一种中药益生菌组合物及其制备方法和应用与流程

本发明属于生物医药，具体涉及一种中药益生菌组合物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、肠道作为人体最大免疫器官，肠道微生态稳态与机体免疫功能密切相关。中草药复方富含多糖、黄酮、皂苷等多种活性组分，可通过调控肠道屏障、平衡菌群、调控免疫相关信号通路实现免疫调节；益生菌能够定植于肠道，促进肠黏膜免疫细胞活化、调控细胞因子分泌，二者联用具备多途径协同调节免疫的巨大潜力，是功能性健康食品研发的重要方向。将中草药复方与益生菌复配构建组合物，开发便于日常食用的功能性食品，契合大众对免疫支持类功能产品的消费需求。

2、检索到的相关文献：

3、专利文献cn111109596a（公开日期2020年5月8日）公开了一种增强免疫力的保健品及其制备方法，该保健品由蜂王浆冻干粉、黄精提取物、黄芪提取物、西洋参、益生元及辅料组成，其中，所述益生元可用含有双歧杆菌类和乳杆菌类的益生菌粉替代，该保健品具有抗氧化、抗疲劳、增强免疫力、调理肠胃等作用。

4、专利文献cn118497046a（公开日期2024年8月16日）公开了一种提升肠道免疫力的益生菌剂及其应用，所述益生菌剂包括鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌两种，两种菌株存在潜在的相互作用，能够相互配合，在提升肠道免疫力的功效上协同增效。

5、前述文献代表的现有技术至少存在以下未解决的技术问题或缺陷：

6、现有技术（如cn111109596a）主要采用中药提取物搭配益生元的复配思路，并未将中药活性成分与活菌益生菌直接复配，也未研究中药活性组分对活菌益生菌菌体活性带来的影响。

7、现有益生菌复配研究（如cn118497046a）多聚焦于菌株间的协同，未涉及中药体系对益生菌存储稳定性的作用。

8、综上，现有技术中，中药、益生菌多单独发挥作用，二者复配体系的协同增益效果有限。

9、发明人在研究中发现，若将中药浸膏直接与植物乳杆菌活菌进行复配，中药浸膏内的酸性组分、体系水分活度等因素会造成植物乳杆菌存储过程活菌活性下降，活菌数衰减明显。现有技术难以在保留中药活性成分的基础上，同时保障植物乳杆菌的存储稳定性。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供：

2、一种中药益生菌组合物及其相关技术，以解决现有中药复方或益生菌单独应用于肠道保护和免疫调节时协同增效有限，且植物乳杆菌与中药成分复配后存储稳定性较差、活菌数易衰减的技术问题或其组合技术问题。

3、术语说明：

4、除非另有定义，否则本文所有科技术语具有的涵义与主题所属领域技术人员通常理解的涵义相同。除非另有说明，本文全文引用的所有专利、专利发明、公开材料通过引用方式整体并入本文。

5、应理解，上述简述和下文的详述为示例性且仅用于解释，而不对本发明的主题作任何限制。在本发明中，除非另有具体说明，否则使用单数时也包括复数。还应注意，除非另有说明，否则所用“或”、“或者”表示“和/或”。此外，所用术语“包括”以及其它形式，例如“包含”、“含”和“含有”并非限制性。

6、可在参考文献“中国药典（2025年版）”中找到对标准化学术语的定义。

7、除非另有说明，否则采用本领域技术范围内的常规方法，如水活度、活菌数、细胞增殖活性、细胞吞噬活性测定和一氧化氮（no）分泌水平测定等检测方法。

8、除非提出具体定义，本文中使用的各类市售产品的使用，均采用标准技术。例如，可利用厂商对试剂盒的使用说明，或者按照本领域公知的方式或本发明的说明来进行实施。通常可根据本说明书中引用和讨论的多个概要性和较具体的文献中的描述，按照本领域熟知的常规方法实施上述技术和方法。

