一种氯替泼诺眼用微乳及其制备方法与流程

1.本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种氯替泼诺眼用微乳及其制备方法。


背景技术：

2.氯替泼诺是根据逆代谢药物设计原理开发的新一代糖皮质激素类药物，用于治疗白内障切除合并人工晶状体植入术后的局部和全身炎症反应，是第一个特别适用于手术后眼部炎症的药物。此外，在可以安全地减轻水肿和炎症的情况下，氯替泼诺可以适用于治疗眼睑和球结膜炎、葡萄膜炎、角膜和眼前节的炎症等对皮质类固醇敏感性的炎症。其与受体的亲和力强且不良反应小，但是水溶性极差。
3.氯替泼诺的传统剂型以混悬滴眼液和软膏剂为主，导致起效慢且药物清除快，生物利用度低，给药频繁。由各上市产品的相关信息可以看出，氯替泼诺系列产品的发展目标在于增大药物的溶解度，延长眼部滞留时间，加强药物的递送效率，以此增加生物利用度，降低给药次数。国内已上市产品(氯替泼诺混悬滴眼液)一天给药四次，给药次数较多，依从性较差。
4.微乳是水、油和两亲性表面活性剂组成的体系，粒径通常在10
‑
100nm之间，是一种热力稳定的透明(或半透明)液体，其具有提高药物溶解度、延长药物的滞留时间、增加药物与眼表面的接触和增强药物角膜渗透等特点，因此适合用于眼科制剂的开发。
5.因此，本发明设计通过制备氯替泼诺眼用微乳，增加药物生物利用度，降低给药频次。


