一种用于评估多囊卵巢综合征治疗响应性的生物标志物组合及其应用

本发明涉及生物医学检测，尤其涉及一种用于评估多囊卵巢综合征治疗响应性的生物标志物组合及其应用。

背景技术：

1、多囊卵巢综合征（pcos）是育龄期女性最常见的内分泌代谢性疾病之一，患病率约为6%-20%，临床表现为高雄激素血症、排卵障碍和卵巢多囊样改变。目前pcos的临床管理面临一个长期存在但尚未解决的核心痛点：在相同的治疗方案下，部分患者能够恢复排卵和月经规律，部分患者则毫无改善。临床实践中，医生无法在治疗前预判患者是否会产生治疗响应，导致“试错式治疗”普遍存在。

2、当前用于pcos诊断和分型的生物标志物研究主要集中于以下方向：

3、（一）单一激素类标志物：如睾酮（t）、游离睾酮指数（fai）、抗苗勒氏管激素（amh）等。这类标志物反映的是疾病的下游表型，无法预测治疗响应，且受月经周期、年龄等因素影响较大。

4、（二）单一菌群物种标志物：已有研究报道pcos患者肠道菌群物种组成发生改变。然而，基于菌群物种分类（属/种水平）的标志物存在显著局限—不同研究队列间物种层面的结果可重复性差，且物种丰度变化难以直接映射到宿主病理生理功能。

5、（三）单一代谢物标志物：已有研究报道pcos患者血清代谢谱发生变化。但单一代谢物受饮食、昼夜节律等混杂因素影响大，作为临床预测标志物的稳健性不足。

6、（四）预测模型类：目前尚无基于“肠道菌群功能基因+宿主代谢物”跨组学联合的pcos治疗响应预测模型。

7、综上所述，现有技术中缺乏一种能够在治疗前有效评估pcos患者治疗响应性的生物标志物组合及预测产品。本发明正是针对这一技术空白而提出。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种用于评估多囊卵巢综合征治疗响应性的生物标志物组合及其应用，以解决现有技术中无法预判pcos患者治疗效果的临床痛点。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种用于评估多囊卵巢综合征治疗响应性的生物标志物组合，所述生物标志物组合包括胆碱硫酸酯酶基因和血清代谢物；

4、所述血清代谢物为琥珀酸、赖氨酰羟脯氨酸、hepoxilin a3或马尿酸中的一种或多种。

5、作为优选，所述胆碱硫酸酯酶基因的核苷酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示；

6、或者与seq id no.1或seq id no.2有90%以上的同源性。

7、作为优选，所述生物标志物组合还包括胆碱脱氢酶。

8、本发明还提供了所述生物标志物组合的检测方法，其特征在于，所述胆碱硫酸酯酶基因的丰度通过宏基因组测序或qpcr绝对定量检测；

9、所述血清代谢物水平通过液相色谱-串联质谱检测。

10、本发明还提供了所述生物标志物组合在制备检测pcos患者治疗响应性的产品中的应用。

11、本发明还提供了一种制备检测pcos患者治疗响应性的试剂盒，所述试剂盒中包括特异性扩增胆碱硫酸酯酶基因的qpcr引物对和检测琥珀酸、赖氨酰羟脯氨酸、hepoxilina3或马尿酸中至少一种代谢物水平的试剂。

12、作为优选，所述试剂为lc-ms/ms检测用内标物和/或化学对照品；

13、所述试剂盒还包括用于建立标准曲线的对照标准品，所述标准品选自succinate同位素内标、succinate化学对照品、lysylhydroxyproline化学对照品、hepoxilin a3化学对照品、hippurate化学对照品中的一种或多种。

14、本发明还提供了sucnr1抑制剂在制备治疗pcos卵巢ecm重塑或卵巢纤维化药物中的。

15、本发明还提供了lox抑制剂在制备治疗pcos卵巢胶原沉积或卵巢纤维化药物中的应用。

16、本发明还提供了调控succinate-sucnr1-ros-hif1α-lox信号轴中任意节点的试剂在治疗pcos中的应用。

17、有益效果：

18、（1）预测准确性显著提高：k01133（胆碱硫酸酯酶基因）与succinate来自宏基因组和代谢组两个完全独立的技术平台（测序vs质谱），二者精准指向同一代谢通路。多组学跨平台锁定的巧合概率在10-¹4至10-¹8量级，确保了联合标志物的稳健性和预测准确性。

19、（2）数据支撑强度高：

20、succinate：ab_p=0.0049，交互fdr=0.036

21、lysylhydroxyproline：ab_p=1.58×10-6（全表最强信号）

22、hepoxilin a3：交互fdr=0.001（全表最强交互信号）

23、上述代谢物在治疗有效组中全部一致下降

24、（3）预测性能优异：基于k01133和succinate联合标志物构建的预测模型，经重复5折交叉验证，auc=0.871，最佳截断值0.579，敏感度79.55%，特异度80.63%。

25、（4）填补临床空白：目前尚无能够在治疗前预判pcos患者治疗响应的检测产品或预测模型，本发明填补了这一技术空白。

26、（5）检测样本易于获取：本发明采用外周血和粪便样本，样本获取无创或微创，患者依从性好，适合临床推广。

27、（6）预留多组学扩展接口：本发明所述标志物组合可进一步与其它临床指标（如bmi、激素水平等）联合，构建多因素预测模型，进一步提高预测准确性。

1.一种用于评估多囊卵巢综合征治疗响应性的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合包括胆碱硫酸酯酶基因和血清代谢物；

2.根据权利要求1所述的生物标志物组合，其特征在于，所述胆碱硫酸酯酶基因的核苷酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示；

3.根据权利要求1或2所述的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合还包括胆碱脱氢酶。

4.权利要求1~3任意一项所述生物标志物组合的检测方法，其特征在于，所述胆碱硫酸酯酶基因的丰度通过宏基因组测序或qpcr绝对定量检测；

5.权利要求1~3任意一项所述生物标志物组合在制备检测pcos患者治疗响应性的产品中的应用。

6.一种制备检测pcos患者治疗响应性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括特异性扩增胆碱硫酸酯酶基因的qpcr引物对和检测琥珀酸、赖氨酰羟脯氨酸、hepoxilin a3或马尿酸中至少一种代谢物水平的试剂。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂为lc-ms/ms检测用内标物和/或化学对照品；

8.sucnr1抑制剂在制备治疗pcos卵巢ecm重塑或卵巢纤维化药物中的。

9.lox抑制剂在制备治疗pcos卵巢胶原沉积或卵巢纤维化药物中的应用。

10.调控succinate-sucnr1-ros-hif1α-lox信号轴中任意节点的试剂在治疗pcos中的应用。