7种耐药基因多重PCR检测的引物、探针及其试剂盒的制作方法

技术特征：
1.7种耐药基因多重pcr检测的引物、探针组，其特征在于，包括：用于检测kpc基因的seq id no：1～2所示核苷酸序列的引物和seq id no：3所示核苷酸序列的探针；用于检测ndm基因的seq id no：4～5所示核苷酸序列的引物和seq id no：6所示核苷酸序列的探针；用于检测imp基因的seq id no：7～8所示核苷酸序列的引物和seq id no：9所示核苷酸序列的探针；用于检测vim基因的seq id no：10～11所示核苷酸序列的引物和seq id no：12所示核苷酸序列的探针；用于检测oxa48基因的seq id no：13～14所示核苷酸序列的引物和seq id no：15所示核苷酸序列的探针；用于检测meca基因的seq id no：16～17所示核苷酸序列的引物和seq id no：18所示核苷酸序列的探针；和用于检测vana基因的引seq id no：19～20所示核苷酸序列的引物和seq id no：21所示核苷酸序列的探针。2.权利要求1所述的引物、探针组在制备cre、mrsa和vre中7种耐药基因多重检测的试剂盒中的应用。3.7种耐药基因多重检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物、探针组。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括检测试剂和核酸提取试剂。5.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述检测试剂包括无菌水、pcrmix。6.7种耐药基因的多重pcr检测的方法，其特征在于，利用权利要求1所述的引物探针组或权利要求3或4所述的试剂盒进行检测。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，基于多重荧光pcr或多重数字pcr平台进行检测。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，基于多重数字pcr平台的检测方法包括以下步骤：(1)提取待测样本核酸；(2)配置数字pcr反应液；(3)制备液滴芯片；(4)运行液滴芯片扩增程序后，采用生物芯片阅读仪进行分析后报告输出。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述待测样本为感染患者血浆样本或无症状定植者肛肠试子样本。10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述扩增程序包括：95℃预变性5min；95℃变性15秒，60℃退火30秒，循环40次。

技术总结
本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及7种耐药基因多重PCR检测的引物、探针及其试剂盒。本发明可快速、准确及超高灵敏度地对耐碳青霉烯类药物的肠杆菌科细菌中碳青霉烯酶基因KPC、NDM、IMP、VIM、OXA48基因，耐甲氧西林的葡萄球菌mecA基因和耐万古霉素的多重耐药的肠球菌中vanA基因进行联合检测，可实时、快速监测血流感染患者体内的特定耐药基因的变化，及时评估患者状况，为临床医生提供辅助治疗建议。本发明试剂盒亦可用于危重症患者和免疫抑制人群无症状定植者的CRE、MRSA和VRE中7种细菌耐药基因的主动筛查，在科研领域和临床上具有极高的应用价值。有极高的应用价值。


技术研发人员：宋小慧 夏江
受保护的技术使用者：领航基因科技（杭州）有限公司
技术研发日：2021.06.24
技术公布日：2021/11/2