一株拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌MP4及其应用

本发明属于农业微生物与植物病害生物防治，更具体地说，本发明涉及一株拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4及其应用。

背景技术：

1、天麻是我国名贵中药材，人工种植规模逐年扩大。经鉴定，

verticillium albo-

atrum（原黑白轮枝菌）是引发天麻根腐病等多种植物病害的核心致病菌之一，该病原菌可在土壤中长期宿存，且其危害随连作时间延长而显著加剧，造成天麻减产、品质下降。

2、目前针对天麻根腐病的主流防控手段仍以化学农药为主，长期使用易引发病原菌抗药性、农药残留及土壤微生态破坏等问题，不符合中药材绿色种植要求。现有生物防治技术中的通用生防菌对

verticillium albo-atrum抑菌效果极弱、适配性较差，针对天麻专属生境、专一拮抗

verticillium albo-atrum的功能菌株暂无报道。

技术实现思路

1、本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

2、为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了一株拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4，所述班氏副伯克霍尔德菌mp4的分类命名为

paraburkholderia

bannensismp4，已于2026年6月15日在广东省微生物菌种保藏中心登记保藏，保藏编号为gdmcc no: 68456；所述班氏副伯克霍尔德菌mp4能够抑制天麻根腐病病原菌

verticillium

albo-atrum的生长。

3、优选的是，所述班氏副伯克霍尔德菌mp4的16s rdna序列如seq id no.1所示。

4、优选的是，所述班氏副伯克霍尔德菌mp4对

verticillium albo-atrum的生长抑制率最高为59.44 %。

5、一种如上所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4的培养方法，包括：将班氏副伯克霍尔德菌mp4自-80℃冰箱取出后，通过四区划线法接种于lb固体培养基进行菌株活化，28~30℃恒温培养25~36 h，然后挑取单菌落接种于lb培养基中，在培养温度为28~30℃条件下培养20~36 h。

6、优选的是，所述lb培养基为lb固体培养基或液体培养基中的一种；接种于lb液体培养基时，lb液体培养基的体积为10~30 ml，摇床转速设置为180~220 r/min；接种于lb固体培养基时，lb固体培养基的体积为10~30 ml；lb固体培养基包括：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，nacl 10 g，琼脂15 g，蒸馏水1000 ml；lb液体培养基包括：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，nacl 10 g，蒸馏水1000 ml。

7、一种如上所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4在抑制

verticillium albo-atrum中的应用。

8、优选的是，所述拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4通过在体外或土壤环境中抑制

verticillium albo-atrum生长。

9、优选的是，所述

verticillium albo-atrum为中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.3.2869的

verticillium albo-atrum。

10、一种如上所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4在制备防治天麻病害的生物制剂中的应用。

11、优选的是，所述病害为天麻根腐病，即引起天麻块茎腐烂的病害。

12、本发明至少包括以下有益效果：

13、（1）本发明的一株拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4，其理化性质：菌落呈白色，表面光滑，不透明，边缘整齐呈圆形，中央微凸起；显微观察呈短直杆状，两端钝圆，单生或成对排列，经革兰氏染色呈粉红色，鉴定为革兰氏阴性菌。在28 ℃、lb培养基、有氧条件下生长良好，20~36 h可生长至对数期。

14、（2）本发明分离获得的菌株

paraburkholderia bannensismp4，筛选自天麻原生种植环境，相较于外源引入菌株，更易在天麻根际环境存活，具备良好的环境适应性。经平板对峙实验证实，

paraburkholderia bannensismp4对

verticillium albo-atrum抑制作用明显，靶向性强，可有效阻碍病原菌增殖；并且菌株为天然本土微生物，无化学毒性，不存在农药残留风险，符合中药材绿色种植的发展理念。

15、（3）本发明填补了天麻专属生境中拮抗

verticillium albo-atrum优质菌种的资源空白，可作为基础材料持续开展菌剂研制、作用机理及田间应用等后续研究。

16、本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

1.一株拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4，其特征在于，所述班氏副伯克霍尔德菌mp4的分类命名为paraburkholderia  bannensis mp4，已于2026年6月15日在广东省微生物菌种保藏中心登记保藏，保藏编号为gdmcc no: 68456；所述班氏副伯克霍尔德菌mp4能够抑制天麻根腐病病原菌verticillium  albo-atrum的生长。

2.如权利要求1所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4，其特征在于，所述班氏副伯克霍尔德菌mp4的16s rdna序列如seq id no.1所示。

3.如权利要求1所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4，其特征在于，所述班氏副伯克霍尔德菌mp4对verticillium  albo-atrum的生长抑制率最高为59.44%。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4的培养方法，其特征在于，包括：将班氏副伯克霍尔德菌mp4自-80℃冰箱取出后，通过四区划线法接种于lb固体培养基进行菌株活化，28~30℃恒温培养25~36 h，然后挑取单菌落接种于lb培养基中，在培养温度为28~30℃条件下培养20~36 h。

5.如权利要求4所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4的培养方法，其特征在于，所述lb培养基为lb固体培养基或液体培养基中的一种；接种于lb液体培养基时，lb液体培养基的体积为10~30 ml，摇床转速设置为180~220 r/min；接种于lb固体培养基时，lb固体培养基的体积为10~30 ml；lb固体培养基包括：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5g，nacl 10 g，琼脂15 g，蒸馏水1000 ml；lb液体培养基包括：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5g，nacl 10 g，蒸馏水1000 ml。

6.一种如权利要求1-3任一项所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4在抑制verticillium  albo-atrum中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4通过在体外或土壤环境中抑制verticillium  albo-atrum生长。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述verticillium  albo-atrum为中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.3.2869的verticillium  albo-atrum。

9.一种如权利要求1-3任一项所述的拮抗天麻根腐病病原菌的班氏副伯克霍尔德菌mp4在制备防治天麻病害的生物制剂中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述病害为天麻根腐病，即引起天麻块茎腐烂的病害。