吗啡的新应用的制作方法

1.本发明涉及医药领域，特别是涉及吗啡的新应用。


背景技术：

2.抑郁症是最常见的精神障碍之一，其特征是持续的消极情绪和改变的认知功能。情绪低落、存在自杀念头及兴趣丧失等是常见临床症状表现，严重者可伴随妄想及幻觉等精神病症状，对身心健康造成严重影响。世界卫生组织(who) 预测，到2030年抑郁症将会成为全球主要的疾病负担原因。全球疾病负担评估机构(gbd)已发表的报告也指出，抑郁症已经成为排除残疾以外影响工作的第二大负担源，它对社会造成的影响已经越来越明显。
3.目前对抑郁症的治疗方法包括药物治疗、改良型电休克治疗(mect)、心理治疗等。但是，现有的抗抑郁药物如氟西汀、米氨平、安非他酮、文拉法辛等普遍调节的是大脑单胺能系统，药物的生效时间缓慢，一般需要2到3周才能改善患者的临床症状，在抑郁症患者接受治疗而药物还未生效的这段时间内，不可控的自杀和自残风险极高，对社会的公共安全影响极大。因此有必要提供能快速起效的新的抗抑郁药。
4.吗啡(morphine)为阿片受体激动剂，吗啡及其衍生物是临床用于解除剧烈疼痛的主要药物，是全世界使用量最大的强效镇痛剂，根据世界卫生组织和国家药品监督管理局提出的癌痛治疗三阶梯方案的要求，吗啡常用于治疗重度癌痛。另外，吗啡还适用于其他镇痛药无效的急性锐痛，如严重创伤、战伤、烧伤、晚期癌症等疼痛。


技术实现要素：

5.基于此，本发明的目的是提供一种吗啡在制备预防和/或治疗抑郁症的药物中的新应用。
6.具体技术方案如下：
7.吗啡或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子在制备预防和/或治疗抑郁症的药物中的应用。
8.在其中一些实施例中，所述抑郁症为重度抑郁症。
9.在其中一些实施例中，所述重度抑郁症为难治性抑郁症。
10.在其中一些实施例中，吗啡能改善抑郁症患者因抑郁症引起的快感缺乏。
11.在其中一些实施例中，吗啡能改善抑郁症患者因抑郁症引起的体重下降。
12.在其中一些实施例中，吗啡能改善抑郁症患者因抑郁症引起的和探究能力下降。
13.在其中一些实施例中，吗啡能改善由抑郁症引起的自主行为能力降低。
14.在其中一些实施例中，吗啡能提高抑郁症患者体内5-ht的含量。
15.本发明的另一目的是提供一种预防和/或治疗抑郁症的药物组合物，活性成分包括吗啡以及其他抗抑郁药。
16.在其中一些实施例中，所述药物组合物还包括药学上可接受的辅料。
17.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
18.本发明首次提供一种吗啡在制备防治抑郁症的药物中的新应用。本发明经动物试验结果证明，吗啡可以明显升高大鼠抑郁症模型竖立次数、糖水消耗量、体重及水平穿越格数，提高大鼠血液5-ht水平，能够快速达到抗抑郁的效果，弥补了常规治疗方法数周才能起效的缺点。
19.进一步地，本发明还通过动物试验结果证明，吗啡可以明显升高重度抑郁症模型大鼠水平穿越格数及竖立次数、糖水摄入量、体重，提高重度抑郁症模型大鼠血液5-ht水平，能够快速达到抗重度抑郁的效果。
附图说明
20.图1为实施例1中各组大鼠的血液中5-ht浓度-时间图；
21.图2为实施例2中各组大鼠的血液中5-ht浓度-时间图。
具体实施方式
22.本发明下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。
23.除非另有定义，本发明所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本发明。
24.本发明的术语“包括”和“具有”以及它们任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。例如包含了一系列步骤的过程、方法、装置、产品或设备没有限定于已列出的步骤或模块，而是可选地还包括没有列出的步骤，或可选地还包括对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤。
