造血祖细胞激酶的双功能降解剂及其治疗用途的制作方法

造血祖细胞激酶的双功能降解剂及其治疗用途
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求于2020年5月6日提交的美国临时申请第63/021,045 号的优先权权益，该申请通过引用以其整体并入本文。


背景技术：
技术领域
3.本发明提供了用于蛋白水解降解造血祖细胞激酶(hematopoieticprogenitor kinase)(hpk1)的新的双功能化合物和用于治疗由hpk1调节的疾病的方法。
4.相关技术的描述
5.免疫肿瘤学利用针对免疫检查点受体ctla4、pd-1和pd-l1的抑制剂抗体。这些检查点途径的靶向破坏使免疫细胞从关键调节途径中释放出来，从而增强针对癌细胞的免疫应答。目前利用这些抗体的疗法的突出之处在于对许多不同癌症的显著且持久的反应，还在于低的总反应率(《25％)。这些反应率的改善可得益于检查点阻断与其它免疫激活剂或基于细胞的疗法的组合。
6.造血祖细胞激酶1是来自激酶的生发中心家族的ste20 ser/thr 激酶，其调节包括t细胞、b细胞和树突状细胞在内的多种免疫群体的功能(hu et al.,gens dev,1996；alzabin et al.,j immunol 2009)。在t细胞中，hpk1充当t细胞受体(tcr)信号传导的负调节子(liouet al.,immunity 2000；sauer et al.,jbc 2001)，通过磷酸化丝氨酸376 上的slp76，诱导slp76与14-3-3蛋白的缔合，并导致信号传导复合物的解离(di bartolo et al.,jem 2007)。进一步支持了hpk1作为 tcr信号传导的负调节子的作用，小鼠hpk1缺陷型t细胞或hpk1 激酶不活跃突变型t细胞与它们的野生型对应物相比，在tcr活化时具有增强的erk 1/2活化和效应细胞因子分泌(shui et al.,natimmunol 2007；hernandez et al.,cell reports 2018)。
7.因此，hpk1可被靶向用于降解，从而在增强抗肿瘤免疫和增加对检查点受体阻滞剂的响应方面提供治疗机会。
8.简要概述
9.本文提供由通式(i)表示的双功能化合物：
[0010][0011]
或其药学上可接受的盐，
[0012]
其中：
[0013]
m为0、1、2、3或4；
[0014]
n为0、1、2、3、4、5或6；
[0015]
a为c
3-7
单环环烷基环或具有1个或2个独立地选自n、o和s 的杂原子的4-6元单环杂环基环；
[0016]
l为具有长度为2-24个连续共价键合的选自c、o、n和s的原子的接头部分；
[0017]
lhm为连接酶束(ligase harness)部分；
[0018]r11
为
[0019]
vi)选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基；或者
[0020]
vii)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、
‑ꢀ
oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0021]
viii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0022]
ix)-s(o)2c
3-7
单环环烷基，
[0023]
x)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或者
[0024]
xi)-c(o)r
21
；
[0025]
每个r
12
独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基；
[0026]r21
为
[0027]
xii)h，
[0028]
xiii)c
3-7
单环的或桥接双环的环烷基，其被1-3个独立地选自
‑ꢀ
cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，其中所述c
1-3
烷基被1-3个独立地选自
–
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0029]
xiv)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、
‑ꢀ
oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0030]
xv)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0031]
xvi)-nh2，
[0032]
xvii)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0033]
xviii)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0034]
xix)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代的，或者
[0035]
xx)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0036]
g)-cn，
[0037]
h)-oh，
[0038]
i)卤素，
[0039]
j)c
1-3
烷氧基，
[0040]
k)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、 c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0041]
l)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，以及
[0042]
m)被一个-oh任选取代的-oc(o)c
1-6
烷基；
[0043]
r3和r
13
各自为h，或者
[0044]
r3和r
13
一起形成＝o；
[0045]
x为-nr
15r16
，其中r
15
和r
16
独立地为
[0046]
xxi)h，
[0047]
xxii)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0048]
xxiii)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-7元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0049]
xxiv)-c(o)c
1-6
烷基，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或者
[0050]
xxv)c
1-6
烷基，其被1-6个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0051]
n)-cn，
[0052]
o)-oh，
[0053]
p)卤素，
[0054]
q)c
1-3
烷氧基，
[0055]
r)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，以及
[0056]
s)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂环基，其中所述5-6元
单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代；或者
[0057]
x为具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-10元单环的、稠合双环的、桥接双环的或螺环的杂环基，其中所述4-10元单环的、稠合双环的、桥接双环的或螺环的杂环基被1-5个r
18
任选地取代；
[0058]
每个r
18
独立地为
[0059]
xxvi)-cn，
[0060]
xxvii)卤素，
[0061]
xxviii)-oh，
[0062]
xxix)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0063]
xxx)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0064]
xxxi)-cooh，或
[0065]
xxxii)-c(o)n(r
22
)2，其中每个r
22
独立地为h或c
1-6
烷基；
[0066]
x1为n或cr
17
；
[0067]
r4、r5、r6、r
10
和r
17
各自独立地为h、卤素、c
1-3
烷基或c
1-3
烷氧基；
[0068]
r7为
[0069]
xxxiii)h，
[0070]
xxxiv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或
[0071]
xxxv)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代；
[0072]
z为-o-、-c(r8)
2-或-nr
8-；
[0073]
每个r8独立地为h或c
1-3
烷基；
[0074]r9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为
[0075]
xxxvi)h，
[0076]
xxxvii)卤素，
[0077]
xxxviii)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0078]
xxxix)-nh2，
[0079]
xl)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0080]
xli)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0081]
xlii)-p(o)(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0082]
xliii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0083]
xliv)-s(o)2n(r
23
)2，其中每个r
23
独立地为h或c
1-6
烷基，
[0084]
xlv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0085]
t)-oh，
[0086]
u)卤素，
[0087]
v)c
1-3
烷氧基，
[0088]
w)c
3-7
单环环烷基，
[0089]
x)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂环基，其中所述5-6元单环杂环基被1-3个独立地选自氧代和 c
1-3
烷基的基团任选地取代，以及
[0090]
y)-nr
20
c(o)oc
1-3
烷基，其中r
20
为h或c
1-3
烷基，
[0091]
xlvi)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0092]
xlvii)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-oh、卤素、 c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0093]
xlviii)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0094]
xlix)-cooh，
[0095]
l)-c(o)n(r
19
)2，或者
[0096]
li)-c
1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2，
[0097]
其中r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
中的一个或多个为-c(o)n(r
19
)2或
ꢀ‑c1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2；以及
[0098]
每个r
19
独立地为
[0099]
lii)h，
[0100]
liii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0101]
liv)c
1-6
烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0102]
lv)c
3-7
单环环烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、 c
1-6
烷基和c
1-6
烷氧基的基团任选地取代，其中所述c
1-6
烷基被1-3 个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或者
[0103]
lvi)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代。
[0104]
在多种实施方案中，z为nh、x1为ch、r6为h，以及所述通式(i)化合物具有通式(ia)的结构：
[0105][0106]
在更具体的实施方案中，所述通式(i)化合物具有通式(ib)的结构：
[0107][0108]
在多种更具体的实施方案中，每个r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为h、卤素、c
1-6
烷基或-c(o)n(r
19
)2，其中r
19
为c
1-6
烷基；r4、 r5和r
10
各自为h；以及r7为c
1-6
烷基。
[0109]
在多种更具体的实施方案中，r3和r
13
一起形成＝o。或者，x 为哌啶基。
[0110]
在更具体的实施方案中，所述通式(i)化合物具有通式(ic)的结构：
[0111][0112]
在多种更具体的实施方案中，l表示为：
[0113][0114]
其中，
[0115]
t为0、1、2、3、4、5、6或7；
[0116]
q为0、1、2、3、4、5、6或7；
[0117]
l1为直连键、-c(o)nh-或-c(o)-；以及
[0118]
l2为-c(o)nh-、-o-或-nh-。
[0119]
在更具体的实施方案中，t为0、q为3、4、5、6或7。
[0120]
在其它更具体的实施方案中，q为0、t为1、3、5或7。
[0121]
在多种其它更具体的实施方案中，l表示为：
[0122][0123]
其中，
[0124]
w为1、2或3；
[0125]
v为1或2；
[0126]
p为1、2、3、4或5；
[0127]
y1为直连键、-(ch2)
p-或
–
o-；
[0128]
y2为直连键、-(ch2)
p-、-c(o)-或-c(o)-ch
2-，
[0129]
x3和x4独立地为n或c(r)，其中r为h或c
1-3
烷基；
[0130]
l4为直连键、
–
nh-、-nhc(o)-或
[0131]
l4为
[0132]
在其它实施方案中，l包括刚性环系统，例如芳基环(例如，苯基)、杂芳基环、桥环、螺环，或它们的混合物。
[0133]
在多种更具体的实施方案中，所述lhm靶向crbn，其具有通式(id)的结构
[0134][0135]
其中，
[0136]
w为
–
c(rg)-或
–
n-；
[0137]
z1为
‑ꢀ
c(o)-、-c(s)-、-c(nrg)-、-c(rg)
2-、-c(rg)
2-c(o)-、-c(o)-n(rg)-、
–ꢀ
crg＝cr
g-、
–
c(rg)＝n-、-c(rg)
2-c(s)-或-c(rg)
2-c(rg)
2-；
[0138]
q为0、1或2；
[0139]
rg为氢或c
1-6
烷基；以及
[0140]
ra为c
1-6
烷基、卤素、卤代c
1-6
烷基、-n(rg)2、cn、硝基、羟基或-o-c
1-4
烷基。
[0141]
在其它具体实施方案中，lhm靶向vhl并具有通式(ie)或(if)的结构：
[0142][0143]
其中，
[0144]
p为0或1；
[0145]rj
为被1至3个rk任选取代的5-6元杂芳基，
[0146]
每个rk独立地为卤素、氧代、-cn、-oh、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基或-o-c
1-6
烷基，
[0147]
每个re独立地为氢、c
1-6
烷基或c
3-8
环烷基；
[0148]
rb为氢或羟基；
[0149]
rc为-c(o)rf，其中rf为c
1-6
烷基或c
3-8
环烷基，其各自被卤素或
–
cn任选地取代。
[0150]
在其它实施方案中，本公开提供了具有通式(ii)的结构的化合物：
[0151][0152]
或其药学上可接受的盐，
[0153]
其中：
[0154]
m为0、1、2、3、4或5；
[0155]
n为0、1、2、3、4、5或6；
[0156]
b为具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-10元单环的、稠合双环的、桥接双环的或螺环的杂环基环；
[0157]
l为具有长度为2-24个连续共价键合的选自c、o、n和s的原子的接头部分；
[0158]
lhm为连接酶束部分；
[0159]
r1和r2中的一个为h、-cn、-oh、卤素或c
1-6
烷基，以及r1和 r2中的另一个为h、卤素或c
1-6
烷基，其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh和卤素的基团任选地取代，或者
[0160]
r1和r2与和它们所连接的碳一起形成c
3-7
单环环烷基或具有1 个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述c
3-7
单环环烷基和所述4-6元单环杂环基各自被一个r
11
任选取代并且各自被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或者
[0161]
r1和r2一起形成＝o；
[0162]r11
为
[0163]
lvii)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、
‑ꢀ
oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0164]
lviii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0165]
lix)-s(o)2c
3-7
单环环烷基，
[0166]
lx)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或者
[0167]
lxi)-c(o)r
21
；
[0168]r21
为
[0169]
lxii)h，
[0170]
lxiii)c
3-7
单环的或桥接双环的环烷基，其被1-3个独立地选自
‑ꢀ
cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代的，其中所述c
1-3
烷基被1-3个独立地选自
–
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0171]
lxiv)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、
‑ꢀ
oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0172]
lxv)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0173]
lxvi)-nh2，
[0174]
lxvii)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0175]
lxviii)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0176]
lxix)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或者
[0177]
lxx)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0178]
z)-cn，
[0179]
aa)-oh，
[0180]
bb)卤素，
[0181]
cc)c
1-3
烷氧基，
[0182]
dd)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、 c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0183]
ee)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、
‑ꢀ
oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，以及
[0184]
ff)被一个-oh任选取代的-oc(o)c
1-6
烷基；
[0185]
r3和r
13
各自为h，或者
[0186]
r3和r
13
一起形成＝o；
[0187]
每个r
12
独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基；
[0188]
每个r
18
独立地为
[0189]
lxxi)-cn，
[0190]
lxxii)卤素，
[0191]
lxxiii)-oh，
[0192]
lxxiv)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基
的基团任选地取代，
[0193]
lxxv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0194]
lxxvi)-cooh，或
[0195]
lxxvii)-c(o)n(r
22
)2，其中每个r
22
独立地为h或c
1-6
烷基；
[0196]
x1为n或cr
17
；
[0197]
r4、r5、r6、r
10
和r
17
各自独立地为h、卤素、c
1-3
烷基或c
1-3
烷氧基；
[0198]
r7为
[0199]
lxxviii)h，
[0200]
lxxix)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或者
[0201]
lxxx)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代；
[0202]
z为-o-、-c(r8)2-或-nr
8-；
[0203]
每个r8独立地为h或c
1-3
烷基；
[0204]r9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为
[0205]
lxxxi)h，
[0206]
lxxxii)卤素，
[0207]
lxxxiii)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0208]
lxxxiv)-nh2，
[0209]
lxxxv)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0210]
lxxxvi)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0211]
lxxxvii)-p(o)(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0212]
lxxxviii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0213]
lxxxix)-s(o)2n(r
23
)2，其中每个r
23
独立地为h或c
1-6
烷基，
[0214]
xc)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代
[0215]
gg)-oh，
[0216]
hh)卤素，
[0217]
ii)c
1-3
烷氧基，
[0218]
jj)c
3-7
单环环烷基，
[0219]
kk)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂环基，其中所述5-6元单环杂环基被1-3个独立地选自氧代和c
1-3
烷基的基团任选地取代，以及
[0220]
ll)-nr
20
c(o)oc
1-3
烷基，其中r
20
为h或c
1-3
烷基，
[0221]
xci)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0222]
xcii)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-oh、卤素、 c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0223]
xciii)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0224]
xciv)-cooh，
[0225]
xcv)-c(o)n(r
19
)2或
[0226]
xcvi)-c
1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2，
[0227]
其中r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
中的一个或多个为-c(o)n(r
19
)2或
ꢀ‑c1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2；以及
[0228]
每个r
19
独立地为
[0229]
xcvii)h，
[0230]
xcviii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0231]
xcix)c
1-6
烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选取代，
[0232]
c)c
3-7
单环环烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、 c
1-6
烷基和c
1-6
烷氧基的基团任选取代，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或者
[0233]
ci)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选取代的。
[0234]
在更具体的实施方案中，z为nh、x1为ch、r6为h以及所述通式(ii)化合物具有通式(iia)的结构：
[0235][0236]
在更具体的实施方案中，所述通式(ii)化合物具有通式(iib)的结构：
[0237][0238]
在更多的实施方案中，每个r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为 h、卤素、c
1-6
烷基或-c(o)n(r
19
)2；其中r
19
为c
1-6
烷基；r4、r5和 r
10
各自为h；以及r7为c
1-6
烷基。
[0239]
在进一步更具体的实施方案中，r3和r
13
一起形成＝o；以及r1和r2与和它们所连接的碳一起形成具有1个或2个独立地选自n、 o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，并且其中所述4-6元单环杂环基被一个r
11
任选取代。
[0240]
在优选的实施方案中，所述通式(ii)化合物具有通式(iic)的结构：
[0241][0242]
在更多的实施方案中，l具有以下结构：
[0243][0244]
其中，t为0、1、2、3、4、5、6或7；q为0、1、2、3、4、5、 6或7；l1为-c(o)nh-；以及l2为-o-或-nh-。在更具体的实施方案中，t为0，以及q为3、5或7。
[0245]
在更具体的实施方案中，所述lhm靶向vhl并具有通式(if)的结构：
[0246][0247]
其中，
[0248]
p为0或1；
[0249]rj
为被1至3个rk任选取代的5-6元杂芳基，
[0250]
每个rk独立地为卤素、氧代、-cn、-oh、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基或-o-c
1-6
烷基。
[0251]
每个re独立地为氢、c
1-6
烷基或c
3-8
环烷基；
[0252]
rb为氢或羟基；
[0253]
rc为-c(o)rf，其中rf为c
1-6
烷基或c
3-8
环烷基，其各自被卤素或
–
cn任选地取代。
[0254]
在其它实施方案中，所述lhm靶向crbn并具有通式(id)的结构：
[0255][0256]
其中，
[0257]
w为
–
c(rg)-或
–
n-；
[0258]
z1为
‑ꢀ
c(o)-、-c(s)-、-c(nrg)-、-c(rg)
2-、-c(rg)
2-c(o)-、-c(o)-n(rg)-、
–ꢀ
crg＝cr
g-、
–
c(rg)＝n-、-c(rg)
2-c(s)-或-c(rg)
2-c(rg)
2-；
[0259]
q为0、1或2；
[0260]
rg为氢或c
1-6
烷基；以及
[0261]
ra为c
1-6
烷基、卤素、卤代c
1-6
烷基、-n(rg)2、cn、硝基、羟基或-o-c
1-4
烷基。
[0262]
本文还提供了药物组合物，其包含通式(i)或通式(ii)的化合物，或任何一种子结构或实施例1-97的具体化合物，或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂或载体。
[0263]
其它实施方案提供了用于治疗与增加的造血祖细胞激酶1(hpk1) 活性相关的疾病或病症的方法，用于增加t细胞活化的方法，用于治疗癌症的方法，用于抑制癌细胞的生长或增殖的方法，用于治疗或预防乙型肝炎病毒(hbv)感染的方法，或用于治疗或预防人免疫缺陷病毒(hiv)感染的方法，所述方法包括向有需要的个体施用治疗有效量的通式(i)或通式(ii)的化合物、任何一种子结构或实施例1-97 的化合物。
[0264]
详细说明
[0265]
hpk1的特异性降解可以通过使用异双功能小分子将hpk1募集至泛素连接酶并因此促进hpk1的泛素化和蛋白酶体降解来实现。因此，本文提供了双功能化合物，其各自包含hpk1结合物，其通过接头共价缀合至用于靶向泛素连接酶的连接酶束部分(lhm)。优选地，lhm靶向小脑蛋白(crbn)或von hippel-lindau(vhl)蛋白，它们是两种普遍表达的生物学上重要的cullin ring e3泛素连接酶复合物的底物识别亚基。参见，例如，wo2019/099926、 wo2020/023851和美国公开申请号2019/0192668。
[0266]
一个实施方案提供通式(i)的双功能化合物：
[0267][0268]
或其药学上可接受的盐、同位素形式、分离的立体异构体或立体异构体的混合物，其中，
[0269]
m为0、1、2、3或4；
[0270]
n为0、1、2、3、4、5或6；
[0271]
a为c
3-7
单环环烷基环或具有1个或2个独立地选自n、o和s 的杂原子的4-6元单环杂环基环；
[0272]
l为具有长度为2-24个连续共价键合的选自c、o、n和s的原子的接头部分；
[0273]
lhm为连接酶束部分；
[0274]r11
为
[0275]
i)选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基；或者
[0276]
ii)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0277]
iii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0278]
iv)-s(o)2c
3-7
单环环烷基，
[0279]
v)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或者
[0280]
vi)-c(o)r
21
；
[0281]
每个r
12
独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基；
[0282]r21
为
[0283]
vii)h，
[0284]
viii)c
3-7
单环的或桥接双环的环烷基，其被1-3个独立地选自
‑ꢀ
cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，其中所述c
1-3
烷基被1-3个独立地选自
–
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0285]
ix)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0286]
x)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0287]
xi)-nh2，
[0288]
xii)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0289]
xiii)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0290]
xiv)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和 c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或者
[0291]
xv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0292]
a)-cn，
[0293]
b)-oh，
[0294]
c)卤素，
[0295]
d)c
1-3
烷氧基，
[0296]
e)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0297]
f)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，以及
[0298]
g)被一个-oh任选取代的-oc(o)c
1-6
烷基；
[0299]
r3和r
13
各自为h，或者
[0300]
r3和r
13
一起形成＝o；
[0301]
x为-nr
15r16
，其中r
15
和r
16
独立地为
[0302]
xvi)h，
[0303]
xvii)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0304]
xviii)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-7元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0305]
xix)-c(o)c
1-6
烷基，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或者
[0306]
xx)c
1-6
烷基，其被1-6个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0307]
h)-cn，
[0308]
i)-oh，
[0309]
j)卤素，
[0310]
k)c
1-3
烷氧基，
[0311]
l)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，以及
[0312]
m)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂环基，其中所述5-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代；或者
[0313]
x为具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-10元单环的、稠合双环的、桥接双环的或螺环的杂环基，其中所述4-10元单环的、稠合双环的、桥接双环的或螺环的杂环基被1-5个r
18
任选地取代；
[0314]
每个r
18
独立地为
[0315]
xxi)-cn，
[0316]
xxii)卤素，
[0317]
xxiii)-oh，
[0318]
xxiv)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0319]
xxv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和 c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0320]
xxvi)-cooh，或
[0321]
xxvii)-c(o)n(r
22
)2，其中每个r
22
独立地为h或c
1-6
烷基；
[0322]
x1为n或cr
17
；
[0323]
r4、r5、r6、r
10
和r
17
各自独立地为h、卤素、c
1-3
烷基或c
1-3
烷氧基；
[0324]
r7为
[0325]
xxviii)h，
[0326]
xxix)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和 c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或
[0327]
xxx)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代；
[0328]
z为-o-、-c(r8)
2-或-nr
8-；
[0329]
每个r8独立地为h或c
1-3
烷基；
[0330]r9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为
[0331]
xxxi)h，
[0332]
xxxii)卤素，
[0333]
xxxiii)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0334]
xxxiv)-nh2，
[0335]
xxxv)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0336]
xxxvi)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0337]
xxxvii)-p(o)(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0338]
xxxviii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0339]
xxxix)-s(o)2n(r
23
)2，其中每个r
23
独立地为h或c
1-6
烷基，
[0340]
xl)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0341]
n)-oh，
[0342]
o)卤素，
[0343]
p)c
1-3
烷氧基，
[0344]
q)c
3-7
单环环烷基，
[0345]
r)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂环基，其中所述5-6元单环杂环基被1-3个独立地选自氧代和c
1-3
烷基的基团任选地取代，以及
[0346]
s)-nr
20
c(o)oc
1-3
烷基，其中r
20
为h或c
1-3
烷基，
[0347]
xli)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0348]
xlii)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-oh、卤素、 c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0349]
xliii)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0350]
xliv)-cooh，
[0351]
xlv)-c(o)n(r
19
)2，或
[0352]
xlvi)-c
1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2,
[0353]
条件是r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
中的一个或多个为-c(o)n(r
19
)2或-c
1-3
亚烷基-c(o)n(r19)2；以及
[0354]
每个r
19
独立地为
[0355]
xlvii)h，
[0356]
xlviii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0357]
xlix)c
1-6
烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0358]
l)c
3-7
单环环烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-6
烷基和c
