多靶点广谱抗病毒和细菌多肽抑制剂PL2及其应用

本发明涉及生物医药领域，具体地涉及多靶点广谱抗病毒和细菌多肽抑制剂pl2及其应用。

背景技术：

1、基于神经氨酸酶、聚合酶以及蛋白酶基因突变的大型数据库分析，推测这些临床药物作用的靶点可能在药物压力或环境因素驱动的自然选择下发生变异，产生具有耐药性的新毒株。这些病毒特性与药物局限性凸显了对新型抗病毒药物的迫切需求--这类药物应能靶向病毒生命周期的多个环节，并具有较高的耐药遗传屏障。

2、因此，本领域迫切需要开发一种多靶点、广谱抑制流感病毒和冠状病毒且具有高耐药屏障的肽类抑制剂。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种多靶点、广谱抑制流感病毒和冠状病毒且具有高耐药屏障的肽类抑制剂。

2、在本发明第一方面，提供了一种分离的多肽或其药学上可接受的盐，所述多肽具有式i或式ii所示的结构：

3、z1-a-l-b-z2   （i）；

4、z1-b-l-a-z2   （ii）

5、式中，

6、z1为无或n端的修饰基团；

7、a为第一肽段，所述第一肽段来源于细胞穿透肽；

8、b为第二肽段，所述第二肽段来源于防御素衍生肽；

9、l为无或连接肽；

10、z2为无或c端的修饰基团；

11、“-”为肽键。

12、在另一优选例中，所述多肽具有选自下组的活性：

13、（i）抑制冠状病毒刺突蛋白和/或流感病毒血凝素介导的膜融合；

14、（ii）抑制内吞体酸化；和/或

15、（iii）抑制病毒rna依赖性rna聚合酶活性。

16、在另一优选例中，所述第一肽段a位于所述第二肽段b的n端。

17、在另一优选例中，所述第二肽段b位于所述第一肽段a的n端。

18、在另一优选例中，所述第一肽段的氨基酸序列如seq id no: 6所示。

19、在另一优选例中，所述第二肽段的氨基酸序列如seq id no: 3所示。

20、在另一优选例中，所述多肽的氨基酸残基选自l-型氨基酸、d-型氨基酸或其组合。

21、在另一优选例中，所述多肽中的氨基酸残基独立地选自l-型氨基酸或d-型氨基酸。

22、在另一优选例中，所述多肽中的氨基酸残基均为l-型氨基酸或均为d-型氨基酸。

23、在另一优选例中，所述多肽的全部氨基酸残基均为d-型氨基酸。

24、在另一优选例中，所述多肽的氨基酸序列如seq id no: 8-10任一所示，或与seqid no: 8-10任一所示的氨基酸序列具有至少90%同源性的氨基酸序列。

25、在另一优选例中，所述多肽的氨基酸序列如seq id no: 8、9或10所示。

26、在另一优选例中，所述多肽的氨基酸序列如seq id no: 8所示。

27、在另一优选例中，所述多肽的氨基酸序列如seq id no: 9所示。

28、在另一优选例中，所述多肽的氨基酸序列如seq id no: 10所示。

29、在另一优选例中，所述多肽的n端和/或c端经过修饰，所述修饰选自：乙酰化、酰胺化、环化、糖基化、磷酸化、烷基化、生物素化、荧光基团修饰、聚乙二醇化、固定化修饰、或连接用于多肽检测或纯化的标签。

30、在另一优选例中，所述标签选自下载：his标签、gst标签、egfp标签、mbp标签、ha标签、flag标签、c-myc标签。

31、在另一优选例中，所述连接肽l为1-5个氨基酸残基，优选地，所述连接肽选自：gly、ser、gly-ser、gly-gly-ser或(gly4ser)n，其中n为1-3的整数。

32、在本发明第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸编码本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐。

33、在本发明第三方面，提供了一种表达载体，所述表达载体包含本发明第二方面所述的多核苷酸。

34、在另一优选例中，所述的表达载体包括真核表达载体、原核表达载体。

35、在本发明第四方面，提供了一种宿主细胞，所述宿主细胞包含本发明第三方面所述的表达载体，或所述宿主细胞的基因组中整合有本发明第二方面所述的多核苷酸。

36、在本发明第五方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含:

37、(a) 治疗有效量的本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐、本发明第三方面所述的表达载体或本发明第四方面所述的宿主细胞，和

