用于递送自扩增RNA的并入免疫抑制剂的脂质纳米粒组合物

本发明涉及使用脂质纳米粒将核酸（例如sarna和mrna）递送至靶细胞。

背景技术：

1、自扩增rna（self-amplifying rna，sarna）含有病毒复制酶以及来源于甲病毒的保守序列元件。甲病毒基因组由约10至12 kb的单链、正义rna组成，分为两个顺反子。第一顺反子编码构成复制机制的非结构蛋白1至4（non-structural proteins 1 through 4，nsp1-4）。第二顺反子即亚基因组rna（subgenomic rna，sgrna），编码结构蛋白。在来源于甲病毒的sarna载体中，结构蛋白被完全去除并由目的基因替换。进入细胞后，nsp1-4多蛋白首先被翻译。nsp形成复制复合物或复制酶，并通过负义中间体产生更多的sarna拷贝。复制酶利用亚基因组启动子以高于基因组链的速率产生正义亚基因组rna。亚基因组rna被翻译以产生治疗性goi。

2、本发明人已认识到对使用脂质纳米粒（lipid nanoparticle，lnp）来提高sarna向靶细胞中的递送的一般需求，从而使得sarna能够在触发低反应原性的情况下在细胞中实现扩展功能。

技术实现思路

1、本发明的一个方面涉及用于在一个或更多个靶细胞中递送自扩增rna（sarna）构建体的脂质纳米粒组合物。在一些实施方案中，靶细胞包含肝细胞。该脂质纳米粒组合物包含脂质混合物，该脂质混合物包含至少一种（可电离）阳离子脂质、至少一种辅助脂质、固醇、皮质类固醇以及至少一种脂质-聚乙二醇缀合物。在一些实施方案中，脂质混合物中的皮质类固醇的摩尔浓度为约0.1 mol%至50 mol%，并且在一些实施方案中为约0.1 mol%至20 mol%，并且在一些实施方案中为0.1 mol%至10 mol%。在一些实施方案中，皮质类固醇包含地塞米松。该sarna构建体包含编码一种或更多种非结构蛋白的第一开放阅读框，以及与第一开放阅读框有效连接的第二开放阅读框。第二开放阅读框包含编码一种或更多种靶蛋白的编码区。

2、该脂质纳米粒可用于递送多个mrna构建体。在一些实施方案中，多个mrna构建体编码相同的蛋白质。在一些实施方案中，多个mrna构建体编码一种或更多种不同的蛋白质。

3、在一些实施方案中，靶蛋白包含一种或更多种治疗性蛋白。该一种或更多种治疗性蛋白可包含凝血因子vii、纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activatorinhibitor-1，pai-1）、脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，lpl）、α-1抗胰蛋白酶（alpha-1antitrypsin，a1at）、蛋白s（pros1）和组织纤溶酶原激活物（tissue plasminogenactivator，tpa）、纤溶酶原（plasminogen，plg）、纤维蛋白原（fibrinogen，fga）、抗glp-1和胰岛素中的一种或更多种。

4、在一些实施方案中，靶蛋白包含用于基于crispr的基因编辑的一种或更多种cas蛋白和/或其变体。

5、在一些实施方案中，靶蛋白包含sadcas9、asdcas12a、spcas9、nlacas11、cas9切口酶、先导编辑器max（prime editor max，pemax）和人成纤维细胞生长因子受体3（fibroblast growth factor receptor 3，fgfr3）（跨膜缺失）中的一种或更多种。

6、本发明的一个方面涉及包含该脂质纳米粒的药物组合物用于治疗一种或更多种病症和疾病的用途。

7、本发明的一个方面涉及mrna构建体，其包含编码凝血因子vii（fvii）的开放阅读框的编码区。本发明的一些方面涉及包含编码fvii的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗出血性病症和/或过度出血的用途。

