一株贝莱斯芽孢杆菌及其在提高大麦抗病性的应用

本发明涉及微生物，具体涉及一株拮抗大麦病原细菌的贝莱斯芽孢杆菌。

背景技术：

1、芽孢杆菌(bacillus spp.) 作为生防细菌，已广泛应用于农作物、畜、禽、水产动物的病害防控，也是当今微生物生态防控的研究热点。贝莱斯芽孢杆菌(bacillusvelezensis)是芽孢杆菌属的一个新种，因其能够产生多种次级代谢产物，并且具有广谱抑菌活性和促生长作用，被广泛应用于动植物病害的生物防治。贝莱斯芽孢杆菌可以分泌产生多种抗菌物质，如脂肽类物质、抗菌蛋白、聚酮化合物等。

2、我国是大麦种植大国，大麦广泛用作粮食、饲料以及啤酒酿造原料。大麦生产过程中细菌性病害严重制约产量与籽粒品质；大麦黑颖病、细菌性叶斑病、细菌性条斑病为大麦主要细菌性病害，病原菌分别为透明黄单胞菌透明致病变种、丁香假单胞菌、燕麦噬酸菌。病原菌可经种子传播，依靠雨水飞溅扩散，高湿条件下极易爆发流行，病害发生可造成大麦减产10-35%，严重降低啤酒大麦加工品质。目前生产上主要依赖化学药剂进行病害防控，长期大量用药会造成病原菌耐药性上升、农药残留、破坏农田微生物群落等问题。因此开发适配大麦种植环境的生防菌株，对大麦病害绿色防控具有重要现实意义。研究发现，贝莱斯芽孢杆菌对多种植物病原细菌具备良好拮抗潜力，可用于大麦细菌性病害的生物防治。。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一株贝莱斯芽孢杆菌*bacillus velezensis* lhzy6-14，其能抑制大麦黑颖病病原菌透明黄单胞菌透明致病变种，同时抑制丁香假单胞菌、燕麦噬酸菌，在大麦病害绿色防控方面具有较大的农业应用前景。

2、为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

3、本发明的贝莱斯芽孢杆菌 lhzy6-14，上述贝莱斯芽孢杆菌的发酵液及代谢产物，上述贝莱斯芽孢杆菌及其发酵液和代谢产物在抑制大麦病原细菌，提高大麦抗病能力中的应用，所述大麦病原细菌包括但不限于透明黄单胞菌透明致病变种，丁香假单胞菌，燕麦噬酸菌。

4、贝莱斯芽孢杆菌抑菌活性物质提取：在超净工作台中，将贝莱斯芽孢杆菌lhzy6-14接种至2216e液体培养基中，于28℃、150rpm条件下培养72h，得发酵液；后进行硫酸铵饱和度为70%的硫酸铵沉淀，4℃过夜沉淀，10000rpm、4℃、离心20分钟，收集沉淀；沉淀于3000da透析袋中透析至纳氏试剂检测不再变黄为止，后冷冻干燥得抗菌粗蛋白；在超净工作台中制透明黄单胞菌透明致病变种vp-hl菌悬液，调至od=1，取100μl制作抑菌板，打孔后，孔内添加100μl上述四株芽孢杆菌主要抑菌物质为蛋白类，盆栽条件下贝莱斯芽孢杆菌对大麦细菌性病害防控效果，实验分 3 个时期：缓苗期、生防菌处理期、病原菌攻毒期。

5、大麦幼苗随机分四组，分别为阳性对照组、阴性对照组：

6、缓苗期：分组后稳定培养 7 天，定时定量浇水，保持栽培环境稳定；

7、生防菌处理期：阳性对照组和阴性对照组均不添加生防菌，实验组浇灌 lhzy6-14菌液，土壤中终浓度为 3×105 cfu/g 土，生防菌处理期持续三天；

8、病原菌攻毒期：阳性对照组和实验组接种透明黄单胞菌透明致病变种菌液；阴性对照组不接种病原菌；定时观察统计大麦植株发病情况；

9、根据数据分析，实验组发病程度显著轻于阳性对照组，因此，菌株 lhzy6-14 发酵液能够有效防控大麦黑颖病。

1.一株贝莱斯芽孢杆菌及其在提高大麦抗病性的应用，即bacillus velezensis，其发酵液及代谢粗提物可以抑制大麦病原细菌为透明黄单胞菌透明致病变种即xanthomonastranslucens，上述贝莱斯芽孢杆菌的发酵液及代谢产物，上述贝莱斯芽孢杆菌及其发酵液和代谢产物在抑制大麦病原细菌，提高大麦抗病能力中的应用，所述大麦病原细菌包括但不限于透明黄单胞菌透明致病变种，丁香假单胞菌，燕麦噬酸菌。

2.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌可以作为一种一种生防菌应用于大麦种植。

3.权利要求 3 所述的生防菌可以作为大麦病害防治制剂。