一种具有美白抗衰功效的海参肽及其制备和应用的制作方法

本技术涉及生物活性肽，具体涉及一种具有美白抗衰功效的海参肽及其制备和应用。

背景技术：

1、黑色素是决定人类皮肤和头发色素沉着的主要生物大分子，在正常生理条件下，黑色素能够吸收紫外线，保护皮肤免受光损伤，具有重要的防御功能。然而，当黑色素在局部过度合成或异常沉积时，便会引发一系列皮肤问题，如黄褐斑、雀斑、老年斑，甚至恶性黑色素瘤等色素障碍性疾病。紫外线照射是导致色素沉着的主要外部诱因，当皮肤暴露于紫外线时，黑色素细胞内的一氧化氮释放增加，进而触发信号转导系统，激活酪氨酸酶活性，促进黑色素的过度生成。

2、酪氨酸酶是黑色素生物合成途径中的关键限速酶，黑色素的合成量主要由酪氨酸酶的活性决定。酪氨酸酶将酪氨酸羟化为多巴（dopa），再将多巴氧化为多巴醌，后者经过一系列非酶促反应和酶促反应最终生成真黑色素和褐黑色素。因此，抑制酪氨酸酶活性被认为是减少皮肤黑色素生成、解决色素过度沉着问题的最有效策略之一。

3、皮肤衰老是机体整体老化的一部分，主要表现有皱纹、色斑的产生，皮肤弹性减退等。其中皮肤色素沉着是困扰现代人群的常见皮肤问题之一。目前市售的酪氨酸酶抑制剂主要包括曲酸、氢醌和熊果苷等化合物。虽然这些成分对酪氨酸酶活性具有较强的抑制作用，但因潜在的细胞毒性和致突变性等问题，其应用受到一定限制。基于市场对“天然、安全”的诉求日益增加，开发具有高效、低毒、良好生物相容性的新型酪氨酸酶抑制剂，已成为美白抗衰领域的研究热点。

4、近年来，生物活性肽（bioactivepeptides）在上述领域展现出巨大的应用前景。活性肽是由2-20个氨基酸组成的小分子片段，因其分子量小、易于透皮吸收、生物活性高、安全性好且作用靶点明确等特点，被誉为“下一代”功能性原料。已有一些肽类成分被应用于市场，如抗衰老的“肌肽（carnosine）”、“铜肽（ghk-cu）”，以及美白的“九肽-1（nonapeptide-1）”等。专利文献cn202411099584.2公开了一种包含鱼胶原蛋白肽、丹凤牡丹花肽、弹性蛋白肽、海参肽、银耳多糖、雨生红球藻等成分的美容护肤胶原蛋白口服液；cn201910822666.8公开了一种包含海参花多肽、透明汉生胶、透明质酸等成分美白保湿面膜。但现有技术大多是包含海参肽的组合物产品在美白、抗衰方面的研究，均未对海参肽及其具体功效物质开展深入研究。

技术实现思路

1、本技术提供一种具有美白抗衰功效的海参肽及其制备和应用，该海参肽具有显著的酪氨酸酶抑制活性以及黑色素生成抑制活性。

2、一种海参蛋白来源的小分子肽，所述小分子肽的氨基酸序列为lapplr（seq idno：1）。

3、本技术还提供一种所述小分子肽的相关生物材料，所述相关生物材料为编码所述小分子肽的核酸分子，或含有所述核酸分子的重组dna、表达盒、载体或宿主细胞。

4、本技术还提供一种海参肽，含有所述小分子肽。

5、本技术还提供一种所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽在制备酪氨酸酶抑制剂中的用途。

6、本技术还提供一种所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽在制备用于改善黄褐斑的保健食品中的用途。

7、一种用于改善黄褐斑的保健食品，包括所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽。

8、可选的，还包括食品学上可接受的载体或辅料。

9、所述载体或辅料包括溶剂、粘合剂、填充剂、糖和甜味剂等，可根据不同需求选择。保健食品的类型可以是片剂、胶囊、口服液、压片糖果、固体饮料等国家允许剂型的任意一种。