1-6
烷氧基的基团任选地取代，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或
[0359]
li)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选取代的。
[0360]
可供选择的实施方案提供通式(ii)化合物：
[0361][0362]
或其药学上可接受的盐、同位素形式、分离的立体异构体或立体异构体的混合物，
[0363]
其中：
[0364]
m为0、1、2、3、4或5；
[0365]
n为0、1、2、3、4、5或6；
[0366]
b为具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-10元单环的、稠合双环的、桥接双环的或螺环的杂环基环；
[0367]
l为具有长度为2-24个连续共价键合的选自c、o、n和s的原子的接头部分；
[0368]
lhm为连接酶束部分；
[0369]
r1和r2中的一个为h、-cn、-oh、卤素或c
1-6
烷基，以及r1和 r2中的另一个为h、卤素或c
1-6
烷基，其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh和卤素的基团任选地取代，或者
[0370]
r1和r2与和它们所连接的碳一起形成c
3-7
单环环烷基或具有1 个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述c
3-7
单环环烷基和所述4-6元单环杂环基各自被一个r
11
任选地取代并且各自被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或者
[0371]
r1和r2一起形成＝o；
[0372]r11
为
[0373]
i)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0374]
ii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0375]
iii)-s(o)2c
3-7
单环环烷基，
[0376]
iv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或
[0377]
v)-c(o)r
21
；
[0378]r21
为
[0379]
vi)h，
[0380]
vii)c
3-7
单环的或桥接双环的环烷基，其被1-3个独立地选自
‑ꢀ
cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，其中所述c
1-3
烷基被1-3个独立地选自
–
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0381]
viii)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0382]
ix)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0383]
x)-nh2，
[0384]
xi)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、
ꢀ‑
oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0385]
xii)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0386]
xiii)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和 c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或
[0387]
xiv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0388]
a)-cn，
[0389]
b)-oh，
[0390]
c)卤素，
[0391]
d)c
1-3
烷氧基，
[0392]
e)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0393]
f)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，以及
[0394]
g)被一个-oh任选取代的-oc(o)c
1-6
烷基；
[0395]
r3和r
13
各自为h，或者
[0396]
r3和r
13
一起形成＝o；
[0397]
每个r
12
独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基；
[0398]
每个r
18
独立地为
[0399]
xv)-cn，
[0400]
xvi)卤素，
[0401]
xvii)-oh，
[0402]
xviii)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0403]
xix)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和 c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0404]
xx)-cooh，或
[0405]
xxi)-c(o)n(r
22
)2，其中每个r
22
独立地为h或c
1-6
烷基；
[0406]
x1为n或cr
17
；
[0407]
r4、r5、r6、r
10
和r
17
各自独立地为h、卤素、c
1-3
烷基或c
1-3
烷氧基；
[0408]
r7为
[0409]
xxii)h，
[0410]
xxiii)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和 c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，或
[0411]
xxiv)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代；
[0412]
z为-o-、-c(r8)2-或-nr
8-；
[0413]
每个r8独立地为h或c
1-3
烷基；
[0414]r9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为
[0415]
xxv)h，
[0416]
xxvi)卤素，
[0417]
xxvii)c
1-6
烷氧基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0418]
xxviii)-nh2，
[0419]
xxix)-nh(c
1-6
烷基)，其中所述c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0420]
xxx)-n(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0421]
xxxi)-p(o)(c
1-6
烷基)2，其中每个c
1-6
烷基可以相同或不同，并且其中每个c
1-6
烷基被1-3个独立地选自-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0422]
xxxii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0423]
xxxiii)-s(o)2n(r
23
)2，其中每个r
23
独立地为h或c
1-6
烷基，
[0424]
xxxiv)c
1-6
烷基，其被1-3个独立地选自以下的基团任选地取代：
[0425]
h)-oh，
[0426]
i)卤素，
[0427]
j)c
1-3
烷氧基，
[0428]
k)c
3-7
单环环烷基，
[0429]
l)具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂环基，其中所述5-6元单环杂环基被1-3个独立地选自氧代和c
1-3
烷基的基团任选地取代，以及
[0430]
m)-nr
20
c(o)oc
1-3
烷基，其中r
20
为h或c
1-3
烷基，
[0431]
xxxv)c
3-7
单环环烷基，其被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0432]
xxxvi)具有1-4个独立地选自n、o和s的杂原子的5-6元单环杂芳基，其中所述5-6元单环杂芳基被1-3个独立地选自-oh、卤素、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0433]
xxxvii)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-3个独立地选自-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，
[0434]
xxxviii)-cooh，
[0435]
xxxix)-c(o)n(r
19
)2，或
[0436]
xl)-c
1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2，
[0437]
其中r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
中的一个或多个为-c(o)n(r
19
)2或
ꢀ‑c1-3
亚烷基-c(o)n(r
19
)2；以及
[0438]
每个r
19
独立地为
[0439]
xli)h，
[0440]
xlii)-s(o)2c
1-6
烷基，
[0441]
xliii)c
1-6
烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、c
1-3
烷氧基和c
3-7
单环环烷基的基团任选地取代，
[0442]
xliv)c
3-7
单环环烷基，其被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、 c
1-6
烷基和c
1-6
烷氧基的基团任选地取代，其中所述c
1-6
烷基被1-3 个独立地选自-cn、-oh、卤素和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代，或
[0443]
xlv)具有1-3个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，其中所述4-6元单环杂环基被1-6个独立地选自-cn、-oh、卤素、氧代、c
1-3
烷基和c
1-3
烷氧基的基团任选地取代。
[0444]
hpk1结合物
[0445]
通式(i)或(ii)的双功能化合物的hpk1结合物通常具有6-氮杂苯并咪唑核，其进一步被衍生化以包括环丁基取代的二氢吲哚或4-氮杂二氢吲哚部分以及苯甲酰胺部分。hpk1结合物提供了用于通过接头(即，接头-lhm部分)与lhm偶联的各种位点。更具体地，在通式(i)的双功能化合物中，hpk1结合物部分通过a环与接头-lhm部分偶联，如由通式(a)表示的结构中所示(波浪线表示与接头-lhm部分的偶联位点)：
[0446][0447]
其中，r3、r4、r5、r6、r7、r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
、r
9e
；r
10
； r
11
、r
12
和r
13
、x1、z、m和n如上文所定义。
[0448]
在更具体的实施方式中，z为nh，x1为ch，r6为h，以及 hpk1结合物部分化合物具有通式(aa)的结构：
[0449][0450]
在优选的实施方案中，环a为哌啶基并且hpk1结合物部分具有以下结构：
[0451][0452]
在多种实施方案中，每个r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为h、卤素、c
1-6
烷基或-c(o)n(r
19
)2，其中r
19
为c
1-6
烷基；r4、r5和r
10
各自为h；以及r7为c
1-6
烷基。
[0453]
在其它实施方案中，r3和r
13
一起形成＝o。
[0454]
在其它实施方案中，x为哌啶基。
[0455]
在其它实施方案中，n为0并且p为0。
[0456]
在优选的实施方案中，hpk1结合物部分具有通式(ac)的结构：
[0457][0458]
在更具体的实施方案中，通式(ac)化合物可以具有以下非对映异构体结构之一：
[0459][0460]
或者，对于通式(ii)的双功能化合物，hpk1结合物部分通过b 环与连接基-lhm部分偶联，如通式(b)表示的结构所示(波浪线表示与连接基-lhm部分的偶联位点)：
[0461][0462]
其中，r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
、r
9e
； r
10
；r
12
、r
13
、r
18
、x1、z、m和n如上文所定义。
[0463]
在优选的实施方案中，z为nh，x1为ch，r6为h，以及hpk1 结合物部分具有通式(ba)的结构：
[0464][0465]
在优选的实施方案中，b环是哌啶基，并且hpk1结合物部分具有通式(bb)的结构：
[0466][0467]
在各种其它实施方案中，每个r
9a
、r
9b
、r
9c
、r
9d
和r
9e
独立地为h、卤素、c
1-6
烷基或-c(o)n(r
19
)2，其中r
19
为c
1-6
烷基；r4、r5和r
10
各自为h；以及r7为c
1-6
烷基。
[0468]
在各种其它实施方案中，r3和r
13
一起形成＝o；以及r1和r2与和它们所连接的碳一起形成具有1个或2个独立地选自n、o和s的杂原子的4-6元单环杂环基，并且其中所述4-6元单环杂环基被一个 r
11
任选地取代。r
11
如本文所定义。
[0469]
在优选的实施方案中，hpk1结合物部分具有通式(bc)的结构：
[0470][0471]
连接酶束部分(lhm)
[0472]
通式(i)或通式(ii)的化合物的lhm靶向e3连接酶的vhl或 crbn，其被双功能化合物控制并利用(harnessed)以诱导hpk1的泛素化和随后的蛋白酶体降解。
[0473]
沙利度胺衍生物，例如来那度胺或泊马度胺，可用于将潜在的底物募集至crbn(泛素连接酶复合物的组分)。
[0474]
一个实施方案提供具有以下结构的靶向crbn的lhm(波浪线显示与通式(i)化合物的其余部分连接的键)：
[0475][0476]
其中，
[0477]
w为
–
c(rg)-或
–
n-；
[0478]
z1为
‑ꢀ
c(o)-、-c(s)-、-c(nrg)-、-c(rg)
2-、-c(rg)
2-c(o)-、-c(o)-n(rg)-、
–ꢀ
crg＝cr
g-、
–
c(rg)＝n-、-c(rg)
2-c(s)-或-c(rg)
2-c(rg)
2-；
[0479]
q为0、1或2；
[0480]
rg为氢或c
1-6
烷基；以及
[0481]
ra为c
1-6
烷基、卤素、卤代c
1-6
烷基、-n(rg)2、cn、硝基、羟基或-o-c
1-4
烷基。
[0482]
在更具体的实施方案中，lhm具有以下结构之一：
[0483][0484]
在其它实施方案中，lhm靶向vhl并且具有通式(ie)或(if)的结构：
[0485][0486]
其中，
[0487]
p为0或1；
[0488]rj
为被1至3个rk任选取代的5-6元杂芳基，
[0489]
每个rk独立地为卤素、氧代、-cn、-oh、c
1-6
烷基、 c
3-8
环烷基或-o-c
1-6
烷基。
[0490]
每个re独立地为氢、c
1-6
烷基或c
3-8
环烷基；
[0491]
rb为氢或羟基；
[0492]
rc为-c(o)rf，其中rf为c
1-6
烷基或c
3-8
环烷基，其各自被任选地取代卤素或
–
cn。
[0493]
在更具体的实施方案中，lhm具有以下结构之一：
[0494][0495]
接头
[0496]
每个通式(i)或通式(ii)的双功能化合物包含接头，其是将hpk1结合物部分与lhm偶联的二价部分。接头部分的结构(例如长度或刚性) 可影响降解过程的效率或选择性。通常，除了向hpk1结合物部分和 lhm提供各自的连接点之外，接头部分还包含多个片段，所述片段有助于接头的总长度和刚性。
[0497]
如本文所用，接头部分通常具有长度为2-24个连续共价键合的选自c、o、n和s的原子。具体地，接头部分包含在与hpk1结合物部分和lhm的各自的连接点之间的共价键的连续
序列，包括由通式(a)、(b)、(id)、(ie)和(if)的波浪线所示的键，以及它们各自的子结构。
[0498]
在一些实施方案中，接头部分具有以下链状结构：
[0499][0500]
其中，
[0501]
t为0、1、2、3、4、5、6或7；
[0502]
q为0、1、2、3、4、5、6或7；
[0503]
l1为直连键、-c(o)nh-或-c(o)-；以及
[0504]
l2为-c(o)nh-、-o-或-nh-。
[0505]
在更具体的实施方案中，t为0，q为3、4、5、6或7。
[0506]
在其它更具体的实施方案中，q为0，t为1、3、5或7。
[0507]
在进一步更具体的实施方案中，所述接头具有以下结构之一：
[0508][0509]
如本文所用，二价部分的*通常表示与化合物的其余部分的各自的连接点，例如hpk1结合物部分和lhm；或其它接头片段。*和波浪线应理解为可互换的。
[0510]
接头的长度可以由形成连续连接的键的原子总数决定。使用上述接头部分作为实例，原子的总数从直接与hpk1结合物部分连接的原子(例如，l1的c原子)起，和形成连续共价键的原子(例如，c、 n或o)，到直接与接头部分连接的原子(例如，l2的c、o或n)计数。不参与连续共价键合的原子(例如，当通过双键连接时，h或o) 被排除在原子总数的计数之外。对于含有一个或多个环结构的接头部分，原子的总数仅沿着原子的单一线性连接的序列计数，而不是围绕环计数。例如，二价1,6-环己基环部分计数为4个原子而不是6 个原子。
[0511]
应理解，除非另有说明和前提条件是满足化合价，否则本文所述的二价部分(例如
l1或l2)不限于表达它们的方向。例如，对于给定的l1，例如-c(o)-nh-，其与分子的其余部分连接的方式可以是任一方向：即，-c(o)-nh-或-nh-c(o)-，前提条件是连接不违反化合价规则。
[0512]
一个或多个接头片段可以是直连键。为了示例性说明，在由-l2‑ꢀ
l
3-l
4-表示的接头片段的序列中，当l3是直连键时，其有效地不存在，因为l2和l4彼此直接连接。
[0513]
在另一个实施方案中，接头部分具有一个或多个环，其倾向于增加接头刚性。链键和环的组合可用于调节双官能团的相对取向或它们之间的距离。
[0514]
在更具体的实施方案中，接头部分具有以下结构：
[0515][0516]
其中，
[0517]
p为1或2；
[0518]
q为0、1、2或3；
[0519]
x2为ch或n；
[0520]
l3为
[0521]
i)-(ch2)
q-；
[0522]
ii)
–
(ch2)
q-c(o)nh-；或
[0523][0524]
在另一个实施方案中，所述接头部分具有以下结构：
[0525][0526]
其中，
[0527]
w为1、2或3；
[0528]
v为1或2；
[0529]
p为1、2、3、4或5；
[0530]
y1为直连键、-(ch2)
p-或
–
o-；
[0531]
y2为直连键、-(ch2)
p-、-c(o)-或-c(o)-ch
2-；
[0532]
x3和x4独立地为n或c(r)，其中r为h或c
1-3
烷基；
[0533]
l4为直连键、
–
nh-、-nhc(o)-，或者
[0534]
l4为
[0535]
在其它具体实施方案中，所述接头部分具有以下结构：
[0536]
[0537]
[0538][0539]
在其它实施方案中，接头部分包含刚性环系统，例如芳基环(例如，苯基)、杂芳基环、桥环、螺环或它们的混合物。
[0540]
在更具体的实施方案中，所述接头部分具有以下结构之一：
[0541]
[0542][0543]
通式(i)和(ii)的化合物的构建
[0544]
通式(i)或通式(ii)的化合物的合成或构建可以在多个步骤中进行，通常涉及分别制备hpk1结合物和lhm部分的构建块，随后通过形成共价键连接各个构建块。一般而言，可以用一种或多种接头前体 (l
x
)制备任一个或两个构建块。接头前体包含一个或多个接头片段 (ls)并且具有用于进一步偶联的末端反应性基团。这两个构建块可以最终偶联(通过形成ls片段)以提供通式(i)或通式(ii)的化合物。
[0545]
以下方案证明了制备构建块的通用方法。根据本文所述的通用方案合成具体实施例(实施例1-97)，其通过它们各自的物理化学性质表征。
[0546]
a.用于制备hpk1结合物构建块的通用方案
[0547]
可以使用类似于以下所示的反应方案a的方法制备hpk1结合物构建块。对于通式(i)的化合物，r1和r2与和它们所连接的碳一起形成a环；对于通式(ii)的化合物，x是b环。
[0548]
反应方案a
[0549][0550]
步骤1-式(3)化合物的制备
[0551]
式(3)化合物可以通过组合化合物(1)和(2)来制备。化合物(1)和(2) 可商购或可通过本领域已知的方法制备。化合物(1)和(2)可以在合适的溶剂如thf中混合。在0℃至100℃的温度下搅拌10分钟至24小时或直到完成反应后，使反应冷却至室温。可以通过过滤或沉淀获得式(3)化合物。
[0552]
步骤2-式(4)化合物的制备
[0553]
可以通过本领域已知的方法通过氯化式(3)化合物来制备式(4)化合物。可以将式(3)化合物与pocl3在合适的溶剂如甲苯中混合。在 0℃至100℃的温度下搅拌10分钟至24小时或直到完成反应后，使反应冷却至室温。然后可以在减压下除去溶剂。为了萃取式(4)化合物，可以加入有机溶剂如乙酸乙酯，然后用水和盐水洗涤。可以将有机相浓缩以获得式(4)化合物。可以通过本领域已知的任何合适的方法，例如硅胶色谱法、研磨、沉淀或结晶纯化式(4)化合物。
[0554]
步骤3-式(5)化合物的制备
[0555]
可以通过本领域已知的方法还原式(4)化合物来制备式(5)化合物。可以将式(4)化合物与锌粉和氯化铵在合适的溶剂如thf、meoh或水、或由thf、meoh和水组成的溶剂的混合物中混合。在0℃至 100℃的温度下搅拌1小时至24小时或直到完成反应后，使反应冷却至室温并通过硅藻土床过滤。为了萃取式(5)化合物，可以加入有机溶剂如乙酸乙酯，然后用水和盐水洗涤。可以将有机相浓缩以获得式(5)化合物。可以通过本领域已知的任何合适的方法，例如硅胶色谱法、研磨、沉淀或结晶纯化式(5)化合物。
[0556]
步骤4-式(6)化合物的制备
[0557]
可以通过本领域已知的方法通过环化式(5)化合物来制备式(6)化合物。可以将式(5)化合物与原甲酸三甲酯和甲酸混合。在0℃至100℃的温度下搅拌1小时至24小时或直到完成反应后，通过蒸馏除去剩余的溶剂。为了萃取式(6)化合物，可以加入有机溶剂如二氯甲烷，然后用水和盐水洗涤。可以将有机相浓缩以获得式(6)化合物。可以通过本领域已知的任何合适的方法纯化式(6)化合物，例如硅胶色谱法、研磨、沉淀、结晶或用有机溶剂例如醚(包括但不限于甲基叔丁基醚)洗涤。
[0558]
步骤5-式(7)化合物的制备
[0559]
可以通过本领域已知的方法将式(6)化合物氟化来制备式(7)化合物。可以将式(6)化合物与氟化铯在溶剂如dmf中混合。在室温至 110℃的温度下搅拌1小时至24小时或直至反应完成后，通过添加冰水或通过将反应混合物添加至冰水中将反应冷却至0℃至室温。为了萃取式(7)化合物，可以加入有机溶剂如乙酸乙酯，然后用水和盐水洗涤。可以将有机相浓缩以获得式(7)化合物。可以通过本领域已知的任何合适的方法，例如硅胶色谱法、研磨、沉淀或结晶纯化式 (7)化合物。
[0560]
步骤6-式(9)化合物的制备
[0561]
可以通过本领域已知的方法组合式(6)和(8)化合物或组合式(7)和 (8)化合物来制备式(9)化合物。式(8)化合物是可商购的或者可以通过本领域已知的方法制备。可以将式(8)化合物与式(6)或(7)化合物在碱如氢化钠的存在下在合适的溶剂如nmp或dma中混合。在室温至 100℃的温度下搅拌1小时至24小时或直到完成反应后，可以将反应加入水中并用酸如10％柠檬酸处理。可以通过过滤或沉淀获得式 (7)化合物。
[0562]
步骤7-式(12)化合物的制备
[0563]
可以通过本领域已知的方法将式(10)和(11)化合物组合来制备式 (12)化合物。式(10)和(11)化合物是可商购的或可以通过本领域已知的方法制备。可以将式(10)和(11)化合物在碱如碳酸钾的存在下在合适的溶剂如dmf中混合。在室温至50℃的温度下搅拌1小时至24 小时或直至完成反应后，将反应冷却至室温。为了萃取式(12)化合物，可以加入有机溶剂如乙酸乙酯，然后用水和盐水洗涤。可以将有机相浓缩以获得式(12)化合物。可以通过本领域已知的任何合适的方法，例如硅胶色谱法、研磨、沉淀或结晶纯化式(12)化合物。
[0564]
步骤8-式(13)化合物的制备
[0565]
可以通过本领域已知的方法通过还原胺化式(12)化合物来制备式 (13)化合物。可以在酸(例如乙酸)或路易斯酸(例如氯化锌)的存在下，在合适的溶剂(例如二氯乙烷或甲醇)中，将式(12)化合物和可商购的或通过本领域已知的方法合成的胺与还原剂(例如三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠)混合。在0℃至室温的温度下搅拌1小时至24小时或直到完成反应后，可以将反应加入到水溶液如饱和碳酸氢钠水溶液中。为了萃取式(13)化合物，可以加入有机溶剂如二氯甲烷，然后用水和盐水洗涤。可以将有机相浓缩以获得式(13)化合物。可以通过本领域已知的任何合适的方法，例如硅胶色谱法、研磨、沉淀或结晶纯化式(13)化合物。
[0566]
步骤9-hpk1结合物构建块的制备
[0567]
可以通过本领域已知的方法通过将式(9)化合物和式(13)化合物组合来制备hpk1结合物构建块。可以将式(9)和式(13)化合物在催化剂如四(三苯基膦)钯和碱如碳酸铯、碳酸钠或磷酸三钾的存在下，在合适的溶剂如二甲氧基乙烷和水的混合物或dmac和水的混合
物中混合。在50℃至150℃的温度下搅拌1小时至24小时后，使反应冷却至室温。可将粗产物过滤并减压浓缩。为了萃取化合物，可以加入有机溶剂如二氯甲烷，然后用水和盐水洗涤。可以浓缩有机相，并且可以通过本领域已知的任何合适的方法，例如硅胶色谱法、反相色谱法、研磨、沉淀或结晶来纯化所得产物。所得的hpk1结合物构建块用作中间体以进一步与接头部分偶联。
[0568]
根据反应方案a制备的hpk1结合物构建块具有至少一个反应位点，通常为胺部分或羧基部分，其可以通过形成共价键进一步偶联至通式(i)或(ii)的分子的其余部分。在下文所示的hpk1结合物构建块的具体实例中，中间体1的螺[吲哚-哌啶基]的-nh-部分和中间体2的羧酸(下文所示的结构)表示各自的反应位点。
[0569][0570]
下文进一步详细描述这些中间体：
[0571]
中间体1：4-氟-n-异丙基-5-((3-异丙基-6-(2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-2-甲基苯甲酰胺
[0572]
步骤1：2-氧代-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基) 螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的合成。在配备有回流冷凝器的100ml单颈圆底烧瓶中放入6-溴-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'
‑ꢀ
甲酸叔丁酯(1)(0.99g,2.6mmol)、双(频哪醇合)硼(0.86g,3.4 mmol)、乙酸钾(0.76g,7.8mmol)和[1,1
′
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)与二氯甲烷的络合物(0.21g,0.26mmol)和二恶烷(10ml)。在通过鼓泡n25分钟使混合物脱气后，将其在80℃下搅拌16小时。然后，将其冷却至室温，用水淬灭，并用etoac萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并通过快速色谱法(0
‑ꢀ
100％ etoac/己烷)纯化，得到标题化合物产物。
[0573]
步骤2：2-氧代-1-(3-氧代环丁基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的合成。在配备有回流冷凝器的100ml单颈圆底烧瓶中放入2-氧代-6-(4,4,5,5
‑ꢀ
四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2)(0.81g,1.9mmol)和碳酸钾(0.65g,4.7mmol,325目)、3
‑ꢀ
溴环丁酮(0.21ml,2.53mmol)和dmf(10ml)。在将混合物在50℃下搅拌1h后，将其冷
却至rt并过滤以除去碳酸钾。将滤液用etoac 稀释，用水淬灭，并用etoac萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤，并通过快速色谱法(0-100％ etoac/己烷) 纯化，得到标题化合物。
[0574]
步骤3：2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的合成。向2-氧代-1-(3-氧代环丁基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.60g,5.24mmol)、乙酸(0.60ml,10.5mmol)和哌啶(1.55ml,15.7mmol)在dcm(29 ml)中的搅拌溶液中在10分钟内分3等份加入stab(3.33g,15.7 mmol)。搅拌3h后，用碳酸氢钠水溶液(100ml)稀释反应，并分离有机层。将水层用dcm(2x75ml)萃取，并将合并的有机层用盐水 (2x100ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到标题化合物(2.9g,96％)。
[0575]
步骤4：5-((6-溴-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4
‑ꢀ
氟-2-甲基苯甲酸的合成。在配备有回流冷凝器的250ml圆底单颈烧瓶中放入5-氨基-4-氟-2-甲基-苯甲酸(2.0g,11mmol)和dmf(40ml)。向其中加入nah(60％,1.6g,39mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌15分钟，然后加入6-溴-4-氟-3-异丙基-咪唑并[4,5-c]吡啶(7)(2.0 g,7.8mmol)。在将混合物在60℃下搅拌16小时后，将其冷却至室温并用水淬灭，接着加入10％柠檬酸以调节其ph值至～5。过滤沉淀，用水洗涤，并干燥，得到标题化合物。
[0576]
步骤5：5-({6-溴-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟-n
‑ꢀ
异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。向5-((6-溴-3-异丙基-3h-咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-2-甲基苯甲酸(1.0g,2.5mmol)、异丙胺 (0.43ml,5.0mmol)和dipea(2.58ml,14.8mmol)的dmf(16ml)溶液中一次性加入hatu(1.91g,5.03mmol)。将反应在室温下搅拌16 小时，然后冷却至0℃并通过添加水(30ml)淬灭。将混合物在室温下搅拌20分钟，然后过滤固体。用水冲洗固体，然后在减压下干燥过夜，得到标题化合物(0.95g,86％)。
[0577]
步骤6：6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3
‑ꢀ
异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的合成。在配备有搅拌棒的微波小瓶中，将5-({6-溴-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟-n
‑ꢀ
异丙基-2-甲基苯甲酰胺(500mg,1.12mmol)、2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基) 螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(694mg,1.23mmol)、碳酸钠(438 mg,4.13mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(91mg,0.08mmol)在1,2-二甲氧基乙烷(12ml)和水(4.1ml)的混合物中混合。然后在搅拌下在微波中在125℃下加热该反应50分钟。冷却至室温后，将反应物浓缩至硅胶上，并根据色谱法b纯化，得到标题化合物(650mg,72％)。
[0578]
步骤7：4-氟-n-异丙基-5-((3-异丙基-6-(2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶
‑ꢀ
4-基)氨基)-2-甲基苯甲酰胺的合成。向6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(900 mg,1.12mmol)的dcm(9ml)溶液中加入hcl(4n于二噁烷中，4.5 ml)。将该混合物搅拌3小时，然后在减压下除去溶剂。根据色谱法 c纯化粗残余物，提供标题化合物(750mg,90％)。
[0579]
中间体2：(3r)-1-[(1s,3s)-3-[1'-乙酰基-6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1-基]环丁基]哌啶-3-甲酸
[0580]
步骤1：2-氧代-1-[(1s,3s)-3-[(3r)-3-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]环丁基]-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序d，使用2-氧代-1-(3-氧代环丁基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.5g,3.0mmol)、(3r)-哌啶-3-甲酸乙酯盐酸盐(761mg,3.93mmol,1.3eq)实施反应，并添加tea(0.42ml,3.02 mmol,1eq)，提供标题化合物(1.9g,3.0mmol,99％)。
[0581]
步骤2：6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3
‑ꢀ
异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-[(3r)-3-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的合成。向配备有搅拌棒的微波小瓶中放入5-({6-溴-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶
‑ꢀ
4-基}氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺(500mg,1.12mmol,1eq)、 2-氧代-1-[(1s,3s)-3-[(3r)-3-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]环丁基]-6
‑ꢀ
(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'
‑ꢀ
甲酸叔丁酯(782mg,1.1eq,1.23mmol)、碳酸钠(438mg,4.13mmol, 3.7eq)和四(三苯基膦)钯(91mg,0.08mmol,0.07eq)和1,2-二甲氧基乙烷(12ml)与水(4.1ml)的混合物。将反应混合物通过微波在125℃加热25min。将反应物通过硅藻土过滤，并将滤饼用dcm和甲醇的1∶1混合物冲洗。将滤液浓缩并通过色谱法b纯化，得到标题产物 (0.9g 1.0mmol,92％)。
[0582]
步骤3：(3r)-1-[(1s,3s)-3-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-1-基]环丁基]哌啶-3-甲酸乙酯的合成。根据通用程序b，使用6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-[(3r)-3-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.8g,2.1mmol)实施反应，提供标题化合物(1.9g，定量)。
[0583]
步骤4：(3r)-1-[(1s,3s)-3-[1'-乙酰基-6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1-基]环丁基]哌啶-3-甲酸乙酯的合成。向(3r)-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1-基]环丁基] 哌啶-3-甲酸乙酯(1.90g,2.44mmol,1eq)、hatu(1.95g,5.12mmol, 2.1eq)和乙酸(0.35ml,6.1mmol)的二甲基甲酰胺(28.7ml,0.85m) 溶液中缓慢加入dipea(2.76ml,15.9mmol,6.5eq)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭并将固体沉淀物通过过滤移出，并在氮气流下真空干燥过夜，得到标题化合物 (0.9g,1.10mmol,45％)。
[0584]
步骤5：(3r)-1-[(1s,3s)-3-[1'-乙酰基-6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1-基]环丁基]哌啶-3-甲酸。根据通用程序c，使用 (r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚
ꢀ‑
3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)哌啶-3-甲酸乙酯(900mg,1.10mmol)
实施反应，提供标题化合物(790mg,1.0mmol,91％)。
[0585]
b.用于制备lhm构建块的通用方案
[0586]
靶向-crbn的lhm可以首先与接头前体偶联，所得构建块可以进一步与hpk1结合物构建块(例如，中间体1或中间体2)偶联。
[0587]
在某些实施方案中，靶向-crbn的lhm-接头构建块通常可以根据反应方案b1制备：
[0588]
反应方案b1
[0589][0590]
接头前体
[0591][0592]
在反应方案b1中，首先将官能化的沙利度胺与接头前体偶联。接头前体(氨基酯)包含“接头a”(代表一个或多个接头片段)和两个末端反应性基团，胺和酯形式的受保护的羧酸。使用示例性氨基酯接头前体，步骤1更详细地描述了初始偶联步骤。
[0593]
步骤1：将2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚
‑ꢀ
1,3-二酮(0.26mmol)、氨基酯(0.26mmol)、乙基双(丙-2-基)胺(0.52 mmol)和dmf(1ml)的混合物在90℃搅拌过夜。将混合物冷却并通过hplc(含有0.1％ tfa的5-95％ mecn的h2o溶液)纯化，得到叔丁酯中间体。
[0594]
然后叔丁酯中间体进行水解(参见步骤2)以提供靶向-crbn的 lhm构建块，其具有在羧酸基团中封端的“接头a”，其可以进一步与另一个部分(例如hpk1结合物构建块)或另一个接头片段反应性偶联。
[0595]
步骤2：将4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-4-基]氨基}丁酸叔丁酯(0.10mmol)、ch2cl2(1ml)和tfa(1 ml)的混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，得到羧酸产物。
[0596]
下面描述的是可以根据反应方案b1制备的靶向-crbn的lhm 构建块的另外的实例。更详细的描述可以在wo2020038415、wo2019207538、wo2018089736中找到，这些参考文献通过引用全文并入本文。
[0597]
中间体3：3-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基)丙酸
[0598][0599]
步骤1产物：3-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]乙氧基]丙酸叔丁酯(1.8g,52％)。lcms；c
22h27
n3o7理论值：445，实测值：m/z＝468[m

