菌体滤液进行样本保存检测查看其品质与产量，样本需在7.5℃环境中进行保存，并且保持无菌状态；
92.第四步：后期处理
93.a、选取无菌处理环境；
94.b、对所得菌体滤液进行提纯、精制、添加制剂等操作可得到不同状态的的酶制剂；
95.c、对制取完成的酶制剂进行封装保存，操作人员需利用医用酒精对手部进行消毒处理，保证酶制剂的安全性。
96.需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
97.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。