基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法与流程

技术特征：
1.一种基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：以谷胱甘肽修饰的金电极为载体，羧基化石墨烯活化后将其负载在谷胱甘肽修饰的金电极表面，得到羧基化石墨烯/谷胱甘肽修饰的金电极，再将羧基化石墨烯/谷胱甘肽修饰的金电极于交联剂中浸泡，晾干，得到基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器。2.根据权利要求1所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：所述的交联剂为含有葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺、4
‑
二甲氨基吡啶的磷酸盐缓冲溶液。3.根据权利要求2所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：所述的交联剂中葡萄糖氧化酶的浓度为6
‑
8g/l，过氧化氢酶的浓度为0.6
‑
0.8g/l，1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺的质量百分浓度为0.03
‑
0.05wt.％，4
‑
二甲氨基吡啶的质量百分浓度为0.004
‑
0.006wt.％。4.根据权利要求2所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：所述的磷酸盐缓冲溶液的ph值为6.8
‑
7.0，浓度为0.2
‑
0.25mol/l。5.根据权利要求1
‑
4任一所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备谷胱甘肽修饰的金电极将金电极置于铁氰化钾溶液中，利用循环伏安法扫描至稳定，之后浸泡于谷胱甘肽溶液中，得到谷胱甘肽修饰的金电极；(2)制备羧基化石墨烯在浓硫酸中加入石墨粉、硝酸钾、高锰酸钾，升温反应，反应完毕再加入双氧水反应，得到氧化石墨烯；氧化石墨烯与氢氧化钠、溴乙酸反应，得到羧基化石墨烯；(3)制备基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器步骤(2)得到的羧基化石墨烯活化后将其负载在步骤(1)得到的谷胱甘肽修饰的金电极表面，得到羧基化石墨烯/谷胱甘肽修饰的金电极，再将羧基化石墨烯/谷胱甘肽修饰的金电极于交联剂中浸泡，晾干，得到基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器。6.根据权利要求5所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的金电极先采用平均粒度为0.05
‑
0.06μm的al2o3粉进行抛光，再置于铁氰化钾溶液中；所述的铁氰化钾溶液的浓度为2.5
×
10
‑3‑
3.0
×
10
‑3mol/l，铁氰化钾溶液中含有氯化钾，氯化钾的浓度为5.0
‑
5.5mol/l。7.根据权利要求5所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的谷胱甘肽溶液是将谷胱甘肽溶于ph值为6.8
‑
7.0的磷酸盐缓冲溶液中制得；谷胱甘肽溶液的浓度为0.04
‑
0.06mol/l；浸泡温度为4
‑
6℃，浸泡时间为22
‑
26h。8.根据权利要求5所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤(2)中，所述的石墨粉、硝酸钾、高锰酸钾、浓硫酸、双氧水的用量比为1.0
‑
1.2:0.6
‑
0.8:3.0
‑
3.5:23
‑
25:5
‑
7，其中石墨粉、硝酸钾、高锰酸钾、双氧水以g计，浓硫酸以ml计，双氧水的质量百分浓度为30
‑
35wt.％；氧化石墨烯、氢氧化钠、溴乙酸的质量比为0.1
‑
0.3:5
‑
7:4
‑
6。9.根据权利要求5所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤(2)中，所述的升温反应为先于15
‑
20℃下反应2
‑
3h，再升温至35
‑
40℃下反应30
‑
35min。10.根据权利要求5所述的基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤(3)中，采用1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺与4
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二甲氨基吡啶的混合溶液对羧基化石墨烯进行活化，混合溶液中1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺的质量百分浓度为0.03
‑
0.05wt.％，4
‑
二甲氨基吡啶的质量百分浓度为0.004
‑
0.006wt.％；活化时间为20
‑
30min；浸泡温度为4
‑
6℃，浸泡时间为22
‑
26h。

技术总结
本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器的构建方法。该方法为以谷胱甘肽修饰的金电极为载体，羧基化石墨烯活化后将其负载在谷胱甘肽修饰的金电极表面，得到羧基化石墨烯/谷胱甘肽修饰的金电极，再将羧基化石墨烯/谷胱甘肽修饰的金电极于交联剂中浸泡，晾干，得到基于谷胱甘肽组装的葡萄糖生物传感器。本发明成功组装了谷胱甘肽


技术研发人员：高先娟 汲霞 杜青青 任云凤 刘宁
受保护的技术使用者：齐鲁医药学院
技术研发日：2021.08.18
技术公布日：2021/12/6