技术实现要素：

6.本发明的目的之一是提供一种有效治疗眼部炎症的氯替泼诺眼用微乳。
7.本发明的另一目的是提供所述氯替泼诺眼用微乳制剂的制备方法。
8.本发明提供的氯替泼诺眼用微乳主要包括油相、乳化剂和助乳化剂。油相的主要作用是增溶药物，药物在油相中应具有较高的平衡溶解度。乳化剂是微乳处方中最重要的组成部分之一，其作用是降低界面张力形成界面膜，所选的乳化剂应对药物和油相都有一定的溶解度、乳化能力强、hlb值适宜、毒性和刺激性较小。助乳化剂可以协同乳化剂降低界面张力，调节界面膜曲率，增加界面膜的流动性，调节乳化剂的hlb值以更好地乳化油相，获得更牢固的界面膜，增加微乳的稳定性，避免水稀释对微乳结构的破坏。
9.在本发明中，氯替泼诺的质量占比为0.05％～0.5％，优选为0.1％～0.2％。
10.在本发明中，所述油相为蓖麻油、聚甘油油酸酯、丙二醇单辛酸酯、丙二醇单月桂酸酯、丙二醇双癸酸脂中的一种或几种，优选为丙二醇单辛酸酯。进一步地，所述油相的质量占比为5％～20％，优选10％～15％。
11.在本发明中，所述乳化剂为tween 80、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或几种；优选为聚氧乙烯蓖麻油和聚氧乙烯氢化蓖麻油组成的混合乳化剂，二者质量比为0.2～5：1，优选为0.5～3：1。进一步地，所述乳化剂的质量
占比为5％～30％，优选为5％～15％。
12.在本发明中，所述助乳化剂为聚乙二醇400、聚乙二醇600、1,2
‑
丙二醇、二乙二醇单乙醚、单月桂酸丙二醇酯中的一种或几种，优选为1,2
‑
丙二醇。进一步地，所述助乳化剂的质量占比为1％～15％，优选5％～10％。
13.进一步地，本发明的氯替泼诺眼用微乳还包括注射用水，注射用水的质量占比为60％～85％，优选为70％～80％。
14.更进一步地，本发明的氯替泼诺眼用微乳还可以加入ph调节剂、渗透压调节剂、防腐剂、螯合剂等组分。
15.根据本发明的实施方案，所述螯合剂优选为edta、edta
‑
2na、edta
‑
ca、edta
‑
2k中的一种或多种；所述防腐剂优选为山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸中的一种或多种；所述ph调节剂优选为naoh、hcl、十二水合磷酸氢二钠、三乙醇胺、三羟甲基氨基甲烷、硼酸、硼酸钠、醋酸、醋酸钠中的一种或多种；所述渗透压调节剂为氯化钠、甘油、葡萄糖、甘露糖醇、丙二醇中的一种或多种，ph调节剂及渗透压调节剂在本发明制剂中的含量适量，只要能够使该制剂的ph在7.0～8.0范围内、渗透压保持在280～320mosmol
·
kg
‑1的范围内即可。
16.在微乳体系中，微乳液与各单独组分相比处于较低的能态，这意味着由各组分形成微乳是一个由高能态向低能态的过程，导致微乳的形成大多数是自发的，不需要能量输入，因此本发明中采用自发乳化法，通过一定温度下的搅拌制备微乳。
17.具体地：所述氯替泼诺眼用微乳的制备方法包括以下步骤：
18.a)将氯替泼诺、油相、混合乳化剂和助乳化剂按处方比例混合均匀；
19.b)恒温搅拌，同时缓慢滴加处方量注射用水；
20.滴加完成后，继续搅拌一定时间，再添加适当的ph调节剂、渗透压调节剂、防腐剂和螯合剂等，定容，即得。
21.根据本发明的实施方案，所述搅拌转速为100～500rpm，例如100～300rpm，示例性为100rpm、200rpm、300rpm。
22.根据本发明的实施方案，所述恒温温度应控制在室温附近，不宜过高或过低，例如20～37℃，示例性为25℃、30℃、35℃。
23.根据本发明的实施方案，所述搅拌时间为10～90min，例如15～60min，示例行为15min、30min、60min。
24.有益效果
25.1、本发明的氯替泼诺眼用微乳制剂具有舒适度高，无刺激性等特点，采用安全、无刺激性的聚山梨酯、聚氧乙烯蓖麻油或聚氧乙烯氢化蓖麻油等hlb值在8～18的非离子表面活性剂为乳化剂；通过乳化技术将药物包裹在油相中制备得到o/w型氯替泼诺眼用微乳制剂，降低了药物的刺激性。
26.2、本发明的氯替泼诺眼用微乳制剂改善了药物的溶解度。氯替泼诺水溶性极差，而本发明中选用的油相、乳化剂及助乳化剂中都具有一定的溶解度，从而保证了氯替泼诺在制剂中的含量。
27.3、本发明的氯替泼诺眼用微乳制剂能够提高药物的眼部生物利用度，从而延长作用时间，降低给药频率。混悬液中药物渗透较慢，大部分药物还未渗透便已经被清除，而微乳中由于表面活性剂的存在及纳米尺度效应的作用，使氯替泼诺更容易透过角膜上皮层，
进而进入到房水虹膜等组织，药物在眼表停留时间较短，故微乳与混悬液相比，更能增加眼部的有效药物浓度，提高生物利用度。
28.4、增加药物与眼表面的接触，促进药物角膜渗透。氯替泼诺眼用微乳的粒径小，比表面积大，加上表面活性剂的存在，有助于降低制剂与角膜表面的接触角，增加了制剂与角膜的接触面积。另外，微乳中的表面活性剂能抑制角膜上皮细胞中p
‑
gp的活性，破坏角膜上皮细胞的紧密连接，促进药物渗透。
附图说明
29.图1为实施例1中所得制剂的外观照片。
30.图2为实施例1中所得制剂经平行光照射得到的完整清晰的通路。
31.图3为试验实施例1中给药前后大鼠眼部状态图。
32.图4为试验实施例2离体角膜渗透实验的累计释放度
‑
时间曲线图。
具体实施方式
33.下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法及未说明配方的试剂均为按照本领域常规条件。
