GIP/GLP1激动剂组合物的制作方法

本发明是一种用于皮下注射的gip/glp1共激动剂(co-agonist)肽药物组合物。所述组合物包含替尔泊肽(tirzepatide)、nacl和磷酸氢二钠。所述组合物提供了商业上可接受的贮存期稳定性(shelf-life stability)、使用期稳定性(in-use stability)，并且与可接受的患者注射部位体验相关。供替代选择的组合物包含替尔泊肽、丙二醇和磷酸氢二钠，其也提供可接受的贮存期稳定性。

背景技术：

0、发明背景

1、糖尿病是一种慢性病，其特征在于由于胰岛素分泌、胰岛素作用或这二者的缺陷所导致的高血糖症。在2型糖尿病(“t2d”)中，胰岛素分泌受损和抗胰岛素性的组合作用与升高的血糖水平有关。替尔泊肽是一种可用于治疗糖尿病的gip/glp1共激动剂肽。替尔泊肽可用于治疗肥胖。

2、us9474780概括描述了通过胃肠外途径施用的含有gip/glp1激动剂的组合物。us9474780描述并要求保护替尔泊肽。需要提供可接受的稳定性和可接受的患者注射部位体验的替尔泊肽组合物。

技术实现思路

1、本发明通过提供替尔泊肽或其药学上可接受的盐的药学上可接受的组合物满足了这些需求；所述组合物包含：选自nacl和丙二醇的试剂；和磷酸氢二钠。

2、在一个实施方案中，所述试剂是nacl。在一个实施方案中，所述nacl的浓度是约6.2 mg/ml至约9.5 mg/ml。在一个实施方案中，所述nacl的浓度是约7.0 mg/ml至约9.0mg/ml。在一个实施方案中，所述nacl的浓度是约8.2 mg/ml。

3、在一个实施方案中，所述试剂是丙二醇。在一个实施方案中，所述丙二醇的浓度是约12.0 mg/ml至约18.0 mg/ml。在一个实施方案中，所述丙二醇的浓度是约14.0 mg/ml至约16.0 mg/ml。在一个实施方案中，所述丙二醇的浓度是约15.0 mg/ml。

4、在一个实施方案中，所述磷酸氢二钠的浓度是约0.67 mg/ml至约2.68 mg/ml。在一个实施方案中，所述磷酸氢二钠的浓度是约1.0 mg/ml至约3.0 mg/ml。在一个实施方案中，所述磷酸氢二钠的浓度是约1.34 mg/ml。

5、在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml且所述试剂是nacl。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约10 mg/ml至约30 mg/ml。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；所述nacl的浓度是约8.2 mg/ml，且磷酸氢二钠的浓度是约0.67 mg/ml至约2.68 mg/ml。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；所述nacl的浓度是约8.2 mg/ml，磷酸氢二钠的浓度是约0.67 mg/ml至约2.68 mg/ml，且所述组合物在一次性使用的自动注射装置中提供。

6、在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；且所述试剂是丙二醇。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；所述丙二醇的浓度是约12.0 mg/ml至约18.0 mg/ml，且所述磷酸氢二钠的浓度是约1.34 mg/ml。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；所述丙二醇的浓度是约15.0 mg/ml，且所述磷酸氢二钠的浓度是约1.34 mg/ml。

7、在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml。在某些实施方案中，所述替尔泊肽的浓度是约10 mg/ml至约30 mg/ml。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度选自5、10、15、20、25和30 mg/ml。在一个实施方案中，0.5 ml或更少的组合物作为一个剂量施用。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的浓度选自10、20和30 mg/ml。

