三氯卡班在制备抗肿瘤药物或药物组合物中的应用

本发明属于生物医药，具体涉及小分子化合物三氯卡班（triclocarban）的制药新用途，尤其涉及triclocarban在制备用于治疗恶性肿瘤的药物或药物组合物中的应用。

背景技术：

1、恶性肿瘤是严重威胁人类健康的主要疾病之一，其中以乳腺癌、肺癌等为代表的实体瘤发病率及致死率常年居高不下。pd-l1（程序性死亡配体1）是一种关键的免疫检查点分子，在多种肿瘤细胞表面及肿瘤微环境中的免疫细胞上异常高表达。当pd-l1与t细胞表面的pd-1受体结合后，会传递抑制性信号，导致t细胞增殖受阻、细胞因子分泌减少，进而诱导t细胞耗竭，帮助肿瘤细胞有效逃避机体的免疫监视。临床研究表明，pd-l1的高表达与乳腺癌等多种恶性肿瘤患者的预后不良及免疫治疗耐药密切相关，是肿瘤免疫抑制微环境形成的重要驱动因素。

2、目前，针对pd-l1的治疗策略主要依赖于单克隆抗体类药物，但此类药物存在生产成本较高、可能引起免疫原性反应、生物屏障穿透性受限以及给药途径通常限于注射给药等不足。近年来，通过小分子化合物直接诱导靶蛋白降解的策略，因兼具可口服给药、易于透过生物膜、可调节蛋白稳态、生产成本相对较低且免疫原性风险较低等潜在优势，已成为抗肿瘤药物研发的前沿方向。然而，尽管已有一些临床前研究报道了具有pd-l1降解活性的小分子化合物，但目前尚未有任何小分子pd-l1降解剂获得监管机构批准上市，该领域仍处于探索阶段。此外，化疗药物与免疫检查点抑制剂的联合应用策略虽已受到广泛关注，但其最佳联合方案、协同机制及安全性仍有待深入探索。

3、triclocarban（三氯卡班，cas号：101-20-2，化学名：1-(4-氯苯基)-3-(3,4-二氯苯基)脲）是一种经典的广谱抗菌剂，自20世纪50年代以来广泛用作个人护理产品（如香皂、沐浴露、洗手液等）中的抗菌活性成分，亦被用于部分外用消毒制剂中。triclocarban的作用机制主要与其抑制细菌中烯脂酰-acp还原酶（fabi）有关，从而阻断细菌脂肪酸合成，发挥抑菌作用。迄今为止，尚未有任何报道揭示triclocarban与pd-l1蛋白降解之间的关联，亦未见其用于抗肿瘤免疫治疗的研究或临床应用报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种小分子化合物三氯卡班的新制药用途，以解决现有pd-1/pd-l1免疫检查点疗法中缺乏高效、可口服的小分子降解剂的技术问题。本发明首次发现triclocarban能够靶向诱导pd-l1蛋白降解，通过重塑肿瘤免疫微环境实现抗肿瘤作用。

2、为实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了式（i）所示化合物在制备抗肿瘤药物或抗肿瘤药物组合物中的应用；

4、

5、式（i）

6、所述式（i）所示化合物的化学名称为三氯卡班（triclocarban），cas号为101-20-2。

7、作为一种可实施的方案，所述抗肿瘤药物或抗肿瘤药物组合物用于治疗pd-l1阳性恶性肿瘤。

8、作为一种可实施的方案，所述pd-l1阳性恶性肿瘤包括但不限于乳腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、胃癌、食管癌、肝癌、结直肠癌、胰腺癌、肾细胞癌、膀胱癌、前列腺癌、卵巢癌、宫颈癌、黑色素瘤、头颈鳞癌及甲状腺癌等肿瘤。