9、术语“任选/任意”或“任选地/任意地”是指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。

10、本发明中使用的涉及组分量、工艺条件等的所有数值或表述，在所有情形中均应被理解为受“约”修饰。术语“约”当指数量或数值范围时，所指数量或者数值范围是试验变异性内(或统计学实验误差内)的近似值。在本发明中，术语“约”应具有在指定值或范围的10%内，优选在5%内的含义。

11、本文所用的术语“室温”，指环境温度，温度由约10℃到约30℃。在一些实施例中，“室温”指的是温度由约20℃到约30℃；在另一些实施例中，“室温”指的是温度由约25℃到约30℃；在又一些实施例中，“室温”指的是10℃、15℃、20℃、25℃、30℃等。

12、本文所用的术语“固液分离”，指采用物理或机械方法，将含有固体颗粒与液体组分的混合体系，分离开为独立的固相组分与液相组分的操作过程。该过程可去除混合体系中的固体杂质、细胞碎片、沉淀、微生物聚集体等固相物质，获取澄清液相，或收集目标固相产物，是细胞培养、样品前处理、试剂制备等环节中常用的分离纯化手段。其中，离心分离、过滤分离、沉降分离、压滤等，均为本领域常规的固液分离手段。

13、本文所用的术语“浓缩”，指采用物理或化学方法，将物料中的溶剂（如水分）去除，使物料中有效成分的浓度提高、体积缩小的工艺操作，可采用减压浓缩、真空浓缩、喷雾浓缩等本领域常规浓缩方式。

14、本文所用的术语“干燥”，指将液体混合物、固体组分中的水分去除，得到干燥产物的常规操作，包括但不限于真空冷冻干燥、低温烘干、喷雾干燥、热风干燥等方式。

15、本文所用的术语“干浸膏”：指中药原料经提取、过滤除去药渣后，得到提取液；将提取液经浓缩、干燥处理除去绝大部分溶剂（水、乙醇等）后得到的固体膏状/粉末状提取物，含水量约5%。

16、当归为伞形科植物当归

angelica sinensis (oliv.) diels的干燥根。秋末采挖，除去须根和泥沙，待水分稍蒸发后，捆成小把，上棚，用烟火慢慢熏干。

17、金樱子为蔷薇科植物金樱子

rosa laevigata michx.的干燥成熟果实。10-11月果实成熟变红时采收，干燥，除去毛刺。

18、金银花为忍冬科植物忍冬

lonicera japonicathunb.的干燥花蕾或带初开的花。夏初花开放前采收，干燥。

19、积雪草为伞形科植物积雪草

centella asiatica (l.) urb.的干燥全草。夏、秋二季采收，除去泥沙，晒干。

20、牛蒡子为菊科植物牛蒡

arctium lappa l.的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收果序，晒干，打下果实，除去杂质，再晒干。

21、植物乳杆菌，又称植物乳植杆菌（

lactiplantibacillus plantarum），广泛存在于发酵蔬菜、发酵乳制品及人体肠道中，例如可来源于脱水的发酵牛乳或健康婴儿粪便。

22、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

23、第一方面，本发明提供了：一种中药益生菌组合物，包括当归、金樱子、金银花、积雪草、牛蒡子和植物乳杆菌。

24、本发明中，以植物乳杆菌作为免疫调节功能核心，重塑肠道免疫微生态；当归、金樱子扶正固本，调节机体基础免疫；金银花清热解毒抗炎；积雪草、牛蒡子清浊解毒、促肠道屏障修复；利用植物药与益生菌配伍，实现多通路协同，提升了机体免疫能力。

25、在一些实施方案中，所述中药益生菌组合物，按重量份计，包括当归11-25份、金樱子7-21份、金银花6-16份、积雪草2-10份、牛蒡子6-14份和植物乳杆菌0.5-3份。

26、在一些实施方案中，按重量份计，所述中药益生菌组合物中当归的用量可选为11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份、24份、25份，或其任意衍生的范围。

