抗亲环素A单抗及其在类风湿性关节炎治疗中的应用的制作方法

本发明属于生物医药领域，涉及抗亲环素a单抗及其在类风湿性关节炎治疗中的应用。

背景技术：

1、cyclophilin a（cypa，亲环素a）具有肽基脯氨酰顺/反异构酶活性，是一种在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质。cypa主要分布在细胞质中，是免疫抑制药物cyclosporina（csa，环孢菌素a）在细胞内的主要受体。细胞内的cypa还参与细胞凋亡、免疫调控、细菌感染、病毒复制等多种生物学过程。当受到机械损伤刺激、活性氧、病原微生物感染等刺激时，cypa还能分泌到细胞外。胞外cypa（ecypa）在多种炎症性疾病的发生过程中发挥着重要作用。例如，在类风湿关节炎、银屑病、系统性红斑狼疮等炎症相关自身免疫性疾病的发生过程中，均可观察到ecypa与炎症的联系。

2、由于anti-cypa单抗只在细胞外针对ecypa发挥作用，不会影响细胞内cypa的正常功能。因此，anti-cypa单抗作为一种药物治疗炎症疾病的可行性远远高于其他药物，将大大增强药物的特异性并减少副作用的产生。陈志南等获得了一种抗cypa骆驼科动物的重链vhh抗体（专利cn 102660551 b）和一种抗人亲环素蛋白a的单克隆抗体（cn 108893449 a）；刘文军等获得了一种抗cyclophilin a 的单克隆抗体（cn 113248617 b）,对病毒诱导的急性肺炎有良好的治疗效果。以上抗体为ecypa相关炎症的诊断和治疗提供了工具，但目前还未有关于cypa抗体在类风湿性关节炎等自身免疫性疾病治疗方面应用的相关实验数据的报道。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供抗亲环素a单抗及其在类风湿性关节炎治疗中的应用。

2、第一方面，本发明提供了分泌anti-cypa单克隆抗体（简称为cypa单抗或anti-cypa单抗）的杂交瘤细胞株bqha7，其保藏号为cgmcc no. 45101。

3、第二方面，本发明提供了由第一方面所述杂交瘤细胞株bqha7分泌的anti-cypa单克隆抗体。

4、第三方面，本发明提供了第二方面所述的anti-cypa单克隆抗体在如下任一中的应用；

5、1）制备治疗类风湿性关节炎的产品；

6、2）制备降低类风湿性关节炎关节的损伤或破坏程度的产品；

7、3）制备延缓类风湿性关节炎的疾病进程的产品；

8、4）制备缓解类风湿性关节炎的炎症反应的产品；

9、5）制备改善类风湿性关节炎的关节肿大和/或骨质被侵蚀程度的产品；

10、6）制备减少炎症细胞浸润数量的产品；

11、7）制备降低与炎症反应相关因子的表达量的产品；

12、8）制备检测亲环素a的产品。

13、上文中，与炎症反应相关因子具体为血清中il-17a、tnf-α和/或il-6。

14、上文中，检测亲环素a为检测待测样品中是否含有亲环素a；上述待测样品为细胞或组织。

15、第四方面，本发明提供了一种产品，其包括第二方面所述的anti-cypa单克隆抗体。

16、上文所述产品具有如下至少一种功能：

17、1）治疗类风湿性关节炎；

18、2）降低类风湿性关节炎关节的损伤或破坏程度；

19、3）延缓类风湿性关节炎的疾病进程；

20、4）缓解类风湿性关节炎的炎症反应；

21、5）改善类风湿性关节炎的关节肿大和/或骨质被侵蚀程度；

22、6）减少炎症细胞浸润数量；

23、7）降低与炎症反应相关因子的表达量；

24、8）检测亲环素a。

25、上文类风湿性关节炎以ii 型胶原蛋白诱导类风湿性关节炎为例。

26、上文中，所述产品为试剂盒。

27、第五方面，本发明提供了一种检测亲环素a的方法，包括如下步骤：以第二方面所述的anti-cypa单克隆抗体作为抗体，检测待测样品中是否含有亲环素a。

28、本发明的实验证明，本发明提供了1种能分泌抗cypa单抗的杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株能够分泌单抗bqha7，此单抗bqha7可以特异性识别cypa，对ii 型胶原蛋白诱导的小鼠类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，ra）具有良好的治疗作用。

29、保藏说明

30、菌种名称：bqha7

31、分类命名：小鼠杂交瘤细胞

32、保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

33、保藏机构简称：cgmcc

34、地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号

35、保藏日期：2022年2月24日

36、保藏中心登记入册编号：cgmcc no. 45101

1.分泌anti-cypa单克隆抗体的杂交瘤细胞株bqha7，其保藏号为cgmcc no. 45101。

2.由权利要求1所述杂交瘤细胞株bqha7分泌的anti-cypa单克隆抗体。

3.权利要求2所述的anti-cypa单克隆抗体在如下任一中的应用；

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述减少炎症细胞浸润数量为减少类风湿性关节炎关节的炎症细胞浸润数量；

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于：所述产品为试剂盒。

6.一种产品，其包括权利要求2所述的anti-cypa单克隆抗体。

7.根据权利要求6所述的产品，其特征在于：

8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于：所述减少炎症细胞浸润数量为减少类风湿性关节炎关节的炎症细胞浸润数量；

9.根据权利要求6-8任一项所述的产品，其特征在于：所述产品为试剂盒。

10.一种检测亲环素a的方法，包括如下步骤：以权利要求2所述的anti-cypa单克隆抗体作为抗体，检测待测样品中是否含有亲环素a。