9、作为本发明的一种优选实施方案，所述恶性肿瘤为乳腺癌。

10、在本发明提供的上述应用中，所述式（i）所示化合物作为唯一的活性成分使用；或者，所述式（i）所示化合物与至少一种其他抗肿瘤活性成分联合作为活性成分使用。

11、作为本发明的一种优选实施方案，所述式（i）所示化合物通过降解肿瘤细胞中的pd-l1蛋白，阻断pd-1/pd-l1免疫检查点信号通路，逆转肿瘤微环境中t细胞的免疫抑制状态，恢复免疫细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤功能，促进免疫细胞浸润，从而抑制肿瘤生长。所述“降解”是指在蛋白水平上降低pd-l1的表达量。

12、在本发明的一些实施方案中，所述药物或药物组合物中三氯卡班的单位剂量为1mg至500 mg。

13、在本发明中，所述药物或药物组合物的给药途径没有特别限制，包括但不限于口服给药、舌下给药、直肠给药、静脉注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、经肺吸入给药、经黏膜吸收给药、外用给药或透皮吸收给药。

14、优选地，所述给药途径为口服给药或腹腔注射给药。

15、在本发明中，所述药物组合物包含治疗有效量的式（i）所示化合物以及至少一种药学上可接受的辅料。

16、可用的药学上可接受的辅料包括但不限于：溶剂（如水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇）、稀释剂（如淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、甘露醇、微晶纤维素）、赋形剂、崩解剂（如交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素）、粘合剂（如羟丙甲纤维素、聚维酮、羧甲基纤维素钠）、润滑剂（如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶）、表面活性剂（如聚山梨酯、十二烷基硫酸钠）、助悬剂、增稠剂、防腐剂（如苯甲酸钠、尼泊金酯类）、缓冲剂（如磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液）、等渗调节剂（如氯化钠、葡萄糖）、ph调节剂、矫味剂及着色剂。

17、在本发明中，所述药物或药物组合物的剂型包括但不限于口服固体制剂（片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、滴丸）、口服液体制剂（口服溶液剂、口服混悬剂、口服乳剂）、注射剂（溶液型注射剂、混悬型注射剂、乳剂型注射剂、冻干粉针剂）、外用制剂（软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、贴剂、搽剂、洗剂）及喷雾剂、气雾剂、粉雾剂。

18、第二方面，本发明提供了式（i）所示化合物与化疗药物联合应用在制备抗肿瘤药物组合物中的用途；

19、所述化疗药物选自以下类别中的一种或多种：

20、（i）铂类化合物，包括但不限于顺铂（cisplatin）、卡铂、奥沙利铂、奈达铂；

21、（ii）烷化剂类，包括但不限于环磷酰胺、异环磷酰胺、氮芥、苯丁酸氮芥、美法仑；

22、（iii）抗代谢类，包括但不限于5-氟尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨、甲氨蝶呤、培美曲塞、阿糖胞苷；

23、（iv）蒽环类及其衍生物，包括但不限于多柔比星、表柔比星、柔红霉素、伊达比星、米托蒽醌；

24、（v）抗微管类，包括但不限于紫杉醇、多西他赛、白蛋白结合型紫杉醇、长春新碱、长春瑞滨、艾日布林；

25、（vi）拓扑异构酶抑制剂类，包括但不限于依托泊苷、替尼泊苷、伊立替康、拓扑替康；

26、（vii）靶向药物，包括但不限于酪氨酸激酶抑制剂、parp抑制剂、cdk4/6抑制剂、mtor抑制剂、hdac抑制剂、vegf/vegfr抑制剂、egfr抑制剂、her2抑制剂；

27、（viii）激素类药物，包括但不限于他莫昔芬、来曲唑、阿那曲唑、氟维司群。

28、作为本发明的一种优选实施方案，所述化疗药物为顺铂。

29、在联合应用的实施方案中，所述药物组合物中式（i）所示化合物与化疗药物的质量比为100:1至1:100。

30、优选地，所述质量比为10:1至1:10。

31、更优选地，所述质量比为5:1至1:5。

32、进一步优选地，所述质量比为1:1。

33、在联合应用的实施方案中，式（i）所示化合物与化疗药物可同时给药、分别给药或顺序给药。

34、所述“同时给药”是指将两种活性成分以同一药物组合物形式或以两种独立的药物组合物在同一时间点给予受试者；所述“分别给药”是指将两种活性成分以两种独立的药物组合物在相同或不同的时间窗内给予受试者；所述“顺序给药”是指先将一种活性成分给予受试者，间隔一定时间后再将另一种活性成分给予受试者。

