调控脂肪酸代谢的乙酰化修饰相关蛋白对应基因及其突变体基因和应用的制作方法

技术特征：
1.调控脂肪酸代谢的乙酰化修饰相关蛋白对应的基因，其特征在于：所述基因为bnaacp3
63k
，其核苷酸序列如seq id no.1所示。2.上述基因编码的蛋白，其氨基酸序列如seq id no.2所示。3.调控脂肪酸代谢的乙酰化修饰相关蛋白，其特征在于：对权利要求2的蛋白质的氨基酸序列的第63号位氨基酸进行突变所得到。4.根据权利要求3所述的蛋白，其特征在于：所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.3或seq id no.4所示。5.编码权利要求4所述的蛋白的基因，其特征在于：所述基因为bnaacp3
63r
基因序列如seq id no.5所示或bnaacp3
63q
基因序列如seq id no.6所示。6.权利要求5所述的基因的克隆方法，其特征在于，步骤如下：（1）以甘蓝型油菜hocr苗期叶片cdna为模板，以所需引入突变碱基的序列分别设计bnaacp3
63k
引物对、bnaacp3
63r
‑1引物对、bnaacp3
63r
‑2引物对、bnaacp3
63r
引物对、bnaacp3
63q
‑1引物对、bnaacp3
63q
‑ꢀ2引物对以及bnaacp3
63q
引物对；（2）以步骤（1）中的模板及相对应的引物对，进行重叠引物pcr扩增；（3）回收目的片段，经连接、转化、验证分别克隆获得bnaacp3
63k
基因、bnaacp3
63r
基因和bnaacp3
63q
基因。7.根据权利要求6所述的克隆方法，其特征在于：所述bnaacp3
63k
引物对为f1和r2，其中f1序列为：gaattctcctctctttgcctttctccgc、r2序列为：gctttttgaccacttcacacact；bnaacp3
63r
‑1引物对为f1和r(r)1，其中r(r)1序列为agttgctttctgaccacttcacaca；bnaacp3
63r
‑2引物对为f(r)2与r2，其中f(r)2序列为tgtgtgaagtggtcagaaagcaact、r2序列为gtcgacgtgggtttgggtttagtggggtt；bnaacp3
63r
引物对为f1和r2； bnaacp3
63q
‑1引物对为f1与r(q)1，其中r(q)1序列为agttgcttttggaccacttcacaca；bnaacp3
63q
‑ꢀ2引物对为f(q)2与r2，其中f(q)2序列为tgtgtgaagtggtccaaaagcaact。8.根据权利要求6所述的克隆方法，其特征在于：所述bnaacp363k基因、bnaacp363r基因和bnaacp363q基因的核苷酸长度均为560bp。9.含有权利要求5所述的基因的表达载体。10.权利要求9所述的表达载体在制备高油酸植株中的应用。

技术总结
本发明属于作物遗传领域，涉及油菜基因的乙酰化修饰，特别是指与脂肪酸代谢相关的基因及其突变体基因和应用。所述基因为BnaACP363K，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。上述基因编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。经乙酰化修饰的蛋白质，对上述蛋白质的氨基酸序列的第63号位氨基酸进行突变所得到。所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示。BnaACP3的乙酰化修饰对油酸和亚油酸可能具有选择作用，能够减缓油酸向亚油酸的转化，之后将在这些T1代拟南芥叶片中进行基因阳性鉴定。进行基因阳性鉴定。进行基因阳性鉴定。


技术研发人员：张振乾 胡尹麒 程潜 戴悦
受保护的技术使用者：长沙隆海生物科技有限公司
技术研发日：2021.07.16
技术公布日：2021/11/17