8、本发明的一个方面涉及mrna构建体，其包含编码纤溶酶原激活物抑制剂（pai-1）的开放阅读框的编码区。一些方面涉及包含编码pai-1的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗过度出血、出血性病症、心脏纤维化和pai-1缺乏症中的一种或更多种的用途。

9、另一些方面和示例性实施方案在附图中示出和/或在以下说明中描述。

10、需要强调的是，本发明涉及上述特征的所有组合，即使这些特征在不同的权利要求中记载。

1.用于在一个或更多个靶细胞中递送自扩增rna（sarna）构建体的脂质纳米粒组合物，所述脂质纳米粒组合物包含脂质混合物，所述脂质混合物包含至少一种（可电离）阳离子脂质、至少一种辅助脂质、固醇、皮质类固醇以及至少一种脂质-聚乙二醇缀合物，

2.根据权利要求1所述的脂质纳米粒组合物，其中所述脂质混合物中的皮质类固醇的摩尔浓度为约0.1 mol%至20 mol%。

3.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述皮质类固醇包含地塞米松、倍他米松、泼尼松和泼尼松龙中的一种或更多种。

4.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述一个或更多个靶细胞包含肝细胞。

5.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述脂质混合物包含：

6.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述至少一种（可电离）阳离子脂质、所述固醇、所述至少一种辅助脂质、所述皮质类固醇和所述至少一种脂质-聚乙二醇缀合物的摩尔比为50%:34.65%:10%:3.85%:1.5%。

7.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述脂质纳米粒用于递送多个所述sarna构建体，其中所述sarna构建体编码相同的靶蛋白或者一种或更多种不同的靶蛋白。

8.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中由所述第一开放阅读框编码的一种或更多种非结构蛋白形成复制酶复合物。

9.根据权利要求8所述的脂质纳米粒组合物，其中所述复制酶复合物是由甲病毒基因组编码的复制酶或来源于由甲病毒基因组编码的复制酶。

10.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述第一开放阅读框编码复制酶，所述复制酶是委内瑞拉马脑炎病毒（veev）基因组或来源于委内瑞拉马脑炎病毒（veev）基因组，其包含seq id no. 1所示的序列或与seq id no. 1具有至少约50%序列同一性的序列。

11.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的第二开放阅读框与亚基因组启动子（sgp）有效连接。

12.根据权利要求11所述的脂质纳米粒组合物，其中所述亚基因组启动子是甲病毒基因组中的或来源于甲病毒基因组，其包含seq id no. 3所示的序列或与seq id no. 3具有至少约50%序列同一性的序列。

13.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体另外包含5’ utr，所述5’ utr有效连接在编码所述一种或更多种非结构蛋白的第一开放阅读框的上游。

14.根据权利要求13所述的脂质纳米粒组合物，其中所述5’ utr包含保守序列元件（cse），所述保守序列元件（cse）是甲病毒基因组中的或来源于甲病毒基因组。

15.根据权利要求13或14所述的脂质纳米粒组合物，其中所述5’ utr包含保守序列元件，所述保守序列元件是委内瑞拉马脑炎病毒（veev）基因组中的或来源于委内瑞拉马脑炎病毒（veev）基因组，其包含seq id no. 2所示的序列或与seq id no. 2具有至少约50%序列同一性的序列。

16.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体另外包含3’ utr，所述3’ utr有效连接在编码所述一种或更多种靶蛋白的第二开放阅读框的下游。

17.根据权利要求16所述的脂质纳米粒组合物，其中所述3’ utr包含保守序列元件，所述保守序列元件是甲病毒基因组中的或来源于甲病毒基因组。

18.根据权利要求16或17所述的脂质纳米粒组合物，其中所述3’ utr包含保守序列元件（cse），所述保守序列元件（cse）是委内瑞拉马脑炎病毒（veev）基因组中的或来源于委内瑞拉马脑炎病毒（veev）基因组，其包含seq id no. 4所示的序列或与seq id no. 4具有至少约50%序列同一性的序列。

19.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体另外包含有效连接在所述5’ utr的上游的5’帽结构。