27、在一些实施方案中，按重量份计，所述中药益生菌组合物中金樱子的用量可选为7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份，或其任意衍生的范围。

28、在一些实施方案中，按重量份计，所述中药益生菌组合物中金银花的用量可选为6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份，或其任意衍生的范围。

29、在一些实施方案中，按重量份计，所述中药益生菌组合物中积雪草的用量可选为2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份，或其任意衍生的范围。

30、在一些实施方案中，按重量份计，所述中药益生菌组合物中牛蒡子的用量可选为6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份，或其任意衍生的范围。

31、在一些实施方案中，按重量份计，所述中药益生菌组合物中植物乳杆菌的用量可选为0.5份、1.0份、1.5份、2.0份、2.5份、3.0份，或其任意衍生的范围。

32、在一些实施方案中，所述中药益生菌组合物中植物乳杆菌的总活菌数为（1-10）×1010cfu/g。

33、在一些实施方案中，所述中药益生菌组合物，按重量份计，包括当归15-21份、金樱子10-18份、金银花8-14份、积雪草4-8份、牛蒡子8-12份和植物乳杆菌1-2份。

34、在一些实施方案中，所述中药益生菌组合物，按重量份计，包括当归18份、金樱子14份、金银花12份、积雪草6份、牛蒡子10份和植物乳杆菌1.5份。

35、第二方面，本发明提供了：上述中药益生菌组合物的制备方法，包括如下步骤：

36、（1）当归醇回流提取，固液分离，合并提取液，浓缩干燥，得到干浸膏1；

37、（2）金樱子和牛蒡子醇回流提取，固液分离，合并提取液，浓缩干燥，得到干浸膏2；

38、（3）金银花和积雪草水煎煮，固液分离，合并煎煮取液，浓缩干燥，得到干浸膏3；

39、（4）将干浸膏1、干浸膏2和干浸膏3混合后，加入植物乳杆菌混合均匀，即可。

40、在一些实施方案中，步骤（1）中所述醇为体积分数90%-95%乙醇，例如，乙醇的体积分数可选为90%、91%、92%、93%、94%、95%，或其衍生的范围。

41、在一些实施方案中，步骤（2）中所述醇为体积分数10%-50%乙醇，例如，乙醇的体积分数可选为10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%、44%、45%、46%、47%、48%、49%、50%，或其衍生的范围。

42、在一些实施方案中，步骤（1）和（2）中所述回流提取为：料液质量比1:8-15，提取至少1次，每次0.5-3h。例如，所述料液质量比可选为1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15，或其衍生的范围；所述提取的次数可选为1次、2次、3次、4次，或其衍生的范围；所述提取的时间可选为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，或其衍生的范围。

43、在一些实施方案中，步骤（3）中所述煎煮为：料液质量比1:8-20，煎煮至少1次。例如，所述料液质量比可选为1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20，或其衍生的范围；所述煎煮的次数可选为1次、2次、3次、4次，或其衍生的范围；所述煎煮的时间可选为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，或其衍生的范围。

