一种美白提亮与修护的组合物及制备方法和化妆品的应用与流程

本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种美白提亮与修护的组合物及制备方法和化妆品的应用。

背景技术：

1、随着人们对外貌要求的提高，美白产品在人们生活中的作用越来越重要。黑色素的代谢通路涉及“黑色素细胞活化-酪氨酸酶催化黑色素合成-黑色素小体向角质形成细胞转运-黑色素随角质层代谢脱落”四个核心环节，并且炎症因子也会持续激活黑色素细胞。现有的美白产品仅聚焦酪氨酸酶抑制这一单靶点，无法阻断黑色素细胞活化、黑色素转运及炎症介导的色素生成，对顽固色斑、炎症后色沉的改善效果极差；且单靶点美白易导致黑色素细胞代偿性活化，停用后出现严重反黑。而传统美白成分如高浓度β-熊果苷、曲酸、传明酸具有皮肤刺激性，长期使用会破坏皮肤屏障。天然美白成分如酚类、黄酮类物质，对高温、光照、氧气极为敏感，在储存过程中易发生活性成分降解问题。因此开发一种能够针对黑色素全通路干预、兼具温和美白，刺激性低，稳定性好的美白组合物至关重要。

2、中国发明专利cn120899603b公开了一种修复受损肌肤细胞的组合物及其制备方法，组合物包括光果甘草根提取物、金蝉花提取肽、灵芝酸-胞外多糖复合物等，各成分配合能够精准作用于受损肌肤细胞的关键病理环节，实现安全、温和且高效的修复功能，但是光果甘草根提取物为经含氯化胆碱和乳酸的混合液超声提取得到，美白修复效果并不理想，不能实现黑色素的全通路干预。中国发明专利cn101067146b公开了一种甘草中主要化学成分的生物提取方法，将甘草粉碎制成超微粉体，再经酶解、煎滤和发酵充分解离；析出甘草酸粗品，制备得到的甘草酸不具有美白功效，不能应用于美白护肤品中。

技术实现思路

1、为了开发一种能够针对黑色素全通路干预、兼具温和美白，刺激性低，稳定性好的美白组合物，本发明的第一个方面提供了一种美白提亮与修护的组合物，包括活性成分，所述活性成分包括复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物、定向酶解熊果叶提取物、酵母菌发酵葡萄果皮提取物、重组人源化胶原蛋白、九肽-1和乙酰基六肽-2；所述复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物通过复合酶制剂酶解后，再经过厌氧菌发酵后得到。

2、本发明针对“黑色素细胞活化-黑色素合成-黑色素转运-黑色素代谢-炎症加剧色沉”全通路，构建了6种活性成分的协同作用体系：九肽-1竞争性结合mc1受体，阻断黑色素细胞活化，从源头抑制黑色素生成信号。本发明采用经过复合酶制剂酶解后，再经过厌氧菌发酵后得到的复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物，光甘草定含量提升3倍以上，刺激性降低90%，水溶性提升5倍，定向酶解熊果叶提取物中的β-熊果苷定向转化为高活性α-熊果苷，抑制酪氨酸酶活性显著增强，阻断黑色素合成，酵母菌发酵葡萄果皮提取物中为高活性游离白藜芦醇和易吸收的低聚原花青素，加速角质层黑色素代谢脱落；乙酰基六肽-2与重组人源化胶原蛋白协同抑制炎症因子释放，修复皮肤屏障，阻断“炎症-色素沉着”恶性循环，从根源解决色斑、暗沉、炎症后色沉问题。

3、作为一种实施方式，所述复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物中光甘草定含量≥30wt%。

4、作为一种实施方式，所述定向酶解熊果叶提取物中α-熊果苷含量≥90wt%，β-熊果苷含量≤3wt%。

5、作为一种实施方式，所述酵母菌发酵葡萄果皮提取物中白藜芦醇含量≥8wt%，低聚原花青素含量≥40wt%。

6、作为一种实施方式，所述重组人源化胶原蛋白为重组人源化ⅲ型胶原蛋白，分子量为30-100kda。

7、作为一种实施方式，所述活性成分以重量份计包括复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物0.5-8份、定向酶解熊果叶提取物1-12份、酵母菌发酵葡萄果皮提取物2-15份、重组人源化胶原蛋白0.1-5份、九肽-1 0.05-3份和乙酰基六肽-2 0.05-3份。

8、作为一种实施方式，所述组合物还包括基质辅料，所述基质辅料以重量份计包括保湿剂10-15份，润肤剂1-3份、增稠剂0.1-0.3份、螯合剂0.01-0.1份、中和剂0.1-0.3份，防腐剂1-2份和去离子水。