na]

.
[0600]
步骤2产物：3-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-4-基]氨基]乙氧基]丙酸(526mg,32％)。lcms；c
18h19
n3o7理论值：389，实测值：m/z＝390[m h]

.
[0601]
中间体4：3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸.
[0602][0603]
步骤1产物：3-[2-[2-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯。
[0604]
步骤2产物：3-[2-[2-[2-[[2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1,3-二氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸。
[0605]
中间体5：6-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)己酸
[0606][0607]
步骤1：6-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基}己酸叔丁酯
[0608]
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg,0.91 mmol)、6-氨基己酸叔丁酯盐酸盐(203mg,0.91mmol)在3ml的nmp 中的混合物中加入n,n-二异丙基乙胺(0.6ml)，并在85℃下加热过夜。使用etoac/己烷(0-100％)通过硅胶色谱法纯化粗制的反应混合物，得到6-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基} 己酸叔丁酯(111mg,28％)。lcms：c
23h29
n3o6,理论值：443.5，实测值：m/z＝444.4[m h]

.
[0609]
步骤2：6-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)己酸
[0610]
向6-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基}己酸叔丁酯(111mg,0.25mmol)的dcm溶液中加入tfa(0.5ml)。将反应混合物在室温下搅拌30min，然后将反应混合物浓缩，得到6
‑ꢀ
((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)己酸(78 mg,78％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.00(s,1h),11.06(s,1h), 7.57(d,j＝8.3hz,1h),7.11(s,1h),6.95(d,j＝2.1hz,1h),6.85(dd, j＝8.4,2.1hz,1h),5.04
(dd,j＝12.7,5.4hz,1h),3.16(q,j＝6.4hz, 2h),2.23(t,j＝7.4hz,2h),2.03
–
1.97(m,1h),1.56(dq,j＝14.8,7.2 hz,4h),1.39(q,j＝7.9hz,2h)。lcms：c
19h21
n3o
6，
理论值：387.4，实测值：m/z＝388.4[m h]

.
[0611]
中间体6：8-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基}辛酸
[0612]
除了用辛酸代替己酸，可以以与中间体5相同的方式制备中间体6。
[0613]
反应方案b2示出了用于制备靶向-crbn的lhm构建块的替代方法，所述构建块是用具有环的接头前体构建的。接头前体通常包含醛反应性基团，其可以通过还原胺化与另一个构建块进一步偶联 (参见例如通用反应g)
[0614]
反应方案b2
[0615][0616]
步骤1：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮
[0617]
将5-氟-1,3-二氢-2-苯并呋喃-1,3-二酮(5.0g,30.10mmol)、3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(6.9g,42.14mmol)和naoac(4.2g,51.17 mmol)在hoac(50ml)中的混合物在120℃下搅拌5小时，然后在真空下浓缩。残余物用水洗涤并通过过滤收集固体。将粗产物用水洗涤两次，并用乙酸乙酯洗涤两次，并在烘箱中干燥，得到2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮(7.7g,92％)，为浅棕色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.16(s,1h),8.03
–
8.00(m,1h),7.87
ꢀ–
7.85(m,1h),7.75
–
7.70(m,1h),5.19
–
5.15(m,1h),2.94
–
2.86(m, 1h),2.63
–
2.48(m,2h),2.12
–
2.06(m,1h)。
[0618]
步骤2：芳基氟化物的胺置换
[0619]
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮 (1.0g,3.62mmol)的nmp(10ml)溶液中加入胺(3.60mmol)和dipea (1.4g,10.83mmol)。将所得溶液在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温并通过反相快速色谱法纯化，得到相应的最终产物。
[0620]
步骤3：醇氧化成醛
[0621]
向醇(1.06mmol)在ch2cl2(10ml)中的混合物中加入dess-martin 氧化剂(2.12mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。将混合物通过柱色谱法纯化，得到所需的醛。
[0622]
应理解，使用4-氟-1,3-二氢-2-苯并呋喃-1,3-二酮作为起始材料将提供用于将
接头与沙利度胺连接的替代位置。
[0623]
下面描述的是可以根据反应方案b2制备的靶向-crbn的lhm 构建块的另外的实例。
[0624]
中间体7：(3s)-1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)吡咯烷-3-甲醛
[0625][0626]
步骤2：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-((s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
[0627]
按照方案b2的步骤1，使2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮与(s)-吡咯烷-3-基甲醇反应，提供了2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-((s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(643.1 mg,33％)，为黄色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h), 7.64(d,j＝8.4hz,1h),6.89(d,j＝2.1hz,1h),6.80(dd,j＝8.4,2.1 hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.78(t,j＝5.4hz,1h),3.59
–ꢀ
3.41(m,5h),3.22
–
3.17(m,1h),2.95
–
2.83(m,1h),2.67
–
2.44(m, 3h),2.12
–
1.88(m,2h),1.87
–
1.76(m,1h)。ms (esi)(c
18h19
n3o5)[m h]

的理论值：358.1；实测值358.1。
[0628]
步骤3：(3s)-1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)吡咯烷-3-甲醛
[0629]
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]异吲哚-1,3-二酮(258mg,0.72mmol)在dcm(5ml)中的混合物中加入 1,1-双(乙酰氧基)-3-氧代-1λ5,2-苯并碘氧戊环(benziodaoxol)-1-基乙酸酯(0.61g,1.44mmol)。90分钟后，加入硅胶，将混合物浓缩至干。将得到的粉末转移至装载筒，并在24g柱上通过快速色谱法纯化混合物，用0至100％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到(3s)-1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]吡咯烷-3-甲醛(198mg,77％)。 lcms c
18h17
n3o5理论值：355，实测值：m/z＝356[m h]

.
[0630]
中间体8：(3s)-1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)吡咯烷-3-甲醛
[0631][0632]
除了用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异二氢吲哚-1,3-二酮(其由 4-氟-1,3-二氢-2-苯并呋喃-1,3-二酮制备)代替2-(2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮，中间体8可以按照与中间体7相同的方式制备。
[0633]
中间体9：3-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}丙酸
[0634][0635]
步骤1：3-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-基)丙酸叔丁酯
[0636]
向3-(哌嗪-1-基)丙酸叔丁酯(400.00mg,1.87mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(516mg,1.87mmol)在10mlnmp中的混合物中加入n,n-二异丙基乙胺(0.65ml,0.48g,3.73mmol)，然后在85-90℃加热16小时。然后将所得反应混合物冷却至室温并在etoac/水之间分配。然后将有机层用盐水洗涤，干燥，浓缩。使用10-100％etoac/己烷，硅胶柱纯化，得到823mg标题化合物。lcms：c
24h30
n4o6，理论值：470.5，实测值：m/z＝471.8[m h]

.
[0637]
步骤2：3-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}丙酸
[0638]
将3-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}丙酸叔丁酯(820.00mg,1.74mmol)溶于三氟乙酸(9.94g,87.14mmol)中，1小时后，蒸发tfa。冻干产物至干，得到3-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}丙酸(722mg,100％收率)。lcms：c
20h22
n4o6，理论值：414.4，实测值：m/z＝415.4[m h]

.
[0639]
中间体10：3-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}乙酸
[0640]
除了用3-(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯代替3-(哌嗪-1-基)丙酸叔丁酯,以与中间体9类似的方式制备中间体10。
[0641]
中间体11：2-(2-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)乙酸
[0642][0643]
步骤1：2-{2-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯
[0644]
向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(70.00mg,0.25mmol)和2-{2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯(69.53mg,0.25mmol)在2ml的nmp中的混合物中加入n,n-二异丙基乙胺(0.13ml)，加热至85℃并过夜。将粗混合物通过柱色谱法纯化，用etoac/己烷(10-100％)洗脱，得到2-{2-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯(68mg,51％)。lcmsc
29h30
n4o6理论值：530，实测值：m/z＝532[m h]

.
[0645]
步骤2：2-(2-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)-2,7-二
氮杂螺[3.5]壬-7-基)乙酸
[0646]
向2-{2-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯(68mg,0.13mmol)的etoh(5ml)和 dcm(2ml)溶液中加入钯碳(6mg,0.06mmol)。将反应混合物用氢气喷射并使用气球保持氢气在一个大气压下，在室温下搅拌48小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并浓缩，得到2-{2-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯 (56mg,99％)。lcms c
22h24
n4o6理论值：440，实测值：m/z＝441 [m h]

.
[0647]
中间体12：1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-甲醛
[0648][0649]
步骤2：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
[0650]
按照方案b2的步骤1，使2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮与哌啶-4-基甲醇反应，提供2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)
‑ꢀ
5-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(939mg,70％)，为黄色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.65(d,j＝8.4 hz,1h),7.30(d,j＝2.4hz,1h),7.23(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),5.07(dd, j＝12.6,5.4hz,1h),4.51(t,j＝5.1hz,1h),4.07(d,j＝13.2hz,2h), 3.27(t,j＝5.7hz,2h),2.99
–
2.80(m,3h),2.62
–
2.55(m,2h),2.17
–ꢀ
1.95(m,1h),1.76
–
1.67(m,3h),1.24
–
1.12(m,2h)。ms (esi)(c
19h21
n3o5)[m h]

的计算值：372.1；实测值：372.2.
[0651]
步骤3：1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-甲醛
[0652]
根据方案b2，将2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-(羟基甲基)哌啶
‑ꢀ
1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮氧化，提供1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)
‑ꢀ
1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-甲醛。lcms c
19h19
n3o5理论值： 369，实测值：m/z＝370[m h]

.
[0653]
通常可以根据反应方案b3制备靶向vhl的lhm构建块，其中 lhm首先与包含“接头a”(代表一个或多个接头片段)和两个末端反应性基团的接头前体偶联。反应性基团之一是羧酸或其反应性等同物；另一反应性基团x可以是，例如，羧酸、羟基或醛基。所得的 lhm构建块具有反应性部分(x)，其可与另一部分进一步偶联。
[0654]
反应方案b3
[0655][0656]
下面描述的是可以根据反应方案b3制备的靶向vhl的lhm构建块的另外的实例。
[0657]
中间体13：5-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酸
[0658][0659]
向戊二酸(135mg,1.0mmol)的thf(10ml)和甲醇(5ml)溶液中加入hatu(0.39g,1.0mmol)和n,n-二异丙基乙胺(0.33ml,1.9 mmol)，并将反应混合物搅拌5分钟，然后加入(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基} 吡咯烷-2-甲酰胺(0.40g,0.93mmol)。将反应混合物搅拌16小时，然后用4n hcl的二噁烷溶液(0.25ml)淬灭，然后将粗混合物浓缩到硅胶上并通过反相色谱法纯化。lcms c
27h36
n4o6s理论值：544，实测值：m/z＝567.5[m

na]

.
[0660]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.01(s,1h),9.00(s,1h),8.58(d, j＝6.4hz,1h),7.91(d,j＝9.3hz,1h),7.43(p,j＝7.8,6.7hz,4h), 5.14(d,j＝3.7hz,1h),4.55(d,j＝9.2hz,1h),4.53
–
4.43(m,2h), 4.37(s,1h),4.23(dd,j＝16.0,5.2hz,1h),3.78
–
3.52(m,2h),2.46(s, 3h),2.28(dt,j＝15.7,7.7hz,1h),2.25
–
2.15(m,3h),2.05(t,j＝10.6 hz,1h),1.98
–
1.83(m,1h),1.72(h,j＝6.4hz,2h),0.95(s,9h)。
[0661]
中间体14：6-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}己酸
[0662]
除了用己酸代替戊二酸，并且用(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基}吡咯烷-2
‑ꢀ
甲酰胺代替(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[4
‑ꢀ
(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺，可以以与中间体 13相同的方式制备中间体14。
[0663]
中间体15：10-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}癸酸
[0664]
除了用癸酸代替戊二酸，并且用(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基}吡咯烷-2
‑ꢀ
甲酰胺代替(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[4
‑ꢀ
(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺，可以以与中间体 13相同的方式制备中间体15。
[0665]
反应方案b4示出了通过与lhm的不同连接点产生靶向vhl的 lhm构建块的另一种方法：
[0666]
反应方案b4
[0667][0668]
反应方案b4开始于将接头前体与靶向vhl的lhm，即(2s,4r)
‑ꢀ
1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2
‑ꢀ
羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺偶联。根据以下步骤制备靶向vhl的lhm。
[0669][0670]
步骤1：2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苄腈
[0671]
将4-溴-2-羟基苄腈(25.0g,126mmol)、4-甲基噻唑(25.0g,253 mmol,2.0eq)和无水koac(24.78g,252.5mmol)的dmf(210.42ml, 0.6m)溶液在超声浴上用氩气鼓泡10min。然后加入pd(oac)2(0.567 g,2.52mmol)。将所得混合物在氩气下在110℃下搅拌5小时，同时每小时添加额外量的pd(oac)2(0.283g,1.26mmol)，共添加三次至 pd(oac)2的总量(1.417g,6.31mmol)。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土过滤，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(dcm/meoh)纯化，提供2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基) 苄腈(17.6g,65％)，为黄色固体。lcms：c
11
h8n2os理论值：216.3，实测值：m/z＝217.5[m h]

[0672]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.36(s,1h),9.08(s,1h),7.71(d, j＝8.1hz,1h),7.14(d,j＝1.6hz,1h),7.08(dd,j＝8.0,1.7hz,1h), 2.50(s,3h)。
[0673]
步骤2：2-(氨基甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯酚
[0674]
在氩气下在-10℃下向1m lah的thf溶液(203.9ml,203.9 mmol)中缓慢加入2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苄腈(17.64g, 81.57mmol)的thf(203.92ml,0.4m)溶液。在完成添加后，历时5 小时使反应混合物缓慢升至室温。通过添加na2so4·
10h2o淬灭反应并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(dcm/meoh)纯化，提供(氨基甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯酚(9.18g,52％)，为琥珀色油。lcms：c
11h12
n2os理论值：220.3，实测值：m/z＝221.5 [m h]

[0675]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.96(s,1h),7.23
–
7.15(m,1h), 6.87
–
6.81(m,2h),3.88(s,2h),2.45(s,3h)。
[0676]
步骤3：(2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-甲酸甲酯
[0677]
在10℃下，向甲基(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酸(41.0g,0.177mol)和dipea(46.3ml,0.266mol)的无水thf (1770ml,0.1m)溶液中分批加入固体hatu(70.8g,0.186mol)，在 30分钟内形成活化的酯。在单独的反应器中，制备(2s,4r)-4-羟基吡咯烷-2-甲酸酯盐酸盐(48.0g,1.266mol)和dipea(46.3ml,0.266mol, 1.5eq)的溶液，并在惰性气氛下冷却至-45℃。在-45℃至-40℃下经 0.5小时滴加活化的酯溶液，并使rm缓慢升温至室温过夜。一次性加入水(～500ml)以淬灭反应，并在真空下浓缩挥发物。将油状残余物用etoac(3x400ml)萃取，用饱和nahco3水溶液(250ml)、10％ khso4水溶液(250ml)、盐水(300ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并蒸发，得到粗品，将其通过fc纯化。浓缩相应的级分，得到 (2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-甲酸甲酯，为淡黄色油(64g,99％)。lcms：c
17h30
n2o6理论值：358.4，实测值：m/z＝359.3[m h]

[0678]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ6.54(d,j＝9.3hz,1h),5.23(d,j ＝3.8hz,1h),4.42
–
4.29(m,2h),4.16(d,j＝9.4hz,1h),3.71
–
3.61 (m,2h),2.11(dd,j＝12.2,9.2hz,1h),1.95
–
1.85(m,1h),1.38(s, 10h),0.94(s,9h)。
[0679]
步骤4：(2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-甲酸
[0680]
在室温下向(2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-甲酸甲酯(63.5g,0.177mol)的thf(220 ml,0.8m)溶液中一次加入lioh
·
h2o(14.9g,0.355mol)的水溶液(86 ml,0.2m)。将rm在室温下搅拌3h并通过tlc/uplc监测。一旦反应完成，添加10％ khso4水溶液直至ph～3。在减压下浓缩thf，并用etoac(3
×
400ml)萃取残余物。将合并的有机级分用10％ khso4水溶液(200ml)、盐水(300ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并蒸发至干。用无水thf(300ml)超声处理粘稠的浅黄色油状残余物，得到灰白色沉淀，将其过滤并在真空中在50℃干燥，得到69.6g的(2s,4r)
‑ꢀ
1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷
‑ꢀ
2-甲酸(69.6g,包括thf～15重量％)。lcms：c
16h28
n2o6理论值： 344.4，实测值：m/z＝345.2[m h]

[0681]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.43(s,1h),6.49(d,j＝9.4hz, 1h),5.18(d,j＝3.7hz,1h),4.33(bs,1h),4.26(t,j＝8.4hz,1h),4.16 (d,j＝9.4hz,1h),3.69-3.52(m,2h),2.18
–
2.02(m,1h),1.89(ddd,j ＝13.2,9.1,4.6hz,1h),1.38(s,9h),0.94(s,9h)。
[0682]
步骤5：n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-({[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)
苯基]甲基}氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酸叔丁酯
[0683]
在氩气下向用冰水浴冷却的(2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基] 氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-甲酸(14.352g,41.67 mmol)的dmf(138.9ml,0.3m)溶液中加入dipea(10.89ml,62.5 mmol)和hatu(16.64g,43.8mmol)。使所得混合物在0.5h内升至室温并在氩气下在-40℃下将其缓慢滴加至2-(氨基甲基)-5-(4-甲基-1,3
‑ꢀ
噻唑-5-基)苯酚(9.180g,41.7mmol)和dipea(7.26ml,42.7mmol) 的dmf(83.3ml,0.5m)溶液中。加入后，将反应混合物置于冷却浴中，并历时5小时缓慢升温至室温。通过添加5ml水淬灭反应并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法(dcm/meoh)纯化，提供(2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-甲酸(13.4g,58％)，为淡黄色固体。lcms： c
27h38
n4o6s理论值：546.7，实测值：m/z＝547.9[m h]