8、在一个实施方案中，所述替尔泊肽的组合物还包含防腐剂。在一个实施方案中，所述替尔泊肽的组合物包含替尔泊肽、磷酸氢二钠、丙二醇和防腐剂。在一个实施方案中，所述防腐剂选自间甲酚和苯酚。在一个实施方案中，所述间甲酚的浓度是约2.0 mg/ml至约4.0 mg/ml。在一个实施方案中，所述间甲酚的浓度是约3.0 mg/ml至约3.5 mg/ml。在一个实施方案中，所述间甲酚的浓度是约3.15 mg/ml。在一个实施方案中，所述苯酚的浓度是约3.0 mg/ml至约7.0 mg/ml。在一个实施方案中，所述苯酚的浓度是约4.0 mg/ml至约6.0mg/ml。在一个实施方案中，所述苯酚的浓度是约5.0 mg/ml。在一个实施方案中，提供了替尔泊肽组合物，其中替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；丙二醇的浓度是约12.0mg/ml至约18.0 mg/ml；磷酸氢二钠的浓度是约0.67mg/ml至约2.68 mg/ml；且间甲酚的浓度是约2.0 mg/ml至约4.0 mg/ml。在一个实施方案中，所述间甲酚的浓度是约3.15 mg/ml。在一个实施方案中，提供了替尔泊肽组合物，其中替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；丙二醇的浓度是约12.0 mg/ml至约18.0 mg/ml；磷酸氢二钠的浓度是约0.67 mg/ml至约2.68 mg/ml；且苯酚的浓度是约3.0 mg/ml至约7.0 mg/ml。在一个实施方案中，提供了替尔泊肽组合物，其中替尔泊肽的浓度是约5 mg/ml至约30 mg/ml；丙二醇的浓度是约12.0mg/ml至约18.0 mg/ml；磷酸氢二钠的浓度是约0.67 mg/ml至约2.68 mg/ml；且苯酚的浓度是约5.0 mg/ml。

9、在一个实施方案中，替尔泊肽组合物的所述剂量约每周施用一次。在一个实施方案中，替尔泊肽组合物的所述剂量每七天施用一次。

10、在一个实施方案中，提供了一种治疗糖尿病的方法，所述方法包括给有需要的人施用有效剂量的上述组合物。

11、在一个实施方案中，提供了一种治疗肥胖症的方法，所述方法包括给有需要的人施用有效剂量的上述组合物之一。在一个实施方案中，提供了一种提供治疗性体重减轻的方法，所述方法包括给有需要的人施用有效剂量的上述组合物之一。在一个实施方案中，提供了一种治疗由gip/glp1共激动剂活性介导的病症的方法，所述方法包括给有需要的人施用有效剂量的上述组合物之一。

12、在一个实施方案中，提供了以药剂形式使用的上述组合物之一。

13、在一个实施方案中，提供了用于治疗糖尿病的上述组合物之一。在一个实施方案中，提供了用于治疗肥胖症的上述组合物之一。

14、在一个实施方案中，提供了用于提供治疗性体重减轻的上述组合物之一。在一个实施方案中，提供了用于提供非治疗性体重减轻的上述组合物之一。

15、根据本发明的另一个方面，提供了一种包含上述组合物之一的制品(article ofmanufacture)。在某些实施方案中，所述制品是多用途小瓶。在某些实施方案中，所述制品是预填充(pre-filled)注射器。在某些实施方案中，所述制品是自动注射装置(“自动注射器”)。如本文所设想的，自动注射器的实例在美国专利8,734,394中被提出。

16、如本文所用，“替尔泊肽”意指us 9,474,780中所述的且由cas登记号2023788-19-2描述的gip/glp1共激动剂肽。替尔泊肽描述在us 9474,780的实施例1中，具有如下序列：

17、yx1egtftsdysix2ldkiaqkafvqwliaggpssgappps

18、其中x1是aib；x2是aib；在20位上的k通过用(2-[2-(2-氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基)2-(γglu)1-co-(ch2)18-co2h与k侧链的ε-氨基缀合而被化学修饰；且c-末端氨基酸被酰胺化为c-末端伯酰胺(seq id no: 1)。

19、当在本文使用时，“药学上可接受的盐”是本领域技术人员众所周知的。在一个实施方案中，药学上可接受的盐是替尔泊肽三氟乙酸盐。

20、当在本文使用时，术语“不含有表面活性剂”意指所述组合物不含有添加的表面活性剂，或者仅含有微量(

de minimis)的添加的表面活性剂。

21、当在本文使用时，术语“丙二醇”是本领域技术人员众所周知的。丙二醇也由式c3h8o2表示。

22、本发明的组合物具有5 mg/ml至30 mg/ml的替尔泊肽浓度。本发明的组合物可能具有5、10、15、20、25和30 mg/ml的特定浓度。这类组合物可以在预填充注射器中提供。这类预填充注射器可用于半毫升这类组合物/患者/剂量。可以使用临床医师确定的给药方案施用替尔泊肽组合物的剂量。