25.在本发明中提及的“多个”是指两个或两个以上。“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，a和/或b，可以表示：单独存在a，同时存在a和b，单独存在b这三种情况。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
26.以下结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。
27.实施例1：吗啡对抑郁症小鼠模型的效果试验
28.实验如下：
29.1.实验动物：30只健康雌雄各半的sd清洁大鼠，2-3月龄，体重200-250g。将实验动物随机分为空白对照组、模型组和实验组共3组，每组10只，清洁级实验室饲养。
30.2.实验方法：
31.大鼠抑郁症模型构建：对模型组和实验组大鼠采用慢性不可预见性温和刺激法(cuns)构建大鼠抑郁症模型，大鼠适应性饲养1周后共接受为期21d 的各种刺激，包括：断水、断食、夜间光照12h、100db铃声吵闹、制动、束缚、悬吊、夹尾、电击足底、冰水(4℃，5min)游泳、合笼、热应激、昼夜颠倒，2 种/天，使用2次，随机安排，同种刺激不连续出现，每种刺激平均3次。
32.通过比较造模第21天与基线旷场试验、糖水偏好实验和体重监测结果验证模型是否建造成功，若大鼠出现持续的快感消失、精神运动性抑制、情绪减退等常见的人类抑郁症患者行为特征，说明抑郁症模型造模成功。本研究中以大鼠自发活动距离低于基线2s、糖水
偏好度降低超过2s且体重偏低超过2s三个标准同时满足则表示建模成功。
33.3.实验过程：实验组大鼠造模成功后第2天腹腔注射自制2mg/0.5ml的盐酸吗啡溶液进行单次给药治疗。将人与大鼠按照体表面积换算后按照5mg/kg剂量给药，空白组和模型组注射等量的生理盐水。
34.于给药前进行3次采血，每次采集1ml，用作5-ht浓度的检查。给药后每 1h进行一次采血(12h后的采血频率调整至2h/次；24h后调整至4h/次，36h后的调整至8h/次)，每次采集1ml，用作5-ht浓度的检查。
35.4.统计学分析：采用spss 21软件进行单因素方差统计分析，试验数据均以表示，检验水准为α＝0.05。
36.5检查项目：
37.5.1行为学观察：
38.①
旷场试验：于造模前1天和给药2d后各进行1次记录。记录在室内安静状态下进行，自制大小为100cm*100cm*40cm的敞口木箱，内壁全黑，底部划分为等面积25格。将大鼠放置于中心方格内，观察记录5min内大鼠的活动。水平穿越格数为大鼠穿越底面块数；竖立次数为两前肢离开地面直立次数。旷场实验主要反映动物对新异环境的行为及情绪，其中垂直竖立次数主要反映大鼠对陌生环境不稳定性的探究能力和好奇心，水平穿越格数主要反应大鼠对新异环境的兴奋性和自主性。
39.②
糖水偏好实验：于造模前1天和给药2d后各进行1次记录。在实验前48h，先进行5％蔗糖水的适应性训练，后断水12h，不断食，测下午(15：00-16：00)1h 内的糖水消耗量。糖水实验主要反映动物快感的缺失程度，而快感缺乏是抑郁症的核心症状，以糖水摄入量来体现。
40.③
体重：于造模前1天和给药2d后各进行1次体重测量。体重反映的是动物整体情况，研究显示抑郁症患者往往具有临床体重减轻的现象。
41.5.2elisa检测5-ht：按照试剂盒说明操作，采用大鼠5-羟基色氨酸elisa 试剂盒(上海江莱)检测5-ht水平。
42.6.实验结果
43.行为学观察：
44.实验前，空白组、模型组和实验组大鼠竖立次数、糖水消耗量、体重及水平穿越格数差异无统计学意义(p＞0.05)。实验后，模型组大鼠竖立次数、糖水消耗量、体重及水平穿越格数较空白组均明显降低，差异有统计学意义(p＜ 0.05)，通过吗啡进行干预治疗后，大鼠竖立次数、糖水消耗量、体重及水平穿越格数较模型组均明显升高，差异有统计学意义(p＜0.05)。大鼠竖立次数升高说明吗啡给药后可以提高抑郁症模型大鼠的探究能力和好奇心；大鼠水平穿越格数升高说明吗啡给药后可以提高抑郁症模型大鼠的自主行动能力和兴奋性；糖水消耗量增加说明吗啡给药后可以改善抑郁症模型大鼠的快感缺失。结果见下表1。