20.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体另外包含有效连接在所述3’ utr的下游的poly(a)尾。

21.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码参与止血的凝血因子的开放阅读框。

22.根据前述权利要求中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码凝血因子vii（fvii）的开放阅读框。

23.根据权利要求21或22所述的脂质纳米粒组合物，其中所述凝血因子包含野生型人凝血因子vii（hfvii）。

24.根据权利要求23所述的脂质纳米粒组合物，其中编码fvii的开放阅读框的sarna构建体的编码区包含seq id no: 6所示的序列或与seq id no: 6具有至少约50%序列同一性的序列。

25.根据权利要求22所述的脂质纳米粒组合物，其中所述fvii包含人凝血因子vii（hfvii）的突变变体。

26.根据权利要求25所述的脂质纳米粒组合物，其中编码fvii的开放阅读框的sarna构建体的编码区包含seq id no: 7所示的序列或与seq id no: 7具有至少约50%序列同一性的序列。

27.根据权利要求22所述的脂质纳米粒组合物，其中所述fvii包含鼠凝血因子vii（mfvii）。

28.根据权利要求27所述的脂质纳米粒组合物，其中编码fvii的开放阅读框的sarna构建体的编码区包含seq id no: 8所示的序列或与seq id no: 8具有至少约50%序列同一性的序列。

29.根据权利要求22所述的脂质纳米粒组合物，其中编码fvii的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 9所示的核酸序列或与seq id no: 9具有至少约50%序列同一性的序列。

30.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码纤溶酶原激活物抑制剂-1（pai-1）的开放阅读框。

31.根据权利要求30所述的脂质纳米粒组合物，其中编码pai-1的开放阅读框的sarna构建体的编码区包含seq id no: 10所示的序列或与seq id no: 10具有至少约50%序列同一性的序列。

32.根据权利要求30所述的脂质纳米粒组合物，其中编码pai-1的开放阅读框的sarna构建体的编码区包含seq id no: 11所示的序列或与seq id no: 11具有至少约50%序列同一性的序列。

33.根据权利要求30所述的脂质纳米粒组合物，其中编码pai-1的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 12所示的核酸序列或与seq id no: 12具有至少约50%序列同一性的序列。

34.根据权利要求30所述的脂质纳米粒组合物，其中编码pai-1的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 13所示的核酸序列或与seq id no: 13具有至少约50%序列同一性的序列。

35.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码凝血蛋白、代谢蛋白和衰老相关蛋白中的一种或更多种的开放阅读框。

36.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码一种或更多种凝血蛋白的开放阅读框。

37.根据权利要求36所述的脂质纳米粒组合物，其中所述一种或更多种凝血蛋白包含凝血酶原，组织因子，血栓调节蛋白，蛋白c，抗凝血酶以及因子v、ix、viii、xi、xii和xiii中的一种或更多种。

38.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码一种或更多种代谢蛋白的开放阅读框。

39.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码一种或更多种衰老相关蛋白的开放阅读框。

40.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗过度出血的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

41.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗出血性病症的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

42.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗代谢病症的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

43.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗遗传性病症的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

44.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗肥胖症的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

45.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗糖尿病的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

46.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗法布里病的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

47.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于免疫治疗的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

48.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码用于治疗癌症的一种或更多种治疗性蛋白的开放阅读框。

49.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码脂蛋白脂肪酶（lpl）。

50.根据权利要求49所述的脂质纳米粒组合物，其中编码lpl的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 15所示的核酸序列或与seq id no: 15具有至少约50%序列同一性的序列。

51.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码α-1抗胰蛋白酶（a1at）的开放阅读框。

52.根据权利要求51所述的脂质纳米粒组合物，其中编码a1at的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 16所示的核酸序列或与seq id no: 16具有至少约50%序列同一性的序列。

53.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码蛋白s（pros1）的开放阅读框。

54.根据权利要求53所述的脂质纳米粒组合物，其中编码pros1的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 17所示的核酸序列或与seq id no: 17具有至少约50%序列同一性的序列。

