基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法与流程

技术特征：
1.一种基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛查方法，其特征在于，对待检植入前胚胎的培养液中的游离dna进行甲基化检测，根据所得检测结果从所述待检植入前胚胎中筛选出染色体正常和dna甲基化水平正常的胚胎作为待植入胚胎。2.根据权利要求1所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，甲基化检测的步骤包括：提取所述培养液中游离dna，构建甲基化文库，测序。3.根据权利要求2所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，构建甲基化文库的步骤包括：所述游离dna经蛋白酶消化、末端修复及加a、连接接头及连接产物纯化、双加氧酶氧化及氧化产物纯化、dna变性、脱氨及脱氨产物纯化、pcr扩增及扩增产物纯化。4.根据权利要求1所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，所述培养液的制备步骤包括：拆除所述植入前胚胎透明带上的颗粒细胞，清洗，培养，收集培养液。5.根据权利要求4所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，收集培养液之前采用如下方法将培养液中的植入前胚胎移出：先在胚胎转移管前端吸入1个-2个气泡，然而再吸取植入前胚胎将其移出培养液。6.根据权利要求1至5任一项所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，所述dna甲基化水平正常包括：dna甲基化水平在0.20-0.30区间内；当从所述待检植入前胚胎中没有筛选到dna甲基化水平在0.20-0.30区间内的胚胎，则优先筛选dna甲基化水平接近0.20-0.30区间的胚胎为待植入胚胎。7.根据权利要求1至5任一项所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，所述染色体正常包括：染色体为标准的二倍体且染色体结构正常；当从所述待检植入前胚胎中没有筛选到染色体正常的胚胎，则优先筛选染色体属于嵌合体但嵌合度少于50％的胚胎作为待植入胚胎。8.根据权利要求1至5任一项所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，所述植入前胚胎为受精后体外发育5天-7天的胚胎。9.根据权利要求8所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，所述植入前胚胎为处于囊胚期的胚胎。10.根据权利要求1至5和9任一项所述的基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛选方法，其特征在于，所述筛选方法还包括结合所述检测结果中印记基因控制区域或/和启动子区域的甲基化水平来筛查胚胎。

技术总结
本发明涉及一种基于胚胎培养液的植入前胚胎的无创筛查方法，对待检植入前胚胎的培养液中的游离DNA进行甲基化检测，根据所得检测结果从所述待检植入前胚胎中筛选出染色体正常和DNA甲基化水平正常的胚胎作为待植入胚胎。与传统技术相比，本申请的有益效果包括：本申请通过检测培养液中的游离DNA或者游离细胞DNA的甲基化水平并根据检测结果进行胚胎筛选，避免了对胚胎的活检，极大的促进了胚胎植入前检测的临床应用，为植入前胚胎的无创表观筛查、准确评估胚胎体外培养阶段发育质量、表观遗传疾病的风险评估提供新的解决方案。观遗传疾病的风险评估提供新的解决方案。观遗传疾病的风险评估提供新的解决方案。


技术研发人员：姚雪龙 刘江
受保护的技术使用者：广州女娲生命科技有限公司
技术研发日：2022.11.08
技术公布日：2023/2/3