一种提高免疫力的组合物、药茶及制备方法与流程

1.本发明涉及药食同源产品技术领域，具体涉及一种提高免疫力的组合物、药茶及制备方法。


背景技术：

2.随着人们对健康水平的关注，越来越多的人选择在日常饮食中加入有益于身体的产品。中医学自古以来就有“药食同源”理论，很多中药材既具有防病治病的药用功效，又能够用于日常食补。此类中药材通常药性温和，治疗效果不及其他中药突出和迅速，即使配食不当也不至于立刻产生不良的结果，配伍得当则有利于提高功效或相互制约可能的副作用。若配伍不当，有可能使各自的功效相互抵消或产生毒副作用，前者要么需要较高的服用量才能满足预期，要么即使长期服用也无法产生预期的效果，后者则会通过日积月累的服用而对于人体生理产生不良影响。例如，金银花、栀子、马齿苋等配伍后长期食用容易损伤脾胃，引起胃肠功能失调，人参、龙眼、花椒等配伍后长期食用容易引起燥热内结、齿龈肿痛、口苦咽干、大便干结等。因此，即使选用药食同源的中药材来作为日常食补材料，也需合理搭配，通过药物之间发挥制约或协同等作用，才能达到理想的效果。
3.药茶是药食同源中药材制品中的常见产品，服用方便，若配方合理还能发挥改善身体机能的效果。药茶中含有中药材，故其嗅味难免令人不易接受，若要改善其口感则需要增加矫味成分，如蔗糖、果葡糖浆、化学甜味剂等，在健康方面则打了折扣。


技术实现要素：

4.针对现有技术中的以上技术问题，本发明提供一种提高免疫力的组合物、药茶及制备方法。该组合物配方合理，能够通过调节细胞免疫机制进而增强免疫，以该组合物作为活性成分制得的药茶在增强免疫力的同时兼具良好气味、口感和外观。
5.为解决以上技术问题，本发明实施例第一方面提供一种提高免疫力的组合物，包括以下重量份数配比的原料：黄芪9～30份、党参9～30份、枸杞6～14份、大枣6～15份和绿茶12～15份。
6.黄芪性微温，味甘，归脾、肺经，具有补气固表，托毒排脓，利尿，生肌的功效；
7.党参性平，味甘，归脾、肺经，具有补中益气，健脾养胃，润肺生津的功效；
8.枸杞性平，味甘，归肝、肾经，具有滋补肝肾、益精明目、润肺的功效；
9.大枣性温，味甘，归脾、胃经，具有补中益气，补脾和胃，养血安神，生津，调营卫，解药毒，除烦闷，疗心下悬，肠僻澼，治虚劳损的功效；
10.绿茶味苦、甘，性凉，入心、肺、胃经，具有清头目，除烦渴，化痰，消食，利尿，解毒的作用。
11.该组合物中，黄芪长于补气升阳，益卫固表，为“补中益气之要药”，又兼疏调血脉、同行经络之功，故重用为君药。党参性发、甘、平，补气之力较为平和，专于补益脾肺之气，兼有补血之效，是以为臣药。党参偏于阴而补中，黄芪偏于阳而实表，二药相和，一里一表，一
阴一阳，相辅相成，协同作用，共奏扶正祛邪之效。佐以枸杞甘平，善滋补肝肾、益精明目，大枣甘温，善补中益气、缓和药性。以上四药均为药食同源之品，既能增强药效，又可改善口感，辅以绿茶清热降火，诸组分合力，重在补中益气兼养血生津、健脾胃，共同实现提高免疫功能。实验证明，该组合物在较低的服用量下可达到提高免疫力的效果。从现代药理学角度看，该组合物具多种保健疗效，可起到增强免疫功能、改善造血功能、调节血压、调节血糖、降血脂和抗氧化作用。并且，上述原料在以上特定比例下配合使用，能够制得感官良好的饮料类产品。
12.优选地，该组合物包括以下重量份数配比的原料：黄芪10～20份、党参10～24份、枸杞10～14份、大枣12～14份和绿茶12～15份。
13.优选地，该组合物包括以下重量份数配比的原料：黄芪10份、党参17～24份、枸杞12～14份、大枣14份和绿茶13.5～15份。
14.第二方面，本发明实施例还提供一种提高免疫力的药茶，该药茶的活性成分包括上述提高免疫力的组合物。将上述组合物制成药茶后更便于日常服用。
