一种抑制酪氨酸激酶的化合物的制作方法

abl抑制剂，因此asciminib对 tki 耐药突变的肿瘤也具有强效抑制活性，同时asciminb具有极高的安全性、避免了前面几代抑制剂的毒性问题；另外研究还发现asciminib和 atp 竞争性 tki 的组合用药可有效减少耐药的出现。因此变构bcr-abl抑制剂被认为在治疗ph阳性的慢性粒细胞白血病领域具有极高的学术价值和社会价值。因此有必要开发新的bcr-abl抑制剂用于解决耐药问题。


技术实现要素：

3.技术问题本发明提供一种制酪氨酸激酶的化合物，是一种具有bcr-abl融合蛋白化合物。
4.技术方案本发明提供一种抑制酪氨酸激酶的化合物，即通式（）表示的化合物：（）式中： r为氢、卤素或者c1~c3直链或支链烷基。
5.所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为氢。
6.所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为甲基。
7.所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为氟。
8.所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为氯。
9.所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，用于制备抑制酪氨酸激酶药物。
10.有益效果本专利发现了一系列新一代的bcr-abl抑制剂，发现它们具有极高的肿瘤细胞抑制活性。能有效解决耐药问题。
具体实施方式
11.实施例1、抑制酪氨酸激酶的化合物1制备1）实施例1化合物结构式
2）实施例1化合物制备步骤步骤1：将氮杂吲哚中间体1(0.1mol)溶于100ml 四氢呋喃中，加入氢氧化锂(0.1mol)，室温搅拌反应2小时后水解完全。将四氢呋喃蒸干后加水溶解，以0.1n烯盐酸调酸性至固体析出。抽滤得到的固体得到中间体2。
12.步骤2：将中间体2（0.05mol)与hatu（0.05mol)溶解于二氯甲烷中，分批加入1-（4-氨基苄基）哌啶。加完原料后室温下搅拌过夜，加水稀释后，分出有机相浓缩后柱层析得到实施例1化合物。
13.实施例2：抑制酪氨酸激酶的化合物2制备1）实施例2化合物结构式
2）实施例2化合物制备步骤按实施例1的合成步骤，从相应的起始原料合成出实施例 2所示化合物。
14.实施例3：抑制酪氨酸激酶的化合物3制备1）实施例3化合物结构式2）实施例3化合物制备步骤按实施例1的合成步骤，从相应的起始原料合成出实施例3所示化合物。
15.实施例4：抑制酪氨酸激酶的化合物4制备1）实施例4化合物结构式
2）实施例4化合物制备步骤按实施例1的合成步骤，从相应的起始原料合成出实施例4所示化合物。
16.实施例5、细胞活性检测实验方法受试物储存液配制（避光操作）：以dmso或相应溶媒溶解受试药物。配制成合适浓度（一般为10-2m）的储存液。置于-20℃存放。实验时以不含fbs的细胞培养所需相应培养基作为稀释液，稀释受试物储存液，以获得所需各实验浓度。
17.在96孔培养板中，根据不同细胞对不同药物的敏感性，可选择最高剂量为100μm或10μm等浓度，按合适比例（一般为1：10或1：3）系列稀释得到9个剂量浓度。每个剂量做3复孔，100μl/孔，为测试孔。以受试物稀释液替代药液，加入细胞对照孔（不含药液，需加入细胞），3或6复孔，100μl/孔。以受试物稀释液替代药液，加入阴性对照孔（不含药液和细胞），3或6复孔，100μl/孔。接种细胞（避光操作）：除阴性对照孔之外，每个待测孔加入100μl完全培养基细胞悬液，其中含有相应细胞数以确保达到培养所需时间时细胞对照组的细胞刚好铺满孔底面，并使得检测的吸光值在合理范围内。阴性对照孔（不含药液和细胞）以受试物稀释液替代细胞悬液，100μl/孔。co2培养箱中培养至所需时间（一般为72小时）。贴壁细胞吸弃测试孔内液体。每个测试孔加入100μlcck-8检测液（含10% cck-8，5�s的相应培养基）；悬浮细胞每孔直接加入20μlcck-8检测液，在co2培养箱中孵育2-4小时。以酶标仪a450nm检测od值。
18.实验结果使用下列公式计算细胞存活率百分比：(o.d. 测试孔
ꢀ–ꢀ
o.d. 阴性对照孔) / (o.d. 细胞对照孔
−ꢀ
o.d. 阴性对照孔)
ꢀ×ꢀ
100。使用graphpad prism6.0软件(golden software, golden, colorado, usa)的非线性回归数据分析方法计算ic50。两种细胞检测结果如下：
说明：a代表半数抑制浓度小于10nm; b代表半数抑制浓度介于10~100nm之间。c代表半数抑制浓度大于100nm。
19.实施例6、抑制酪氨酸激酶的化合物1-4制备抑制酪氨酸激酶药物抑制酪氨酸激酶实施例化合物1或化合物2或化合物3或化合物4的单个化合物与乳糖、或淀粉，或四个化合物相互组合后与赋形剂乳糖、或淀粉，按重量比为9:1的比例混合制成粉剂。
20.抑制酪氨酸激酶实施例化合物1或化合物2或化合物3或化合物4的单个化合物与糊精、或乳糖、或淀粉、或硬脂酸镁，或四个化合物相互组合后与糊精、或乳糖、或淀粉、或硬脂酸镁，按重量比为5:1或8:1或10:1的比例混合后制粒压片。
21.抑制酪氨酸激酶实施例化合物1或化合物2或化合物3或化合物4的单个化合物与糊精、或乳糖、或淀粉、或硬脂酸镁，或四个化合物相互组合后与糊精、或乳糖、或淀粉、或硬脂酸镁，按重量比为5:1的比例制成胶囊或颗粒剂或冲剂。
22.抑制酪氨酸激酶实施例化合物1或化合物2或化合物3或化合物4的单个化合物与注射用水、或四个化合物相互组合后与注射用水，按重量比为3:1的比例制成注射液。
23.抑制酪氨酸激酶实施例化合物1或化合物2或化合物3或化合物4的单个化合物与注射用水、或四个化合物相互组合后与注射用水，按重量比为3:1的比例制成粉针剂。
24.上述制剂的具体制备方法同现有技术使用的常规方法。


技术特征：
1.一种抑制酪氨酸激酶的化合物，即通式（）表示的化合物：（）式中：r为氢、卤素或者c1~c3直链或支链烷基。2.根据权利要求1所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为氢。3.根据权利要求1所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为甲基。4.根据权利要求1所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为氟。5.根据权利要求1所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，r为氯。6.一种权利要求1-5所述一种抑制酪氨酸激酶的化合物，用于制备抑制酪氨酸激酶药物。

技术总结
本发明为一种抑制酪氨酸激酶的化合物，具体是一种具有Bcr-ABL融合蛋白化合物，本发明为新一代的酪氨酸激酶的抑制剂，发现它们具有极高的肿瘤细胞抑制活性。能有效解决耐药问题。题。


技术研发人员：贺乾辉 邱飞
受保护的技术使用者：启东泓昱生物医药有限公司
技术研发日：2021.08.09
技术公布日：2023/2/17