基于四面体纳米结构DNA的信号探针、其制备方法和用途与流程

技术特征：
1.一种基于四面体纳米结构dna的信号探针，其特征在于，所述信号探针包括：正置四面体纳米结构dna和复合物，所述复合物包括倒置四面体纳米结构dna和生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构dna的其中三个顶点均延伸有一个所述生物素修饰的核酸适配体；所述倒置四面体纳米结构dna的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构dna的其中一个顶点杂交；所述核酸适配体能与待测循环肿瘤细胞识别并结合。2.根据权利要求1所述的信号探针，其特征在于，所述正置四面体纳米结构dna包括a1、b1、c1和d1四条链，其核苷酸序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3以及seq id no.4所示；和/或，所述倒置四面体纳米结构dna包括a2、b2、c2和d2四条链，其核苷酸序列分别如seq id no.5、seq id no.6、seq id no.7以及seq id no.8所示；和/或，所述生物素修饰的核酸适配体的核苷酸序列如seq id no.9所示。3.一种电化学生物检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将待测循环肿瘤细胞与复合物一起孵育，得到结合有复合物的待测循环肿瘤细胞；将正置四面体纳米结构dna修饰在工作电极表面；2)使正置四面体纳米结构dna和复合物中的倒置四面体纳米结构dna杂交，以将循环肿瘤细胞捕获在工作电极上；3)加入氧化还原酶和相应的底物，进行电化学检测。4.根据权利要求3所述的电化学生物检测方法，其特征在于，所述复合物包括倒置四面体纳米结构dna和生物素修饰的核酸适配体，所述核酸适配体能与待测循环肿瘤细胞识别并结合；和/或，所述倒置四面体纳米结构dna的其中三个顶点均延伸有所述生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构dna的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构dna的其中一个顶点杂交。5.根据权利要求3所述的电化学生物测试方法，其特征在于，所述正置四面体纳米结构dna包括a1、b1、c1和d1四条链，其核苷酸序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3以及seq id no.4所示；和/或，所述倒置四面体纳米结构dna包括a2、b2、c2和d2四条链，其核苷酸序列分别如seq id no.5、seq id no.6、seq id no.7以及seq id no.8所示；和/或，正置四面体纳米结构dna通过au
‑
s键修饰在所述工作电极表面；和/或，所述工作电极为碳电极；和/或，所述工作电极为丝网印刷电极；和/或，采用恒电位沉积法将氯金酸直接还原成纳米金并修饰于工作电极上，然后与正置四面体纳米结构dna键合。6.根据权利要求5所述的电化学生物测试方法，其特征在于，所述生物素修饰的核酸适配体的核苷酸序列如seq id no.9所示。7.一种电化学生物传感器，其特征在于，包括工作电极、正置四面体纳米结构dna和复合物，所述正置四面体纳米结构dna修饰在所述工作电极上；所述复合物包括倒置四面体纳米结构dna和生物素修饰的核酸适配体；所述倒置四面体纳米结构dna的其中三个顶点均延伸有一个所述生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构dna的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构dna的其中一个顶点杂交。8.根据权利要求7所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述电化学生物传感器还包括参比电极和对电极；和/或，正置四面体纳米结构dna通过au
‑
s键修饰在所述工作电极表面；和/或，所述工作电极为碳电极；和/或，所述工作电极为丝网印刷电极；和/或，采用恒电位沉积法将氯金酸直接还原成纳米金并修饰于工作电极上，然后与正置四面体纳米结构
dna键合。9.根据权利要求7所述的电化学生物传感器，其特征在于，所述正置四面体纳米结构dna包括a1、b1、c1和d1四条链，其核苷酸序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3以及seq id no.4所示；和/或，所述倒置四面体纳米结构dna包括a2、b2、c2和d2四条链，其核苷酸序列分别如seq id no.5、seq id no.6、seq id no.7以及seqid no.8所示；和/或，所述生物素修饰的核酸适配体的核苷酸序列如seq id no.9所示。10.如权利要求1～3任一项所述的信号探针或如权利要求7～9任一项所述的电化学生物传感器用于检测循环肿瘤细胞的用途。

技术总结
本发明提供一种基于四面体纳米结构DNA的信号探针及其制备方法和用途，所述信号探针包括：正置四面体纳米结构DNA和复合物，所述复合物包括倒置四面体纳米结构DNA和生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构DNA的其中三个顶点均延伸有所述生物素修饰的核酸适配体；所述倒置四面体纳米结构DNA的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构DNA的其中一个顶点杂交；所述核酸适配体能与待测循环肿瘤细胞识别并结合。本申请中的探针用于实现对循环肿瘤细胞的识别、捕获及检测，不仅降低了成本，而且检测高效、稳定，而且依据这一技术进行的诊断方法具有很高的应用价值。诊断方法具有很高的应用价值。


技术研发人员：宓现强 王晨光 徐怡
受保护的技术使用者：中国科学院上海高等研究院
技术研发日：2021.08.04
技术公布日：2021/11/8