9、作为一种实施方式，所述基质辅料以重量份计包括保湿剂13.2份，润肤剂2份、增稠剂0.2份、螯合剂0.05份、中和剂0.2份，防腐剂1份和去离子水。

10、作为一种实施方式，所述保湿剂包括甘油、丙二醇、透明质酸钠、泛醇中的至少一种。

11、作为一种实施方式，所述润肤剂包括角鲨烷、霍霍巴油、辛酸/癸酸甘油三酯中的至少一种。

12、作为一种实施方式，所述增稠剂包括卡波姆、黄原胶、羟乙基纤维素中的至少一种。

13、作为一种实施方式，所述螯合剂为edta二钠。

14、作为一种实施方式，所述中和剂为三乙醇胺。

15、作为一种实施方式，所述防腐剂包括对羟基苯乙酮、1,2-己二醇中的至少一种。

16、作为一种实施方式，所述复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物的制备方法包括以下步骤：

17、将光果甘草根干燥，粉碎，过筛得到光果甘草粉；

18、将光果甘草粉与去离子水混合，调节ph至4-6，加入复合酶制剂，恒温酶解1-5h，沸水浴灭酶，冷却后得到酶解液；

19、将酶解液加入厌氧菌中厌氧发酵，发酵后灭菌，然后离心，取上清液过滤浓缩，浓缩物冷冻干燥得到复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物。

20、作为一种实施方式，所述复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物的制备方法包括以下步骤：

21、将光果甘草根30-50℃干燥10-15h，粉碎，过80目筛得到光果甘草粉；

22、将光果甘草粉与去离子水混合，用柠檬酸调节ph至4-6，加入复合酶制剂，40-60℃恒温酶解1-5h，100℃沸水浴灭酶10min，冷却至室温得到酶解液；

23、将酶解液加入厌氧菌中35-40℃厌氧发酵45-50h，发酵后100℃灭菌10min，冷却至室温，然后6000-10000rpm离心15-30min，取上清液过滤浓缩，浓缩物-30~-50℃冷冻干燥45-50h得到复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物。

24、作为一种实施方式，所述复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物的制备方法包括以下步骤：

25、将光果甘草根40℃干燥12h，粉碎，过80目筛得到光果甘草粉；

26、将光果甘草粉与去离子水混合，用柠檬酸调节ph至5，加入复合酶制剂，50℃恒温酶解3h，100℃沸水浴灭酶10min，冷却至室温得到酶解液；

27、将酶解液加入厌氧菌中37℃厌氧发酵48h，发酵后100℃灭菌10min，冷却至室温，然后8000rpm离心20min，取上清液过滤浓缩，浓缩物-40℃冷冻干燥48h得到复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物。

28、作为一种实施方式，所述光果甘草粉与去离子水的质量体积比为1g：（10-20）ml。

29、作为一种实施方式，所述光果甘草粉与去离子水的质量体积比为1g：15ml。

30、作为一种实施方式，所述复合酶制剂包括纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和果胶酶；所述纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和果胶酶的重量比为（1-5）：（1-3）：1。

31、作为一种实施方式，所述纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和果胶酶的重量比为3：2:1。

32、作为一种实施方式，所述复合酶制剂的添加量是光果甘草粉质量的1-3wt%。

33、作为一种实施方式，所述复合酶制剂的添加量是光果甘草粉质量的2wt%。

34、作为一种实施方式，所述厌氧菌为植物乳杆菌种子液，所述植物乳杆菌种子液在600nm波长下的吸光度值为1-1.5，所述植物乳杆菌种子液的接种量是酶解液体积的1-5%。

35、作为一种实施方式，所述植物乳杆菌种子液在600nm波长下的吸光度值为1.2，所述植物乳杆菌种子液的接种量是酶解液体积的3%。

36、作为一种实施方式，所述浓缩物的固含量为10-30wt%。

37、作为一种实施方式，所述浓缩物的固含量为20wt%。

38、作为一种实施方式，所述过滤为用截留分子量3000da的超滤膜超滤。

39、作为一种实施方式，所述浓缩为滤过液于60℃减压浓缩。

40、经hplc检测，本发明制备的复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物中光甘草定含量≥30%，远高于传统溶剂提取法的8%-10%，同时去除了光果甘草中具有刺激性的黄酮类杂质，水溶性提升5倍以上，生物利用度大幅提升。

