制备铼螯合MAG3寡核苷酸的新方法与流程

技术特征：
1.一种制备式(iii)化合物的方法，所述方法包括以下步骤：a)使式(i)化合物：其中r为h或硫醇保护基，与铼络合物的前体在溶剂中反应，得到式(ii)化合物：b)添加n
‑
羟基琥珀酰亚胺和偶联剂，得到式(iii)化合物：其中步骤a)和b)在一锅法反应中进行。2.根据权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括步骤c)：添加氨基寡核苷酸和碱以得到式(iv)化合物：3.根据权利要求2所述的方法，其中步骤a)、b)和c)在一锅法反应中进行。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述铼络合物的前体选自由以下所组成的组：reocl3(pph3)2、re(nph)cl3(pph3)2、reo2(pph3)2i和re(nph)cl3(pph3)2。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述铼络合物的前体是reocl3(pph3)2。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中r是选自由以下所组成的组的硫醇保护基：乙酰基(ac)、苯甲酰基(bz)、苄基(bn)、β
‑
甲氧基乙氧基甲基醚(mem)、二甲氧基三苯甲基(或双
‑
(4
‑
甲氧基苯基)苯基甲基)(dmt)、三甲氧基三苯甲基(或三
‑
(4
‑
甲氧基苯基)苯基甲基)(tmt)、甲氧基甲基醚(mom)、甲氧基三苯甲基[(4
‑
甲氧基苯基)二苯基甲基(mmt)、
对甲氧基苄基醚(pmb)、甲硫基甲基醚、新戊酰(piv)、四氢吡喃基(thp)、四氢呋喃(thf)、三苯甲基或三苯基甲基(tr)、甲硅烷基醚(例如三甲基甲硅烷基(tms)、叔丁基二甲基甲硅烷基(tbdms)、三异丙基甲硅烷基氧基甲基(tom)和三异丙基甲硅烷基(tips)醚)以及甲基醚和乙氧基乙基醚(ee)。7.根据权利要求6所述的方法，其中r是选自由乙酰基(ac)和苯甲酰基(bz)所组成的组的硫醇保护基。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中步骤a)中的所述溶剂是极性非质子溶剂和极性质子溶剂的混合物。9.根据权利要求8所述的方法，其中dmf:meoh的体积比为约1:1。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中在步骤a)中进一步使用碱。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述的碱是naome。12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，所述方法包括以下步骤：a)使式(i)化合物：其中r是h、选自由乙酰基(ac)和苯甲酰基(bz)所组成的组的硫醇保护基，与reocl3(pph3)2，在体积比为约1:1的dmf:meoh中反应，得到式(ii)化合物：b)添加n
‑
羟基琥珀酰亚胺和edc
‑
hcl，得到式(iii)化合物：c)添加氨基寡核苷酸和碱，得到式(iv)化合物：
其中所述寡核苷酸包含至少一种2’糖修饰的核苷或lna核苷，且步骤a)、b)和c)是在一锅法反应中进行的。13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述寡核苷酸是反义寡核苷酸。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述反义寡核苷酸包含至少一种2’糖修饰的核苷或lna核苷。15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述偶联剂选自由以下偶联剂组成的组：dcc(n,n'
‑
二环己基碳二亚胺)、dic(n,n'
‑
二异丙基碳二亚胺)、edc(1
‑
乙基
‑3‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)碳二亚胺)、edc
‑
hcl(1
‑
乙基
‑3‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)碳二亚胺
‑
hcl)、bop、pybop((苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基三吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐)、pybrop(溴化三吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐)、tbtu(2
‑
(1h
‑
苯并三唑
‑1‑
基)
‑
1,1,3,3
‑
四甲基铵四氟硼酸盐)、tstu(n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
o
‑
(n
‑
琥珀酰亚氨基)脲四氟硼酸盐)、tntu(o
‑
(双环[2.2.1]庚
‑5‑
烯
‑
2,3
‑
二甲酰亚氨基)
‑
n,n,n',n'
‑
四甲基脲四氟硼酸盐)、t3p(2,4,6
‑
三丙基
‑
1,3,5,2,4,6
‑
三氧杂三磷杂己环
‑
2,4,6
‑
三氧化物)、hctu(o
‑
(6
‑
氯苯并三唑
‑1‑
基)
‑
n,n,n',n'
‑
四甲基脲六氟磷酸盐)、tatu、hatu(n
‑
[(二甲基氨基)
‑
1h
‑
1,2,3
‑
三唑并
‑
[4,5
‑
b]吡啶
‑1‑
基亚甲基]
‑
n
‑
甲基甲铵六氟磷酸盐n
‑
氧化物)以及dmtmm(4
‑
(4,6
‑
二甲氧基
‑
1,3,5
‑
三嗪
‑2‑
基)
‑4‑
甲基吗啉正离子氯化物)、cdi(1,1'
‑
羰基二咪唑)。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述偶联剂是edc
‑
hcl(1
‑
乙基
‑3‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)碳二亚胺
‑
hcl)。17.如前所述的本发明。***

技术总结
本发明涉及一种制备式(III)化合物：以及铼螯合MAG3寡核苷酸的新方法。寡核苷酸的新方法。


技术研发人员：E
受保护的技术使用者：罗氏创新中心哥本哈根有限公司
技术研发日：2020.04.28
技术公布日：2021/12/6