44、在一些实施方案中，所述制备方法，包括如下步骤：

45、（1）当归采用体积分数90-95%乙醇回流提取，固液分离，合并提取液，浓缩干燥，得到干浸膏1；

46、（2）金樱子和牛蒡子采用体积分数10%-50%乙醇回流提取，固液分离，合并提取液，浓缩干燥，得到干浸膏2；

47、（3）金银花和积雪草采用水煎煮，固液分离，合并煎煮取液，浓缩干燥，得到干浸膏3；

48、（4）将干浸膏1、干浸膏2和干浸膏3混合后，加入植物乳杆菌混合均匀，即可。

49、第三方面，本发明提供了上述中药益生菌组合物或上述制备方法制备得到的中药益生菌组合物在制备有助于增强免疫力的产品中的应用。

50、第四方面，本发明提供了一种有助于增强免疫力的产品，包括上述中药益生菌组合物或上述制备方法制备得到的中药益生菌组合物。

51、在一些实施方案中，所述产品包括保健食品、特殊膳食用食品或膳食补充剂。

52、在一些实施方案中，所述产品，由上述中药益生菌组合物或上述制备方法制备得到的中药益生菌组合物和可接受的辅料制成。

53、优选地，所述可接受的辅料为保健食品上可接受的辅料。

54、本发明所述中药益生菌组合物可按本领域常规制剂方法制备成各种保健食品或临床上常规制剂，例如，可以向本发明有效量的中药益生菌组合物中加入保健食品上可接受辅料，本发明对所述辅料的种类并没有特殊限制，本领域技术人员公知的辅料的种类即可。在本发明中，所述辅料可以为崩解剂、润滑剂、黏合剂、分散剂中的一种或多种，制备成各种口服药剂，如片剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂或口服液。

55、对于本领域技术人员来说，在知晓活性成分的情况下，可根据常规制剂方法，轻易的制成各种药剂产品，同时在制备中所采用的辅料也为本领域技术人员所公知，如羧甲基淀粉钠、蔗糖粉、蜂蜜、芝麻油等。

56、第五方面，本发明提供了一种提高植物乳杆菌存储稳定性的方法，包括如下步骤：将植物乳杆菌与中药浸膏混合，得到中药益生菌组合物，密封避光储存即可。

57、在一些实施方案中，所述中药益生菌组合物，按重量份计，包括当归11-25份、金樱子7-21份、金银花6-16份、积雪草2-10份、牛蒡子6-14份和植物乳杆菌0.5-3份。

58、在一些实施方案中，所述中药浸膏的制备方法，包括如下步骤：

59、（1）当归采用体积分数90%-95%乙醇回流提取，固液分离，合并提取液，浓缩干燥，得到干浸膏1；

60、（2）金樱子和牛蒡子采用体积分数10%-50%乙醇回流提取，固液分离，合并提取液，浓缩干燥，得到干浸膏2；

61、（3）金银花和积雪草采用水煎煮，固液分离，合并煎煮取液，浓缩干燥，得到干浸膏3；

62、（4）将干浸膏1、干浸膏2和干浸膏3混合均匀，即可。

63、在一些实施方案中，步骤（1）中所述醇为体积分数90%-95%乙醇，例如，乙醇的体积分数可选为90%、91%、92%、93%、94%、95%，或其衍生的范围。

64、在一些实施方案中，步骤（2）中所述醇为体积分数10%-50%乙醇，例如，乙醇的体积分数可选为10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%、44%、45%、46%、47%、48%、49%、50%，或其衍生的范围。

65、在一些实施方案中，步骤（1）和（2）中所述回流提取为：料液质量比1:8-15，提取至少1次。例如，所述料液质量比可选为1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15，或其衍生的范围；所述提取的次数可选为1次、2次、3次、4次，或其衍生的范围。

66、在一些实施方案中，步骤（3）中所述煎煮为：料液质量比1:8-20，煎煮至少 1次。例如，所述料液质量比可选为1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20，或其衍生的范围；所述煎煮的次数可选为1次、2次、3次、4次，或其衍生的范围。

67、基于对本发明的技术问题的进一步解决或同时解决多个技术问题，在本发明第一方面所提供的技术方案中，优选方案包括：

68、第一项优选方案：中药益生菌组合物的用量关系。该技术方案在解决了技术问题“增强抵抗力”的基础上，进一步强化了上述技术效果。

69、第二项优选方案：中药浸膏的制备方法。该技术方案在解决了技术问题“增强抵抗力”的基础上，进一步提高了活菌的存储稳定性，强化了肠道保护效果。

70、本发明中实施例1-实施例3至少支持“所述中药益生菌组合物，按重量份计，包括当归11-25份、金樱子7-21份、金银花6-16份、积雪草2-10份、牛蒡子6-14份和植物乳杆菌0.5-3份”的保护范围。