.
[0684]
通过快速色谱法纯化后，还获得双酰化副产物—2-({[(2s,4r)-1
‑ꢀ
[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2
‑ꢀ
基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基(2s)-1-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基)吡咯烷-2-甲酸酯。酰基可根据步骤5a裂解。
[0685]1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ9.28(br s,1h),8.70(s,1h),8.11(t, j＝6.6hz,1h),7.13(d,j＝7.8hz,1h),6.98(d,j＝1.8hz,1h),6.88 (dd,j＝7.7,1.8hz,1h),5.19(d,j＝8.9hz,1h),4.77(t,j＝7.9hz, 1h),4.51(dd,j＝15.0,6.9hz,2h),4.12(td,j＝20.4,8.4hz,3h),3.57 (dd,j＝11.4,3.6hz,1h),2.85(br s,2h),2.53(m,4h),2.11(dd,j＝ 13.5,8.1hz,1h),1.56
–
1.43(m,2h),1.41(s,9h),0.84(s,9h)。
[0686]
步骤5a：：n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-({[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酸叔丁酯
[0687]
向2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基) 苯基(2s)-1-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二甲基丁酰基)吡咯烷-2
‑ꢀ
甲酸酯(3.0g,3.5mmol)的meoh(70ml,0.05m)溶液中加入k2co
3 (0.48g,3.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩，将残余物用水稀释，用khso4中和并用dcm萃取(x3次)，将获得的有机层经na2so4干燥，在减压下浓缩。所得残余物通过硅胶快速色谱法(5％ dcm/meoh)纯化，得到n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基
ꢀ‑
2-({[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}氨基甲酰基)吡咯烷
‑ꢀ
1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酸叔丁酯(2.14g,99％)，为淡黄色固体。lcms：c
27h38
n4o6s理论值：546.7，实测值：m/z＝ 547.2[m h]

[0688]1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ9.29(s,1h),8.80(s,1h),8.19(s,1h), 7.14(d,j＝7.8hz,1h),6.98(d,j＝1.8hz,1h),6.87(dd,j＝7.7,1.8 hz,1h),5.14(d,j＝8.9hz,1h),4.81(t,j＝7.9hz,1h),4.56(q,j＝ 7.8hz,2h),4.12(td,j＝13.6,12.6,4.7hz,3h),3.56(dd,j＝11.4,3.5 hz,1h),2.56(s,4h),2.19
–
2.05(m,1h),0.83(s,10h)。
[0689]
步骤6：(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺
[0690]
向用冰水浴冷却的n-[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-({[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}氨基甲酰基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1
‑ꢀ
氧代丁-2-基]氨基甲酸叔丁酯(5.27g,9.64mmol)的dcm(48.2ml,0.2 m)溶液中加入2m hcl的et2o溶液
(38.56ml,77.12mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将固体在超声波浴上研磨，过滤，在过滤器上用dcm洗涤并真空干燥，提供(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3
‑ꢀ
二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺(5.05g,99％)，为白色固体。lcms： c
22h30
n4o4s理论值：446.6，实测值：m/z＝447.7[m h]

[0691]1h nmr(300mhz,d2o)δ9.50(d,j＝1.0hz,1h),7.30(d,j＝7.8 hz,1h),7.04
–
6.89(m,2h),4.58(dd,j＝9.9,7.6hz,1h),4.52(s,1h), 4.44
–
4.23(m,2h),4.08(s,1h),3.80(d,j＝11.9hz,1h),3.68(dd,j＝ 11.9,3.4hz,1h),3.46(q,j＝7.1hz,1h),2.45(s,3h),2.28(dd,j＝ 13.9,7.7hz,1h),2.01(ddd,j＝14.0,9.9,4.2hz,1h),1.08(t,j＝7.1 hz,2h),0.98(s,9h)。
[0692]
步骤7：(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺
[0693]
向用冰水浴冷却的1-氟环丙烷-1-甲酸(1.337g,12.85mmol)的 dmf(128ml,0.1m)溶液中加入hatu(5.129g,13.49mmol)和 dipea(3.36ml,19.3mmol)。使所得混合物在0.5小时内升至室温，然后在-40℃下，将其滴加至(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2
‑ꢀ
甲酰胺(5.05g，定量收率)(6.674g,12.85mmol)和dipea(7.83ml, 45.0mmol)的dmf(42ml,0.3m)溶液中。在添加后，将反应混合物在冷却浴中放置以历时16小时缓慢地升至室温。然后将反应用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(dcm/meoh)纯化，提供(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2
‑ꢀ
甲酰胺(5.05g,74％)，为黄色固体。lcms：c
26h33
n4o5sf理论值： 532.6，实测值：m/z＝533.8[m h]

[0694]1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ9.29(s,1h),8.70(s,1h),8.09(dd,j ＝7.5,5.5hz,1h),7.13(d,j＝7.8hz,1h),7.01(dd,j＝8.5,3.7hz, 1h),6.98(d,j＝1.8hz,1h),6.88(dd,j＝7.7,1.8hz,1h),4.73(t,j＝ 7.9hz,1h),4.53(br s,1h),4.51
–
4.40(m,2h),4.18(dd,j＝14.6,5.4 hz,1h),3.99(d,j＝11.3hz,1h),3.63(dd,j＝11.2,3.7hz,1h),2.53 (s,3h),2.47(ddd,j＝12.9,7.9,4.6hz,1h),2.15
–
2.01(m,1h),1.36
–ꢀ
1.22(m,4h),0.91(s,9h)。
[0695]
下面描述的是可以根据反应方案b4制备的靶向vhl的lhm构建块的另外的实例。
[0696]
中间体16：10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]癸酸
[0697][0698]
步骤1：10-溴癸酸叔丁酯
[0699]
在0℃下在氮气下向10-溴癸酸(cas：50530-12-6,10.0g,39.8 mmol,1.0eq)的无水二氯甲烷(0.25m)溶液中加入叔丁醇(18.9ml,199 mmol,5.0eq)，随后加入dmap(0.96g,4.0mmol,0.1equiv)。5分钟后，在0℃下向该溶液中加入二环己基碳二亚胺(9.04g,44mmol,1.1 equiv)。使反应混合物升温至室温并搅拌20小时。将挥发物浓缩并将粗残余物直接装载到二氧化硅上(5-10％ etoac的己烷溶液)。已分离出被作为杂质的dcc污染的标题化合物(9.0g)。通过fc(洗脱剂：10
‑ꢀ
50％ dcm的己烷溶液)进行另外的纯化，得到5.8g的10-溴癸酸叔丁酯(47％收率)，为无色油。
[0700]1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ3.42(t,j＝6.9hz,2h),2.22(t,j＝ 7.5hz,2h),1.87(p,j＝6.9hz,2h),1.68
–
1.51(m,2h),1.46(s,9h), 1.45
–
1.37(m,2h),1.31(s,8h)。
[0701]
步骤2：10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]癸酸叔丁酯
[0702]
向(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2
‑ꢀ
甲酰胺(0.8g,1.5mmol,1.0eq)的无水dmf(15ml,0.1m)溶液中加入cs2co3(0.734g,2.25mmol,1.5eq)和10-溴癸酸叔丁酯(0.646g, 2.10mmol,1.4eq)。将反应混合物用氩气吹扫，密封并在25℃下搅拌 16小时。将固体过滤，用etoac(5ml)洗涤并丢弃。将获得的滤液用水(60ml)稀释并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水 (20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到
粗品，将其通过快速色谱法(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到0.99g的标题化合物，为白色固体(87％收率)。esi( )[m h]

＝782.4
[0703]1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ8.70(s,1h),7.34(d,j＝7.7hz,1h), 7.25(t,j＝5.9hz,1h),7.05(dd,j＝8.7,3.6hz,1h),6.96(dd,j＝7.6, 1.6hz,1h),6.89(d,j＝1.6hz,1h),4.76(t,j＝7.7hz,1h),4.61
–
4.49 (m,3h),4.44(dd,j＝14.8,5.4hz,1h),4.09
–
3.97(m,3h),3.64(dd,j ＝11.3,3.9hz,1h),2.65
–
2.56(m,1h),2.55(s,3h),2.22(t,j＝7.5hz, 2h),2.15(d,j＝2.6hz,1h),1.87(p,j＝6.6hz,2h),1.59(t,j＝7.1 hz,2h),1.52(m,2h),1.46(s,9h),1.43
–
1.32(m,10h),0.96(s,9h)。
[0704]
步骤3：10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]癸酸
[0705]
向10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基) 苯氧基]癸酸叔丁酯(0.993g,1.31mmol,1.0eq)的无水dcm(6.5ml, 0.2m)溶液中加入tfa(2.00ml,26.17mmol,20eq)。将反应在25℃下搅拌3小时。在真空中蒸发反应物，并将所得油状物用氨水(20％, 5ml)处理。搅拌1小时导致形成油。将上清液倾析。将该油真空干燥并使用反相快速色谱法(20％至60％乙腈/0.1％甲酸水溶液)纯化，得到0.703g标题化合物，为白色固体(77％收率)。lcms(254nm)： rt＝3.037min,100％纯度,esi( )[m h]

＝703.2
[0706]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ12.00(s,1h),8.99(s,1h),8.51(t, j＝5.9hz,1h),7.41(d,j＝7.8hz,1h),7.31(dd,j＝9.3,2.9hz,1h), 7.01(d,j＝1.7hz,1h),6.96(dd,j＝7.7,1.6hz,1h),5.19(s,1h),4.66
ꢀ–
4.57(m,1h),4.53(t,j＝8.2hz,1h),4.36(s,1h),4.25(qd,j＝16.7, 5.9hz,2h),4.05(t,j＝6.3hz,2h),3.73
–
3.56(m,2h),2.47(s,3h), 2.19(t,j＝7.3hz,2h),2.15
–
2.09(m,1h),1.93(ddd,j＝13.0,8.9,4.5 hz,1h),1.76(p,j＝6.4hz,2h),1.57
–
1.38(m,6h),1.38
–
1.15(m, 12h),0.97(s,9h)。
[0707]
中间体17：3-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3-甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}丙酸
[0708][0709]
步骤1：3-(2-溴乙氧基)丙酸叔丁酯
[0710]
在50ml烧瓶中制备3-(2-羟基乙氧基)丙酸叔丁酯(3.0g,16 mmol,1eq)和四溴化碳(7.8g,24mmol,1.5eq)的二氯甲烷(15ml)溶液，并冷却至0℃。在剧烈搅拌下历时30分钟经由粉末漏斗分批添加三苯基膦(6.2g,24mmol,1.5eq)。加入膦后，无色溶液变成淡棕色，并在室温下再搅拌2小时。将混合物浓缩并快速加入到搅拌的己烷 (50ml)中。过滤白色沉淀，浓缩剩余溶液，通过fc(洗脱的dcm/meoh
–
9/1)纯化所获得的残余物，得到4.1g标题化合
物(收率 62％)。
[0711]
步骤2：3-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}丙酸叔丁酯
[0712]
向(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]
‑ꢀ
4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺(1.5g,2.82mmol,1.0eq)的dmf(18.77ml,0.15m)溶液中加入 cs2co3(1.376g,4.22mmol,1.5eq)和3-(2-溴乙氧基)丙酸叔丁酯(2.18 g,3.94mmol,1.4eq)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并用etoac(3x)萃取，将有机层经na2so4干燥，浓缩，将所得残余物通过fc纯化，用dcm/meoh-9/1洗脱，得到1.8g标题化合物，为淡黄色的油(定量收率)。uplc(12min,254nm)： rt＝6.25min,100％纯度,esi[m
h
] ＝705.6
[0713]
步骤3：3-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3-甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}丙酸
[0714]
在0℃下向3-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基
ꢀ‑
1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}丙酸叔丁酯(1.8g,2.64mmol,1eq)的 dcm(17.6ml,0.15m)溶液中滴加tfa(13.2ml,0.2m)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，将残余物用50mlnh4oh水溶液稀释(直至ph＝11)，在超声浴中放置0.5小时，然后仅通过搅拌放置1小时。将所得浆液浓缩并通过rf纯化两次：第一次，用acn/h2o洗脱，得到0.3g标题化合物；第二次，用acn/h2o(0.1％甲酸)洗脱，得到1g标题化合物。
[0715]
在用nh4oh中和之后，产物以铵盐形式获得，其在第二次纯化期间用甲酸释放。合并所有的量，得到1.3g标题化合物(收率76％)。 lcms(254nm)：rt＝2.29min,99％纯度,esi( )[m h]

＝649.1.
[0716]1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ8.70(s,1h),7.37(d,j＝7.8hz,2h), 7.09
–
7.03(m,1h),6.99(dd,j＝7.7,1.6hz,1h),6.91(d,j＝1.6hz, 1h),4.76(t,j＝8.1hz,1h),4.64
–
4.51(m,3h),4.41(dd,j＝14.3,5.2 hz,1h),4.20(t,j＝4.2hz,2h),4.03(d,j＝11.3hz,1h),3.89(td,j＝ 8.6,7.8,4.4hz,4h),3.77(dd,j＝11.3,3.7hz,1h),2.66(ddd,j＝19.7, 14.9,5.1hz,2h),2.54(s,3h),2.33
–
2.14(m,2h),1.41
–
1.23(m,4h), 1.03(s,9h)。
[0717]
中间体18：1-(2-(((2s,4r)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰氨基)甲基)-5-(4-甲基噻唑-5-基)苯氧基)乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸
[0718]
以与中间体17类似的方式，通过在步骤1中用3-(2-羟基乙氧基) 丙酸叔丁酯代替3-{2-[2-(2-溴乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸叔丁酯，制备中间体18，得到标题化合物，为白色固体。lcms(254nm)： rt＝2.27min,96.35％纯度，esi[m h]