45.表1大鼠行为学比较1
[0046][0047]
综上所述，模型组大鼠水平穿越格数及竖立次数较空白组明显降低，经吗啡干预后，大鼠水平穿越格数及竖立次数呈明显上升。另外，模型组大鼠糖水摄入量较空白组明显降低，实验组大鼠糖水摄入量较模型组明显升高。再者，模型组大鼠体重较空白组明显降低，经吗啡干预后大鼠体重较模型组明显上升。提示经吗啡干预，大鼠对事物的兴趣、摄食量增加，从而影响大鼠体重的增长，干预治疗有效。
[0048]
5-ht水平：结果见图1，在给药前三次采血平均结果来看，模型组与实验组大鼠血液中的5-ht水平低于正常范围，说明大鼠抑郁模型造模成功，而空白组大鼠5-ht水平正常。在给药后2h内，5-ht水平急速升高，并在给药5h内达到正常小鼠的平均水平，并持续至24h后才缓慢降低，但依然处于正常浓度范围内。
[0049]
本实验研究发现，吗啡能够使5-ht神经元兴奋，使患者体内的5-ht水平得以在短时间内提高至正常水平，并持续保持在该浓度水平，从而改善抑郁症患者的症状。吗啡数小时内就能改善抑郁症患者的临床症状，并且药效可持续 2-3天，能够快速达到抗抑郁的效果，弥补了常规治疗方法数周才能起效的缺点，并且会对抑郁症患者症状的改善和稳定非常有利。
[0050]
实施例2：吗啡对重度抑郁症小鼠模型的效果试验
[0051]
实验如下：
[0052]
1.实验动物：30只健康雌雄各半的sd清洁大鼠，2-3月龄，体重250-300g。 (因大鼠重度抑郁症模型的构建时间较长，因此大鼠的挑选标准会有所不同。) 将实验动物随机分为空白对照组、模型组和实验组共3组，每组10只，清洁级实验室饲养。
[0053]
2.实验方法：
[0054]
大鼠重度抑郁症模型构建：对模型组和实验组大鼠采用慢性不可预见性温和刺激法(cuns)构建大鼠重度抑郁症模型，大鼠适应性饲养2周后共接受为期10周的各种刺激，包括：断水、断食、夜间光照12h、100db铃声吵闹、制动、束缚、悬吊、夹尾、电击足底、冰水(4℃，5min)游泳、合笼、热应激、昼夜颠倒，3种/天，使用2次，随机安排，同种刺激不连续出现，每种刺激平均3次。
[0055]
通过比较造模第10周最后一天与基线旷场试验、糖水偏好实验和体重监测结果验证模型是否建造成功，若大鼠出现持续的快感消失、精神运动性抑制、情绪减退等常见的人类抑郁症患者行为特征，说明重度抑郁症模型造模成功。本研究中以大鼠自发活动距离低于基线5s、糖水偏好度降低超过5s且体重偏低超过5s三个标准同时满足则表示建模成功。
[0056]
3.实验过程：实验组大鼠造模成功后第2天腹腔注射自制2mg/0.5ml的盐酸吗啡溶液进行单次给药治疗。将人与大鼠按照体表面积换算后按照5mg/kg剂量给药，空白组和模型组注射等量的生理盐水。
[0057]
于给药前进行3次采血，每次采集1ml，用作5-ht浓度的检查。给药后每 1h进行一次采血(12h后的采血频率调整至2h/次；24h后调整至4h/次，36h后的调整至8h/次)，每次采集1ml，用作5-ht浓度的检查。
[0058]
4.统计学分析：采用spss 21软件进行单因素方差统计分析，试验数据均以表示，检验水准为α＝0.05。
[0059]
5检查项目：
[0060]
5.1行为学观察：
[0061]
①
旷场试验：于造模前1天和给药2d后各进行1次记录。记录在室内安静状态下进行，自制大小为100cm*100cm*50cm的敞口木箱，内壁全黑，底部划分为等面积25格。将大鼠放置于中心方格内，观察记录8min内大鼠的活动。水平穿越格数为大鼠穿越底面块数；竖立次数为两前肢离开地面直立次数。旷场实验主要反映动物对新异环境的行为及情绪，其中垂直竖立次数主要反映大鼠对陌生环境不稳定性的探究能力和好奇心，水平穿越格数主要反应大鼠对新异环境的兴奋性和自主性。
[0062]
②
糖水偏好实验：于造模前1天和给药2d后各进行1次记录。在实验前48h，先进行5％蔗糖水的适应性训练，后断水12h，不断食，测下午(15：00-16：00)1h 内的糖水消耗量。糖水实验主要反映动物快感的缺失程度，而快感缺乏是重度抑郁症的核心症状，以糖水摄入量来体现。
