一种薤白制剂的检测方法及其应用与流程

1.本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种薤白制剂的检测方法及其应用。


背景技术：

2.薤白(学名：allium macrostemon bunge)百合科葱属植物。根色白，作药用，名薤白。鳞茎近球状，鳞茎外皮带黑色，纸质或膜质，不破裂，但在标本上多因脱落而仅存白色的内皮。叶3-5枚，半圆柱状，或因背部纵棱发达而为三棱状半圆柱形，中空，上面具沟槽，子房近球状，腹缝线基部具有帘的凹陷蜜穴，花柱伸出花被外，花果期5-7月。
3.中国各省区均产，生于海拔1500米以下的山坡、丘陵、山谷或草地上，极少数地区(云南和西藏)在海拔3000米的山坡上也有。俄罗斯、朝鲜和日本也有分布。鳞茎作药用，也可作蔬菜食用，在少数地区已有栽培。
4.薤白味辛、苦，性温，无毒，具有理气、宽胸、通阳、散结之功效，中医长期用于治疗胸闷刺痛、泻痢后重、肺气喘急等疾病。
5.《中国药典》2020版中，薤白药材有两个基原，分别为百合科植物小根蒜allium macrostemon bge.或薤allium chinense g.don的干燥鳞茎。《中国药典》只收录两个基原作为药用，通过对药材的性状描述可知，小根蒜为卵圆形，薤为长卵形，该描述可对两者的药材进行区分，但加工成配方颗粒后，失去了药材原本的性状，无法再对二者进行区分；就配方颗粒而言，相关《技术要求》明确规定，对于多基原的品种要固定基原，因为建立一种有效鉴别基原的方法显得尤为重要。
6.cn113759057a公开了一种薤白水提取物及其制剂的特征图谱及其构建方法，其构建方法包括以下步骤，(1)薤白供试品溶液的制备；(2)取薤白供试品溶液采用高效液相色谱法检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为水-甲醇，梯度洗脱程序包括：0
→
22min，流动相中甲醇的体积百分数为：5％
→
11％，得到特征图谱，实现了包括腺苷和胸苷在内的共有特征峰的分离，洗脱程序简单，得到的特征图谱基线平稳，噪音干扰较小，特征峰峰形好、分离度高，而且可以准确定位腺苷和胸苷的峰位置，充分的反映薤白水提取物及其制剂的整体性和特征性，为薤白水提取物及其制剂的质量检测和控制提供依据。
7.虽然现有技术中已经公开了一些薤白提取物的检测方法及其特征图谱，但是依然存在共有特征峰数量少、特征峰峰形差、分离度不高等问题，且现有技术主要应用于薤白提取物质量标准控制方面，未进行相关薤白提取物不同基原的区别研究，因此，开发一种薤白制剂的检测方法，可以高效、准确、稳定检测薤白提取物，并得到多个共有特征峰、特征峰存在良好的分离度、良好的重现性，可以应用于区别不同基原的薤白提取物，是本领域的研究重点。


技术实现要素：

8.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种薤白制剂的检测方法及其应用，可以高效、准确、稳定检测薤白制剂，并得到多个共有特征峰、特征峰存在良好的分离
度、良好的重现性，可以应用于区别不同基原的薤白配方颗粒。
9.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
10.第一方面，本发明提供一种薤白制剂的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：
11.(1)将待测的薤白制剂制备成薤白供试品溶液；
12.(2)取所述薤白供试品溶液进行高效液相色谱法检测，得到特征图谱；
13.所述高效液相色谱法检测的条件如下：检测波长为250-258nm，例如可以为251nm、252nm、253nm、254nm、255nm、256nm或257nm等，优选为254nm，流动相a为乙腈，流动相b为水，进行梯度洗脱，流速为0.7-0.9ml/min，例如可以为0.75ml/min、0.8ml/min或0.85ml/min等，优选为0.8ml/min。
14.本发明提供的一种薤白制剂的检测方法，采用高效液相色谱法检测薤白制剂，在检测波长为250-258nm(优选为254nm)，流速为0.7-0.9ml/min(优选为0.8ml/min)，流动相a为乙腈，流动相b为水的条件下进行梯度洗脱，可以稳定、准确得到薤白制剂的特征图谱，并且图谱中有多个共有特征峰，各个特征峰存在良好的分离度，特征图谱具备良好的重现性，本发明提供的测试方法精确度较高，可以实现对薤白(小根蒜)配方颗粒及薤白(薤)配方颗粒两个基原的有效鉴别，有效控制产品质量，确保临床疗效，现有技术中虽然也是使用高效液相色谱法对薤白制剂进行检测，但是关于薤白基原的鉴别方法尚未报道，本发明提供的薤白制剂检测方法可以在针对薤白制剂进行特征图谱检测的同时对薤白制剂中主要功效成分进行含量测定，并且所得到的特征图谱可以实现基原鉴别，有效节约检测时间和检测成本。
15.优选地，所述梯度洗脱的过程为：0-9min，例如可以为2min、4min、6min或8min等，流动相a：0，流动相b：100％；9-14min，例如可以为10min、11min、12min或13min等，流动相a：0-3％，例如可以为1％、2％或2.5％等，流动相b：100-97％，例如可以为99％、98％或97.5％等；14-21min，例如可以为15min、16min、18min或20min等，流动相a：3％，流动相b：97％；21-35min，例如可以为22min、24min、26min、28min、30min、32min或34min等，流动相a：3-10％，例如可以为4％、6％或8％等，流动相b：97-90％，例如可以为96％、94％或92％等。