＝736.88.
[0719]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.98(s,1h),8.51(t,j＝6.0hz, 1h),7.41(d,j＝7.8hz,1h),7.31(dd,j＝9.2,2.9hz,1h),7.04(d,j＝ 1.7hz,1h),6.97(dd,j＝7.7,1.6hz,1h),5.19(s,1h),4.60(d,j＝9.1 hz,1h),4.51(t,j＝8.2hz,1h),4.35(s,1h),4.28(d,j＝6.1hz,1h), 4.25
–
4.14(m,3h),3.79(dd,j＝5.8,3.4hz,2h),3.66
–
3.46(m,12h), 2.46(s,
3h),2.42(t,j＝6.3hz,2h),2.10(dd,j＝13.0,8.0hz,1h),1.92 (ddd,j＝13.1,9.0,4.4hz,1h),1.49
–
1.28(m,2h),1.21(tq,j＝8.4, 4.6,3.8hz,2h),0.96(s,9h)。
[0720]
c.用于将hpk1结合物和lhm构建块偶联的通用方案
[0721]
以下通用方法a-f示例性说明了可通过其偶联构建块以提供通式(i)或通式(ii)化合物以及它们各自的子结构的键形成。
[0722]
通用程序a：snar与束(harness)的连接
[0723][0724]
如下制备取代的苯胺。向伯胺或仲胺(1eq.)和dipea(4.0eq.)的 nmp(0.4m)溶液中加入芳基氟化物(1eq.)。将反应混合物在120℃搅拌4h。此时，lcms显示失去起始材料。将反应混合物冷却至室温并加入水(nmp体积的一半)。将该粗制混合物直接注射到反相isco 上并经由色谱法c纯化以提供所需产物。
[0725]
通用程序b：boc脱保护(以及叔丁酯水解)
[0726][0727]
按照通用程序将氨基甲酸叔丁酯脱保护以产生伯胺和仲胺；按照通用程序将叔丁酯脱保护以产生羧酸：向搅拌的氨基甲酸叔丁酯 (或叔丁酯)底物(1eq.)的dcm(0.23m)室温溶液中滴加hcl(4n的二噁烷溶液，18eq.)。将反应混合物搅拌16小时，然后浓缩至干。然后使用所得产物而无需进一步纯化，除非另有说明。
[0728]
通用程序c：酯皂化
[0729][0730]
根据以下通用程序进行甲酯和乙酯皂化反应：在室温下将酯起始材料(1eq.)溶于thf(0.25m)中。向该溶液中加入氢氧化锂(水溶液， 0.55m,1.1eq.)，并将所得混合物剧烈搅拌过夜。此时lcms显示失去起始材料，并且将反应浓缩至干以提供锂盐形式的产物。
[0731]
通用程序d：还原胺化
[0732][0733]
向醛(1eq.)和胺(1eq.)的dcm(0.25m)溶液中加入stab(3eq.)，并将反应混合物在室温下搅拌30分钟至24小时，直至lcms显示转化为所需产物。通过添加饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应混合物。将反应混合物用dcm萃取(2x)，并将合并的有机物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。
[0734]
通用程序e：胺烷基化
[0735][0736]
向搅拌的胺的dmf(0.2m)溶液中加入碳酸钾(2eq.)，然后滴加烷基溴(1.1eq.,在0.57m dmf溶液中)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用dcm稀释，并将有机相用水(2x)、盐水(1x) 洗涤，并经硫酸钠干燥，然后过滤并真空浓缩。通过色谱法b纯化粗残余物，得到所需产物。
[0737]
通用程序f：bop酰胺偶联
[0738][0739]
向酸的dmf(0.1m)溶液中加入胺(1eq.)和dipea(5eq.)。最后加入bop(1.3eq.)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用dmf稀释，使用注射器式过滤器过滤，并通过rp-hplc 进一步纯化，得到所需产物。
[0740]
定义
[0741]
以下描述阐述了示例性方法、参数等。然而，应当认识到，这种描述并不旨在限制本公开内容的范围，而是作为示例性实施方案的描述来提供。
[0742]
不在两个字母或符号之间的破折号(
“‑”
)用于表示取代基的连接点。例如，-c(o)nh2通过碳原子连接。化学基团前端或末端的破折号是方便的；化学基团可以用或不用一个或多个破折号来描述，而不会失去它们的普通含义。通过结构中的线画出的波浪线表示基团的连接点。除非化学上或结构上需要，否则化学基团的书写或命名顺序不指示或暗示方向性。
[0743]
前缀“c
u-v”表示以下基团具有u至v个碳原子。例如，“c
1-6
烷基”表示烷基具有1至6个碳原子。
[0744]
本文中提及的“约”一个值或参数包括(并描述)涉及该值或参数本身的实施方案。在某些实施方案中，术语“约”包括指示量
±
10％。在其它实施方案中，术语“约”包括指示量
±
5％。在某些其它实施方案中，术语“约”包括指示量
±
1％。此外，术语“约x”包括“x”的描述。此外，单数形式“一个/一种(a)”和“该”包括复数指代物，除非上下文另有明确规定。因此，例如，提及“化合物”包括多种这样的化合物，并且提及“测定”包括提及本领域技术人员已知的一种或多种测定及其等同物。
[0745]“烷基”是指不含不饱和度的或支化的饱和烃链。如本文所用，烷基具有1至20个碳原子(即，c
1-20
烷基)、1至12个碳原子(即，c
1-12
烷基)、1至8个碳原子(即，c
1-8
烷基)、1至6个碳原子(即，c
1-6
烷基)或1至4个碳原子(即，c
1-4
烷基)。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、2
‑ꢀ
戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基和3-甲基戊基。当具有特定数目碳的烷基残基由化学名称命名或由分子式鉴定时，可以涵盖具有所述数目碳的所有位置异构体；因此，例如，“丁基”包括正丁基(即，-(ch2)3ch3)、仲丁基(即，-ch(ch3)ch2ch3)、异丁基 (即，
‑‑
ch2ch(ch3)2)和叔丁基(即，-c(ch3)3)；“丙基”包括正丙基 (即，
‑‑
(ch2)2ch3))和异丙基(即，-ch(ch3)2)。
[0746]“亚烷基”或“亚烷基链”是指将分子的其余部分连接至基团，不含不饱和度并且具
有1至20个碳原子，或更典型地1至12个碳原子(c
1-12
亚烷基)，或1至8个碳原子(c
1-8
亚烷基)，或1至3个碳原子(c
1-3
亚烷基)的非支化或支化的二价烃链，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、正亚丁基等。亚烷基链可以通过链内的一个碳或通过链内的任何两个碳与分子的其余部分和基团连接。
[0747]“烯基”是指含有至少一个碳-碳双键并且具有2至20个碳原子 (即，c
2-20
烯基)，或更典型地2至12个碳原子(即，c
2-12
烯基)，2至 8个碳原子(即，c
2-8
烯基)，2至6个碳原子(即，c
2-6
烯基)或2至4 个碳原子(即，c
2-4
烯基)的烷基。烯基的实例包括乙烯基、丙烯基、丁二烯基(包括1,2-丁二烯基和1,3-丁二烯基)。
[0748]“亚烯基”和“亚烯基链”是指将分子的其余部分连接到基团，含有至少一个双键并且具有2至20个碳原子，或更典型地2至12个碳原子，或2至8个碳原子的未支化或支化的二价烃链，例如，亚乙烯基、亚丙烯基、亚正丁烯基等。亚烯基链通过单键连接到分子的其余部分以及通过双键或单键连接到基团。亚烯基链与分子的其余部分以及与基团的连接点可以通过链内的一个碳或任何两个碳。
[0749]“炔基”是指含有至少一个碳-碳三键并且具有2至20个碳原子 (即，c
2-20
炔基)，或更典型地2至12个碳原子(即，c
2-12
炔基)，或更典型地2至8个碳原子(即，c
2-8
炔基)，2至6个碳原子(即，c
2-6
炔基)或2至4个碳原子(即c
2-4
炔基)的烷基。术语“炔基”还包括具有一个三键和一个双键的那些基团。
[0750]“亚炔基”和“亚炔基链”是指将分子的其余部分连接至基团，含有至少一个三键并且具有2至20个碳原子，或更典型地2至12个碳原子，或2至8个碳原子的非支化或支化的二价烃链。亚炔基链通过单键与分子的其余部分连接，以及通过双键或单键与基团连接。亚炔基链与分子的其余部分以及与基团的连接点可以通过链内的一个碳或任何两个碳。
[0751]“烷氧基”是指基团“烷基-o
‑”
。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基和1,2-二甲基丁氧基。
[0752]“卤代烷氧基”是指如上所定义的烷氧基，其中一个或多个氢原子被卤素替代。
[0753]“烷硫基”是指基团“烷基-s
‑”
。
[0754]“氨基”是指基团-nr
yry
，其中每个ry独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、杂环基、环烷基或杂芳基，其中的每一个任选地被取代，如本文所定义。
[0755]“芳基”是指具有单个环(例如单环)或多个环(例如双环或三环)的芳族碳环基团，包括稠合系统。如本文所用，芳基具有6至20个环碳原子(即，c
6-20
芳基)、6至15个碳环原子(即，c
6-15
芳基)或6至10 个碳环原子(即，c
6-10
芳基)。芳基的实例包括苯基、萘基、芴基和蒽基。然而，芳基不涵盖下文定义的杂芳基或以任何方式与其重叠。如果一个或多个芳基与杂芳基稠合，则所得环系为杂芳基。如果一个或多个芳基与杂环基稠合，则所得环系为杂环基。
[0756]“氰基”是指基团-cn。
[0757]“酮基”或“氧代”是指基团＝o。
[0758]“氨基甲酰基”是指“o-氨基甲酰基”基团，其是指基团o
‑ꢀ
c(o)nr
yrz
；以及“n-氨基甲酰基”基团，其是指基团-nryc(o)orz，其中ry和rz独立地选自氢、烷基、芳基、卤代烷基或杂芳基；其中的每一个可以任选地被取代。
[0759]“羧基”或“羧酸”是指-c(o)oh。
[0760]“酯”是指-oc(o)r和-c(o)or，其中r是取代基；其中的每一个可以任选地被取代，如本文所定义。
[0761]“环烷基”是指具有单个环或多个环(包括稠合、桥接和螺环系统) 的饱和或部分不饱和的环烷基。术语“环烷基”包括环烯基(即，具有至少一个双键的环状基团)。如本文所用，环烷基具有3至15个环碳原子(即，c
3-20
环烷基)、3至12个环碳原子(即，c
3-12
环烷基)、3至 10个环碳原子(即，c
3-10
环烷基)、3至8个环碳原子(即，c
3-8
环烷基) 或3至6个环碳原子(即，c
3-6
环烷基)。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和二环[2.2.2]辛-1-基。环烷基可以通过单个环原子(例如作为取代基)或通过两个环原子(例如作为接头)连接到分子的其余部分。
[0762]“乙二醇单元”是指具有-ch2ch2o-结构的二价单体，其可以重复并延伸成更长的链。接头片段可以具有多达12个乙二醇单元，或更典型地多达6个乙二醇单元。
[0763]“丙二醇单元”是指具有-ch(ch3)-ch2o-结构的二价单体，其可以重复并延伸成更长的链。接头片段可以具有多达12个丙二醇单元，或更典型地多达6个丙二醇单元。
[0764]“卤素”或“卤代”包括氟、氯、溴和碘。
[0765]“卤代烷基”是指如上所定义的未支化或支化的烷基，其中一个或多个氢原子被卤素替代。例如，当残基被一个以上的卤素取代时，可以通过使用对应于所连接的卤素部分的数目的前缀来提及。二卤代烷基和三卤代烷基是指被两个(“二”)或三个(“三”)卤素基团取代的烷基，其可以是但不一定是相同的卤素。卤代烷基的实例包括二氟甲基(-chf2)和三氟甲基(-cf3)。
[0766]“杂烷基”是指其中一个或多个碳原子(和任何相关的氢原子)各自独立地被相同或不同的杂原子如n、o、s等替代的烷基。术语“杂烷基”包括具有碳和杂原子的未支化或支化的饱和链。举例来说，1、 2或3个碳原子可以独立地被相同或不同的杂原子替代。杂原子基团包括但不限于-n(r)-、-o-、-s-、-s(o)-、-s(o)
2-等，其中r为h、烷基、芳基、环烷基、杂烷基、杂芳基或杂环基，其中的每一个可以任选地被取代。杂烷基的实例包括-och3、-ch2och3、-sch3、
‑ꢀ
ch2sch3、-nrch3和-ch2nrch3，其中r是氢、烷基、芳基、芳基烷基、杂烷基或杂芳基，其中的每一个可以任选地被取代。如本文所用，杂烷基包括1至10个碳原子、1至8个碳原子或1至4个碳原子；以及1-3个杂原子、1-2个杂原子或1个杂原子。
[0767]“杂芳基”是指具有单个环、多个环或多个稠合环的5-15元或更典型地5-12元芳族基团，其中1-3个环杂原子独立地选自氮、氧和硫。如本文所用，杂芳基包括3至12个环碳原子(即，c
3-12
杂芳基) 或3至8个碳环原子(即，c
3-8
杂芳基)；以及1至5个杂原子、1至4 个杂原子、1至3个环杂原子、1至2个环杂原子或1个环杂原子，其独立地选自氮、氧和硫。杂芳基的实例包括嘧啶基、嘌呤基、吡啶基、哒嗪基，苯并噻唑基和吡唑基。稠合杂芳基环的实例包括但不限于苯并[d]噻唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并[d]咪唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶基和咪唑并[1,5-a]吡啶基，其中杂芳基可经由稠合系统的任一环结合。具有含有至少一个杂原子的单个或多个稠合环的任何芳环被认为是杂芳基，无论与分子的其余部分的连接如何(即，通过稠合环中的任一个)。杂芳基不涵盖如上所定义的芳基或与其重叠。杂芳基可以通过单个环原子(例如作为取代基) 或通过两个环原子(例如作为接头)连接到分子的其余部分。
[0768]“杂环基”是指具有1-3个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3
‑ꢀ
15元，或更典型
地5-12元饱和或不饱和环状烷基。术语“杂环基”包括杂环烯基(即，具有至少一个双键的杂环基)、双环杂环基、桥接杂环基、稠合杂环基和螺杂环基。杂环基可以是单环或多环，其中多环可以是稠合的、桥接的或螺环的。含有至少一个杂原子的任何非芳族环被认为是杂环基，无论连接如何(即，可以通过碳原子或杂原子结合)。此外，术语杂环基旨在涵盖含有至少一个杂原子的任何非芳族环，该环可以与芳基或杂芳基环稠合，而不管与分子的其余部分的连接如何。如本文所用，杂环基具有3至15个环原子(例如，3
‑ꢀ
15元杂环基、3-12元杂环基、4-10元杂环基、4-8元杂环基或4-6元杂环基；具有1至5个环杂原子、1至4个环杂原子、1至3个环杂原子、1至2个环杂原子、或1个环杂原子，其独立地选自氮、硫或氧。杂环基可以含有一个或多个氧代和/或硫代基团。杂环基的实例包括吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、氧杂环丁烷基、二氧戊环基、氮杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吗啉基、硫代吗啉基、4-7元磺内酰胺、 4-7元环状氨基甲酸酯、4-7元环状碳酸酯、4-7元环状硫化物和吗啉基。如本文所用，杂环基可包括桥接结构(即，“桥接杂环基”)，其中在杂环基的两个非相邻原子处连接的4-10元环部分具有至少一个杂原子，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫。如本文所用，桥接的杂环基包括双环和三环环系。本文还使用的术语“螺杂环基”是指其中3-10元杂环基具有一个或多个另外的环的环系统，其中所述一个或多个另外的环是3-10元环烷基或3-10元杂环基，其中所述一个或多个另外的环的单个原子也是3-10元杂环基的原子。螺杂环基环的实例包括双环和三环环系统，如2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷基、2
‑ꢀ
氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛烷基和6-氧杂-1-氮杂螺[3.3]庚烷基。稠合杂环基环的实例包括但不限于1,2,3,4-四氢异喹啉基、1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉基、1-氧代-1,2-二氢异喹啉基、4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶基、二氢吲哚基和异二氢吲哚基，其中杂环基可经由稠合系统的任一环结合。如本文所用，双环杂环基是在两个点处与另一个环基团连接的杂环基，其中另一个环基团本身可以是杂环基团或碳环基团。杂芳基可以通过单个环原子(例如作为取代基)或通过两个环原子(例如作为接头)连接到分子的其余部分。
[0769]“稠合的”是指与相邻环连接并共用形成共价键的两个相邻环原子的环。
[0770]“桥接的”是指其中环上的非相邻原子通过二价取代基(如亚烷基、含有一个或两个杂原子的亚烷基或单个杂原子)连接的环稠合。奎宁环基和金刚烷基是桥环系统的实例。
[0771]“螺环”是指在同一碳原子处通过两个键连接的环取代基。螺环基团的实例包括1,1-二乙基环戊烷、二甲基-二氧戊环和4-苄基-4-甲基哌啶，其中环戊烷和哌啶分别是螺环取代基。
[0772]“羟基(hydroxy)”或“羟基(hydroxyl)”是指基团-oh。“羟基烷基”是指如上所定义的未分支的或分支的烷基，其中一个或多个氢原子被羟基替代。
[0773]“硝基”是指基团-no2。
[0774]“亚氨基”是指含有c＝n双键的基团，如c＝n-ry或＝n-c(o)ry，其中ry选自氢、烷基、芳基、氰基、卤代烷基或杂芳基；其中的每一个可以任选地被取代。亚氨基可以是通过分别在碳和氮处与其余分子连接的接头片段。
[0775]“磺酰基”是指基团-s(o)2r，其中r是取代基或所定义的基团。
[0776]“烷基磺酰基”是指基团-s(o)2r，其中r是取代基或所定义的基团。
[0777]“烷基亚磺酰基”是指基团-s(o)r，其中r是取代基或所定义的基团。
[0778]“硫氰酸盐
”‑
scn。
[0779]“硫醇”是指基团-sr，其中r是取代基或所定义的基团。
[0780]“硫代”或“硫酮”是指基团(＝s)或(s)。
[0781]
可以使用某些常用的替代化学名称。例如，二价基团如二价“烷基”基团、二价“芳基”基团等也可以分别被称为“亚烷基(alkylene)”基团或“亚烷基(alkylenyl)”基团，“亚芳基(arylene)”基团或“亚芳基(arylenyl)”基团。此外，除非另有明确说明，否则当基团的组合在本文中被称为一个部分(例如，芳基烷基)时，最后提及的基团含有这样的原子，该部分通过所述原子与分子的其余部分连接。
[0782]
术语“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括所述事件或情况发生的情况和所述事件或情况不发生的情况。此外，术语“任选取代的”是指指定原子或基团上的任何一个或多个氢原子可以被除氢以外的部分替代或可以不被除氢以外的部分替代。“任选取代的”可以是零至可能取代的最大数目，并且每次出现是独立的。当使用术语“取代的”时，则需要在所示取代基的可取代的氢原子上进行取代。任选的取代可以与 (必需的)取代相同或不同。
[0783]
当部分是“任选取代的”并且提及通用术语时，如任何“烷基”、“烯基”、“炔基”、“卤代烷基”、“环烷基”、“芳基”或“杂芳基”，则该通用术语可以是指任何先前具体列举的术语，如(c
1-3
烷基)、(c
4-6
烷基)、-o(c
1-4
烷基)、(c
3-10
环烷基),o-(c
3-10
环烷基)等。例如，“任何芳基”包括“芳基”和
“‑
o(芳基)”以及芳基的实例，如苯基或萘基等。此外，术语“任何杂环基”包括术语“杂环基”和o-(杂环基)，以及杂环基的实例，如氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、吗啉代、哌啶基等。以相同的方式，术语“任何杂芳基”包括术语“杂芳基”和“o-(杂芳基)”，以及具体的杂芳基，如吡啶等。
[0784]
一些通式(i)或通式(ii)的化合物可以作为“立体异构体”或立体异构体的混合物存在。立体异构体是指由通过相同键键合的相同原子组成但具有不可互换的不同三维结构的化合物。本公开内容的化合物或其药学上可接受的盐可以含有一个或多个不对称中心并且因此可以产生对映异构体(其分子是彼此不可重叠的镜像的两种立体异构体)、非对映异构体和可以根据绝对立体化学定义为(r)-或(s)-的其它立体异构形式。本公开内容意在包括所有这种可能的异构体以及它们的rac混合物(即等量的(r)和(s)对映异构体)和光学纯形式。光学活性的( )和(-)、(r)-和(s)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或者使用常规技术，如使用手性柱的hplc拆分。
[0785]
本公开内容还包括通式(i)或通式(ii)化合物的“氘代类似物”，其中与碳原子连接的1至n个氢被氘替代，其中n是分子中氢的数目。这样的化合物表现出增加的代谢抗性，因此当施用至哺乳动物，特别是人时，可用于增加通式(i)或通式(ii)的任何化合物的半衰期。参见，例如，foster,“deuterium isotope effects in studies of drugmetabolism,”trends pharmacol.sci.5(12):524-527(1984)。这样的化合物通过本领域熟知的手段合成，例如通过使用其中一个或多个氢已被氘替代的起始材料。
[0786]
本公开内容的氘标记的或取代的治疗化合物可以具有改善的与分布、代谢和排泄(adme)有关的dmpk(药物代谢和药代动力学)性质。用较重的同位素如氘取代可提供由更大的代谢稳定性引起的某些治疗优势，例如增加的体内半衰期、降低的剂量需求和/或治疗指数的改善。18f标记的化合物可用于pet或spect研究。本公开内容的同位素标记的化合物通常可以通过进行在方案中或在以下描述的实施例和制备中公开的程序，通过用容易获得的
同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来制备。应当理解，在本上下文中的氘被认为是通式(i)或通式(ii)化合物中的取代基。
[0787]
这种较重的同位素(特别是氘)的浓度可以通过同位素富集因子来定义。在本公开内容的化合物中，未具体指定为特定同位素的任何原子意在代表该原子的任何稳定同位素。除非另有说明，否则当位置具体指定为“h”或“氢”时，该位置应理解为具有其天然丰度同位素组成的氢。因此，在本公开内容的化合物中，特别指定为氘(d)的任何原子意在表示氘。
[0788]
在许多情况下，本公开内容的化合物能够通过存在氨基和/或羧基或与其类似的基团而形成酸式盐和/或碱式盐。
[0789]
还提供了本文所述的化合物的药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。“药学上可接受的”或“生理学上可接受的”是指可用于制备适于兽医或人类药物用途的药物组合物的化合物、盐、组合物、剂型和其它材料。
[0790]
给定化合物的术语“药学上可接受的盐”是指保留给定化合物的生物有效性和性质，并且不是生物学上或其它方面不合需要的盐。“药学上可接受的盐”或“生理学上可接受的盐”包括例如无机酸的盐和有机酸的盐。此外，如果本文所述的化合物作为酸加成盐获得，则游离碱可以通过碱化酸式盐的溶液获得。相反地，如果产物是游离碱，则加成盐，特别是药学上可接受的加成盐，可以根据由碱化合物制备酸加成盐的常规方法，通过将游离碱溶解在合适的有机溶剂中并用酸处理溶液来制备。本领域技术人员将认识到可用于制备无毒的药学上可接受的加成盐的各种合成方法。药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸制备。衍生自无机酸的盐包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。衍生自有机酸的盐包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。同样，药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱制备。衍生自无机碱的盐包括(仅作为实例)钠、钾、锂、铵、钙和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺的盐，如烷基胺(即nh2(烷基))、二烷基胺(即hn(烷基)2)、三烷基胺 (即n(烷基)3)、取代的烷基胺(即nh2(取代的烷基))、二(取代的烷基) 胺(即hn(取代的烷基)2)、三(取代的烷基)胺(即，n(取代的烷基)3)、烯基胺(即，nh2(烯基))、二烯基胺(即，hn(烯基)2)、三烯基胺(即， n(烯基)3)、取代的烯基胺(即，nh2(取代的烯基))、二(取代的烯基) 胺(即，hn(取代的烯基)2)、三(取代的烯基)胺(即，n(取代的烯基)3)、单、二或三环烷基胺(即，nh2(环烷基)、hn(环烷基)2、n(环烷基)3)、单、二或三芳基胺(即，nh2(芳基)、hn(芳基)2、n(芳基)3)或混合胺等。合适的胺的具体实例包括，仅作为实例，异丙胺、三甲胺、二乙胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、哌嗪、哌啶、吗啉、n-乙基哌啶等。
[0791]
术语“取代的”意指指定原子或基团上的任何一个或多个氢原子被除氢以外的一个或多个取代基替代，条件是不超过指定原子的正常化合价。一个或多个取代基包括但不限于烷基、烯基、炔基、烷氧基、酰基、氨基、酰氨基、脒基、芳基、叠氮基、氨基甲酰基、羧基、羧基酯、氰基、胍基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂烷基、杂芳基、杂环基、羟基、肼基、亚氨基、氧代、硝基、烷基亚磺酰基、磺酸、烷基磺酰基、硫氰酸酯、硫醇、硫酮或其组合。通过用无限附加的其它取代基限定取代基而获得的聚合物或类似的不确定结构(例如，具有取代的烷基的取代的芳基，所述取代的烷基本身被取代的芳基取代，所述取代的芳基进一步被取
代的杂烷基取代等)不旨在包括在本文中。除非另有说明，否则本文所述的化合物中的连续取代的最大数目为3。例如，用两个其它取代的芳基连续取代取代的芳基限于((取代的芳基)取代的芳基)取代的芳基。类似地，上述定义不旨在包括不允许的取代模式(例如，被5个氟取代的甲基或具有两个相邻氧环原子的杂芳基)。这种不允许的取代模式是本领域技术人员熟知的。当用于修饰化学基团时，术语“取代的”可以描述本文定义的其它化学基团。除非另有说明，否则当基团被描述为任选取代的时，该基团的任何取代基本身是未取代的。例如，在一些实施方案中，术语“取代的烷基”是指具有一个或多个取代基的烷基，所述取代基包括羟基、卤代、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。在其它实施方案中，一个或多个取代基可以进一步被卤代、烷基、卤代烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基取代，其中的每一个是取代的。在其它实施方案中，取代基可以进一步被卤代、烷基、卤代烷基、烷氧基、羟基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基取代，其中的每一个是未取代的。本领域技术人员将认识到，应当选择本文通式化合物的取代基和其它部分，以便提供足够稳定的化合物，从而提供可配制成可接受的稳定药物组合物的药学上有用的化合物。具有这种稳定性的化合物被认为落入本发明的范围内。本领域技术人员应理解，上述定义和取代基的任何组合不应产生不可操作的物质或化合物。
[0792]
如本文所用，“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。这种介质和试剂用于药物活性物质的用途是本领域熟知的。除了在任何常规介质或试剂与活性成分不相容的情况下，预期其在治疗组合物中的用途。补充的活性成分也可以掺入到组合物中。
[0793]“溶剂化物”通过溶剂和化合物的相互作用形成。还提供了本文所述的化合物的盐的溶剂化物。还提供了本文所述化合物的水合物。
[0794]
靶向的hpk1降解
[0795]
本公开的化合物通过基于细胞的分析证明了降解hpk1。
[0796]
使用hibit hpk1 jurkat细胞系以稳健的人细胞高通量形式评价 hpk1的总蛋白水平。用hpk1 ctm处理后剩余的hpk1水平被报道为与媒介物处理的对照相比在24小时实现的d
max
(最大降解)。如生物学实施例中进一步描述的，结果表明hpk1 ctm能够降解hpk1。这些降低不是通过并行的活力评估(ctg)测量的细胞毒性的结果。还参见表1。
[0797]
通式(i)和(ii)的双功能化合物的药物组合物和用途
[0798]
通式(i)或通式(ii)的双功能化合物被证明降解hpk1，因此可用于治疗涉及hpk1功能(例如信号传导或支架)的疾病适应症或病症。
[0799]
各种实施方案提供了通式(i)或通式(ii)化合物或任何一种子结构或实施例1-97的具体化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物。
[0800]
其它实施方案提供了用于治疗与增加的造血祖细胞激酶1(hpk1) 活性相关的疾病或病症的方法，用于增加t细胞活化的方法，用于治疗癌症的方法，用于抑制癌细胞的生长或增殖的方法，用于治疗或预防乙型肝炎病毒(hbv)感染的方法，或用于治疗或预防人免疫缺陷病毒(hiv)感染的方法，所述方法包括向有需要的个体施用治疗有效量的通式(i)或通式(ii)化合物、任何一种子结构或实施例1-97的化合物。
[0801]
在更具体的实施方案中，癌症选自膀胱癌、乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌、头颈鳞状细胞癌、霍奇金淋巴瘤、merkel细胞癌、间皮瘤、黑素瘤、非小细胞肺癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、
前列腺癌、肾细胞癌、小细胞肺癌、移行细胞癌和尿路上皮癌。
[0802]
在一些实施方案中，通式(i)或通式(ii)化合物或任何一种子结构或实施例1-97的化合物可以与治疗有效量的一种或多种另外的治疗剂或其药学上可接受的盐施用。
[0803]
在其它实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自：诱导性t细胞共刺激分子(icos)激动剂、细胞毒性t淋巴细胞抗原 4(ctla-4)封闭抗体、pd1和/或pd-l1抑制剂、分化簇47(cd47)抑制剂、ox40激动剂、gitr激动剂、cd27激动剂、cd28激动剂、 cd40激动剂、cd137激动剂、toll样受体8(tlr8)激动剂、t细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域-3(tim-3)抑制剂、淋巴细胞活化基因 3(lag-3)抑制剂、ceacam1抑制剂、具有ig和itim结构域的t 细胞免疫受体(tigit)抑制剂、t细胞活化的含有v结构域免疫球蛋白(ig)抑制因子(vista)抑制剂、抗杀伤igg样受体(kir)抑制剂、 sting激动剂、c-x-c趋化因子受体4型(cxcr-4)抑制剂、b7-h3 抑制剂、cd73抑制剂、抑制性rna、il2/15/17融合蛋白、 mknk1/2抑制剂、jak抑制剂和pi3k抑制剂，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0804]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自：利妥昔单抗，多柔比星，吉西他滨，纳武单抗，派姆单抗、匹地利珠单抗、pdr001、tsr-001、阿替利珠单抗，德瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、匹地利珠单抗、tsr-042、bms-986016、鲁索利替尼、n-(氰基甲基)-4-[2-(4-吗啉代苯胺基)嘧啶-4-基]苯甲酰胺、xl147、 bkm120、gdc-0941、bay80-6946、px-866、ch5132799、xl756、 bez235和gdc-0980、渥曼青霉素、ly294002、tgr-1202、amg
‑ꢀ
319、gsk2269557、x-339、x-414、rp5090、kar4141、xl499、 oxy111a、ipi-145、ipi-443、gsk2636771、bay 10824391、布帕尼西、byl719、rg7604、mln1117、wx-037、aezs-129、pa799、 zstk474、as252424、tgx221、tg100115、ic87114、ipi-549、 incb050465、(s)-2-(1-((9h-嘌呤-6-基)氨基)丙基)-5-氟-3-苯基喹唑啉-4(3h)-酮，(s)-2-(1-((9h-嘌呤-6-基)氨基)乙基)-6-氟-3-苯基喹唑啉
ꢀ‑
4(3h)-酮，(s)-2-(1-((9h-嘌呤-6-基)氨基)乙基)-3-(2,6-二氟苯基)喹唑啉-4(3h)-酮，(s)-4-氨基-6-((1-(5-氯-4-氧代-3-苯基-3,4-二氢喹唑啉
‑ꢀ
2-基)乙基)氨基)嘧啶-5-甲腈和伊匹单抗，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0805]
在更具体的实施方案中，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自艾代拉里斯，替拉鲁替尼，莫洛替尼和entospletinib，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0806]
在其它实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自hbv联合药物、hbv疫苗、hbv dna聚合酶抑制剂、免疫调节剂、toll样受体(tlr)调节剂、干扰素α受体配体、透明质酸酶抑制剂、乙型肝炎表面抗原(hbsag)抑制剂、细胞毒性t淋巴细胞相关蛋白4(ipi4)抑制剂、亲环蛋白抑制剂、hbv病毒进入抑制剂、靶向病毒mrna的反义寡核苷酸、短干扰rna(sirna)和ddrnai内切核酸酶调节剂、核糖核苷酸还原酶抑制剂、hbv e抗原抑制剂、共价闭合环状 dna(cccdna)抑制剂、法尼醇x受体激动剂、hbv抗体、ccr2趋化因子拮抗剂、胸腺素激动剂、细胞因子、核蛋白调节剂、维甲酸诱导基因1刺激剂、nod2刺激剂、磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)抑制剂、吲哚胺-2,3-双加氧酶(ido)途径抑制剂、pd-1抑制剂、pd-l1抑制剂、重组胸腺素α-1激动剂、bruton’s酪氨酸激酶(btk)抑制剂、 kdm抑制剂、hbv复制抑制剂、精氨酸酶抑制剂和其它hbv药物，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0807]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自阿德福韦
富马酸替诺福韦二吡呋酯 恩曲他滨富马酸替诺福韦二吡呋酯恩替卡韦拉米夫定替诺福韦艾拉酚胺、替诺福韦、替诺福韦二吡呋酯、富马酸替诺福韦艾拉酚胺、半富马酸替诺福韦艾拉酚胺、替比夫定恩曲他滨聚乙二醇化干扰素α-2b干扰素α 1b干扰素α-2b聚乙二醇化干扰素α
‑ꢀ
2a干扰素α-n1利巴韦林、干扰素β
‑ꢀ
1abioferon、ingaron、inmutag(干扰素)、algeron、罗扰素-a、oligotide、zutectra、shaferon、干扰素α-2b(axxo)、alfaferone、干扰素α-2b、feron、干扰素α2(cj)、bevac、 laferonum、vipeg、blauferon-b、blauferon-a、intermaxα、 realdiron、lanstion、pegaferon、pdferon-b、α干扰素2b、kalferon、 pegnano、feronsure、pegihep、optipeg a、realfa 2b、reliferon、 peg化干扰素α-2b、reaferon-ec、proquiferon、uniferon、urifron、干扰素α-2b、安达芬、shanferon、mor-22、白介素-2(il-2)、重组人白介素-2(shenzhen neptunus)、layfferon、ka shu ning、shangsheng lei tai、因特芬、赛若金、伏康泰、丽蝇抗病毒肽和西莫白介素；或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0808]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自恩替卡韦、阿德福韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯、替诺福韦艾拉酚胺、替诺福韦、替诺福韦二吡呋酯、富马酸替诺福韦艾拉酚胺、半富马酸替诺福韦艾拉酚胺、替比夫定和拉米夫定，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0809]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自替诺福韦艾拉酚胺、富马酸替诺福韦艾拉酚胺和半富马酸替诺福韦艾拉酚胺，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0810]
在其它实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自：用于 hiv的联合药物、用于治疗hiv的其它药物、hiv蛋白酶抑制剂、逆转录酶的hiv非核苷或非核苷酸抑制剂、逆转录酶的hiv核苷或核苷酸抑制剂、hiv整合酶抑制剂、hiv非催化位点(或变构)整合酶抑制剂、hiv进入抑制剂、hiv成熟抑制剂、潜伏期逆转剂、靶向 hiv衣壳的化合物、基于免疫的疗法、磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)抑制剂、hiv抗体、双特异性抗体和“抗体样”治疗蛋白、hiv p17基质蛋白抑制剂、il-13拮抗剂、肽基-脯氨酰基顺-反异构酶a调节剂、蛋白二硫键异构酶抑制剂、补体c5a受体拮抗剂、dna甲基转移酶抑制剂、hiv vif基因调节剂、vif二聚化拮抗剂、hiv-1病毒感染因子抑制剂、tat蛋白抑制剂、hiv-1nef调节剂、hck酪氨酸激酶调节剂、混合谱系激酶-3(mlk-3)抑制剂、hiv-1剪接抑制剂、rev蛋白抑制剂、整联蛋白拮抗剂、核蛋白抑制剂、剪接因子调节剂、含有 comm结构域的蛋白1调节剂、hiv核糖核酸酶h抑制剂、逆细胞周期蛋白调节剂、cdk-9抑制剂、树突状icam-3抓取非整联蛋白1 抑制剂、hiv gag蛋白抑制剂、hiv pol蛋白抑制剂、补体因子h 调节剂、泛素连接酶抑制剂、脱氧胞苷激酶抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂、前蛋白转化酶pc9刺激剂、atp依赖性rna解螺旋酶ddx3x抑制剂、逆转录酶启动复合物抑制剂、g6pd和 nadh-氧化酶抑制剂、药代动力学增强剂、hiv基因疗法和hiv疫苗，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0811]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自 hiv蛋白酶抑制化合物、逆转录酶的hiv非核苷抑制剂、逆转录酶的hiv非核苷酸抑制剂、逆转录酶的hiv核苷抑制剂、逆转录酶的 hiv核苷酸抑制剂、hiv整合酶抑制剂、gp41抑制剂、cxcr4抑制剂、gp120抑制剂、ccr5抑制剂、衣壳聚合抑制剂、药代动力学增强剂和用于治疗hiv的其它药物，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0812]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自4
′‑ꢀ
乙炔基-2-氟-2
′‑
脱氧腺苷、比克替拉韦、硫酸阿巴卡韦、替诺福韦、替诺福韦二吡呋酯、富马酸替诺福韦二吡呋酯、半富马酸替诺福韦二吡呋酯、替诺福韦艾拉酚胺和半富马酸替诺福韦艾拉酚胺，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0813]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自4
′‑ꢀ
乙炔基-2-氟-2
′‑
脱氧腺苷、比克替拉韦、替诺福韦艾拉酚胺、富马酸替诺福韦艾拉酚胺或半富马酸替诺福韦艾拉酚胺，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
[0814]
在更具体的实施方案中，所述一种或多种另外的治疗剂选自4
′‑ꢀ
乙炔基-2-氟-2
′‑
脱氧腺苷、比克替拉韦或其药学上可接受的盐、替诺福韦二吡呋酯、半富马酸替诺福韦二吡呋酯或富马酸替诺福韦二吡呋酯，或前述任一者的药学上可接受的盐，或它们的任意组合。
实施例
[0815]
纯化程序
[0816]
使用诸如sunfire prep c18 obd、xbridge prep obd c18和 xbridge shield rp18 obd的柱，使用诸如(水-0.1％甲酸)/乙腈、(水
‑ꢀ
10mmol/l nh4hco3)/乙腈或(水-10mmol/l nh4hco3)/乙腈的溶剂系统，实施制备规模的hplc。色谱法a是指在硅胶上纯化，通常在预先填充的柱中，用etoac与己烷或石油醚的混合物洗脱；色谱法b 是指用meoh与dcm的混合物洗脱；色谱法c是指使用c18反相硅胶，用乙腈与水的混合物洗脱。在生物学实施例中，绘制的没有立体化学的化合物作为外消旋混合物或非对映异构体混合物进行测试。
[0817]
缩略语
[0818]
实施例中使用的缩略语包括以下：bop(苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐；hatu(n-[(二甲基氨基)-1h-1,2,3-三唑并
‑ꢀ
[4,5-b]吡啶-1-基亚甲基]-n-甲铵六氟磷酸盐n-氧化物)；dmso(二甲基亚砜)；thf(四氢呋喃)；etoac(乙酸乙酯)；acn(乙腈)；et2o(乙醚)；dcm(二氯甲烷)；meoh(甲醇)；etoh(乙醇)；dce(1,2-二氯乙烷)；tea(三甲胺)；dipea(n,n-二异丙基乙胺)；dmf(n,n-二甲基甲酰胺)；nmp(n-甲基-2-吡咯烷酮)；stab(三乙酰氧基硼氢化钠)； dmp(dess
–
martin氧化剂)；tfa(三氟乙酸)；rt或rt(室温)；anh (无水)；eq.或equiv.(当量)。
[0819]
实施例1
[0820]
5-((6-(1'-(10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)氨基)癸酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n
‑ꢀ
异丙基-2-甲基苯甲酰胺
基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n
‑ꢀ
异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[0829][0830]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、8-{[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基}辛酸(5.9mg,wo 2018089736a1)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(5.1mg,32％)；lcms:c
62h74
fn
11
o7理论值1103.6，实测值 1105.3[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.05(s,1h),9.31(d, j＝9.3hz,1h),8.57(s,1h),8.35(s,1h),8.13(d,j＝7.9hz,1h),7.87 (s,1h),7.66(d,j＝7.7hz,1h),7.61(d,j＝8.3hz,1h),7.56(d,j＝ 8.4hz,1h),7.50(d,j＝9.7hz,2h),7.22
–
6.99(m,2h),6.95(s,1h), 6.85(d,j＝8.6hz,1h),5.32
–
5.20(m,1h),5.02(dd,j＝12.6,5.3hz, 1h),4.26
–
4.17(m,1h),4.07
–
3.99(m,1h),3.89
–
3.67(m,6h),3.20
ꢀ–
3.12(m,3h),3.02
–
2.72(m,9h),2.66
–
2.53(m,2h),2.35(s,6h), 2.06
–
1.94(m,1h),1.87
–
1.48(m,22h),1.09(d,j＝6.6hz,6h).
[0831]
实施例4
[0832]
5-((6-(1'-(10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5
‑ꢀ
基)氨基)癸酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n
‑ꢀ
异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[0833][0834]
步骤1：10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5
‑ꢀ
基)氨基)癸酸苄酯的合成。根据通用程序a，使用10-氨基癸酸苄酯 (11.0g,39.7mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(9.86g,35.7mmol)实施反应，随后实施色谱法b以提供标题化合物(4.8g,25％)。
[0835]
步骤2：10-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基}氨基)癸酸的合成。将10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)
氨基)癸酸苄酯(4.8g,9.0mmol)、hcl(2m乙醚溶液，5.0eq)和10％ pd/c(20重量％)在thf(0.03m)中的混合物在氢气球下搅拌2hr。此后，将反应用氮气喷射15min，然后在硅藻土垫上过滤。然后用tfa:dcm(9:1)的混合物洗涤滤饼，减压浓缩滤液，以提供产物(3.3g,83％)。
[0836]
步骤3：5-((6-(1'-(10-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)癸酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)
‑ꢀ
4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、10-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基}氨基)癸酸(6.3mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(3.7mg,23％)；lcms: c
64h78
fn
11
o7理论值1131.6，实测值1132.9[m h]