15.第三方面，本发明实施例还提供一种提高免疫力的药茶的制备方法，具体包括以下操作：
16.按重量份数配比称取上述组合物中的各原料，混合、粉碎，置于茶包，以热水浸泡后取出茶包，即得所述药茶；所述热水的温度为80～100℃，浸泡时间为3～5min，所述热水的重量为各原料总重量的25～60倍。
17.其中优选热水的温度为90～100℃，浸泡时间为3～5min，热水的重量为各原料总重量的41.7～58.3倍。在该工艺参数下进行该药茶的制备，能够进一步提升药茶的外观、口感、气味，使其能够更好地满足使用者对药茶产品的口味需求。
附图说明
18.图1为本发明效果例2雌性各组小鼠体重比较
19.图2为本发明效果例2雄性各组小鼠体重比较
20.图3为本发明效果例2各组小鼠胸腺指数的比较
21.图4为本发明效果例2各组小鼠肝指数的比较
22.图5为本发明效果例2各组小鼠肾指数的比较
23.图6为本发明效果例2各组小鼠肠指数的比较
24.图7为本发明效果例2各组小鼠肺指数的比较
25.图8为本发明效果例2各组小鼠免疫抑制小鼠t淋巴细胞亚群百分比率
26.图9为本发明效果例2中不同浓度标准品的od值的标准曲线；
27.图10为本发明效果例2中各组小鼠血清中的ifn
‑
γ浓度
具体实施方式
28.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
29.药食同源的中药常被用于日常食补，配伍得当则有利于提高功效或相互制约可能的副作用。而若配伍不当，有可能使各自的功效相互抵消或产生毒副作用，前者要么需要较高的服用量才能满足预期，要么即使长期服用也无法产生预期的效果，后者会通过日积月累的服用而对于人体生理产生不良影响。因此，即使选用药食同源的中药材来作为日常食补材料，也需合理搭配，通过药物之间发挥制约或协同等作用，才能达到理想的效果。
30.药茶是药食同源中药材制品中的常见产品，但药茶中由于含有中药材，其嗅味难免令人不易接受，因此往往需要增加矫味成分以改善口感，但糖类甜味剂和化学甜味剂长期服用均不利于健康。
31.为了得到具有显著提高免疫力、能够用于日常服用，并兼具良好口味的药食同源产品，本发明实施例提供了一种提高免疫力的组合物，包括以下重量份数配比的原料：黄芪9～30份、党参9～30份、枸杞6～14份、大枣6～15份和绿茶12～15份。该组合物中黄芪、党参、枸杞和大枣均是药食同源的品种，富含多糖类物质，且多糖类成分不但能治疗机体的免疫系统受到严重损伤的癌症，还能治疗多种免疫缺损疾病，如慢性病毒性肝炎和某些耐药细菌或病毒引起的慢性疾病，并且多糖作为药物对细胞毒性很小。绿茶中含有茶多酚、咖啡碱、茶多糖、氨基酸、水溶性浸出物和抗坏血酸等，其中茶多糖同样具有调节免疫功能。本发明中不同原料中的不同多糖经复合后，得到的药茶在较低的服用量下具有显著的激发人体免疫力系统活力、调节身体状态的功效。
32.本技术实施例中，各原料进一步优选的配比为：黄芪10～20份、党参10～24份、枸杞10～14份、大枣12～14份和绿茶12～15份。
33.更优选的配比为：黄芪10份、党参17～24份、枸杞12～14份、大枣14份和绿茶13.5～15份。
34.为了更进一步便于日常服用，本发明实施例提供了一种提高免疫力的药茶，该药茶的活性成分包括上述的提高免疫力的组合物。
35.本发明结合提高免疫力的效果、产品感官和生产成本，提供了一种制备方法以制得提高免疫力的药茶，具体包括以下操作：
36.按重量份数配比称取上述组合物中的各原料，混合、粉碎，置于茶包，以热水浸泡后取出茶包，即得所述药茶；所述热水的温度为80～100℃，浸泡时间为3～5min，所述热水的重量为各原料总重量的25～60倍。