35、第三方面，本发明提供了一种抗肿瘤药物组合物，其包含治疗有效量的式（i）所示化合物以及至少一种药学上可接受的辅料。

36、作为一种实施方案，所述药物组合物还包含至少一种第二活性成分，所述第二活性成分选自化疗药物、免疫治疗药物或靶向治疗药物。

37、优选地，所述第二活性成分为化疗药物，更优选为顺铂。

38、第四方面，本发明提供了一种治疗恶性肿瘤的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的式（i）所示化合物，或给予本发明所述的药物组合物。

39、优选地，所述方法还包括向受试者给予化疗药物。所述化疗药物优选为顺铂。

40、所述“治疗”是指减轻、延缓、抑制或预防恶性肿瘤的生长、转移、复发，包括但不限于缩小肿瘤体积、降低肿瘤负荷、延长患者生存期、改善患者生活质量。

41、在本发明中，所述受试者为哺乳动物，优选为人。

42、本发明所述的triclocarban为已知化合物，可通过商业渠道购买（如sigma-aldrich、chemdiv、targetmol等化合物供应商），亦可参照本领域已知的化学合成方法制备，例如以4-氯苯胺和3,4-二氯苯基异氰酸酯为原料经加成反应制得，或采用其他本领域常规的脲类化合物合成方法。

43、基于上述技术方案，本发明具有以下有益效果：

44、（一）本发明首次揭示了triclocarban作为pd-l1蛋白降解剂的全新制药用途。实验证实，triclocarban能够在人乳腺癌细胞mcf-7和小鼠乳腺癌细胞4t1中浓度依赖性地诱导pd-l1蛋白降解，在3 µm浓度下即可显著降低pd-l1蛋白水平。这一发现为pd-1/pd-l1免疫检查点通路提供了一种具有明确降解活性且可口服的小分子化合物，为开发非抗体类免疫检查点抑制剂提供了新的策略。

45、（二）本发明通过小鼠乳腺癌4t1原位移植瘤模型证实，triclocarban（5 mg/kg，腹腔注射，每日1次）能够显著抑制肿瘤生长，肿瘤体积和肿瘤重量较溶剂对照组均显著减小，具有确切的体内抗肿瘤药效，验证了其作为抗肿瘤药物的临床开发潜力。

46、（三）本发明通过流式细胞术系统分析了肿瘤免疫微环境的变化，发现triclocarban能够显著增加肿瘤浸润cd8+t细胞的比例，同时上调颗粒酶b阳性（gzmb+）t细胞的比例，逆转肿瘤微环境的免疫抑制状态，激活机体抗肿瘤免疫应答。上述发现表明，triclocarban通过降解pd-l1蛋白，在逆转免疫抑制微环境的同时，可能协同增强免疫细胞对肿瘤的清除作用，为肿瘤免疫治疗提供了新的药物候选。

47、（四）本发明揭示了triclocarban与一线化疗药物顺铂的协同增效作用。在4t1乳腺癌模型中，triclocarban与顺铂联合用药组的肿瘤抑制效果显著优于任一单药组，表明triclocarban与顺铂联用可产生优于单用的抗肿瘤效果，具有联合用药的临床开发潜力。

48、（五）与现有的pd-1/pd-l1单克隆抗体药物相比，triclocarban作为小分子化合物具有生产成本低、无免疫原性风险、可口服给药、组织穿透性好等显著优势，能够大幅降低治疗成本，提高患者依从性和药物可及性，具有良好的社会效益和经济效益。

49、（六）triclocarban作为已在个人护理产品中广泛使用的已知化合物，其人体安全性数据相对充分，可望缩短药物研发周期，降低临床开发风险，具有快速推进至临床试验的可行性。