.
[0837]
实施例5
[0838]
5-((6-(1'-(3-(2-(2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[0839][0840]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、3-{2
‑ꢀ
[2-(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]氨基}乙氧基) 乙氧基]乙氧基}丙酸(6.8mg,wo 2020038415 a1)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(5.0mg,30％)；lcms: c
63h76
fn
11o10
理论值1165.6，实测值1167.3[m h]

.
[0841]
实施例6
[0842]
(2s,4r)-n-(2-((10-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-10-氧代癸基)氧基)
‑ꢀ
4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺
[0843][0844]
步骤1：10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑
‑ꢀ
5-基)苯氧基]癸酸叔丁酯的合成。向(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5
‑ꢀ
基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺(0.8g,1.5mmol,1.0eq)的无水 dmf(15ml,0.1m)溶液中加入cs2co3(0.734g,2.25mmol,1.5eq)和 10-溴癸酸叔丁酯(0.646g,2.10mmol,1.4eq)。将反应混合物用氩气吹扫，密封并在25℃下搅拌16小时。将固体过滤，用etoac(5ml) 洗涤并丢弃。将获得的滤液用水(60ml)稀释并用乙酸乙酯(3x20ml) 萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗品，将其根据色谱法a纯化，得到标题化合物(0.99 g,87％收率)。
[0845]
步骤2：10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑
‑ꢀ
5-基)苯氧基]癸酸的合成。向10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基) 甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5
‑ꢀ
(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]癸酸叔丁酯(0.993g,1.31mmol,1.0eq) 的无水dcm(6.5ml,0.2m)溶液中加入tfa(2.00ml,26.2mmol,20 eq)。将反应在25℃下搅拌3小时。在真空中蒸发反应物，并将所得油状物用氨水(20％,5ml)处理。搅拌1小时导致形成油。将上清液倾析。将该油真空干燥并使用色谱法c纯化(20％至60％乙腈/0.1％甲酸水溶液)，得到标题化合物，为固体(0.703g,76％收率)。
[0846]
步骤3：(2s,4r)-n-(2-((10-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-10-氧代癸基)氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序 f合成标题化合物，使用中间体1(11mg)、10-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2
‑ꢀ
[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]癸酸(11mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(3.6mg,16％)； lcms:c
77h100
f2n
12
o8s理论值1390.7，实测值1393.2[m h]

.
[0847]
实施例7
[0848]
(2s,4r)-1-((s)-2-(7-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨
基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-7-氧代庚酰氨基)
‑ꢀ
3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基) 吡咯烷-2-甲酰胺
[0849][0850]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(11mg)、6
‑ꢀ
{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基} 己酸(8.9mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(5.2mg,28％)；lcms:c
71h91
fn
12
o7s理论值1274.7，实测值 1277.3[m 2h]

.
[0851]
实施例8
[0852]
(2s,4r)-1-((s)-2-(11-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-11-氧代十一烷酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基) 乙基)吡咯烷-2-甲酰胺
[0853][0854]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(11mg)、10
‑ꢀ
{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基} 癸酸(9.5mg,wo 2019207538 a1)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(5.6mg,28％)；lcms:c
75h99
fn
12
o7s理论值1330.7，实测值1333.3[m 2h]

.
[0855]
实施例9
[0856]
(2s,4r)-n-(2-(2-(2-(2-(3-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯
基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1
‑ꢀ
氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺
[0857][0858]
步骤1：3-[2-(2-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基
ꢀ‑
1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸叔丁酯的合成。向 (2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基
‑ꢀ
n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺 (0.7g,1.31mmol,1.0eq)的无水dmf(13ml,0.1m)溶液中加入 cs2co3(0.642g,1.97mmol,1.5eq)和3-{2-[2-(2-溴乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸叔丁酯(0.897g,2.63mmol,2.0eq)。将反应混合物用氩气吹扫并在25℃下搅拌16小时。将固体过滤，用etoac(5ml)洗涤并丢弃。将获得的滤液用水(60ml)稀释并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗品，将其通过快速色谱法纯化，得到标题化合物，为白色泡沫(0.63g,61％收率)。
[0859]
步骤2：3-[2-(2-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基
ꢀ‑
1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸的合成。向3-[2
‑ꢀ
(2-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸叔丁酯(0.63g,1.3mmol,1.0eq)的无水dcm(6.5ml,0.2m)溶液中加入tfa(1.81g,15.9mmol,20eq)。将反应在25℃下搅拌2小时。真空蒸发反应物，并将所得油状物用氨水(20％,5ml)处理。搅拌1小时导致形成油。将上清液倾析，将该油真空干燥并使用色谱法c纯化(20％至60％乙腈/0.1％甲酸水溶液)，得到标题化合物，为白色固体(0.502g,87％收率)。
[0860]
步骤3：(2s,4r)-n-(2-(2-(2-(2-(3-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代
‑ꢀ
1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-3-氧代丙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2
‑ꢀ
(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(15mg)、3
‑ꢀ
[2-(2-{2-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基) 苯氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸(15mg)作为起始材料。通过反相 hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.3mg,29％)；lcms: c
76h98
f2n
12o11
s理论值1424.7，实测值1425.1[m h]

.
[0861]
实施例10
[0862]
(2s,4r)-1-((s)-2-(9-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-9-氧代壬酰氨基)
‑ꢀ
3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基) 吡咯烷-2-甲酰胺
[0863][0864]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(13mg)、9-(((s)
‑ꢀ
1-((2s,4r)-4-羟基-2-(((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-9-氧代壬酸(11mg, wo 2019207538 a1)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(11.9mg,50％)；lcms:c
73h95
fn
12
o7s理论值1302.7，实测值1303.9[m h]

.1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.36(d,j＝9.9 hz,1h),8.98(s,1h),8.70(s,1h),8.41(s,1h),8.37(d,j＝7.8hz,1h), 8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.87(s,1h),7.78(d,j＝9.3hz,1h),7.66(d,j ＝7.9hz,1h),7.60(d,j＝8.2hz,1h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.46
–ꢀ
7.42(m,2h),7.42
–
7.33(m,2h),7.18(d,j＝12.1hz,1h),5.30(t,j＝ 6.7hz,1h),4.92(q,j＝7.1hz,1h),4.54
–
3.32(m,13h),3.04
–
2.71 (m,6h),2.45(s,3h),2.36(s,5h),2.26(dt,j＝14.7,7.5hz,1h),2.12 (dt,j＝14.1,7.2hz,1h),2.01(t,j＝10.5hz,1h),1.91
–
1.20(m,31h), 1.09(d,j＝6.6hz,6h),0.94(s,9h)。
[0865]
实施例11
[0866]
5-((6-(1'-(3-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
‑ꢀ
4-基)氨基)乙氧基)丙酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺 [二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[0867][0868]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(15mg)、3-(2
‑ꢀ
((2-(2,6-二氧代哌
啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙氧基) 丙酸(9mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(15.5mg,70％)；lcms:c
59h68
fn
11
o8理论值1077.5，实测值 1078.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),9.36(d, j＝9.1hz,1h),8.76(s,1h),8.44(s,1h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.86 (s,1h),7.61(dd,j＝26.4,7.9hz,4h),7.48(d,j＝8.8hz,2h),7.17(t, j＝10.9hz,2h),7.04(d,j＝7.0hz,1h),6.61(s,1h),5.36
–
5.29(m, 1h),5.04(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.19(dd,j＝16.6,8.4hz,1h),4.08
ꢀ–
3.97(m,1h),3.94
–
3.81(m,2h),3.74(t,j＝6.7hz,4h),3.64(t,j＝ 5.4hz,2h),3.56
–
3.32(m,4h),3.04
–
2.60(m,6h),2.36(s,3h),2.07
ꢀ–
1.92(m,1h),1.92
–
1.29(m,18h),1.09(d,j＝6.5hz,9h)。
[0869]
实施例12
[0870]
5-((6-(1'-(1-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)氨基)-3,6,9,12,15-五氧杂十八烷-18-酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[0871][0872]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(15mg)、1-((2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)-3,6,9,12,15
‑ꢀ
五氧杂十八烷-18-酸(11mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(19mg,52％)；lcms:c
67h84
fn
11o12
理论值1253.6，实测值1255.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h), 9.35(s,1h),8.65(d,j＝10.3hz,1h),8.39(s,1h),8.13(d,j＝7.8hz, 1h),7.86(s,1h),7.74
–
7.43(m,5h),7.16(dd,j＝21.5,10.4hz,2h), 7.09
–
6.98(m,1h),6.60(s,1h),5.36
–
5.24(m,1h),5.05(dd,j＝12.8, 5.5hz,1h),4.24
–
4.16(m,1h),4.02(dd,j＝13.6,6.8hz,1h),3.91
–ꢀ
3.80(m,4h),3.79
–
3.58(m,8h),3.58
–
3.35(m,16h),3.01
–
2.54(m, 9h),2.36(s,3h),2.06
–
1.98(m,1h),1.88
–
1.31(m,18h),1.09(d,j＝ 6.5hz,6h)。
[0873]
实施例13
[0874]
(2s,4r)-n-(2-((8-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基) 氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-8-氧代辛基)氧基)-4-(4
‑ꢀ
甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺
[0875][0876]
步骤1：8-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑
‑ꢀ
5-基)苯氧基]辛酸叔丁酯的合成。向(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-{[2-羟基-4-(4-甲基-1,3-噻唑-5
‑ꢀ
基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲酰胺(1.4g,2.6mmol,1.0eq)的无水 dmf(17.5ml,0.15m)溶液中加入8-溴辛酸叔丁酯(1.03g,3.68mmol, 1.4eq)和cs2co3(1.29g,3.94mmol,1.5eq)。将反应混合物密封并在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用etoac(20ml)稀释并过滤。将获得的滤液用水(60ml)稀释并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗品，将其通过色谱法b纯化，得到标题化合物，为固体(1.84g, 96％)。
[0877]
步骤2：8-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2-[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑
‑ꢀ
5-基)苯氧基]辛酸的合成。在氩气氛下，向8-[2-({[(2s,4r)-1-[(2s)-2
‑ꢀ
[(1-氟环丙基)甲酰氨基]-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基吡咯烷-2-基]甲酰氨基}甲基)-5-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯氧基]辛酸叔丁酯(1.84g, 2.51mmol,1.0eq)的无水dcm(12.6ml,0.2m)溶液中加入tfa(1.29 g,3.94mmol,1.5eq)。将反应混合物在室温下搅拌2h并蒸发至干。将粗残余物用氨水(10ml)研磨1h。将水相倾析，将该油真空干燥并使用色谱法c纯化(20％至60％乙腈/0.1％甲酸水溶液)，得到标题化合物(1.32g,78％)。
[0878]
步骤3：(2s,4r)-n-(2-((8-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-8-氧代辛基)氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺的合成。
[0879]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(11mg)、8-(2
‑ꢀ
(((2s,4r)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰氨基)甲基)-5-(4-甲基噻唑-5-基)苯氧基)辛酸(11mg) 作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(10.7 mg,53％)；lcms:c
75h96
f2n
12
o8s理论值1362.7，实测值1364.5 [m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.33(d,j＝9.5hz,1h),8.98 (s,1h),8.62(s,1h),8.49(t,j＝6.0hz,1h),8.37(s,1h),8.13(d,j＝ 7.8hz,1h),7.87(s,1h),7.66(d,j＝7.9hz,1h),7.61(d,j＝8.3hz, 1h),7.53
–
7.45(m,2h),7.40(d,j＝7.8hz,1h),7.28(dd,j＝9.2,2.8 hz,1h),7.17(d,j＝12.2hz,1h),7.04
–
6.98(m,1h),6.95(dd,j＝7.8, 1.6hz,1h),5.28(p,j＝
3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4
‑ꢀ
甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序f 合成标题化合物，使用中间体1(12mg)、3-(1-(2-(((s)-1-((2s,4r)-4-羟基-2-(((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲酰基)吡咯烷-1
‑ꢀ
基)-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-2-氧代乙基)哌啶-4-基)丙酸(10 mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.1 mg,28％)；lcms:c
74h96
fn
13
o7s理论值1329.7，实测值1331.5 [m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.49(s,2h),8.99(s,1h), 8.73(d,j＝9.1hz,1h),8.67(s,1h),8.39(d,j＝9.3hz,2h),8.14(d,j ＝7.9hz,1h),7.87(s,1h),7.66(d,j＝7.8hz,1h),7.60(d,j＝8.2hz, 1h),7.54
–
7.41(m,5h),7.41
–
7.27(m,2h),7.18(d,j＝12.2hz,1h), 5.33
–
5.25(m,1h),4.92(t,j＝7.2hz,1h),4.57(d,j＝9.1hz,1h), 4.43(t,j＝8.2hz,1h),4.31(s,1h),4.24
–
4.16(m,1h),4.07
–
3.93(m, 1h),3.67
–
3.28(m,4h),3.08
–
2.71(m,9h),2.47
–
2.32(m,8h),2.08
ꢀ–
1.99(m,1h),1.93
–
1.32(m,33h),1.15
–
1.04(m,6h),0.96(d,j＝ 13.7hz,9h)。
[0888]
实施例15
[0889]
(3r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)
‑ꢀ
4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)-n-(9-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3
‑ꢀ
二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)壬基)哌啶-3-甲酰胺
[0890][0891]
步骤1：5-((9-氨基壬基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮的合成。根据通用程序a，使用9-氨基壬基氨基甲酸叔丁酯(8.2g,32mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(8.0g,29mmol)进行反应。对该反应的产物进行通用程序 b以提供标题化合物(3.25g,23％，经过两个步骤)。
[0892]
步骤2：(3r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)-n-(9-((2-(2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)壬基)哌啶-3-甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体2(12mg)、5-((9-氨基壬基)氨基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(10.6mg,45％)； lcms:c
66h81
fn
12
o8理论值1188.6，实测值1191.2[m 2h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ11.05(s,1h),9.56(s,1h),8.64(s,1h),8.38(s, 1h),8.22
–
8.09(m,1h),8.05(t,j＝5.5hz,1h),7.87(d,j＝7.5hz, 1h),7.71
–
7.44(m,6h),7.17(dd,j＝12.1,6.5hz,2h),6.93(s,2h), 6.84(dt,j＝8.4,2.8hz,2h),5.29(p,j＝6.7hz,1h),5.07
–
4.97(m, 1h),4.20(t,j＝8.3hz,1h),4.03(dq,j
＝13.1,6.6hz,1h),3.93
–
3.45 (m,4h),3.20
–
2.97(m,8h),2.57(d,j＝18.8hz,3h),2.36(s,3h),2.07 (s,3h),2.02
–
1.19(m,30h),1.09(d,j＝6.6hz,6h)。
[0893]
实施例16
[0894]
(r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)-n-(7-(2-(((2s,4r)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷
‑ꢀ
1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰氨基)甲基)-5
‑ꢀ
(4-甲基噻唑-5-基)苯氧基)庚基)哌啶-3-甲酰胺
[0895][0896]
步骤1：(2s,4r)-n-(2-((7-氨基庚基)氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据实施例9，步骤1-2中概述的程序合成标题化合物，使用(7-溴庚基)氨基甲酸叔丁酯作为步骤1中的起始材料。
[0897]
步骤2：(r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)-n-(7-(2-(((2s,4r)-1-((s)-2-(1
‑ꢀ
氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰氨基) 甲基)-5-(4-甲基噻唑-5-基)苯氧基)庚基)哌啶-3-甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体2(12mg)、(2s,4r)-n-(2-((7
‑ꢀ
氨基庚基)氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺(7.7mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(6.2mg,34％)； lcms:c
77h99
f2n
13
o9s理论值1419.7，实测值1422.4[m 2h]