37.该实施例中，各参数进一步优选的范围为：热水的温度为90～100℃，浸泡时间为3～5min，热水的重量为各原料总重量的41.7～58.3倍。
38.下面分多个实施例对本发明实施例进行进一步的说明，并列举了部分对比实验以及动物实验以证明本发明在提高免疫力方面的效果以及所得药茶的感官评价结果。
39.以下实施例中的黄芪、党参、枸杞和大枣分别为来自于安徽常富国药有限公司的黄芪饮片(批号200302)、党参饮片(批号200302)、枸杞饮片(批号200302)和大枣饮片(批号210302)，绿茶为来自于杭州西湖牌龙井茶公司的龙井茶。
40.实施例1～11
41.本发明实施例1～11提供了提高免疫力的药茶，各实施例中的原料如表1所示：
42.表1实施例1～11原料配比
[0043][0044][0045]
以上实施例1～11的制备方法为：
[0046]
按重量份数配比称取上述组合物中的各原料，混合后粉碎(过80目筛)，置于茶包，以41.7倍重量的100℃热水浸泡5min，取出茶包，即得药茶。
[0047]
实施例12～17
[0048]
本发明实施例12～17提供了提高免疫力的药茶，各实施例中的原料同实施例2，制备方法为：按重量份数配比称取上述组合物中的各原料，混合后粉碎(过80目筛)，置于茶包，以80～100℃热水浸泡3～5min，取出茶包，即得药茶。各实施例制备方法的具体参数如表2所示：
[0049]
表2实施例12～17具体参数
[0050][0051]
[0052]
效果例1
[0053]
本效果例对实施例制得的药茶进行了感官评价。10名评定人员皆为食品专业的老师和同学，身体健康，在评定前12h内不吸烟、不喝酒、不食辛辣等刺激性食物，评定过程中采用独立评定。感官评价指标及评分标准如表3所示，各实施例评价结果如表4所示。
[0054]
表3感官评价指标及评分标准
[0055][0056]
表4各实施例所得药茶的感官评价结果
[0057]
[0058][0059]
由以上结果可见，本发明实施例所提供的药茶均具有良好的感官，其中实施例2、11、15的感官评分高于其他实施例，实施例2的感官评分最高。
[0060]
对比例1
[0061]
本对比例提供了一种组合物，其原料以实施例2为基础，将黄芪改为党参，具体包括以下原料：党参27份、枸杞14份、大枣14份、绿茶13.5份。制备方法同实施例2。
[0062]
对比例2
[0063]
本对比例提供了一种组合物，其原料以实施例2为基础，将党参改为黄芪，具体包括以下原料：黄芪27份、枸杞14份、大枣14份、绿茶13.5份。制备方法同实施例2。
[0064]
效果例2
[0065]
本效果例对实施例和对比例制得的药茶进行了药效学考察。
[0066]
1.材料、仪器及试剂
[0067]
1.1实验动物
[0068]
km小鼠80只，spf级，雌雄各半，3
‑
4周龄，体重18
‑
22g，由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供，许可证号为：scxk(京)2019
‑
0010。饲料生产许可证号：(2018)06073。饲养环境湿度：60％～70％，温度：20℃～24℃。
[0069]
1.2药品与试剂
[0070]
表5药品与试剂
[0071][0072]
1.3实验仪器
[0073]
表6实验仪器
[0074][0075]
1.4实验试剂配制
[0076]
1.4.1环磷酰胺溶液配制
[0077]
本实验选用环磷酰胺作为阳性药物。根据所需的环磷酰胺浓度，用电子分析天平称取250mg或400mg的环磷酰胺粉末，置于50ml生理盐水中，不断用玻璃棒进行搅拌，直至粉末完全溶解，配置成浓度为5mg/ml或8mg/ml的环磷酰胺溶液。