41、作为一种实施方式，所述定向酶解熊果叶提取物的制备方法包括以下步骤：

42、将熊果叶40-50℃干燥8-12h，粉碎，过80目筛得到熊果叶粉；

43、将熊果叶粉用提取液50-70℃回流提取1-3次，每次1-3h，合并提取液，于40-60℃减压回收乙醇至无醇，得到熊果叶粗提液，固形物含量为8-10wt%；

44、调节熊果叶粗提液的ph至5-6，加入定向酶，50-55℃恒温水浴酶解1-5h，100℃沸水浴灭酶10min，冷却后得到酶解液；

45、酶解液纯化浓缩，-30~-50℃干燥45-50h后得到定向酶解熊果叶提取物。

46、作为一种实施方式，所述定向酶解熊果叶提取物的制备方法包括以下步骤：

47、将熊果叶45℃干燥10h，粉碎，过80目筛得到熊果叶粉；

48、将熊果叶粉用提取液60℃回流提取2次，每次2h，合并提取液，于50℃减压回收乙醇至无醇，得到熊果叶粗提液，固形物含量为8.2wt%；

49、调节熊果叶粗提液的ph至5.2，加入定向酶，52℃恒温水浴酶解4h，100℃沸水浴灭酶10min，冷却后得到酶解液；

50、酶解液纯化浓缩，-40℃干燥48h后得到定向酶解熊果叶提取物。

51、作为一种实施方式，所述提取液为乙醇水溶液，所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为45-55%。所述熊果叶粉与乙醇水溶液的料液比为1g：（10-20）ml。

52、作为一种实施方式，所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为50%。所述熊果叶粉与乙醇水溶液的料液比为1g：15ml。

53、作为一种实施方式，所述定向酶为β-葡萄糖苷酶，β-葡萄糖苷酶的添加量为熊果叶粗提液中固形物质量的1-3%。

54、作为一种实施方式，所述β-葡萄糖苷酶的添加量为熊果叶粗提液中固形物质量的1.5%。

55、作为一种实施方式，所述酶解液纯化为将酶解液经ab-8大孔吸附树脂层析，先用去离子水洗脱除去杂质，再用体积分数70%的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液。

56、作为一种实施方式，所述浓缩为将洗脱液于40-60℃减压浓缩至固形物含量10-20%。

57、作为一种实施方式，所述浓缩为将洗脱液于50℃减压浓缩至固形物含量15%。

58、经hplc检测，本发明制备的定向酶解熊果叶提取物中α-熊果苷含量≥90%，β-熊果苷含量≤3%，无熊果酚等刺激性杂质，α-熊果苷的酪氨酸酶抑制活性是β-熊果苷的10倍以上，且不会水解产生氢醌，安全性与稳定性大幅提升。

59、作为一种实施方式，所述酵母菌发酵葡萄果皮提取物的制备方法包括以下步骤：

60、将葡萄果皮洗净干燥，粉碎，过筛得到葡萄果皮粉；

61、将葡萄果皮粉与去离子水混合，灭菌后接入酿酒酵母菌种子液发酵，发酵后灭菌，然后离心，取上清液过滤浓缩，浓缩物冷冻干燥得到酵母菌发酵葡萄果皮提取物。

62、作为一种实施方式，所述酵母菌发酵葡萄果皮提取物的制备方法包括以下步骤：

63、将葡萄果皮洗净35-45℃干燥10-15h，粉碎，过80目筛得到葡萄果皮粉；

64、将葡萄果皮粉与去离子水混合，120-125℃高压灭菌15-25min后，冷却至室温，接入酿酒酵母菌种子液发酵，25-30℃，140-160r/min摇床有氧发酵70-75h后100℃灭菌10min，冷却至室温，然后7000-10000r/min离心10-30min，取上清液过滤浓缩，浓缩物-30~-50℃冷冻干燥45-50h得到酵母菌发酵葡萄果皮提取物。

65、作为一种实施方式，所述酵母菌发酵葡萄果皮提取物的制备方法包括以下步骤：

66、将葡萄果皮洗净40℃干燥12h，粉碎，过80目筛得到葡萄果皮粉；

67、将葡萄果皮粉与去离子水混合，121℃高压灭菌20min后，冷却至室温，接入酿酒酵母菌种子液发酵，28℃，150r/min摇床有氧发酵72h后100℃灭菌10min，冷却至室温，然后8000r/min离心20min，取上清液过滤浓缩，浓缩物-40℃冷冻干燥48h得到酵母菌发酵葡萄果皮提取物。

68、作为一种实施方式，所述葡萄果皮为赤霞珠葡萄果皮。

69、作为一种实施方式，所述葡萄果皮粉与去离子水的料液比为1g：（8-12）ml。

70、作为一种实施方式，所述葡萄果皮粉与去离子水的料液比为1g：10ml。

71、作为一种实施方式，所述酿酒酵母菌种子液在600nm波长下的吸光度值为1-1.5，所述植物乳杆菌种子液的接种量是酶解液体积的1-5%。

72、作为一种实施方式，所述酿酒酵母菌种子液在600nm波长下的吸光度值为1.0，所述植物乳杆菌种子液的接种量是酶解液体积的4%。

73、作为一种实施方式，所述过滤为用截留分子量1000da的纳滤膜过滤。

74、作为一种实施方式，所述浓缩为滤过液于60℃减压浓缩。

75、经hplc检测，本发明制备的酵母菌发酵葡萄果皮提取物中白藜芦醇含量≥8%，低聚原花青素含量≥40%，同时富含酵母多糖、氨基酸等活性成分，具有强抗氧化性与抗炎活性，能够加速角质层黑色素代谢，阻断炎症通路。