；1hnmr(500mhz,dmso-d6)δ9.55(s,1h),8.98(s,1h),8.76(s,1h),8.50 (t,j＝6.0hz,1h),8.43(s,1h),8.13(d,j＝8.0hz,1h),8.10
–
8.05(m, 1h),7.86(d,j＝6.5hz,1h),7.67
–
7.44(m,4h),7.40(d,j＝7.8hz, 1h),7.28(dd,j＝9.6,2.7hz,1h),7.18(dd,j＝12.0,6.7hz,1h),6.99 (t,j＝2.7hz,1h),6.95(dd,j＝7.8,1.6hz,1h),5.31(p,j＝6.6hz, 1h),4.59(d,j＝9.2hz,1h),4.51(t,j＝8.2hz,1h),4.37
–
4.14(m, 4h),4.07
–
3.99(m,4h),3.91
–
3.34(m,6h),3.13
–
2.73(m,8h),2.65
ꢀ–
2.57(m,1h),2.45(s,3h),2.37(d,j＝2.2hz,
3h),2.07(s,4h),1.91 (ddd,j＝13.2,9.2,4.5hz,3h),1.86
–
1.56(m,14h),1.56
–
1.15(m, 14h),1.09(d,j＝6.6,6h),0.95(s,9h)。
[0898]
实施例17
[0899]
(r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)-n-(9-(2-(((2s,4r)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷
‑ꢀ
1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰氨基)甲基)-5
‑ꢀ
(4-甲基噻唑-5-基)苯氧基)壬基)哌啶-3-甲酰胺
[0900][0901]
步骤1：(2s,4r)-n-(2-((9-氨基壬基)氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据实施例9，步骤1-2中概述的程序合成标题化合物，使用(9-溴壬基)氨基甲酸叔丁酯作为步骤1中的起始材料。
[0902]
步骤2：(r)-1-((1s,3s)-3-(1'-乙酰基-6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1-基)环丁基)-n-(9-(2-(((2s,4r)-1-((s)-2-(1
‑ꢀ
氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰氨基) 甲基)-5-(4-甲基噻唑-5-基)苯氧基)壬基)哌啶-3-甲酰胺的合成
[0903]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体2(12mg)、(2s,4r)
‑ꢀ
n-(2-((9-氨基壬基)氧基)-4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)-1-((s)-2-(1-氟环丙烷-1-甲酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基吡咯烷-2-甲酰胺(7.7 mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(5.3 mg,28％)；lcms:c
79h103
f2n
13
o9s理论值1447.8，实测值1449.5 [m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.98(s,1h),8.68(s,1h), 8.49(t,j＝6.0hz,1h),8.39(s,1h),8.12(d,j＝8.1hz,1h),8.05(t,j ＝5.9hz,1h),7.86(d,j＝7.8hz,1h),7.65(d,j＝8.0hz,1h),7.58 (dd,j＝8.3,4.7hz,1h),7.50(d,j＝8.6hz,2h),7.40(d,j＝7.8hz, 1h),7.28(dd,j＝9.2,2.8hz,1h),7.18(dd,j＝12.1,6.7hz,1h),7.02
ꢀ–
6.97(m,1h),6.95(d,j＝
基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2
‑ꢀ
基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基]乙酸的合成。根据通用程序c，使用 2-[4-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基]乙酸甲酯(589mg,0.92mmol)实施反应，以提供标题化合物(0.566g,98％)。
[0911]
步骤5：(2s,4r)-1-((s)-2-(2-(4-(2-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-基)乙酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4
‑ꢀ
(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序 f合成标题化合物，使用中间体1(11.5mg)、[4-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4
‑ꢀ
羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基]乙酸(10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.2mg,36％)；lcms:c
72h93
fn
14
o7s理论值1316.6，实测值 1317.6[m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.52(d,j＝9.5hz, 1h),8.99(s,1h),8.66(s,1h),8.40(d,j＝8.5hz,2h),8.14(d,j＝7.8 hz,1h),7.88(s,1h),7.68(d,j＝7.7hz,1h),7.59(d,j＝8.3hz,1h), 7.53
–
7.40(m,4h),7.37(d,j＝8.1hz,2h),7.18(d,j＝12.1hz,1h), 5.29(q,j＝6.6hz,1h),4.91(t,j＝7.2hz,1h),4.54(d,j＝9.4hz, 1h),4.43(t,j＝8.2hz,1h),4.33
–
3.32(m,22h),3.03
–
2.92(m,1h), 2.92
–
2.76(m,6h),2.45(s,3h),2.36(s,3h),2.05(t,j＝10.3hz,1h), 1.92
–
1.52(m,18h),1.43(dd,j＝53.2,7.0hz,4h),1.09(d,j＝6.6hz, 6h),0.97(s,9h)。
[0912]
实施例19
[0913]
(2s,4r)-1-((s)-2-(5-(1-(2-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-2-氧代乙基)哌啶-4-基)戊酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺
[0914][0915]
步骤1：4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3
‑ꢀ
噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁
ꢀ‑
2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序f 合成标题化合物，使用5-[1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基]戊酸(107mg, 0.37mmol)和(1r,4s)-2-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n
‑ꢀ
[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]环戊烷-1-甲酰胺盐酸
盐 (150mg,0.31mmol)作为起始材料。色谱法c提供标题化合物(0.220 g,99％)。
[0916]
步骤2：(2s,4r)-1-[(2s)-3,3-二甲基-2-[5-(哌啶-4-基)戊酰氨基]丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷
‑ꢀ
2-甲酰胺盐酸盐的合成。根据通用程序b，使用4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)
‑ꢀ
4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基} 吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.220g,0.31mmol)实施反应，以提供标题化合物(0.194g, 99％)。
[0917]
步骤3：2-[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基
‑ꢀ
1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基]乙酸甲酯的合成。根据通用程序e，使用(2s,4r)-1-[(2s)-3,3-二甲基-2-[5-(哌啶-4-基)戊酰氨基]丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷
‑ꢀ
2-甲酰胺盐酸盐(168mg,0.26mmol)和2-溴乙酸甲酯(40mg,0.26 mmol)实施反应。色谱法b提供标题化合物(69.9mg,39％)。
[0918]
步骤4：[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3
‑ꢀ
噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁
ꢀ‑
2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基]乙酸的合成。根据通用程序c，使用2-[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5
‑ꢀ
基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基] 氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基]乙酸甲酯(69.9mg,0.10mmol)实施反应，以提供标题化合物(67mg,98％)。
[0919]
步骤5：(2s,4r)-1-((s)-2-(5-(1-(2-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-2-氧代乙基)哌啶-4-基)戊酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4
‑ꢀ
(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序 f合成标题化合物，使用中间体1(11.5mg)、[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)
‑ꢀ
4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基} 吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基] 乙酸(10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.2mg,46％)；lcms:c
76h100
fn
13
o7s理论值1357.8，实测值 1359.5[m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.42(s,1h),8.99(s, 1h),8.61(s,1h),8.40
–
8.33(m,2h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.88(s, 1h),7.80(d,j＝9.2hz,1h),7.68(d,j＝7.7hz,1h),7.60(d,j＝8.2 hz,1h),7.52(s,1h),7.49
–
7.32(m,6h),7.17(d,j＝12.1hz,1h),5.31
ꢀ–
5.25(m,1h),4.92(t,j＝7.2hz,1h),4.53(d,j＝9.2hz,1h),4.45
–ꢀ
4.27(m,6h),4.24
–
3.30(m,17h),3.22(s,1h),3.02
–
2.73(m,10h), 2.45(s,4h),2.36(s,3h),2.31
–
2.23(m,1h),2.13(d,j＝8.3hz,1h), 2.01(s,1h),1.93
–
1.35(m,30h),1.09(d,j＝6.6hz,6h),0.94(s,9h)。
[0920]
实施例20
[0921]
(2s,4r)-1-((s)-2-(5-(1-(3-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)戊酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺
[0922][0923]
步骤1：3-[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基
‑ꢀ
1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基]丙酸甲酯的合成。根据通用程序e，使用(2s,4r)-1-[(2s)-3,3-二甲基-2-[5-(哌啶-4-基)戊酰氨基]丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷
‑ꢀ
2-甲酰胺盐酸盐(168mg,0.26mmol)和3-溴丙酸甲酯(43mg,0.26 mmol)实施反应。色谱法b提供标题化合物(47mg,26％)。
[0924]
步骤2：3-[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基
‑ꢀ
1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基]丙酸的合成。根据通用程序c，使用3-[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑
‑ꢀ
5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基] 氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基]丙酸甲酯(47mg,0.07mmol)实施反应，以提供标题化合物(46mg,98％)。
[0925]
步骤3：(2s,4r)-1-((s)-2-(5-(1-(3-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)戊酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4
‑ꢀ
(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序 f合成标题化合物，使用中间体1(5.2mg)、3-[4-(4-{[(2s)-1-[(2s,4r)
‑ꢀ
4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基} 吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}丁基)哌啶-1-基] 丙酸(5mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(2.5mg,24％)；lcms:c
77h102
fn
13
o7s理论值1371.8，实测值 1374.9[m 3h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.40(s,1h),8.99(s, 1h),8.59(s,1h),8.36(d,j＝9.3hz,2h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.88 (s,1h),7.80(d,j＝9.3hz,1h),7.68(d,j＝7.8hz,1h),7.61(d,j＝ 8.3hz,1h),7.52(s,1h),7.50
–
7.41(m,3h),7.38(d,j＝8.2hz,2h), 7.17(d,j＝12.1hz,1h),5.31
–
5.25(m,1h),4.95
–
4.88(m,1h),4.53 (d,j＝9.3hz,1h),4.41(t,j＝8.0hz,1h),4.29(s,1h),4.20(t,j＝8.2 hz,1h),4.07
–
3.99(m,1h),3.96
–
3.30(m,12h),3.02
–
2.73(m,11h), 2.45(s,3h),2.36(s,3h),2.31
–
2.23(m,1h),2.12(dt,j＝13.9,6.4hz, 1h),2.01(t,j＝10.4hz,1h),1.88
–
1.44(m,22h),1.38(d,j＝7.0hz, 3h),1.34
–
1.18(m,6h),1.09(d,j＝6.6hz,6h),0.94(s,9h)。
[0926]
实施例21
[0927]
5-{[6-(1'-{2-[4-(3-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}丙基)哌嗪-1-基]乙酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]-1,
2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0928][0929]
步骤1：2-[4-(丙-2-炔-1-基)哌嗪-1-基]乙酸叔丁酯的合成。向2
‑ꢀ
(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(1.5g,7.5mmol)的acn(50.0ml)溶液中加入3-溴丙-1-炔(893mg,7.50mmol)和cs2co3(2.4g,7.50mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3h。反应完成后，过滤混合物。在真空下浓缩滤液。通过色谱法a纯化残余物，以提供2-[4-(丙-2-炔-1-基)哌嗪
ꢀ‑
1-基]乙酸叔丁酯(1.1g,62％)，为黄色油。
[0930]
步骤2：2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
ꢀ‑
4-基)丙-2-炔基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯的合成。向4-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(1.3g,3.86mmol)的dmf(18.0ml)溶液中加入2-(4-(丙-2-炔基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(1.4g,5.6mmol)、 pd(pph3)2cl2(423mg,0.60mmol)、dipea(12.0ml)和cui(251mg, 1.32mmol)。将所得混合物在75℃下搅拌4h。反应完成后，将所得混合物用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并过滤。真空蒸发滤液。通过色谱法b纯化残余物以提供2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)丙-2-炔基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(2.5g,70％)，为固体。
[0931]
步骤3：2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
ꢀ‑
4-基)丙基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯的合成。向2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)丙-2-炔基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(2.1g,4.25mmol)的乙醇(50.0ml)溶液中加入10％ pd/c(0.42g，干燥)。将所得混合物在室温下在h2下搅拌16h。反应完成后，过滤反应混合物。真空蒸发滤液以提供2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)
‑ꢀ
1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)丙基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(1.6g，粗品)，为固体。
[0932]
步骤4：2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)丙基)哌嗪-1-基)乙酸2,2,2-三氟乙酸的合成。向2-(4-(3-(2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)丙基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(2.1g,4.2mmol)的二氯甲烷(20.0ml)溶液中加入三氟乙酸 (20.0ml)。将所得混合物在室温下搅拌4h。将所得混合物真空浓缩。通过pre-hplc纯化残余物，采用如下条件：柱：xselect csh prepc18 obd柱,5um,19x150mm；流动相a：水(0.05％ tfa)，流动相 b：acn；流速：25ml/min；梯度：在7min内5％ b至20％ b； 254/220nm；rt:6.05min，以提供2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)
‑ꢀ
1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)丙基)哌嗪-1-基)乙酸2,2,2-三氟乙酸 (398mg,21％)为固体。
[0933]
步骤5：5-{[6-(1'-{2-[4-(3-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代
‑ꢀ
2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}丙基)哌嗪-1-基]乙酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁
基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(17.9mg)、 2-(4-(3-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)丙基)哌嗪-1-基)乙酸2,2,2-三氟乙酸(10mg)作为起始材料。通过反相hplc 纯化粗物质，提供标题化合物(12.4mg,46％)；lcms:c
63h75
fn
12
o7理论值1130.6，实测值1133.3[m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso
‑ꢀ
d6)δ11.14(s,1h),9.49(s,1h),8.63(s,1h),8.39(s,1h),8.13(d,j＝7.8 hz,1h),7.88(s,1h),7.82(d,j＝6.7hz,2h),7.75(dd,j＝6.6,2.2hz, 1h),7.67(d,j＝7.6hz,1h),7.60(d,j＝8.2hz,1h),7.51(s,1h),7.47 (d,j＝7.8hz,1h),7.17(d,j＝12.2hz,1h),5.34
–
5.24(m,1h),5.14 (dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.24
–
4.14(m,1h),4.04(dt,j＝13.8,6.7hz, 1h),3.96
–
3.07(m,10h),3.01
–
2.72(m,13h),2.65
–
2.52(m,3h), 2.36(s,4h),2.10
–
1.92(m,4h),1.91
–
1.50(m,16h),1.48
–
1.38(m, 1h),1.09(d,j＝6.5hz,6h)。
[0934]
实施例22
[0935]
5-[(6-{1'-[2-(2-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)乙酰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0936][0937]
步骤1：7-[2-(苄基氧基)-2-氧代乙基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯的合成。向2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯(5.0g,22mmol, 1.0eq)的dmf(85ml,0.26m)溶液中加入cs2co3(14.4g,44.2mmol, 2.0eq)和2-溴乙酸苄酯(5.06g,22.1mmol,1.0eq)。将反应混合物在 rt下搅拌3h。此时，将dmf蒸发至干，将粗产物溶于水中，并用et2o (350ml x 2)萃取，用盐水洗涤，并蒸发至干，得到粗残余物，然后将其通过色谱法a纯化，以提供标题化合物(6.25g,76％)。
[0938]
步骤2：2-{2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯三氟乙酸盐的合成。向7-[2-(苄基氧基)-2-氧代乙基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯(6.25g,16.7mmol,1.0eq)的dcm(56ml,0.3m)溶液中加入三氟乙酸(25.5ml,114mmol,20.0eq)。将反应混合物在rt下搅拌过夜。然后将挥发物蒸发至干，并将粗产物用et2o研磨，得到8.23g的标题化合物，为tfa盐(定量收率)。
[0939]
步骤3：2-{2-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-5-基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基}乙酸苄酯的合成。在无水条件下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(7.5 g,27.1mmol,1eq)的dmso(54.3ml,0.5m)
基]哌嗪-1-基}乙酸叔丁酯的合成。向哌嗪-1-基-乙酸叔丁酯二盐酸盐(4.46g,16.3mmol,1.1eq)的dmso(29.7ml,0.5m)溶液中加入dipea(3.93ml,22.5mmol,2eq)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5
‑ꢀ
氟异二氢吲哚-1,3-二酮(4.1g,14.8mmol,1eq)。将反应混合物在氩气下在90℃下加热40h。形成亮黄色沉淀并将其滤出。然后将滤饼用水洗涤2次。将滤液用dcm萃取2次。将合并的dcm层真空浓缩并与沉淀物合并。通过色谱法b纯化粗产物，得到标题化合物，为黄色固体(5.49g,81％收率)。
[0946]
步骤2：2-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}乙酸三氟乙酸盐的合成。向2-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}乙酸叔丁酯(5.49g,12.0mmol,1eq)的dcm(100ml,0.12m)溶液中加入 tfa(50.6ml,661mmol,55eq)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后在减压下浓缩。将所得亮黄色粘性固体用200ml无水乙醚超声处理并搅拌1小时。将所得沉淀过滤，用无水et2o洗涤两次，并在减压下干燥，得到亮黄色固体(6.55g，定量)。
[0947]
步骤3：5-[(6-{1'-[2-(4-{2-[(3rs)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基}哌嗪-1-基)乙酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。
[0948]
根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、2-(4-(2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-基)乙酸 (10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物 (13mg,70％)；lcms:c
60h69
fn
12
o7理论值1088.5，实测值1090.4 [m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),10.18(s,1h), 9.53(s,1h),8.62(s,1h),8.39(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.89(s, 1h),7.79(d,j＝8.5hz,1h),7.72
–
7.65(m,1h),7.60(d,j＝8.2hz, 1h),7.53
–
7.44(m,3h),7.36(dd,j＝8.7,2.3hz,1h),7.17(d,j＝12.1 hz,1h),5.28(p,j＝6.7hz,1h),5.10(dd,j＝12.7,5.5hz,1h),4.46 (s,1h),4.26
–
4.11(m,1h),4.08
–
3.18(m,10h),3.04
–
2.73(m,8h), 2.64
–
2.54(s,4h),2.36(s,3h),2.10
–
1.99(m,1h),1.92
–
1.52(m, 17h),1.41(d,j＝13.0hz,1h),1.09(d,j＝6.5hz,6h)。
[0949]
实施例24
[0950]
5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0951][0952]
步骤1：4-{3-[(叔丁氧基)羰基]氮杂环丁烷-1-基}哌啶-1-甲酸苄酯的合成。向氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(4.5g,29mmol,1.0eq)和1-(苄基氧基羰基)-4-哌啶酮(7.35g,31.5mmol,1.10eq)的dce(136ml,0.2 m)溶液中加入乙酸(2.46ml,42.9mmol,1.5eq)，并将反应混合物在 rt下搅拌1h。然后，加入nabh(oac)3(9.71g,45.8mmol,1.6eq)，并将混合物
在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物用nahco3水溶液淬灭，用dcm(3x)萃取，用盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩至干。通过色谱法b纯化无色油状物，得到9.39g(88％收率)的标题化合物。
[0953]
步骤2：1-(哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯的合成。将4-{3
‑ꢀ
[(叔丁氧基)羰基]氮杂环丁烷-1-基}哌啶-1-甲酸苄酯(9.39g,25.1 mmol,1.0eq)的meoh(250ml,0.1m)溶液脱气并用氩气填充3次。然后加入pd(oh)2(0.7g,5.0mmol,0.2eq)，再次将混合物脱气并用氩气填充3次。之后，将反应混合物脱气并装入h2气球，并在室温下搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，浓缩滤液，得到5.81g (96％收率)标题化合物。
[0954]
步骤3：1-{1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-5-基]哌啶-4-基}氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯的合成。向2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-5-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(6.05g,21.9 mmol,1.0eq)的dmso(43.8ml,0.5m)溶液中加入1-(哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(5.79g,24.1mmol,1.1eq)和dipea(7.63ml, 43.8mmol,2.0eq)。然后将反应混合物移至预热浴至90℃，并在氩气氛下搅拌过夜。将反应用水淬灭，用dcm(3x)萃取，并将有机相用冰冷的水洗涤。将粗品通过fc纯化，通过dcm:丙酮(0-10％)洗脱，得到6.95g(64％收率)标题化合物。
[0955]
步骤4：1-{1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-5-基]哌啶-4-基}氮杂环丁烷-3-甲酸盐酸盐的合成。向1-{1-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]哌啶-4
‑ꢀ
基}氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(4.95g,9.97mmol,1.0eq)的无水dcm (100ml,0.1m)溶液中加入2m hcl的et2o溶液(50ml,100mmol, 10.0eq)。然后将反应混合物在室温下搅拌2小时。加入另一份hcl 的et2o溶液(50ml,100mmol,10.0eq)，将反应再搅拌3小时。将沉淀物滤出并再次溶解在dcm中，然后加入2m hcl的et2o溶液(50 ml,100mmol,10.0eq)，并将反应混合物超声处理45分钟。将沉淀的固体滤出，用et2o洗涤，并真空干燥，得到4.83g(定量收率)标题化合物，为hcl盐。
[0956]
步骤5：5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-羰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(11.8 mg)、外消旋-1-(1-{2-[(3r)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5
‑ꢀ
基}哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酸(7mg)作为起始材料。通过反相 hplc纯化粗物质，提供标题化合物(6.5mg,36％)；lcms: c
63h73
fn
12
o7理论值1128.6，实测值1130.7[m 2h]

；1h nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),9.49(s,1h),8.61(s,1h),8.38(s,1h), 8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.88(s,1h),7.76
–
7.65(m,2h),7.60(dd,j＝ 8.2,3.6hz,1h),7.53
–
7.45(m,2h),7.42(s,1h),7.32(d,j＝8.2hz, 1h),7.17(d,j＝12.0hz,1h),5.37
–
5.20(m,1h),5.08(dd,j＝12.7, 5.5hz,1h),4.46
–
4.20(m,2h),4.22
–
4.14(m,4h),4.06
–
3.32(m, 11h),3.05
–
2.73(m,8h),2.65
–
2.53(m,2h),2.36(s,3h),2.15
–
1.98 (m,3h),1.92
–
1.50(m,17h),1.50
–
1.34(m,3h),1.09(d,j＝6.6hz, 6h)。
[0957]
实施例25
[0958]
5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[(3rs)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环
丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0959][0960]
步骤1：1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶
ꢀ‑
4-甲酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(400mg,1.45mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(350mg, 1.89mmol)作为起始材料实施反应。将粗物质用色谱法b纯化。使用该物质，遵循通用程序b，在色谱法c之后产生标题化合物(0.378 mg,68％)。
[0961]
步骤2：1-(1-{2-[-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用1-[2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶-4-甲酸(50mg,0.13 mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(27mg,0.16mmol)实施反应，并使用色谱法b纯化。然后根据通用程序b处理该物质，在色谱法c之后分离标题化合物(40mg,64％)。
[0962]
步骤3：5-[(1-(1-{2-[(3r)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基}哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-甲酸6-{1'-[1-(1-{2-[(3rs)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-羰基)吡咯烷
‑ꢀ
3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'
‑ꢀ
哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10.5mg)、1-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-甲酸(7mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(5.1mg,31％)；lcms: c
65h75
fn
12
o8理论值1170.6，实测值1172.5[m 2h]

；1h nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),9.34(s,1h),8.68(s,1h),8.40(s,1h), 8.13(dd,j＝7.8,4.5hz,1h),7.87(d,j＝2.9hz,1h),7.74
–
7.63(m, 2h),7.63
–
7.47(m,3h),7.35(dd,j＝10.7,6.8hz,2h),7.18(d,j＝ 12.0hz,1h),5.37
–
5.23(m,1h),5.10(dd,j＝12.9,5.3hz,1h),4.26
ꢀ–
3.26(m,8h),3.03
–
2.73(m,8h),2.71
–
2.54(m,8h),2.36(d,j＝6.0 hz,4h),2.22
–
1.98(m,3h),1.92
–
1.50(m,21h),1.50
–
1.36(m,1h), 1.09(dd,j＝6.6,4.1hz,6h)。
[0963]
实施例26
[0964]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷
‑ꢀ
3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]
‑ꢀ
6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0965][0966]
步骤1：(反)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基}环己烷-1-甲酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(100mg,0.36mmol)和(反)-4-氨基环己烷-1-甲酸(104mg,0.72mmol)作为起始材料实施反应。色谱法c提供标题化合物(40mg,28％)。
[0967]
步骤2：1-[(反)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用 (反)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}环己烷-1-甲酸(32mg,0.08mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(16.5mg,0.10 mmol)实施反应，并使用色谱法c纯化。然后根据通用程序b处理该物质，并且在色谱法c之后分离标题化合物(23mg,58％)。
[0968]
步骤3：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10.5 mg)、1-[(反)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-甲酸(7mg)作为起始材料。通过反相hplc 纯化粗物质，提供标题化合物(5.9mg,34％)；lcms:c
66h77
fn
12
o8理论值1184.6，实测值1185.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ 11.11(s,1h),9.34(s,1h),8.67(s,1h),8.41(s,1h),8.15(d,j＝8.0hz, 1h),7.89(d,j＝2.5hz,1h),7.78
–
7.48(m,5h),7.33
–
7.14(m,2h), 7.05(d,j＝7.0hz,1h),6.18(d,j＝8.1hz,1h),5.38
–
5.25(m,1h), 5.06(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.22
–
3.24(m,8h),3.09
–
2.69(m,8h), 2.69
–
2.54(m,4h),2.37(s,3h),2.21
–
1.94(m,6h),1.91
–
1.48(m, 22h),1.48
–
1.29(m,3h),1.11(d,j＝6.4hz,6h)。
[0969]
实施例27
[0970]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'-[1
‑ꢀ
[(1s,4s)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚
‑ꢀ
4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0971][0972]
步骤1：1-[(顺)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-甲酸的合成。类似于实施例26，步骤 1和2，从(顺)-4-氨基环己烷-1-甲酸开始进行合成，提供标题化合物。
[0973]
步骤2：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'-[1-[(1s,4s)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1,2-二氢螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、1-[(顺)-4-({2-[(3rs)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-甲酸(7mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(9.7mg,58％)；lcms: c
66h77
fn
12
o8理论值1184.6，实测值1185.9[m h]