23、最初生产时，所述组合物是无菌的。如果在多次使用的小瓶或药筒(cartridge)中提供，则可以以足够的浓度加入与所述组合物的其它组分相容的抗微生物防腐化合物或化合物混合物，以满足适用的法规抗微生物防腐要求。药学上可接受的防腐剂是本领域众所周知的。(参见，例如remington: the science and practice of pharmacy (d.b. troy,editor, 第21版，lippincott, williams & wilkins, 2006)。在一个实施方案中，所述防腐剂是间甲酚。在一个实施方案中，所述防腐剂是苯酚。用于一次性使用的预填充注射器的组合物无需防腐剂。在一个实施方案中，所述组合物不含有表面活性剂。

24、本发明的替尔泊肽组合物的ph典型地是6.5至7.5，并且使用生理上适宜的酸和碱调节ph，因为这可能是达到期望ph所需要的。在一个实施方案中，ph目标是6.7至7.3。患者注射部位体验是皮下施用组合物的考虑因素。符合期望的是选择与可接受的患者注射部位体验相关的组合物。例如，nacl和柠檬酸盐已经被与注射部位的疼痛刺激相关联。(laursen, t.；hansen, b.；fisker, s. pain perception after subcutaneousinjections of media containing different buffers.

basic & clinical

pharmacology & toxicology 2006,

98, (2), 218-221.), (fransson, j.；espander‐jansson, local tolerance of subcutaneous injections.

journal of pharmacy and

pharmacology 1996,

48, (10), 1012-1015.)  当施用所述组合物时，进一步符合期望的是尽可能接近地匹配注射部位的体液张力(即，重量渗克分子浓度)，因为与体液不近似等张(isotonic)的溶液在施用时会产生疼痛的刺痛感。符合期望的是所述组合物与注射部位的体液近似等张。包含替尔泊肽、nacl和磷酸氢二钠的本发明的组合物与可接受的患者注射部位体验相关。同样，包含替尔泊肽、丙二醇和磷酸氢二钠的组合物与可接受的患者注射部位体验相关。

25、在一个实施方案中，用碱调节ph以促进在缓冲溶液中的溶解。可能需要向组合物中添加酸以将ph调至期望的ph范围。在一个实施方案中，naoh用于促进替尔泊肽在缓冲液中的溶解。在一个实施方案中，添加hcl以将含有溶解的替尔泊肽的组合物的ph调至期望的ph范围。

26、本发明的组合物典型地被皮下施用。典型地使用预填充的一次性笔型、可重复使用的笔型或自动笔型注射器来施用所述组合物。可以使用多次使用的小瓶或泵装置来施用所述组合物。在一个实施方案中，所述装置是美国专利8,734,394所要求保护的自动注射装置。

27、包含替尔泊肽、nacl和磷酸氢二钠的组合物提供了期望的贮存期稳定性，并为患者提供可接受的注射部位体验。同样，包含替尔泊肽、丙二醇和磷酸氢二钠的组合物提供期望的贮存期稳定性，并为患者提供可接受的注射部位体验。如本文所用，“贮存期稳定性”在约5摄氏度在受控的条件下测定。包含替尔泊肽、nacl和磷酸氢二钠的组合物提供可接受的使用期稳定性。同样，包含替尔泊肽、丙二醇和磷酸氢二钠的组合物提供可接受的使用期稳定性。如本文所用，术语“使用期稳定性”是指在25摄氏度或约25摄氏度或者在40摄氏度或约40摄氏度在受控的条件下测定的组合物的稳定性。

28、实施例

29、实施例#1 – 含有nacl的组合物

30、基本上如本文所述制备组合物。含有5、10、15、20、15和30 mg/ml替尔泊肽的组合物各自含有表1中所列出的成分。任选地添加酸或碱，以达到期望的ph范围。适量

(q.s.)添加水至一毫升的总最终体积。

31、表1. 替尔泊肽、磷酸盐和nacl的制剂

32、

33、使用5 mm磷酸盐缓冲液

34、实施例#2 – 含有丙二醇的组合物

35、基本上如本文所述制备组合物。提供每ml组合物5、10、15、20、15和30 mg替尔泊肽的组合物各自含有表2中所列出的成分。任选地添加酸或碱，以达到期望的ph范围。适量