[0078]
1.4.2蛋白粉溶液配制
[0079]
称取适量的蛋白粉，溶于热蒸馏水中，并用玻璃棒进行搅拌，配置成浓度为0.14mg/ml的溶液。
[0080]
1.4.3药茶高中低剂量配制
[0081]
为考察本发明药茶在较低剂量下的药效学数据，本实验按下述方法配制了不同浓度的药茶：
[0082]
按照《保健食品动物功能学试验基本要求》，按实施例2的药茶原料配比称取原料，混合后粉碎(过80目筛)，得实施例药茶粉末。取适量实施例药茶粉末，置于茶包，浸于250ml的100℃热蒸馏水中，静置等待5min后取出茶包，配制得到低、中、高不同浓度的实施例药
茶，浓度分别为0.052g/ml、0.104g/ml、0.156g/ml(以原料质量计)。按相同方法将对比例1、2的组合物分别制成浓度为0.104g/ml的对比例1药茶和对比例2药茶。
[0083]
2.方法
[0084]
2.1动物分组
[0085]
将80只雌雄各半的km小鼠随机分成ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ、
ⅴ
、
ⅵ
组，每组10只，雌雄各半。即空白组，模型组，蛋白粉组，实施例药茶高剂量组，实施例药茶中剂量组，实施例药茶低剂量组，对比例1组和对比例2组。空白组灌服10ml/kg的蒸馏水；模型组灌服等体积的蒸馏水；蛋白粉组灌服等体积的蛋白粉(0.14mg/ml)；实施例药茶高剂量组灌服等体积的高浓度药茶(0.156g/ml)；实施例药茶中剂量组灌服等体积的中浓度药茶(0.104g/ml)；实施例药茶低剂量组灌服等体积的低浓度药茶(0.052g/ml)，对比例1组和对比例2组分别灌服等体积的对比例1药茶和对比例2药茶。以上8组动物每天灌胃一次，连续灌胃21天。
[0086]
2.2免疫力低下小鼠模型的建立
[0087]
从空白组、模型组小鼠中分别选取5只小鼠进行造模预实验。予模型组小鼠腹腔注射5mg/ml的环磷酰胺溶液(10mg/kg/d)，连续3天，空白组给予等量生理盐水，建立免疫低下小鼠模型。造模期间观察并记录小鼠的精神状态、毛发的光泽度及饮食变化。每天上午9点进行小鼠体重称量，隔天更换一次垫料。于实验第4天杀检，检测免疫指标变化，最终确定造模剂量为50mg/kg/d。即空白组腹腔注射生理盐水，其余各组腹腔注射50mg/kg/d的环磷酰胺，连续3天，此后每隔7d按照80mg/kg/d的剂量为腹腔注射一次环磷酰胺进行加强。
[0088]
本实验采用先造模后给药，除空白组外，各组小鼠在连续3天腹腔注射5mg/ml的环磷酰胺溶液(10mg/kg/d)后即开始给药，并在给药期间每隔7d腹腔注射一次8mg/ml的环磷酰胺溶液(10mg/kg/d)进行加强。空白组小鼠在连续3天腹腔注射等量生理盐水后即开始灌服蒸馏水，并每隔7d腹腔注射一次等量生理盐水。观察不同浓度的实施例药茶和对比例药茶对免疫低下小鼠的治疗作用。
[0089]
2.3样品采集及处理方法
[0090]
2.3.1摘取脏器
[0091]
将高压灭菌后的试剂，灭菌烘干后的器械移入工作台，将摘眼球取血后的小鼠脱颈椎处死；解剖小鼠，纵向剖开腹腔，夹取胸腺、肝、肾、小肠、肺，眼科剪分离脏器下面的结缔组织，用无菌pbs冲洗脏器表面后平放于干净的无菌滤纸片上，用电子分析天平称重，记录数据并计算脏器指数。
[0092]
脏器指数＝脏器质量(mg)/体重(g)
[0093]
2.3.2脾细胞悬液的制备
[0094]