76、本发明的第二个方面提供了一种美白提亮与修护的组合物的制备方法，包括以下步骤：

77、将保湿剂、增稠剂、螯合剂与去离子水混和，加热至70-90℃，搅拌至各组分溶解，得到水相；

78、将润肤剂加热至70-90℃，搅拌至完全熔融均匀，得到油相；

79、将油相加入水相中，保持温度70-90℃，均质乳化，然后加入中和剂，继续均质至体系均匀，降温，加入防腐剂，搅拌至完全溶解，得到基质辅料；

80、将基质辅料继续降温至30-40℃，加入复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物、定向酶解熊果叶提取物、酵母菌发酵葡萄果皮提取物、重组人源化胶原蛋白、九肽-1、乙酰基六肽-2，搅拌至体系均匀，过滤得到美白提亮与修护的组合物。

81、作为一种实施方式，所述美白提亮与修护的组合物的制备方法，包括以下步骤：

82、将保湿剂、增稠剂、螯合剂与去离子水混和，加热至80℃，以30r/min的转速搅拌20min至各组分溶解，得到水相；

83、将润肤剂加热至80℃，以30r/min的转速搅拌15min至完全熔融均匀，得到油相；

84、将油相加入水相中，保持温度80℃，以4000r/min的转速均质乳化8min，然后加入中和剂，继续均质2min至体系均匀，降温至42℃，加入防腐剂，以40r/min的转速搅拌15min至完全溶解，得到基质辅料；

85、将基质辅料继续降温至37℃，加入复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物、定向酶解熊果叶提取物、酵母菌发酵葡萄果皮提取物、重组人源化胶原蛋白、九肽-1、乙酰基六肽-2，以30r/min的转速搅拌20min至体系均匀，经200目滤网过滤得到美白提亮与修护的组合物。

86、本发明的第三个方面提供了一种化妆品，包括上述的美白提亮与修护的组合物。

87、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

88、（1）本发明所述美白提亮与修护的组合物，通过多靶点干预“黑色素细胞活化-酪氨酸酶催化黑色素合成-黑色素小体向角质形成细胞转运-黑色素随角质层代谢脱落”全通路，同时阻断“炎症-色素沉着”恶性循环。九肽-1从源头抑制黑色素生成信号，合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物与定向酶解熊果叶提取物协同抑制黑色素合成与转运，多肽与胶原蛋白协同阻断炎症介导的色素生成，形成闭环式美白机制。

89、（2）本发明所述美白提亮与修护的组合物，采用复合酶制剂酶解后，再经过厌氧菌发酵后得到的复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物，可以使光甘草定含量≥30%，刺激性降低90%，水溶性提升5倍以上，生物利用度大幅提升；用β-葡萄糖苷酶定向酶解将β-熊果苷转化为α-熊果苷。

90、（3）本发明所述美白提亮与修护的组合物，采用β-葡萄糖苷酶定向酶解将β-熊果苷转化为α-熊果苷，使α-熊果苷含量≥90%，β-熊果苷含量≤3%，无熊果酚等刺激性杂质，α-熊果苷的酪氨酸酶抑制活性是β-熊果苷的10倍以上，安全性与稳定性大幅提升。

91、（4）本发明所述美白提亮与修护的组合物，采用酿酒酵母菌有氧发酵葡萄果皮粉，使白藜芦醇含量≥8%，低聚原花青素含量≥40%，抗氧化活性提升2倍以上，具有强抗氧化性与抗炎活性，能够加速角质层黑色素代谢，阻断炎症通路。

92、（5）本发明所述美白提亮与修护的组合物，发酵提取物中的酵母多糖、植物多糖与重组人源化胶原蛋白形成三维保湿网络，包裹活性成分，隔绝氧气与光照的影响；各活性成分之间形成抗氧化协同体系，相互保护，避免氧化降解，大幅提升了组合物的储存稳定性。

93、（6）本发明所述美白提亮与修护的组合物，提取物采用了特定的制备工艺，去除了植物提取物中的刺激性杂质，无有机溶剂残留，同时复配重组人源化胶原蛋白与抗炎多肽，在美白的同时修复皮肤屏障，降低刺激性。

94、（7）本发明所述美白提亮与修护的组合物，复合酶解-益生菌发酵光果甘草提取物、定向酶解熊果叶提取物和酵母菌发酵葡萄果皮提取物的提取工艺条件温和，参数可控，活性成分保留率高，无需使用大量有毒有机溶剂，绿色环保，无三废污染，无需新增设备投入，适合工业化大规模推广应用。