16.优选地，所述检测所用色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
17.优选地，所述检测的柱温为28-32℃，例如可以为29℃、30℃或31℃等，优选为30℃。
18.上述各项数值范围中的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
19.优选地，所述薤白制剂为薤白配方颗粒。
20.优选地，所述薤白制剂选自小根蒜基原或薤基原。
21.优选地，所述薤白供试品溶液的制备方法如下：用溶剂提取薤白制剂，然后固液分离，得到的液体为薤白供试品溶液。
22.优选地，所述溶剂选自甲醇水溶液、水、乙醇水溶液中的至少一种，优选为甲醇水溶液。
23.优选地，所述提取的料液比为1:(15-25)，例如可以为1:16、1:18、1:20、1:22或1:24等，优选为1:20，以薤白制剂为1g计，溶剂为15-25ml。
24.优选地，所述提取的方式为回流或超声，优选为超声。
25.优选地，所述提取的时间为20-40min，例如可以为22min、24min、26min、28min、
30min、32min、34min、36min或38min等，优选为30min。
26.优选地，所述固液分离选自离心或过滤。
27.优选地，所述检测方法还包括制备对照品溶液的步骤，以及采用和供试品溶液相同的检测方法，检测对照品溶液得到特征图谱的步骤。
28.优选地，所述对照品溶液中对照品包括鸟苷、腺苷、胸苷、鸟苷、尿嘧啶或色氨酸中的任意一种。
29.优选地，所述对照品溶液中对照品的质量浓度为0.01-0.1mg/ml，例如可以为0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.06mg/ml或0.08mg/ml等。
30.优选地，所述对照品溶液中的溶剂为甲醇水溶液。
31.优选地，所述甲醇水溶液中甲醇的质量百分含量为5-15％，例如可以为6％、8％、10％、12％或14％等，优选为10％。
32.上述各项数值范围中的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
33.优选地，所述检测方法包括如下步骤：
34.(1)称取待测的薤白配方颗粒，加入10-20倍量的溶剂进行提取，所述溶剂选自甲醇水溶液、水、乙醇水溶液中的至少一种，所述提取为回流提取或超声提取，时间为20-40min，然后离心或过滤进行固液分离，取液体，得到薤白供试品溶液。
35.(2)取所述薤白供试品溶液进行高效液相色谱法检测，得到特征图谱，检测波长为250-258nm，流动相a为乙腈，流动相b为水，进行梯度洗脱，流速为0.7-0.9ml/min。
36.所述梯度洗脱的过程为：0-9min，流动相a：0，流动相b：100％；9-14min，流动相a：0-3％，流动相b：100-97％；14-21min，流动相a：3％，流动相b：97％；21-35min，流动相a：3-10％，流动相b：97-90％。
37.第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的检测方法在测定薤白提取物中鸟苷和/或腺苷含量中的应用。
38.第三方面，本发明提供一种如第一方面所述的检测方法在识别不同基原的薤白提取物中的应用。
39.优选地，所述不同基原的薤白提取物的特征图谱存在差异；
40.优选地，所述差异包括特征峰数量、特征峰峰形、特征峰面积、特征峰保留时间或特征峰半峰宽中的至少一种。
41.优选地，所述小根蒜基原的薤白制剂的特征图谱中包括10个特征峰，所述薤基原的薤白制剂的特征图谱中包括5个特征峰。
42.优选地，所述10个特征峰与参照峰的相对保留时间的误差不超过
±
10％。
43.优选地，所述5个特征峰与参照峰的相对保留时间的误差不超过
±
10％。
44.优选地，所述10个特征峰以所述鸟苷峰为参照峰，按照出峰顺序，各特征峰的相对保留时间分别为：0.28-0.29，例如可以为0.282、0.284、0.286或0.288等；0.39-0.40，例如可以为0.392、0.394、0.396或0.398等；0.45-0.46，例如可以为0.452、0.454、0.456或0.458等；0.57-0.58，例如可以为0.572、0.574、0.576或0.578等；0.92-0.93，例如可以为0.922、0.924、0.926或0.928等；1.00；1.20-1.21，例如可以为1.202、1.204、1.206或1.208等；1.27-1.28，例如可以为1.272、1.274、1.276或1.278等；1.43-1.44，例如可以为1.432、1.434、1.436或1.438等；1.51-1.52，例如可以为1.512、1.514、1.516或1.518等。
45.优选地，按照出峰顺序，各特征峰的相对保留时间分别为：0.29、0.40、0.45、0.57、0.93、1.00、1.21、1.28、1.44、1.51。
46.优选地，所述5个特征峰以所述鸟苷峰为参照峰，按照出峰顺序，各特征峰的相对保留时间分别为：0.30-0.32，例如可以为0.30、0.31或0.32等；0.60-0.62，例如可以为0.60、0.61或0.62等；1.00；1.30-1.30，例如可以为1.30、1.31或1.32等；1.00。
47.优选地，按照出峰顺序，各特征峰的相对保留时间分别为：0.31、0.61、1.00、1.31、1.00。