将脾脏迅速放入盛有少量无菌pbs的培养皿中；用10ml注射器针芯经200目不锈钢细胞筛网研磨脾脏，制成细胞悬液；用5ml的注射器吸取适量的无菌pbs溶液冲洗200目不锈钢筛网；将研磨后的脾细胞悬液使用1000μl的移液枪转移至10ml离心管中，离心管放入高速离心机，转速为1500rpm，离心时间5min；弃上清加适量无菌pbs，吹打混匀即为小鼠脾脏单个核细胞混悬液；以1500rpm离心5min弃上清并调整细胞浓度为1
×
106～5
×
106个/ml。
[0095]
2.3.3流式细胞术检测免疫细胞水平
[0096]
按照2.3.2项制备脾细胞悬液；用100μl的移液枪吸取cd3、cd4和cd8置于500μl ep管涡旋混匀后避光4℃保存；用1μl的移液枪吸取混匀后的cd3、cd4和cd8抗体探于脾细胞悬
液底部，将细胞吹打混匀，避光静置30min即可进样检测。
[0097]
2.3.4elisa法检测细胞因子水平
[0098]
小鼠血清ifn
‑
γ水平检测参照试剂盒说明书进行，简要步骤如下：
[0099]
①
加样品和标准品，37℃反应90min。不洗。
[0100]
②
加生物素标记抗体，37℃反应60min。1x洗涤缓冲液(ph7.4 pbs：0.15m；kh2po
4 0.2g；na2hpo4·
12h2o 2.9g；nacl 8.0g；kcl 0.2g；tween
‑
20 0.05wt％，0.5ml；加蒸馏水至1000ml)洗涤3次。
[0101]
③
加abc，37℃反应60min。ix洗涤缓冲液洗涤5次。
[0102]
④
tmb37℃反应15
‑
20min。
[0103]
⑤
加入tmb终止液，读数。
[0104]
2.4数据统计分析
[0105]
采用excel统计，计算资料以表示；用graph pad8.0软件进行多组间比较，采用单因素方差分析(one
‑
way anova)，以p<0.05为差异有统计学意义。
[0106]
3.结果
[0107]
3.1小鼠状态
[0108]
空白组小鼠精神良好，皮毛光亮，反应灵敏。模型组小鼠腹腔注射环磷酰胺后第3天开始出现活动减少，毛色黯淡，出现炸毛、掉毛现象。给药结束后，蛋白粉组和实施例药茶组均活动增加，停止掉毛，毛色恢复柔顺光亮。
[0109]
3.2实施例药茶对小鼠体重的影响
[0110]
雌性小鼠腹腔注射环磷酰胺造模后，与空白组比较，模型组体重有所减轻并有统计学意义(p<0.05)。给药后，与模型组比较，除实施例药茶低剂量组体重有统计学意义(p<0.05)，其余各剂量组小鼠体重均呈上升趋势但无统计学意义。(见表7，图1)
[0111]
表7雌性各组小鼠体重比较
[0112][0113]
注：与空白组比较，#p<0.05,##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05。
[0114]
雄性小鼠腹腔注射环磷酰胺造模后，与空白组比较，模型组体重均有所减轻并有显著统计学意义(p<0.01)。给药后，与模型组比较，除实施例药茶高剂量组、对比例1组、对比例2组体重无统计学意义，其余各剂量组小鼠体重均呈上升趋势并有统计学意义(p<
0.05)。(表8，图2)
[0115]
表8雄性鼠各组小鼠体重比较
[0116][0117][0118]
注：与空白组比较，#p<0.05,##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05。
[0119]
3.3实施例药茶对小鼠脏器的影响
[0120]
与空白组比较，模型组小鼠胸腺重量及胸腺指数均有统计学意义(p<0.05)；与模型组比较，蛋白粉组及实施例药茶高、中、低剂量组胸腺重量及胸腺指数均有统计学意义(p<0.05)(表9，图3)。各组其他脏器指数无统计学意义，如图4～7。
[0121]
表9各组小鼠胸腺重量及胸腺指数的比较
