一种用于区分BA0711疫苗株的引物组、试剂盒和用途的制作方法
本发明属于生物领域,具体涉及一种用于区分ba0711疫苗株的引物组、试剂盒和用途。
背景技术:
1、2023年农业农村部批准布鲁氏菌病活疫苗(ba0711株)为新兽药,ba0711株由羊种布鲁氏菌生物3型研发而成,具有孕畜可用、牛羊通用等特点。
2、公开号为cn119639926a,主题为一种鉴别布鲁氏菌病原的pcr试剂盒、方法和应用的专利申请,其公开了一种鉴别布鲁氏菌病原的pcr试剂盒、方法和应用,包括同时检测布鲁氏菌ba0711疫苗株、m5-90△26疫苗株、rev.1疫苗株和野毒株的引物对和探针;其中,鉴别布鲁氏菌ba0711疫苗株的位点是布鲁氏菌ba0711疫苗株的特有缺失序列;
3、在本领域中,针对布鲁氏菌ba0711疫苗株的研究较少。
4、本案所要解决的技术问题是:如何基于新的位点鉴别ba0711株。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种用于区分ba0711疫苗株的引物组,本发明采用布鲁氏菌bcsp31基因、布鲁氏菌cspa基因为目标基因,通过筛查布鲁氏菌bcsp31基因可判断动物是否感染布鲁氏菌,通过筛查布鲁氏菌cspa基因可判断动物是否接种了ba0711疫苗株。
2、同时,本发明还提供了基于该引物组的试剂盒和用途。
3、为达到此发明目的,本发明采用以下技术方案:
4、一种用于区分ba0711疫苗株的引物组,包括以布鲁氏菌bcsp31基因为目标基因的第一引物对、以布鲁氏菌cspa基因为目标基因的第二引物对;
5、所述第一引物对包括第一上游引物和第一下游引物;
6、所述第二引物对包括第二上游引物和第二下游引物,或,第三上游引物和第三下游引物;
7、所述第一上游引物的核苷酸序列如seq id no.1所示;
8、所述第一下游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示;
9、所述第二上游引物的核苷酸序列如seq id no.3所示;
10、所述第二下游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示;
11、所述第三上游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示;
12、所述第三下游引物的核苷酸序列如seq id no.6所示。
13、同时,本发明还公开了采用如上所述的引物组制备试剂盒的用途;所述试剂盒用于区分ba0711疫苗株和布鲁氏菌野毒株。
14、最后,本发明还公开了一种试剂盒,包括第一试剂盒和第二试剂盒;
15、所述第一试剂盒包括第一引物对;所述第二试剂盒包括第二引物对;
16、所述第一引物对包括第一上游引物和第一下游引物;
17、所述第二引物对包括第二上游引物和第二下游引物,或,第三上游引物和第三下游引物;
18、所述第一上游引物的核苷酸序列如seq id no.1所示;
19、所述第一下游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示;
20、所述第二上游引物的核苷酸序列如seq id no.3所示;
21、所述第二下游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示;
22、所述第三上游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示;
23、所述第三下游引物的核苷酸序列如seq id no.6所示。
24、相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
25、本发明采用布鲁氏菌bcsp31基因、布鲁氏菌cspa基因为目标基因,通过筛查布鲁氏菌bcsp31基因可判断动物是否感染布鲁氏菌,通过筛查布鲁氏菌cspa基因可判断动物是否接种了ba0711疫苗株。
26、更为具体来说,如果第一试剂盒的检测结果为阳性,则说明动物有感染布鲁氏菌或接种过布鲁氏菌疫苗;再结合第二试剂盒的结果,如果第二试剂盒为阴性且第一试剂盒为阳性,则说明动物接种了ba0711疫苗株并产生良好的免疫保护;如果第二试剂盒为阳性且第一试剂盒为阳性,则说明动物感染了布鲁氏菌;如果第一试剂盒和第二试剂盒均为阴性,则说明动物没有感染布鲁氏菌也没有接种布鲁氏菌疫苗。
1.一种用于区分ba0711疫苗株的引物组,其特征在于,包括以布鲁氏菌bcsp31基因为目标基因的第一引物对、以布鲁氏菌cspa基因为目标基因的第二引物对;
2.采用如权利要求1所述的引物组制备试剂盒的用途;所述试剂盒用于区分ba0711疫苗株和布鲁氏菌野毒株。
3.一种试剂盒,其特征在于,包括第一试剂盒和第二试剂盒;
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