48.上述各项数值范围中的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
49.相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
50.本发明提供的一种薤白制剂的检测方法，采用高效液相色谱法在特定条件下检测薤白制剂，可以稳定、准确的检测得到薤白制剂的特征图谱，并且图谱中有多个共有特征峰，各个特征峰存在良好的分离度，图谱具备良好的重现性，本发明提供的测试方法精确度较高，可以实现对薤白(小根蒜)配方颗粒及薤白(薤)配方颗粒两个基原的有效鉴别，有效控制产品质量，确保临床疗效，并且本发明提供的薤白制剂的检测方法可以在针对薤白制剂进行特征图谱检测的同时对薤白制剂中主要功效成分进行含量测定，并且所得到的特征图谱可以实现基原鉴别，有效节约检测时间和检测成本。
附图说明
51.图1为实施例1检测得到的特征谱图；
52.图2为实施例1特征图谱中的各特征峰确认图；
53.图3为实施例1制备得到的薤白供试品溶液在254nm处3d全扫描图；
54.图4为实施例35-52检测18批薤白配方颗粒得到的特征谱图；
55.图5为实施例53-58检测得到的特征谱图；
56.图6为实施例59检测得到的特征谱图。
具体实施方式
57.下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
58.本文所用术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，还可包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
[0059]“任选的”或者“任意一种”是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生，而且该描述包括事件发生的情形和事件不发生的情形。
[0060]
本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显只指单数形式。
[0061]
本发明所描述的术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例性地”、“具体示例”或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本文中，对上述术语的示意性表述不是必须针对
相同的实施例或示例。
[0062]
以下示例中，仪器、试剂及试药来源如下：
[0063]
仪器：
[0064]
高效液相色谱仪(岛津lc-2010a，tuv检测器，labsolutions操作系统)；
[0065]
高效液相色谱仪(岛津lc-2010a，waters e2695，uv检测器)；
[0066]
me104e电子天平(梅特勒
·
托利多)；
[0067]
色谱柱(沃特世c18，柱长250mm，柱内径4.6mm，粒径为5μm)。
[0068]
试药：
[0069]
薤白配方颗粒：
[0070]
基原为小根蒜：200618-725800-01、200529-724400-02、200610-713800-03、200703-725800-04、200703-725800-05、200703-043100-06、200703-043100-07、200703-725800-08、200703-043100-09、200703-725800-10、200703-043100-11、200703-727000-12、200703-710000-13、200703-710038-14、200703-712000-15、200703-714100-17、200703-724400-18、202201、202202、202203；
[0071]
基原为薤：202204、202205、202206、202207；
[0072]
腺苷对照品(批号：110879-201703，纯度99.7％，中国食品药品检定研究院)；
[0073]
胸苷对照品(批号：110879-201703，中国食品药品检定研究院)；
[0074]
尿嘧啶对照品(批号：100469-201302，纯度99.6％，中国食品药品检定研究院)；
[0075]
鸟苷对照品(批号：111977-201501，纯度93.6％，中国食品药品检定研究院)；
[0076]
色氨酸对照品(批号：140686-201904，纯度99.9％，中国食品药品检定研究院)；
[0077]
尿苷对照品(批号：110887-2018-03，纯度99.5％，中国食品药品检定研究院)。
[0078]
试剂：
[0079]
乙腈：色谱纯(merk)；
[0080]
水为蒸馏水(屈臣氏)；
[0081]
其它试剂均为分析纯。
[0082]
实施例1
[0083]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0084]
(1)称取待测薤白(小根蒜)配方颗粒0.5g于具塞锥形瓶中，加入10ml的10％甲醇水溶液后超声(功率250w，频率40khz)提取30min，放至室温，称定重量，用10％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，取液体，得到薤白供试品溶液。
[0085]