[0122][0123]
注：与空白组比较，#p<0.05,##p<0.01，###p<0.001；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
[0124]
3.4实施例药茶对免疫抑制小鼠t淋巴细胞亚群的影响
[0125]
与空白组比较，模型组cd
3
细胞、cd
4
细胞、cd
8
细胞及cd
4
cd
8
细胞比例值均降低且有统计学意义(p<0.05)；与模型组比较，蛋白粉组cd
4
细胞、cd
8
细胞比例值均上升且有统计学意义(p<0.05)，实施例药茶高剂量组无统计学意义，实施例药茶中剂量组cd
4
细胞、cd
8
细胞及cd
4
cd
8
细胞比例值均上升且有统计学意义(p<0.05)，实施例药茶低剂量组cd
3
细胞、cd
4
细胞、cd
8
细胞及cd
4
cd
8
细胞比例值均上升且有统计学意义(p<0.05)。(表10，图
8)
[0126]
表10实施例药茶对免疫抑制小鼠t淋巴细胞亚群百分比率的影响
[0127][0128]
注：与空白组比较，#p<0.05,##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05,**p<0.01，***p<0.001。
[0129]
3.5实施例药茶对ifn
‑
γ细胞因子的影响
[0130]
与空白组比较，模型组ifn
‑
γ细胞因子降低并有显著统计学意义(p<0.01)，与模型组比较，实施例药茶低剂量组ifn
‑
γ细胞因子升高有统计学意义(p<0.05)，余各给药组均无统计学意义。(表11、图9，表12、图10)
[0131]
表11不同浓度标准品的od值
[0132][0133]
标准曲线的方程式：y＝(a
‑
d)/[1 (x/c)^b] d,其a＝7.51838，b＝
‑
1.00901，c＝5065.89288，d＝0.05253，r2＝0.99967。
[0134]
表12各组小鼠血清中的ifn
‑
γ浓度
[0135][0136]
注：与空白组比较，#p<0.05,##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05。
[0137]
由以上结果可见，本发明所提供的药茶在较低的用量下即可减免器官损伤、促进免疫功能恢复并且对小鼠无毒副作用，使cd
3
细胞、cd
4
细胞、cd
8
细胞、cd
4
cd
8
细胞比例值增多并使ifn
‑
γ细胞因子增多至接近正常值，表明本发明所提供的药茶在较低的用量下可通过调节细胞免疫机制进而增强免疫保护作用，并且本发明所提供的药茶在相同浓度下的技术效果优于对比例1、2。
[0138]
实验中发现，实施例药茶高剂量组小鼠出现大便稀软的情况，经分析，该现象可能
与绿茶性寒以及对小鼠有通便作用有关：在中剂量组和低剂量组，由于剂量相对较小，故绿茶的寒性及其对小鼠的通便作用尚不足以对小鼠体质和排便产生影响。而在高剂量组，由于绿茶剂量增加，其寒性对小鼠胃部可能会产生一定程度伤害，其促排便作用会影响小鼠肠蠕动并促进其排便，进而影响到小鼠体质以及小鼠t淋巴细胞亚群百分比率和血清中ifn
‑
γ浓度的检测结果，使表10、表12中高剂量组的结果低于中、低剂量组。
[0139]
但由以上表10、12的数据可见，实施例药茶高剂量组的实验结果与模型组比较不具有统计学意义，故仍以实施例药茶中、低剂量组作为参考来计算人用适宜剂量。根据以上试验中实施例药茶中、低剂量组的药茶浓度，推算人用适宜剂量约为4.5～6g/天。
[0140]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。