55.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码组织纤溶酶原激活物（tpa）的开放阅读框。

56.根据权利要求55所述的脂质纳米粒组合物，其中编码tpa的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 18所示的核酸序列或与seq id no: 18具有至少约50%序列同一性的序列。

57.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码纤溶酶原（plg）的开放阅读框。

58.根据权利要求57所述的脂质纳米粒组合物，其中编码plg的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 21所示的核酸序列或与seq id no: 21具有至少约50%序列同一性的序列。

59.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码glp-1（胰高血糖素样肽-1）激动剂的开放阅读框。

60.根据权利要求59所述的脂质纳米粒组合物，其中编码glp-1激动剂的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 30所示的核酸序列或与seq id no: 30具有至少约50%序列同一性的序列。

61.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码胰岛素的开放阅读框。

62.根据权利要求61所述的脂质纳米粒组合物，其中编码胰岛素的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 25所示的核酸序列或与seq id no: 25具有至少约50%序列同一性的序列。

63.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码纤维蛋白原α链（fga）的开放阅读框。

64.根据权利要求63所述的脂质纳米粒组合物，其中编码fga的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 24所示的核酸序列或与seq id no: 24具有至少约50%序列同一性的序列。

65.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码cas蛋白和或其变体的开放阅读框。

66.根据权利要求65所述的脂质纳米粒组合物，其中所述cas蛋白或其变体包含sadcas9。

67.根据权利要求66所述的脂质纳米粒组合物，其中编码sadcas9的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 19所示的核酸序列或与seq id no: 19具有至少约50%序列同一性的序列。

68.根据权利要求65所述的脂质纳米粒组合物，其中所述cas蛋白或其变体包含asdcas12a。

69.根据权利要求68所述的脂质纳米粒组合物，其中编码asdcas12a的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 20所示的核酸序列或与seq id no: 20具有至少约50%序列同一性的序列。

70.根据权利要求65所述的脂质纳米粒组合物，其中所述cas蛋白或其变体包含spcas9。

71.根据权利要求70所述的脂质纳米粒组合物，其中编码spcas9的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 26所示的核酸序列或与seq id no: 26具有至少约50%序列同一性的序列。

72.根据权利要求65所述的脂质纳米粒组合物，其中所述cas蛋白或其变体包含nlacas11。

73.根据权利要求71所述的脂质纳米粒组合物，其中编码nlacas11的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 27所示的核酸序列或与seq id no: 27具有至少约50%序列同一性的序列。

74.根据权利要求65所述的脂质纳米粒组合物，其中所述cas蛋白或其变体包含cas9切口酶。

75.根据权利要求74所述的脂质纳米粒组合物，其中编码cas9切口酶的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 28所示的核酸序列或与seq id no: 28具有至少约50%序列同一性的序列。

76.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码先导编辑器max（pemax）的开放阅读框。

77.根据权利要求76所述的脂质纳米粒组合物，其中编码pemax的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 29所示的核酸序列或与seq id no: 29具有至少约50%序列同一性的序列。

78.根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒组合物，其中所述sarna构建体的编码区编码成纤维细胞生长因子3（fgfr3）（跨膜缺失）的开放阅读框。

79.根据权利要求78所述的脂质纳米粒组合物，其中编码fgfr3（跨膜缺失）的开放阅读框的sarna构建体包含seq id no: 31所示的核酸序列或与seq id no: 31具有至少约50%序列同一性的序列。

80.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗出血性病症的用途。

81.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗过度出血的用途。

82.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中预防性治疗出血的用途。

83.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗心脏纤维化的用途。

84.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有pai-1缺乏症的对象的用途。

85.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗过度出血的用途。

86.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有脂蛋白脂肪酶缺乏症（lpl-d）的对象的用途。

87.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有α-1抗胰蛋白酶（a1at）缺乏症的对象的用途。