(2)精密吸取薤白供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，采用(2)精密吸取薤白供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，采用c18色谱柱，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，检测波长为254nm，柱温为30℃，流动相a为乙腈，流动相b为水，进行梯度洗脱，流速为0.8ml/min，理论板数按鸟苷峰计算应不低于50000。梯度洗脱过程如表1所示：
[0086]
表1
[0087]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0-901009-140
→
3100
→
97
14-2139721-353
→
1097
→
90
[0088]
实施例1检测得到的特征图谱如图1所示；重复6次进样的保留时间检测结果如表2所示；重复6次进样的峰面积检测结果如表3所示：
[0089]
表2
[0090][0091]
表3
[0092][0093][0094]
根据表2、表3测试结果可知6次重复实验结果各特征峰的相对保留时间rsd在
0.03-0.17％范围内，相对峰面积的rsd在0.10-3.42％范围内，表明在本发明提供检测方法下具有良好的精密度。
[0095]
测试例1
[0096]
取腺苷、鸟苷、尿嘧啶、胸苷、尿苷、色氨酸对照品精密称定，加70％甲醇制成20μg/ml溶液，得到腺苷、鸟苷、尿嘧啶、胸苷、尿苷、色氨酸对照品溶液，分别精密吸取实施例1制备的薤白供试品溶液、腺苷对照品溶液、胸苷对照品溶液、尿嘧啶对照品溶液、尿苷对照品溶液、色氨酸对照品溶液、鸟苷对照品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，按照实施例1步骤(2)检测方法进行测定，对各特征峰进行确认，各特征峰确认图如图2所示，如图可知，通过与对照品特征图谱进行比对，确定峰1为尿嘧啶，峰4为尿苷，峰6为鸟苷，峰7为胸苷，峰8为色氨酸，峰9为腺苷。
[0097]
实施例2-3
[0098]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0099]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中的流速分别为0.7ml/min、0.9ml/min，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0100]
实施例1-3所述的方法检测得到的保留时间结果如表4所示；实施例1-3所述的方法检测得到的峰面积结果如表5所示：
[0101]
表4
[0102][0103]
表5
[0104][0105]
根据表4、表5检测结果可知，不同流速下相对保留时间和相对峰面积的rsd值均有超过5％范围的情况，表明该方法对流速要求较为严格，在实施例1中，即流速为0.8ml/min时，相对保留时间和相对峰面积相对更为稳定，更接近平均值，因此，流速优选为0.8ml/min。
[0106]
实施例4-5
[0107]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0108]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中的柱温分别为28℃、32℃，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0109]
实施例1、4、5所述的方法检测得到的保留时间结果如表6所示；实施例1、4、5所述的方法检测得到的峰面积结果如表7所示：
[0110]
表6
[0111][0112]
表7
[0113][0114][0115]
根据表6、表7检测结果可知，不同柱温条件下，相对保留时间及相对峰面积rsd值均在5％以内，表明该检测方法对柱温有较好的耐用性。
[0116]
实施例6-7
[0117]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0118]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(2)中的检测波长为252nm、256nm，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0119]
实施例1、6、7所述的方法检测得到的保留时间结果如表8所示；实施例1、6、7所述的方法检测得到的峰面积结果如表9所示：
[0120]
表8
[0121][0122]
表9
[0123][0124][0125]
根据表8、表9检测结果可知，不同检测波长条件下，相对保留时间及相对峰面积rsd值均在5％以内，表明该检测方法对检测波长有较好的耐用性，对供试品溶液进行3d全扫描，测试结果图谱如图3所示，结果显示在254nm附近时特征图谱信息较为丰富，因此，检测波长优选为254nm。
[0126]
实施例8
[0127]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0128]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)不同，本实施例的步骤(1)为：称取待测薤白(小根蒜)配方颗粒0.5g于具塞锥形瓶中，加入10ml的10％甲醇水溶液后回流提取30min，放至室温，称定重量，用10％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，取液体，得到薤白供试品溶液。其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0129]