71、技术特征“所述中药益生菌组合物，按重量份计，包括当归11-25份、金樱子7-21份、金银花6-16份、积雪草2-10份、牛蒡子6-14份和植物乳杆菌0.5-3份”，由本文前述解释和/或实施例1-实施例3中相应的当归、金樱子、金银花、积雪草、牛蒡子和植物乳杆菌的用量概括得到。因此，本领域技术人员经合理的推定，可认定上述技术特征、其下位概念、其基本等同的技术手段、基于现有技术水平在常规技术手段和公知常识内可替换的技术手段，都应当属于本发明的保护范围，例如在其他技术特征不变的情况下，将当归11-25份替换为当归14份、当归12-24份等，仍属于本发明的保护范围。

72、本发明中实施例1-实施例3至少支持“所述中药益生菌组合物的制备方法”的保护范围。

73、技术特征“所述中药益生菌组合物的制备方法”，由本文前述解释和/或实施例1-实施例3中相应的具体步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）和步骤（4）概括得到。因此，本领域技术人员经合理的推定，可认定上述技术特征、其下位概念、其基本等同的技术手段、基于现有技术水平在常规技术手段和公知常识内可替换的技术手段，都应当属于本发明的保护范围，例如在其他技术特征不变的情况下，将步骤（1）中醇回流提取替换为体积分数90%-95%乙醇回流提取、步骤（2）中醇回流提取替换为体积分数10%-50%乙醇回流提取等，仍属于本发明的保护范围。

74、本发明中实施例1-实施例3以及检测例1至少支持“提高植物乳杆菌存储稳定性的方法”的保护范围。

75、技术特征“提高植物乳杆菌存储稳定性的方法”，由本文前述解释和/或实施例1-实施例3中相应的具体步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）和步骤（4）概括得到，且检测例1给出了本发明复配中药浸膏体系能够有效改善植物乳杆菌的存储稳定性，对植物乳杆菌菌体具有良好保护作用。因此，本领域技术人员经合理的推定，可认定上述技术特征、其下位概念、其基本等同的技术手段、基于现有技术水平在常规技术手段和公知常识内可替换的技术手段，都应当属于本发明的保护范围。

76、本发明的有益效果为：

77、本发明中，以植物乳杆菌作为免疫调节功能核心，重塑肠道免疫微生态；当归、金樱子扶正固本，调节机体基础免疫；金银花清热解毒抗炎；积雪草、牛蒡子清浊解毒、促肠道屏障修复；利用植物药与益生菌配伍，实现多通路协同，提升了机体免疫能力。

78、实验证明，本发明植物乳杆菌和中药组分相互配合，在增强免疫力方面，产出了协同作用。

79、同时实验证明，本发明复配中药浸膏体系能够有效改善植物乳杆菌的存储稳定性，对植物乳杆菌菌体具有良好保护作用，进一步强化了其肠道保护效果。

80、此外，基于本发明的情况：

81、1、基于实施例1和对比例1-对比例3的对比可知，本发明采用当归高醇提、金樱子-牛蒡子中低醇提、金银花-积雪草水提的分组差异化提取工艺组合，取得新的技术效果。相较于全方统一溶剂提取的对比例，本发明得到的中药浸膏能够降低体系水活度，减轻中药酸性成分对植物乳杆菌的破坏，加速储存6个月活菌存留率可达61.8%-67.2%，同时保留充足免疫活性物质，有效提升巨噬细胞吞噬与no分泌水平，组合后的技术效果优于各提取手段单独使用效果的总和。

82、2、基于实施例1和对比例4-5的对比，本发明采用限定重量份的五味中药浸膏与植物乳杆菌复配，药材配比偏离或组分缺失时，组合物的植物乳杆菌储存稳定性以及免疫活化效果均同步显著下降。证明本发明各中药组分、植物乳杆菌之间存在配伍协同关系，中药浸膏既贡献免疫调节活性，又对植物乳杆菌起到保护作用；植物乳杆菌进一步放大免疫调节效果，实现双重技术效果协同达成。