一种筛查胃癌相关基因突变的方法和试剂盒与流程

技术特征：
1.一种检测胃癌基因突变位点的方法，其特征在于，所述方法包括：1)捕获：进行第一轮特异性多重pcr反应，使用61对引物对样品dna进行扩增，所述61对pcr引物于t1试管进行反应，试管引物为61对seq id no.1
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seq id no.61；2)建库：进行第二轮接头pcr反应，使用接头序列为igt
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i5 index和igt
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i7index，对步骤1)获得的扩增产物进行扩增，得到多重pcr文库；3)定量和质量检测：对步骤2)获得的多重pcr文库进行文库浓度测定，并对文库片段长度和纯度进行检测；4)测序：对步骤2)获得的多重pcr文库进行测序；5)分析：对步骤4)获得的测序结果进行分析，完成全编码区的突变检测。2.一种胃癌基因突变多重pcr检测试剂盒，所述试剂盒包括：两套pcr引物；所述的两套pcr引物，第一套pcr引物包括61对pcr引物，第二套pcr引物为通用引物，包括igt
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i5index和igt
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i7index。3.根据权利要求2所述的一种胃癌基因突变多重pcr检测试剂盒，所述试剂盒还包括igt
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em808聚合酶混合物、扩增缓冲增强剂nb、yf磁珠漂洗缓冲液b和试剂m。4.根据权利要求2所述的一种胃癌基因突变多重pcr检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有水。5.根据权利要求3所述的一种胃癌基因突变多重pcr检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中，第一套引物的pcr反应的反应体系按如下比例配制：igt
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em808聚合酶混合物10份、第一套pcr引物5份、扩增缓冲增强剂nb 3.5份、试剂m 2.5份、gdna(ng/μl) ddh2o 9份。6.根据权利要求2所述的一种胃癌基因突变多重pcr检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中，第二套pcr反应的反应体系按如下比例配制：第一轮多重pcr产物13.5份、igt
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em808聚合酶混合物10份、接头序列igt
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i5 index1份(10μm)、接头序列igt
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17index 1份(10μm)、试剂m 2.5份、ddh2o2份。

技术总结
本发明公开了一种筛查胃癌相关基因突变的方法和试剂盒，属于基因突变检测技术领域，本发明的方法和试剂盒使用了两套PCR引物，第一套PCR引物包括61对PCR引物，共一组，包括引物61对(SEQ I D NO.1


技术研发人员：谢小冬 赵龑飞 马青龙
受保护的技术使用者：谢小冬
技术研发日：2021.06.23
技术公布日：2021/11/2