38、(b) 药学上可接受的载体或赋形剂。

39、在另一优选例中，所述药物组合物还包含选自下组的一种或多种额外活性成分：抗病毒药物、抗菌药物、抗炎药物、免疫调节剂或其组合。

40、在另一优选例中，所述抗病毒药物选自：瑞德西韦、巴洛沙韦、奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦、法匹拉韦、莫诺拉韦、奈玛特韦、利托那韦或其组合。

41、在另一优选例中，所述抗菌药物选自：β-内酰胺类抗生素、大环内酯类抗生素、喹诺酮类抗生素、氨基糖苷类抗生素、四环素类抗生素、糖肽类抗生素、噁唑烷酮类抗生素或其组合。

42、在另一优选例中，所述药物组合物的剂型选自：注射剂、喷雾剂、滴鼻剂、吸入剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、口服液、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、栓剂或贴剂。

43、在另一优选例中，所述药物组合物为鼻腔给药制剂、口腔吸入制剂、肺部给药制剂、注射制剂或口服制剂。

44、在本发明第六方面，提供了本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐、本发明第三方面所述的表达载体、本发明第四方面所述的宿主细胞或本发明第五方面所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗病毒感染的药物中的用途。

45、在另一优选例中，所述病毒为冠状病毒和/或流感病毒。

46、在另一优选例中，所述冠状病毒选自下组：sars-cov-2、mers-cov、sars-cov-1或其变异株，或其组合。

47、在另一优选例中，所述sars-cov-2的变异株选自下组：d614g、delta、xdv、xbb、omicron及其亚变异株，或其组合。

48、在另一优选例中，所述流感病毒选自下组：甲型流感病毒、乙型流感病毒，或其组合。

49、在另一优选例中，所述甲型流感病毒选自下组：h1n1亚型、h3n2亚型、h5n1亚型、h7n9亚型，或其组合。

50、在本发明第七方面，提供了本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐、本发明第三方面所述的表达载体、本发明第四方面所述的宿主细胞或本发明第五方面所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗细菌感染的药物中的用途。

51、在另一优选例中，所述细菌为呼吸道致病菌。

52、在另一优选例中，所述呼吸道致病菌选自下组：金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌，或其组合。

53、在本发明第八方面，提供了本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐、本发明第三方面所述的表达载体、本发明第四方面所述的宿主细胞或本发明第五方面所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗病毒与细菌共感染的药物中的用途。

54、在本发明第九方面，提供了本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐的用途，用于制备选自下组的制剂：

55、（1）用于抑制病毒进入细胞的制剂，其中，所述多肽通过阻断病毒包膜蛋白介导的膜融合和/或抑制内吞体酸化来抑制病毒进入；

56、（2）用于抑制病毒复制的制剂，其中，所述多肽通过抑制病毒的rna依赖性rna聚合酶活性来抑制病毒复制；和/或

57、（3）用于同时抑制病毒进入和病毒复制的制剂，其中，所述多肽同时具有：（i）阻断病毒包膜蛋白介导的膜融合的活性；（ii）抑制内吞体酸化的活性；和（iii）抑制病毒rna依赖性rna聚合酶活性的活性。

58、在本发明第十方面，提供了本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐、本发明第三方面所述的表达载体、本发明第四方面所述的宿主细胞或本发明第五方面所述的药物组合物在制备用于提高病毒耐药屏障的药物中的用途，其中，所述多肽通过多靶点作用机制抑制病毒，使病毒不易产生耐药性。

59、在另一优选例中，所述病毒在所述多肽的压力下连续传代至少15次不产生耐药性。

60、在本发明第十一方面，提供了一种体外抑制病毒的方法，所述方法包括将病毒和/或感染病毒的细胞与有效量的本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐接触。

61、在本发明第十二方面，提供了一种体外抑制细菌生长的方法，所述方法包括将细菌与有效量的本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐接触。

62、在本发明第十三方面，提供了一种试剂盒，所述试剂盒包含本发明第一方面所述的多肽或其药学上可接受的盐、本发明第三方面所述的表达载体、本发明第四方面所述的宿主细胞或本发明第五方面所述的药物组合物。

63、在另一优选例中，所述试剂盒还包含选自下组的一种或多种组分：使用说明书、缓冲液、稀释液、给药装置、阳性对照、阴性对照或其组合。

64、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。