34.除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
35.实施例1
36.按照表1中给出的处方1的组成，将100mg氯替泼诺溶于10g丙二醇单辛酸酯，然后加入6g聚氧乙烯蓖麻油、3g聚氧乙烯氢化蓖麻油和6g 1,2
‑
丙二醇混合均匀，在25℃、200rpm搅拌下，缓慢滴加75ml注射用水，继续搅拌15min。最后加入处方量的十二水合磷酸氢二钠、依地酸二钠、山梨酸钾、naoh、hcl等辅料，用注射用水定容至100ml。
37.采用与处方1相同的制备方法，按照表1中给出的组成，制得处方2
‑
5眼用微乳制剂。采用10000rpm高速离心10min和室温静置24h的方法简单考察其稳定性，并测得粒径及多分散系数(pdi)。
38.表1实施例1中氯替泼诺眼用微乳制剂的处方组成
[0039][0040]
处方1
‑
3制备所得氯替泼诺眼用微乳为半透明液体，泛淡蓝色乳光，平行光射入时有完整清晰的通路(如图1、图2所示)。其ph值在7.5左右，渗透压在335mosmol
·
kg
‑1左右，与0.9％nacl溶液(300mosmol
·
kg
‑1)比值约为1.1，属于可接受范围，粒径较小，且分布较为集中。而处方4
‑
5经稳定性考察后，均出现分层现象，即无法形成稳定且均一的微乳。
[0041]
实施例2
[0042]
按照表1中给出的处方1的组成，用表二中的工艺参数制备氯替泼诺眼用微乳制剂，并测得粒径及多分散系数(pdi)。
[0043]
表2实施例2中氯替泼诺眼用微乳制剂的制备工艺参数(n＝3)
[0044][0045]
实施例3
[0046]
称取油相丙二醇单辛酸酯1g、混合乳化剂聚氧乙烯蓖麻油/聚氧乙烯氢化蓖麻油(1:1)0.5g，助乳化剂为聚乙二醇400或聚乙二醇600 0.5g，置于恒温磁力搅拌器上，在25℃、200rpm下搅拌，缓慢滴加纯化水，采用10000rpm高速离心10min和室温静置24h的方法简单考察微乳的稳定性。经实验发现，两组均出现分层现象，即均无法形成稳定且均一的微乳。
[0047]
试验例1
[0048]
以眼部健康的成年大鼠为模型动物，将100μl丁香油灌注入大鼠眼部，建立大鼠眼部炎症模型，第二天进行给药，通过比较给药后大鼠眼部状态随时间变化来评价实施例1中处方1的氯替泼诺眼部微乳制剂的药效。
[0049]
治疗方案：造模成功后第二天开始给予大鼠治疗，将9只大鼠随机分成3组，其中，阴性对照组3只，模型组6只，3只为氯替泼诺眼用微乳组，3只为市售氯替泼诺混悬滴眼液组。模型组大鼠均以左眼为实验眼，右眼为正常对照眼，模型组阴性对照组的大鼠双眼均灌注生理盐水50μl，给药频次为4次/d；氯替泼诺混悬滴眼液(0.5％)组大鼠左眼每次给药50μl，右眼滴入等量生理盐水，给药频次为4次/d；氯替泼诺眼用微乳(0.1％)组左眼每次给药50μl，右眼滴入等量生理盐水，给药频次为3次/d。每次给药结束后手动使大鼠的眼睛闭合5～10秒，保证制剂和眼表充分接触，记录下每次给药前后大鼠的眼睛状态，比较两种制剂治愈大鼠所需时间。
[0050]
制剂药效对比：阴性对照组在模型组治疗结束时眼睛仍存在严重的炎症症状，结膜结构已经无法辨识，眼部红色分泌物增多，大概一周后炎症才有所好转。模型组在给药后炎症有了显著改善，其中，氯替泼诺眼用微乳(0.1％)在第一天给药结束即给药3次后基本痊愈，眼部结构清晰可辨认，并在第四次给药后完全痊愈，结膜呈浅红色，角膜虹膜清晰可见，眼部无肿胀发红现象，相比之下，氯替泼诺混悬滴眼液(0.5％)组第二天即给药6次后才完全痊愈。该实验初步证明，所制备的微乳滴眼液具有良好的治疗眼部炎症的效果，疗效优于市售混悬滴眼液，且降低了给药次数，提高了药物的生物利用度。
[0051]
试验例2
[0052]
进行离体兔角膜渗透实验，研究本发明氯替泼诺眼用微乳(me)和市售混悬滴眼液(suspension)两种制剂的角膜渗透能力，并测定实验结束后角膜上的残留药物量。
[0053]
试验方案：将取下的新鲜兔角膜小心安装在扩散装置上，固定在供体池和接收池之间，上皮侧朝向正上方，并在接收池内加入35℃的50％乙醇
‑
生理盐水4ml，确保角膜与接收介质之间没有空气，并保持在35℃
±
0.5℃，600rpm下持续搅拌。取氯替泼诺眼用微乳(0.1％)和市售氯替泼诺混悬液(0.5％)适量(相当于100μg氯替泼诺)，分别放置在供给池中，并于实验开始后1h、2h、3h、4h、6h、8h和10h从接收池中取出样品300μl，经0.45μm有机系滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液，并立即补充同体积同温度的接收介质，以维持总体积不变。进行hplc含量测定，绘制累计释放度
‑
时间曲线(图4)。渗透实验后，取干燥后的角膜放入匀浆管中，加乙腈1ml，于组织研磨仪中研磨1h，取组织研磨液于10000rpm下离心10min，取上清液，经0.45μm有机系滤膜过滤，测定残留药物含量。
[0054]
渗透实验结果表明：10h内，微乳和混悬液的渗透量分别为75％和30％，与混悬液相比，微乳中药物的角膜渗透速率和渗透量都显著增加，说明微乳有助于增强药物穿透角膜的能力。残留药物含量测定结果如表3所示：市售混悬液组的角膜药物残留量较微乳组多，说明以混悬液形式给药溶液时，药物在穿透角膜上皮层后容易堆积在角膜内部。
[0055]
表3角膜药物残留量测定结果(n＝3)
[0056][0057]
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。