使用泊洛沙胺的病毒传导的制作方法

技术特征：
1.一种组合物，其特征在于，包括或由下述物质组成：(a)泊洛沙胺；(b)(i)逆转录病毒载体；和(ii)脊椎动物细胞。2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，(a)所述泊洛沙胺为序贯泊洛沙胺；和/或(b)具有式(1)的结构r1r2n
‑
(ch2)2‑
nr3r4ꢀꢀꢀꢀ
(i)或者式(ii):r1r2r5n

‑
(ch2)2‑
n

r3r4r6ꢀꢀꢀꢀ
(ii)c
‑
l其中，在任一公式中，r1为h
‑
(o(ch2)2)
a
‑
(och(ch3)ch2)
b
‑
；r2为h
‑
(o(ch2)2)
c
‑
(och(ch3)ch2)
d
‑
；r3为
‑
(ch2ch(ch3)o)
e
‑
((ch2)2o)
f
‑
h；r4为
‑
(ch2ch(ch3)o)
g
‑
((ch2)2o)
h
‑
h；r5和r6各自为不存在或选自h、c
l
到c6烷基、c2到c6烯基和c2到c6炔基；其中，如果r5或r6不存在，则连接r5或r6的n不携带正电荷；c
‑
l代表一个或多个反离子，所述反离子使式(ii)的结构呈电中性；a、c、f和h各自为从约25到约200、优选从约50到约120的整数；并且b、d、e和g各自为从约5到约50、优选从约10到约25的整数。3.如权利要求2(b)所述的组合物，其特征在于，a＝c；f＝h；b＝d；和/或e＝g；以及，优选地，a＝c＝f＝h；和/或b＝d＝e＝g。4.如权利要求2(b)或3所述的组合物，其特征在于，所述环氧丙烷
‑
环氧乙烷比率(#po/#eo)定义为(b d e g)/(a c f h)，所述比率的范围为从约0.05到约1.5，优选从约0.1到约1.0，更优选从约0.15到约0.67，最优选从约0.18到约0.35。5.如权利要求1至4任一所述的组合物，其特征在于，进一步包括或由下述物质组成：(a)选自多阳离子聚合物或多阳离子肽的组中的一种或多种多阳离子物质；(b)前列腺素；(c)糖蛋白；(d)泊洛沙姆；和/或(e)环孢霉素；和/或(f)星状孢菌素。6.一种药物组合物，其包含或由权利要求1至5中任一所述的组合物构成，其特征在于，权利要求1至5中任一所述的组合物包含所述的病毒载体。7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，
所述逆转录病毒载体携带对患有疾病或有患上所述疾病的风险的个体有益的基因。8.泊洛沙胺在使用逆转录病毒载体转导脊椎动物细胞中的用途，其特征在于，所述用途中可选地还使用：(a)选自多阳离子聚合物或多阳离子肽的组中的一种或多种多阳离子物质；(b)前列腺素；(c)糖蛋白；(d)泊洛沙姆；(e)环孢霉素；和/或(f)星状孢菌素。9.一种用逆转录病毒载体转导脊椎动物细胞的方法，其特征在于，所述方法包括或由下述步骤组成：使所述脊椎动物细胞、泊洛沙胺和所述病毒载体接触，其中优选地，所述接触按以下顺序进行：(a)提供所述细胞；(b)添加所述泊洛沙胺；和(c)添加所述载体，其中优选地，在所述接触后进行旋转接种。10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，与参考方法相比，增强了转导，所述参考方法中不包括添加所述泊洛沙胺，所述参考方法在其他方面与所述转导脊椎动物细胞的方法相同。11.一种增强病毒拷贝数(vcn)的方法，其特征在于，所述方法包括权利要求9所述的方法，其中与参考方法相比，增强了vcn，该参考方法中不包括添加所述泊洛沙胺，所述参考方法在其他方面与所述增强vcn的方法相同，其中优选地，vcn的增强为至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少5倍或至少10倍。12.如权利要求9至11任一所述的方法，其特征在于，(a)所述逆转录病毒载体是慢病毒载体；和/或(b)所述泊洛沙胺是t1107。13.如权利要求9至12任一所述的方法，其特征在于，所述接触包括或进一步由使下述物质接触组成：(a)选自多阳离子组聚合物或多阳离子肽的组中的一种或多种多阳离子物质；(b)前列腺素；(c)糖蛋白；(d)泊洛沙姆；(e)环孢菌素；和/或(f)星状孢菌素。14.如前述权利要求中任一所述的组合物、用途或方法，其中所述逆转录病毒载体是慢病毒载体。15.如前述权利要求中任一所述的组合物、用途或方法，其中所述泊洛沙胺的浓度范围为从约0.1到约40mg/ml，优选从约0.2至约30mg/ml，更优选在约0.3至约20mg/ml之间，其中(a)如果所述细胞是悬浮细胞，则优选约0.3至约20mg/ml；以及
(b)如果所述细胞是贴壁细胞，则优选约0.3至约10mg/ml。16.如前述权利要求中任一所述的组合物、用途或方法，其中，(a)所述多阳离子聚合物选自1，5
‑
二甲基
‑
1，5
‑
重氮
‑
十一甲基
‑
聚甲基溴(聚凝胺)和聚乙二醇
‑
多聚赖氨酸嵌段共聚物(peg
‑
pll)；(b)所述多阳离子肽选自硫酸鱼精蛋白、平均分子量为从约1至约300kda的聚l
‑
赖氨酸(pll)和维克托福林
‑
1(c)所述糖蛋白为纤维连接蛋白(d)所述前列腺素为pge2；(e)所述泊洛沙姆为f108或f98；和/或(f)所述环孢菌素为csa或csh。17.一种试剂盒，包括或由下述物质组成：(a)泊洛沙胺；(b)以下(i)至(iii)中的一项或多项或所有项：(i)(1)至(6)中的一种、多种或全部：(1)选自多阳离子聚合物和多阳离子肽的多阳离子物质；(2)前列腺素；(3)糖蛋白；(4)泊洛沙姆；(5)环孢菌素；和(6)星状孢菌素；(ii)逆转录病毒载体；以及(iii)脊椎动物细胞；以及(c)可选的说明书，包括用于实现权利要求8或11至16中任何一用途和/或操作权利要求9至16中任何一方法的使用说明。

技术总结
本发明提供一种组合物，包括或由下述物质组成：(a)泊洛沙胺；(b)(i)逆转录病毒载体；和(ii)脊椎动物细胞。(ii)脊椎动物细胞。


技术研发人员：克里斯蒂安
受保护的技术使用者：西瑞恩生物科技股份有限公司
技术研发日：2019.12.04
技术公布日：2021/11/9