实施例1、8所述的方法检测得到的保留时间结果如表10所示；实施例1、8所述的方法检测得到的峰面积结果如表11所示：
[0130]
表10
[0131][0132][0133]
表11
[0134][0135]
根据表10、表11检测结果可知，不同提取条件下，该特征图谱中的相对保留时间及相对峰面积差异较小，因此，超声提取和回流提取都可以采用，其中，超声处理操作更加简便。
[0136]
实施例9-11
[0137]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0138]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中的提取剂分别为30％甲醇水溶液、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0139]
实施例1、9-11所述的方法检测得到的保留时间结果如表12所示；实施例1、9-11所述的方法检测得到的峰面积结果如表13所示：
[0140]
表12
[0141][0142][0143]
表13
[0144][0145]
根据表12、表13检测结果可知，不同提取剂对于检测结果特征图谱中的峰形影响较大，采用30％乙醇水溶液提取时，图谱整体峰形差，分离度低，采用30％甲醇水溶液和10％乙醇水溶液提取时，峰2出现包峰现象，无法积分，因此提取剂优选为10％甲醇水溶液。
[0146]
实施例12-13
[0147]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0148]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中称取待测薤白(小根蒜)配方颗粒的质量分别为0.2g、0.8g，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0149]
实施例1、12、13所述的方法检测得到的保留时间结果如表14所示；实施例1、12、13所述的方法检测得到的峰面积结果如表15所示：
[0150]
表14
[0151][0152]
表15
[0153][0154]
根据表14、表15检测结果可知，不同浓度的待测供试品溶液所检测得到的图谱中，相对保留时间及相对峰面积差异较小，结合图谱中个特征峰的响应值，实施例中，即浓度为0.5g/ml时，各特征峰响应值适中，因此，本发明供试品溶液浓度优选为0.5g/ml。
[0155]
实施例14-15
[0156]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0157]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中提取时间分别为20min、40min，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0158]
实施例1、14、15所述的方法检测得到的保留时间结果如表16所示；实施例1、14、15所述的方法检测得到的峰面积结果如表17所示：
[0159]
表16
[0160][0161]
表17
[0162][0163]
根据表16、表17检测结果可知，不同提取时间对于检测结果图谱中的相对保留时间和相对峰面积的影响较小，表明20min时已经提取完全，为保证不同批次、不用基原的薤白配方颗粒可以提取完全，优选为30min。
[0164]
实施例16-22
[0165]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0166]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)完成后，供试品溶液分别放置2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h后进行步骤(2)，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0167]
实施例1、16-22所述的方法检测得到的保留时间结果如表18所示；实施例1、16-22所述的方法检测得到的峰面积结果如表19所示：
[0168]
表18
[0169][0170][0171]
表19
[0172][0173]
根据表18、表19检测结果可知，在24h内的各特征峰的相对保留时间rsd在0.07-0.77％范围内，相对峰面积在0.26-4.51％范围内，表明本发明制备的供试品溶液在24h内具有良好的稳定性。
[0174]
实施例23-28
[0175]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0176]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中分别称取等质量的同批次待测薤白(小根蒜)配方颗粒6份，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0177]
实施例23-28所述的方法检测得到的保留时间结果如表20所示；实施例23-28所述的方法检测得到的峰面积结果如表21所示：
[0178]
表20
[0179][0180][0181]
表21
[0182][0183]
根据表20、表21检测结果可知，检测图谱中各特征峰的相对保留时间rsd在1.77-2.02％范围内，相对峰面积rsd在0.47-2.73％范围内，表明本发明检测方法得到的特征图谱重复性较好。