[0063]
③
体重：于造模前1天和给药2d后各进行1次体重测量。体重反映的是动物整体情况，研究显示重度抑郁症患者往往具有临床体重减轻的现象。
[0064]
5.2elisa检测5-ht：按照试剂盒说明操作，采用大鼠5-羟基色氨酸elisa 试剂盒(上海江莱)检测5-ht水平。
[0065]
6.实验结果
[0066]
行为学观察：
[0067]
实验前，空白组、模型组和实验组大鼠竖立次数、糖水消耗量及水平穿越格数差异无统计学意义(p＞0.05)。实验后，模型组大鼠竖立次数、糖水消耗量、体重及水平穿越格数较空白组均明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)，通过吗啡进行干预治疗后，实验组大鼠的竖立次数、糖水消耗量、体重及水平穿越格数较模型组均明显升高，差异有统计学意义(p＜0.05)。大鼠竖立次数升高说明吗啡给药后可以提高重度抑郁症模型大鼠的探究能力和好奇心；大鼠水平穿越格数升高说明吗啡给药后可以提高重度抑郁症模型大鼠的自主行动能力和兴奋性；糖水消耗量增加说明吗啡给药后可以改善重度抑郁症模型大鼠的快感缺失。结果见下表2。
[0068]
表2大鼠行为学比较2
[0069][0070]
综上所述，重度抑郁症模型组大鼠水平穿越格数及竖立次数较空白组明显降低，经吗啡干预治疗后，大鼠水平穿越格数明显增多，竖立次数明显上升。另外，重度抑郁症模型组大鼠糖水摄入量较空白组明显降低，实验组大鼠糖水摄入量较重度抑郁症模型组明显升高。再者，重度抑郁症模型组大鼠体重较空白组明显降低，经吗啡干预后大鼠体重较重度抑郁症模型组明显上升。提示经吗啡干预后，大鼠对事物的兴趣、摄食量增加，从而影响大鼠体重的增长，干预治疗有效。
[0071]
5-ht水平：结果见图2，从给药前三次采血平均结果来看，模型组与实验组大鼠血液中的5-ht水平低于正常范围，说明大鼠重度抑郁模型造模成功，而空白组大鼠5-ht水平正常。在给药后2h内，5-ht水平急速升高，并在给药5h 内快速达到正常小鼠的平均水平，并持续作用，20h后逐渐降低，但依然处于正常浓度范围内。结果表明，经吗啡单次给药后，可迅速缓解重度抑郁症患者情绪低迷，企图自杀的想法，并且药效持续时间长，即使24h后5-ht水平明显降低，但依旧使其高于抑郁大鼠的平均水平。
[0072]
实施例3：成瘾性试验
[0073]
1.实验动物：
[0074]
20只健康雌雄各半的sd清洁大鼠，2-3月龄，体重200-250g。将实验动物随机分为空白对照组和吗啡组，共2组，每组10只，清洁级实验室饲养。
[0075]
2.实验方法：
[0076]
每天上午08：00和晚上20：00腹腔注射自制2mg/0.5ml的盐酸吗啡溶液，将人与大鼠按照体表面积换算后按照5mg/kg剂量给药，空白对照组注射等量的生理盐水，连续给药4周。给药结束后，不再给药，清洁级实验室饲养1周，观察并记录大鼠1周内直立、清理皮毛、伸展、湿狗样抖、舔阴、咬牙阵数、上睑下垂等行为次数。一般认为大鼠的直立、清理皮毛、伸展、湿狗样抖、舔阴、咬牙阵数、上睑下垂等行为是阿片类物质持续摄入过程中突然撤除所产生的中枢性戒断反应。
[0077]
3.统计学分析：采用spss 21软件进行单因素方差统计分析，试验数据均以表示，检验水准为α＝0.05。
[0078]
4.实验结果：观察以上各组大鼠停止给药后1周内是否出现戒断反应及体重改变，结果如下表3所示：
[0079]
表3大鼠成瘾性评价试验(n＝10)
[0080][0081][0082]
由表3的结果可知，当连续给大鼠腹腔注射4周后，通过戒断反应计数及统计情况，对空白对照组与吗啡组进行比较，均未出现明显戒断反应，其差异不具有显著性。(p＞0.005，无显著性差异)这说明以该发明剂量的吗啡进行给药，不会产生戒断症状，成瘾性低，安全性好。
[0083]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0084]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。