88.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗易栓症的用途。

89.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗缺血性卒中的用途。

90.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的组合物用于使用基于crispr的系统进行基因编辑的用途。

91.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有遗传性病症或疾病的对象的用途。

92.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有纤溶酶原缺乏症的对象的用途。

93.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有糖尿病的对象的用途。

94.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有肥胖症的对象的用途。

95.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有代谢病症的对象的用途。

96.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有纤维蛋白原缺乏症的对象的用途。

97.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有fv缺乏症的对象的用途。

98.根据权利要求80至97中任一项所述的用途，其中所述药物组合物被配制成用于通过静脉内、皮下、腹膜内、瘤内和肌内施用中的一种或更多种向有此需要的对象施用。

99.包含根据权利要求1至20中任一项所述的脂质纳米粒的组合物用于先导编辑的用途。

100.根据权利要求99所述的用途，其中所述组合物被配制成用于通过静脉内、皮下、腹膜内、瘤内和肌内施用中的一种或更多种向对象施用。

101.mrna构建体，其包含编码凝血因子vii的开放阅读框的编码区，所述开放阅读框包含seq id no: 6所示的序列或与seq id no: 6具有至少约50%序列同一性的序列。

102.mrna构建体，其包含编码凝血因子vii的开放阅读框的编码区，所述开放阅读框包含seq id no: 7所示的序列或与seq id no: 7具有至少约50%序列同一性的序列。

103.mrna构建体，其包含编码凝血因子vii的开放阅读框的编码区，所述开放阅读框包含seq id no: 8所示的序列或与seq id no: 8具有至少约50%序列同一性的序列。

104.编码凝血因子vii的开放阅读框的mrna构建体，其包含seq id no: 22所示的序列或与seq id no: 22具有至少约50%序列同一性的序列。

105.包含根据权利要求101至104中任一项所述的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗出血性病症的用途。

106.包含根据权利要求101至104中任一项所述的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗过度出血的用途。

107.根据权利要求105或106所述的用途，其中所述脂质纳米粒包含至少一种（可电离）阳离子脂质、至少一种辅助脂质、固醇以及至少一种脂质-聚乙二醇缀合物。

108.根据权利要求105至107中任一项所述的用途，其中所述药物组合物被配制成用于通过静脉内、皮下、腹膜内、瘤内和肌内施用中的一种或更多种向有此需要的对象施用。

109.mrna构建体，其包含编码纤溶酶原激活物抑制剂（pai-1）的开放阅读框的编码区，所述开放阅读框包含seq id no: 10所示的序列或与seq id no: 10具有至少约50%序列同一性的序列。

110.mrna构建体，其包含编码纤溶酶原激活物抑制剂（pai-1）的开放阅读框的编码区，所述开放阅读框包含seq id no: 11所示的序列或与seq id no: 11具有至少约50%序列同一性的序列。

111.编码pai-1的开放阅读框的mrna构建体，其包含seq id no: 14所示的序列或与seq id no: 14具有至少约50%序列同一性的序列。

112.编码pai-1的开放阅读框的mrna构建体，其包含seq id no: 23所示的序列或与seq id no: 23具有至少约50%序列同一性的序列。

113.包含根据权利要求109至112中任一项所述的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗出血性病症的用途。

114.包含根据权利要求109至112中任一项所述的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗过度出血的用途。

115.包含根据权利要求109至112中任一项所述的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于在对象中治疗心脏纤维化的用途。

116.包含根据权利要求109至112中任一项所述的mrna构建体和脂质纳米粒的药物组合物用于治疗患有pai-1缺乏症的对象的用途。

117.根据权利要求113至116中任一项所述的用途，其中所述脂质纳米粒包含至少一种（可电离）阳离子脂质、至少一种辅助脂质、固醇以及至少一种脂质-聚乙二醇缀合物。

118.根据权利要求113至117中任一项所述的用途，其中所述药物组合物被配制成用于通过静脉内、皮下、腹膜内、瘤内和肌内施用中的一种或更多种向有此需要的对象施用。