(q.s.)添加水至一毫升的总最终体积。

36、表2. 替尔泊肽、磷酸盐和丙二醇的制剂

37、

38、使用5 mm磷酸盐缓冲液

39、分子排阻色谱法(sec)使用期稳定性研究

40、该操作是在214 nm使用uv检测的等度分子排阻hplc方法，被设计测定替尔泊肽单体和总聚集体的相对量。将单体和聚集体报道为与总面积相比的峰面积百分比。该操作是通过其将已知杂质与替尔泊肽拆分开的能力所测定的稳定性指示。本研究比较了替代选择组合物与如表3所示制备的本发明的组合物。本研究的稳定性如表4中所示。

41、比较替代选择组合物的稳定性研究：

42、表3

43、

44、使用10 mm磷酸盐缓冲液

45、表4. 使用分子排阻色谱法(sec)测定的替尔泊肽单体(%峰面积)

46、

47、贮存期稳定性研究

48、rp-hplc：

49、该操作是在214 nm使用uv检测的梯度反相hplc方法，被设计用于测定药物产品中替尔泊肽的量、身份和纯度。通过将主峰的保留时间与外部参比标准品的主峰的保留时间进行匹配来确定身份。通过将主峰面积与外部参比标准品中的相应峰进行比较来确定量。将杂质和相关物质报道为与总峰面积相比的峰面积百分比。该操作是通过其将已知杂质与替尔泊肽拆分开的能力所判断的稳定性指示。如表4所示，包含nacl作为张度剂(tonicityagent)的组合物提供了可接受的使用期稳定性。

50、分子排阻色谱(sec)贮存期稳定性研究

51、上文所述的分子排阻稳定性研究方法和rp-hplc被用于比较包含nacl作为张度和稳定剂的组合物与包含丙二醇作为张度和稳定剂的组合物。本研究举例说明了包含nacl试剂或包含丙二醇作为试剂的本发明的组合物的可接受的贮存期稳定性。表5中列出了用于本研究的组合物。表6中给出了来自本研究的稳定性。

52、表5. nacl与丙二醇之间的比较

53、

54、本研究中使用5 mm磷酸盐缓冲液

55、表6. 通过用sec测定单体(%峰面积)和通过rp-hplc测定纯度的替尔泊肽制剂中nacl与丙二醇作为试剂的比较

56、

57、注射疼痛研究：

58、如表7所述制备所有组合物。将每个溶液组合物小瓶在室温下保持约30分钟，但不超过4小时。立即使用重构的冻干组合物。所有注射按以下顺序在腹部的四个象限之间轮转：左下象限；右下象限；左上象限；和右上象限。具有29号针头的注射器用于从小瓶中施用组合物。受试者抓住注射部位的皮肤褶皱，然后将针头以约45度角插入。第二个人使用秒表来测量注射的时间长度。受试者将注射器的柱塞缓慢推进，直到注射0.5 ml组合物为止。注射的目标时间为4秒时间，但不超过5秒。注射后将针头从皮肤上拔下，从受试者的抓握中释放皮肤。在每次注射后受试者立即评估疼痛。使用100-mm验证的疼痛视觉模拟量表(vas)评估疼痛测量值。vas是良好验证的评估注射部位疼痛的工具(williamson, a.；hoggart,pain: a review of three commonly used pain rating scales.

journal of clinical

nursing 2005,

14, (7), 798-804)。vas表示为10-cm (100-mm)线，由言语描述词锚定，通常是“无痛”和“最坏的可想象的疼痛”。要求受试者标记100-mm线以指示在时间点上的疼痛强度，并按照临床指示进行。工作人员使用游标卡尺测量从0到受试者在vas上放置的标记的距离，并将测量值记录在源文件中。来自本研究的结果见表8。轻度疼痛强度指示(与中度或重度相比)反映可接受的患者注射部位体验。

59、表7

60、

61、

62、

63、本研究中使用5 mm磷酸盐缓冲液

64、表8. vas疼痛评分

65、

66、

67、序列

68、seq id no:1

69、替尔泊肽

70、yx1egtftsdysix2ldkiaqkafvqwliaggpssgappps

71、其中x1是aib；x2是aib；在20位上的k通过用(2-[2-(2-氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基)2-(γglu)1-co-(ch2)18-co2h与k侧链的ε-氨基缀合而被化学修饰；且c-末端氨基酸被酰胺化为c-末端伯酰胺。