10、本技术还提供一种所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽在制备用于提供皮肤营养的食品中的用途。

11、本技术还提供一种所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽制备具有美白抗衰功效的护肤品或化妆品中的用途。

12、可选的，所述美白功效包括抑制酪氨酸酶活性和/或降低黑色素生成量。

13、可选的，所述护肤品或化妆品选自洗面奶、面霜、面膜、精华液、爽肤水、润肤乳、防晒霜、眼霜中的一种或几种。

14、本技术还提供一种所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽在制备用于预防或治疗皮肤色素沉着疾病的药物中的用途。

15、可选的，所述皮肤色素沉着疾病选自黄褐斑、妊娠斑、蝴蝶斑、老年斑、晒斑、咖啡斑和雀斑中的至少一种。

16、一种用于预防或治疗黑色素沉着疾病的药物，包括治疗有效量的所述小分子肽或所述相关生物材料或所述的海参肽以及药学上可接受的载体或辅料。

17、治疗有效量是指药物在临床应用中，能对目标疾病产生明确治疗效果且不良反应处于可接受范围的剂量范围。可以随着疾病的严重程度，以及有待治疗的受试者的身体条件、年龄、体重、性别等而改变。

18、所述药学上可接受的载体/辅料指在药物制剂中，经过合理、安全评估的，除活性成分以外的所有物质。这些物质本身通常不具有治疗疾病的作用。所述载体或辅料可以是稀释剂，黏合剂，崩解剂，润滑剂，矫味剂，芳香剂等。

19、本技术还提供一种海参蛋白水解产物（海参肽）的制备方法，包括：

20、（1）取鲜冻东海乌参，按质量比1：0.5~0.8与水混合，118℃下高温蒸煮3h，并继续保温8h；

21、（2）保温结束后搅拌匀浆并过滤，取滤液；

22、（3）向所得滤液中添加复合蛋白酶，在50℃条件下酶解6h，制得酶解液；所述复合蛋白酶与鲜冻东海乌参的质量比为1：1000，所述复合蛋白酶由质量比4：5：0.5：0.5的木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味酶组成；

23、（4）酶解结束后将物料升温至80℃后加入活性炭进行脱色处理；

24、（5）脱色结束后过滤，所得料液经1000da膜分离，取滤过液；

25、（6）所得过滤液经蒸发浓缩至料液糖度为25°，得浓缩液；

26、（7）所得浓缩液依次经高温灭菌和喷雾干燥后即得所述海参酶解产物。

27、所述木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味酶均为本领域常规水解酶，市购即可。

28、与现有技术相比，本技术至少具有如下有益效果之一：

29、（1）本技术的活性肽源自传统药食两用海洋生物——海参，其原料天然、安全性高，经体外细胞实验及斑马鱼体内模型验证，在有效抑制黑色素生成的浓度范围内（0.625-10μg/ml），该活性肽对细胞活力及斑马鱼胚胎存活率均无明显影响，未观察到发育畸形或急性毒性反应。

30、（2）经斑马鱼实验验证，浓度0.625μg/ml的六肽即可显著抑制黑色素的生成，其中，当六肽（lr-6）浓度达到10μg/ml时，对斑马鱼的酪氨酸酶抑制率达到29.22%，黑色素含量下降了16.39%。

31、（3）本技术的活性肽明确了海参肽中美白功效的具体活性肽段成分，其氨基酸序列为lapplr。

32、（4）本技术的活性肽不仅可作为美白活性成分添加至化妆品中，还可应用于改善黄褐斑的保健食品、特殊医学用途配方食品或提供皮肤营养的食品中，通过口服途径从内而外发挥抑制黑色素生成、改善肤色暗沉及色斑问题的作用。此外，该活性肽也可作为药物先导化合物，用于开发治疗色素沉着过度性疾病的外用或口服制剂。多剂型、多途径的应用潜力使得本发明具有极高的产业转化价值和市场竞争力。