[0184]
实施例29-34
[0185]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0186]
其与实施例23-28的区别仅在于，步骤(2)中高效液相色谱仪采用waters e2695，uv检测器，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0187]
实施例29-34所述的方法检测得到的保留时间结果如表22所示：
[0188]
表22
[0189][0190]
根据表22测试结果可知，不同检测仪器的图谱中各特征峰的相对保留时间rsd在1.35-2.51％范围内，检测结果符合中间精密度分析要求。
[0191]
实施例35-52
[0192]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0193]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中薤白(小根蒜)配方颗粒分别来自18批薤白配方颗粒，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0194]
实施例35-52检测得到的特征图谱如图4所示；实施例35-52所述的方法检测得到的保留时间结果如表23所示；实施例35-52所述的方法检测得到的峰面积结果如表24所示；实施例35-52所述的方法检测得到的特征图谱与对照特征图谱的相似度情况如表25所示：
[0195]
表23
[0196]
[0197][0198]
表24
[0199]
[0200][0201]
根据表23、表24检测结果可知，18批薤白(小根蒜)配方颗粒特征图谱中，各特征峰相对保留时间差异较小，rsd在
±
5％范围内，符合质量控制要求，可以选择相对保留时间的平均值作为测定值，分别为0.29(峰1)、0.40(峰2)、0.45(峰3)、0.57(峰4)、0.93(峰5)、1.00(峰6)、1.21(峰7)、1.28(8)、1.44(峰9)、1.51(峰10)，允许误差
±
10％；各特征峰的相对峰面积的差异较大，rsd在13.31-176.58％范围内，不符合质量控制标准，因此，相对峰面积不做规定。
[0202]
表25
[0203] 批号与对照特征图谱相似度实施例35200618-725800-010.985实施例36200529-724400-020.994实施例37200610-713800-030.994实施例38200703-725800-040.995
实施例39200703-725800-050.996实施例40200703-043100-060.996实施例41200703-043100-070.996实施例42200703-725800-080.995实施例43200703-043100-090.972实施例44200703-725800-100.996实施例45200703-043100-110.972实施例46200703-727000-120.996实施例47200703-710000-130.995实施例48200703-710038-140.993实施例49200703-712000-150.972实施例50200703-710000-160.996实施例51200703-714100-170.995实施例52200703-724400-180.994—r1
[0204]
根据表25检测结果可知，检测18批薤白(小根蒜)配方颗粒得到的特征图谱与对照特征图谱的相似度为0.972-0.996，均高于0.95，表明本发明提供的检测方法在检测不同批次的薤白(小根蒜)配方颗粒时，得到的特征图谱差异较小，具备良好的适用性。
[0205]
实施例53-58
[0206]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0207]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中的薤白(小根蒜)配方颗粒分别替换为：薤白(小根蒜)配方颗粒202201、薤白(小根蒜)配方颗粒202202、薤白(小根蒜)配方颗粒202203、薤白(薤)配方颗粒202204、薤白(薤)配方颗粒202205、薤白(薤)配方颗粒202206，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0208]
实施例53-58检测得到的特征图谱如图5所示，如图可知，相对于薤白(小根蒜)配方颗粒来说，薤白(薤)配方颗粒图谱中，峰1、峰2、峰3、峰7、峰10，存在明显缺失，峰5的峰形差异较大。通过规定薤白(小根蒜)配方颗粒特征图谱中10个特征峰，可快速对不同基原的薤白进行区分。
[0209]
实施例59
[0210]
本实施例提供一种薤白制剂的检测方法，其检测方法如下：
[0211]
其与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中的薤白(小根蒜)配方颗粒替换为薤白(薤)配方颗粒202207，其他物料、步骤和参数均与实施例1相同。
[0212]
实施例59检测得到的特征图谱如图6所示。
[0213]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的工艺方法，但本发明并不局限于上述工艺步骤，即不意味着本发明必须依赖上述工艺步骤才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。