；1h nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),9.36(s,1h),8.69(s,1h),8.41(s,1h), 8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.87(d,j＝4.5hz,1h),7.75
–
7.47(m,5h), 7.16(dd,j＝18.2,10.4hz,2h),7.05(d,j＝7.0hz,1h),6.53(s,1h), 5.39
–
5.20(m,1h),5.07(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.24
–
3.21(m,9h), 3.03
–
2.73(m,8h),2.65
–
2.52(m,5h),2.36(s,3h),2.16
–
2.02(m, 2h),1.90
–
1.50(m,26h),1.41(q,j＝14.2,13.6hz,1h),1.10(d,j＝ 6.6hz,6h)。
[0974]
实施例28
[0975]
5-[(6-{1'-[2-(7-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0976][0977]
步骤1：2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基乙酸盐酸盐的合成。根据通用程序e，接着根据通用程序b，使用2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(400mg,1.77mmol)和2-溴乙酸叔丁酯(379mg,1.94mmol)作为起始材料进行合成。分离标题化合物(331mg,84％，经过两个步骤)，无需进一步纯化。
[0978]
步骤2：(7-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-2,7
‑ꢀ
二氮杂
螺[3.5]壬-2-基)乙酸的合成。根据通用程序a，使用2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基乙酸盐酸盐(331mg,1.50mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶
ꢀ‑
3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(414mg,1.50mmol)作为起始材料实施反应。色谱法c提供标题化合物(50mg,8％)。
[0979]
步骤3：5-[(6-{1'-[2-(7-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(13.5 mg)、(7-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酸(8mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(6.2mg,30％)；lcms:c
63h73
fn
12
o7理论值1128.6，实测值1129.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.07(d,j＝ 4.3hz,1h),10.30(d,j＝37.2hz,1h),9.48(s,1h),8.59(s,1h),8.37 (s,1h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.89(s,1h),7.70(t,j＝7.9hz,2h), 7.61(d,j＝8.3hz,1h),7.52(s,1h),7.46(d,j＝7.9hz,1h),7.17(d,j ＝12.2hz,1h),6.97
–
6.80(m,1h),5.35
–
5.20(m,1h),5.10
–
5.01(m, 1h),4.54(d,j＝17.4hz,1h),4.25
–
3.13(m,9h),3.04
–
2.68(m,9h), 2.65
–
2.52(m,6h),2.36(s,3h),2.23
–
1.52(m,22h),1.41(d,j＝13.6 hz,1h),1.09(d,j＝6.4hz,6h)。
[0980]
实施例29
[0981]
5-{[6-(1'-{2-[(3s)-1-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代
‑ꢀ
2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]吡咯烷-3-基}甲基)哌啶-3-基]乙酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)
‑ꢀ
3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2
‑ꢀ
基)苯甲酰胺
[0982][0983]
步骤1：3-{[(3s)-3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基]甲基}吡咯烷
ꢀ‑
1-甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序d，使用3-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.00g,5.02mmol)、2-[(3s)-哌啶-3-基]乙酸甲酯盐酸盐(972 mg,5.02mmol)和tea(1.54ml,11.0mmol)作为反应试剂实施反应。在该程序之后，使用标题化合物(1.6g,94％)而无需进一步纯化。
[0984]
步骤2：[(3s)-1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-3-基]乙酸的合成。根据通用程序c，使用3-{[(3s)-3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基]甲基} 吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.60g,4.70mmol)作为起始材料实施皂化反应。将该反应的产物直接进行通用程序b以产生标题化合物(1.06g，定量)。
[0985]
步骤3：2-((3s)-1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-3-基)乙酸的合成。根据通用程序a，使用[(3s)-1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-3-基]乙酸(328mg,0.72mmol)和 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(200mg,0.72mmol)作为起始材料实施反应。色谱法c提供标题化合物(214mg,61％)。
[0986]
步骤4：5-{[6-(1'-{2-[(3s)-1-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]吡咯烷-3-基}甲基)哌啶-3-基]乙酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基
‑ꢀ
n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(7.3mg)、2-((3s)-1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-3-基)乙酸(5mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(2.8mg,23％)； lcms:c
66h79
fn
12
o7理论值1170.6，实测值1172.1[m h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ10.99(s,1h),8.49(s,1h),8.27(s,1h),8.05(d, j＝7.9hz,1h),7.79(s,1h),7.60(dd,j＝14.7,8.1hz,2h),7.52(d,j ＝8.1hz,1h),7.46
–
7.37(m,2h),7.09(d,j＝12.2hz,1h),6.87(s, 1h),6.76(d,j＝8.2hz,1h),5.23
–
5.11(m,1h),4.98(dd,j＝13.0,5.4 hz,1h),4.16
–
4.07(m,1h),4.01
–
3.91(m,1h),3.81
–
3.05(m,8h), 2.99
–
2.65(m,14h),2.57
–
2.46(m,4h),2.36
–
2.12(m,10h),2.03
–ꢀ
1.28(m,30h),1.01(d,j＝6.6hz,6h)。
[0987]
实施例30
[0988]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'-[1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚
‑ꢀ
4-基}氨基)环丁烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[0989][0990]
步骤1：(顺)-3-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基}环丁烷-1-甲酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(150mg,0.54mmol)和(顺)-3-氨基环丁烷-1-甲酸盐酸盐(82mg,0.54mmol)作为起始材料实施反应。色谱法 c提供标题化合物(50mg,25％)。
[0991]
步骤2：1-[(顺)-3-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基}氨基)环丁烷羰基]吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用 (顺)-3-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}环丁烷-1-甲酸(18mg,0.05mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(10mg,0.06 mmol)作为起始材料实施反应。然后将该反应的产物进行通用程序b，其在色谱法c之后提供标题化合物(8mg,40％)。
[0992]
步骤3：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'-[1-[(1s,3s)-3-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}氨基)环丁烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1,2-二氢螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成
标题化合物，使用中间体1(12.7mg)、1-((顺)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环丁烷-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸(8mg,0.02mmol)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(9.3mg,45％)； lcms:c
64h73
fn
12
o8理论值1156.6，实测值1157.9[m h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),9.35(s,1h),8.66(s,1h),8.40(s, 1h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.87(d,j＝3.6hz,1h),7.71
–
7.63(m, 1h),7.63
–
7.47(m,4h),7.18(d,j＝12.1hz,1h),7.10
–
7.03(m,2h), 6.45(s,1h),5.29(p,j＝6.6hz,1h),5.06(dd,j＝12.7,5.4hz,1h), 4.25
–
3.19(m,8h),3.08
–
2.74(m,8h),2.72
–
2.56(m,4h),2.54(s, 3h),2.36(s,3h),2.18
–
2.01(m,5h),1.91
–
1.53(m,18h),1.41(d,j＝ 12.9hz,1h),1.10(d,j＝6.6hz,6h)。
[0993]
实施例31
[0994]
5-{[6-(1'-{2-[(3s)-1-{[1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代
‑ꢀ
2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}吡咯烷-3-基]甲基}哌啶-3-基]乙酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)
‑ꢀ
3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2
‑ꢀ
基)苯甲酰胺
[0995][0996]
步骤1：3-{[(3s)-3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基]甲基}吡咯烷
ꢀ‑
1-甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序d，使用3-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.00g,5.02mmol)、2-[(3s)-哌啶-3-基]乙酸甲酯盐酸盐(972 mg,5.02mmol)和2-[(3s)-哌啶-3-基]乙酸甲酯盐酸盐(972mg,5.02 mmol)作为反应试剂实施反应。在该程序之后，使用标题化合物(1.6 g,94％)而无需进一步纯化。
[0997]
步骤2：[(3s)-1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-3-基]乙酸的合成。根据通用程序c，使用3-{[(3s)-3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基]甲基} 吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.60g,4.70mmol)作为起始材料进行皂化反应。将该反应的产物直接进行通用程序b以产生标题化合物(1.06g，定量)。
[0998]
步骤3：2-((3s)-1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-3-基)乙酸的合成。根据通用程序a，使用[(3s)-1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-3-基]乙酸(819mg,1.81mmol)和 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(500mg,1.81mmol)作为起始材料实施反应。色谱法c提供标题化合物(490mg,48％)。
[0999]
步骤4：5-{[6-(1'-{2-[(3s)-1-{[1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}吡咯烷-3-基]甲基}哌啶-3-基]乙酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基
‑ꢀ
n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(14mg)、2-((3s)-1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-3-基)乙酸(10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.1mg,29％)； lcms:c
66h79
fn
12
o7理论值1170.6，实测值
1171.8[m h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),9.49(s,1h),9.17(s,1h),8.65(s, 1h),8.40(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.87(s,1h),7.69
–
7.54(m, 3h),7.49(d,j＝8.5hz,2h),7.21
–
7.15(m,2h),7.12(d,j＝8.8hz, 1h),5.35
–
5.24(m,1h),5.07(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.20(dd,j＝ 16.4,8.3hz,1h),4.10
–
3.98(m,1h),3.93
–
3.08(m,10h),3.07
–
2.66 (m,10h),2.65
–
2.52(m,4h),2.42
–
2.32(m,4h),2.22(s,1h),2.06
–ꢀ
1.29(m,25h),1.09(d,j＝6.5hz,6h)。
[1000]
实施例32
[1001]
5-({6-[1'-(1-{2-[(3s)-1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-3-基]乙酰基}吡咯烷-3-羰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1002][1003]
步骤1：[(3s)-1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 哌啶-3-基]乙酸的合成。根据通用程序a，使用(3s)-哌啶-3-基乙酸 (143mg,1.00mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮 (276mg,1.00mmol)作为起始材料进行反应。色谱法c提供标题化合物(190mg,48％)。
[1004]
步骤2：1-{2-[(3s)-1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基]哌啶-3-基]乙酰基}吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用[(3s)-1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶-3-基] 乙酸(20mg,0.05mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(8.6mg,0.05mmol) 作为起始材料进行反应。将来自该反应的粗物质直接进行通用程序b 以提供标题化合物(10mg,40％)。
[1005]
步骤3：5-({6-[1'-(1-{2-[(3s)-1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-3-基]乙酰基}吡咯烷-3-羰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]
‑ꢀ
3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(14.5 mg)、1-(2-((3r)-1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)哌啶-3-基)乙酰基)吡咯烷-3-甲酸(10mg)作为起始材料。通过反相 hplc纯化粗物质，提供标题化合物(7.5mg,31％)；lcms: c
66h77
fn
12
o8理论值1184.6，实测值1185.9[m h]

；1h nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),9.34(s,1h),8.70(d,j＝4.9hz,1h), 8.41(s,1h),8.13(d,j＝7.7hz,1h),7.87(d,j＝2.8hz,1h),7.71
–ꢀ
7.62(m,2h),7.61
–
7.46(m,3h),7.41(t,j＝8.8hz,1h),7.31(d,j＝ 6.9hz,1h),7.18(d,j＝12.0hz,1h),5.30(p,j＝6.6hz,1h),5.10(dd, j＝9.7,4.5hz,1h),4.25
–
4.15(m,1h),4.08
–
3.99(m,1h),3.40(d,j ＝11.0hz,10h),3.03
–
2.65(m,8h),2.54(s,3h),2.36(s,3h),2.31
–ꢀ
1.91(m,8h),1.93
–
1.50(m,20h),1.41(q,j＝10.5,8.2hz,1h),1.10 (d,j＝6.5hz,6h)。
[1006]
实施例33
[1007]
5-{[6-(1'-{1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)甲基]氮杂环丁烷-3-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1008][1009]
步骤1：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-[4-(羟基甲基)哌啶-1-基]异吲哚-1,3-二酮的合成。根据通用程序a，使用哌啶-4-基甲醇(208mg,1.80 mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(500mg,1.81 mmol)作为起始材料实施反应。色谱法b提供标题化合物(500mg, 74％)。
[1010]
步骤2：1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶
ꢀ‑
4-甲醛的合成。向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-[4-(羟基甲基)哌啶-1-基] 异吲哚-1,3-二酮(100mg,0.27mmol)的dcm(1.35ml)溶液中加入 dmp(228mg,0.54mmol)。搅拌90分钟后，向反应中加入硅胶，减压除去溶剂。然后通过色谱法a纯化该物质，以提供标题化合物(32 mg,32％)。
[1011]
步骤3：1-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 哌啶-4-基}甲基)氮杂环丁烷-3-甲酸的合成。根据通用程序d，使用氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(6.4mg,0.04mmol)和1-[2-(2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶-4-甲醛(15mg,0.04mmol)作为起始材料进行还原胺化。将来自该反应的粗物质直接用通用程序b处理。遵循色谱法c，获得标题化合物(8mg,43％)。
[1012]
步骤4：5-{[6-(1'-{1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)甲基]氮杂环丁烷-3-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(12.44 mg)、1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌啶
ꢀ‑
4-基)甲基)氮杂环丁烷-3-甲酸(8mg)作为起始材料。通过反相hplc 纯化粗物质，提供标题化合物(8.2mg,36％)；lcms:c
64h75
fn
12
o7理论值1142.6，实测值1144.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),9.45(s,1h),8.62(s,1h),8.39(s,1h),8.13(d,j＝7.8hz, 1h),7.88(s,1h),7.75
–
7.63(m,2h),7.60(d,j＝8.1hz,1h),7.55
–ꢀ
7.45(m,2h),7.39
–
7.30(m,2h),7.17(d,j＝12.0hz,1h),5.29(q,j＝ 6.4hz,1h),5.09(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.51
–
4.40(m,1h),4.29
–ꢀ
4.18(m,2h),4.10
–
3.13(m,10h),3.03
–
2.71(m,10h),
异吲哚-4-基}哌啶-4-基)乙酰基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1028][1029]
步骤1：1-(2-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
ꢀ‑
4-基)哌啶-4-基)乙酰基)哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序f，使用 (1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}哌啶-4-基)乙酸 (25mg,0.06mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(12mg,0.06mmol)实施反应。然后将该反应的粗物质进行通用程序b。色谱法c提供标题化合物(22mg,69％)。
[1030]
步骤2：5-{[6-(1'-{1-[2-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代
‑ꢀ
2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)乙酰基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(15mg)、 1-(2-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌啶-4
‑ꢀ
基)乙酰基)哌啶-4-甲酸(10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(16.4mg,68％)；lcms:c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1199.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ 11.08(s,1h),9.37(s,1h),8.67(s,1h),8.40(s,1h),8.13(d,j＝7.8hz, 1h),7.87(s,1h),7.71
–
7.64(m,2h),7.59(d,j＝8.1hz,1h),7.52(d, j＝8.4hz,2h),7.33(dd,j＝10.8,7.8hz,2h),7.18(d,j＝12.1hz, 1h),5.29(q,j＝6.8hz,1h),5.09(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.44(s, 1h),4.24
–
4.17(m,1h),4.03(h,j＝6.8hz,1h),3.96
–
3.37(m,10h), 3.11(t,j＝12.5hz,1h),3.00
–
2.71(m,9h),2.70
–
2.55(m,2h),2.36
ꢀ–
2.29(m,4h),2.06
–
2.00(m,1h),1.88
–
1.33(m,27h),1.10(d,j＝ 6.5hz,6h)。
[1031]
实施例37
[1032]
5-{[6-(1'-{1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)甲基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4，5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1033][1034]
步骤1：1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)哌啶-4-基)甲基)哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序d，使用1-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶-4-甲醛(15mg, 0.04mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(7.5mg,0.04mmol)实施反应。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(17.8mg,91％)。
[1035]
步骤2：5-{[6-(1'-{1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)甲基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(7.3mg)、 1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌啶-4-基) 甲基)哌啶-4-甲酸(5mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.2mg,64％)；lcms:c
66h79
fn
12
o7理论值1170.6，实测值1172.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h), 9.48(s,1h),8.98(s,1h),8.63(s,1h),8.39(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz, 1h),7.88(s,1h),7.74
–
7.63(m,2h),7.60(d,j＝8.2hz,1h),7.52(d, j＝5.5hz,2h),7.36(d,j＝7.6hz,2h),7.18(d,j＝12.1hz,1h),5.32
ꢀ–
5.18(m,1h),5.09(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.24
–
3.11(m,10h), 3.09
–
2.71(m,14h),2.66
–
2.56(m 1h),2.36(s,3h),2.10
–
1.36(m, 28h),1.10(d,j＝6.6hz,6h)。.
[1036]
实施例38
[1037]
5-[(6-{1'-[1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)甲基]吡咯烷-3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1038][1039]
步骤1：1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)哌啶-4-基)甲基)吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序d，使用1
‑ꢀ
[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶-4-甲醛(15mg, 0.04mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(6.8mg,
4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、 1-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-羰基)氮杂环丁烷-3-甲酸(6.8mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(7.2mg,44％)；lcms:c
64h73
fn
12
o8理论值 1156.6，实测值1157.8[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.07 (s,1h),9.39(s,1h),8.73(d,j＝6.2hz,1h),8.43(s,1h),8.13(d,j＝ 7.8hz,1h),7.87(d,j＝2.6hz,1h),7.74
–
7.61(m,2h),7.62
–
7.45 (m,3h),7.33(s,1h),7.30
–
7.13(m,2h),5.30(q,j＝6.5hz,1h),5.07 (dd,j＝12.7,5.5hz,1h),4.45
–
4.34(m,1h),4.24
–
3.35(m,11h), 3.15
–
2.68(m,10h),2.65
–
2.55(m,2h),2.36(s,3h),2.05
–
1.93(m, 1h),1.88
–
1.32(m,23h),1.09(d,j＝6.5hz,6h)。
[1047]
实施例40
[1048]
5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1049][1050]
步骤1：1-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5
‑ꢀ
基)哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用1-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌啶-4-甲酸(10mg, 0.03mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(4.4mg,0.03mmol)实施反应。将来自该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(10g,80％)。
[1051]
步骤2：5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)吡咯烷-3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、1
‑ꢀ
(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-羰基) 吡咯烷-3-甲酸(8.4mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(12.1mg,75％)；lcms:c
65h75
fn
12
o8理论值1170.6，实测值1172.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h), 9.37(s,1h),8.70(s,1h),8.41(s,1h),8.14(d,j＝7.5hz,1h),7.87(d, j＝4.8hz,1h),7.67(dd,j＝8.4,4.5hz,2h),7.62
–
7.46(m,3h),7.34 (t,j＝2.5hz,1h),7.25(dd,j＝8.6,2.7hz,1h),7.18(d,j＝12.1hz, 1h),5.30(p,j＝6.6hz,1h),5.07(dd,j＝12.7,5.4hz,1h),4.24
–
3.26 (m,11h),3.15
–
2.73(m,11h),2.64
–
2.53(m,2h),2.37
–
2.34(m,3h), 2.19
–
1.51(m,25h),1.41(d,j＝13.0hz,1h),1.11
–
1.07(m,6h)。
[1052]
实施例41
[1053]
5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)哌啶-4-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1054][1055]
步骤1：1-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5
‑ꢀ
基)哌啶-4-羰基)哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序f，使用1-[2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌啶-4-甲酸(10mg,0.03 mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(4.6mg,0.03mmol)实施反应。将来自该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物 (8.4g,66％)。
[1056]
步骤2：5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)哌啶-4-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、1-(1-(2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-羰基)哌啶
ꢀ‑
4-甲酸(8.4mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8.8mg,54％)；lcms:c
66h77
fn
12
o8理论值1184.6，实测值 1185.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),9.37(s, 1h),8.72(s,1h),8.42(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.88(s,1h),7.67 (d,j＝8.5hz,2h),7.59(d,j＝8.1hz,1h),7.52(d,j＝11.0hz,2h), 7.34(d,j＝2.2hz,1h),7.25(dd,j＝8.8,2.3hz,1h),7.18(d,j＝12.1 hz,1h),5.34
–
5.25(m,1h),5.07(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.45
–
4.38 (m,1h),4.25
–
4.15(m,1h),4.12
–
3.29(m,10h),3.20
–
2.72(m,13h), 2.69
–
2.55(m,2h),2.37(s,3h),2.07
–
1.97(m,1h),1.89
–
1.46(m, 24h),1.47
–
1.35(m,2h),1.10(d,j＝6.6hz,6h)。
[1057]
实施例42
[1058]
5-{[6-(1'-{1-[2-(7-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酰基]哌啶-4-羰基}-2
‑ꢀ
氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺
[1059][1060]
步骤1：2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基乙酸盐酸盐的合成。根据通用程序e，使用2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(400mg,1.77mmol) 和2-溴乙酸叔丁酯(379mg,1.94mmol)作为起始材料实施反应。然后根据通用程序b处理粗残余物，以提供标题化合物(300mg,77％)。
[1061]
步骤2：(7-{2-[(2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}
‑ꢀ
2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(414mg,1.50mmol)和2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基乙酸盐酸盐(330mg,1.50mmol)作为起始材料实施反应。色谱法c提供标题化合物(50mg,8％)。
[1062]
步骤3：1-(2-(7-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
ꢀ‑
5-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酰基)哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序f，使用(7-{2-[(2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}
‑ꢀ
2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酸(20mg,0.05mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(9.2mg,0.05mmol)作为起始材料实施反应。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(10mg,40％)。
[1063]
步骤4：5-{[6-(1'-{1-[2-(7-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代
‑ꢀ
2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基}-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酰基]哌啶-4
‑ꢀ
羰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'
‑ꢀ
哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、1-(2-(7-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙酰基)哌啶-4-甲酸(7.2 mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(6.7 mg,39％)；lcms:c
69h82
fn
13
o8理论值1239.6，实测值1240.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),10.28
–
10.07(m,1h), 9.44(s,1h),8.62(s,1h),8.38(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.88(s, 1h),7.73
–
7.63(m,2h),7.60(d,j＝8.5hz,1h),7.50(d,j＝11.5hz, 2h),7.39
–
7.26(m,1h),7.17(d,j＝12.1hz,1h),6.97
–
6.78(m,1h), 5.28(q,j＝6.7hz,1h),5.07(dd,j＝13.0,5.0hz,1h),4.61
–
4.28(m, 2h),4.25
–
4.15(m,1h),4.08
–
3.99(m,2h),3.97
–
2.69(m,20h),2.65
ꢀ–
2.55(m,1h),2.36(s,3h),2.20
–
1.33(m,30h),1.12
–
0.99(m,6h)。
[1064]
实施例43
[1065]
5-[(6-{1'-[23-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-4-基}氨基)-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三烷-1-基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1066][1067]
步骤1：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((23-羟基-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三基)氨基)异二氢吲哚-1,3-二酮的合成。根据通用程序a，使用23-氨基-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三烷-1-醇(1.34g,3.62 mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(1.0g,3.62 mmol)作为起始材料实施反应。色谱法b提供标题化合物(700mg, 31％)。
[1068]
步骤2：23-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)氨基)-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三基4-甲基苯磺酸酯的合成。向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-((23-羟基-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三基)氨基)异二氢吲哚-1,3-二酮(2.5g,4.0mmol)与吡啶(316mg,4.0 mmol)的dcm(15ml)溶液中加入对甲苯磺酰氯(838mg,4.4mmol)。然后将反应搅拌过夜，然后加入水。除去有机相，用dcm(2x)萃取水相，然后用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，并在减压下浓缩。色谱法b提供标题化合物(220mg,7％)。
[1069]
步骤3：5-[(6-{1'-[23-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三烷-1-基]
‑ꢀ
2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺的合成。通过将中间体1(19.7mg,1eq)、23-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)-3,6,9,12,15,18,21
‑ꢀ
七氧杂二十三基4-甲基苯磺酸酯(23mg,1eq)、碘化钠(3.97mg,1eq) 和碳酸钾(18.3mg,5eq)在acn(0.05m)中合并，并将反应混合物在 80℃下加热16小时来合成标题化合物。将反应混合物过滤并通过反相hplc纯化，提供标题化合物(15.1mg,33％)；lcms:c
70h92
fn
11o13
理论值1313.7，实测值1315.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso
‑ꢀ
d6)δ11.09(s,1h),9.65
–
9.39(m,2h),8.61(d,j＝3.6hz,1h),8.39(d, j＝21.9hz,1h),8.14(d,j＝7.9hz,1h),7.90(d,j＝25.4hz,1h),7.77
ꢀ–
7.48(m,4h),7.26
–
7.06(m,3h),7.04(d,j＝7.0hz,1h),6.59(s,1h), 5.28(s,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.27
–
3.29(m,36h),2.99
ꢀ–
2.75(m,8h),2.58(d,j＝19.6hz,2h),2.38
–
2.25(m,5h),2.17(s, 1h),2.05
–
1.48(m,16h),1.41(q,j＝11.9,10.7hz,1h),1.10(d,j＝ 6.5hz,6h)。
[1070]
实施例44
[1071]
5-({6-[1'-(2-{4-[4-({[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)乙基]氨基甲酰基}甲基)苯基]哌嗪-1-基} 乙酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟
‑ꢀ
2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1072][1073]
步骤1：2-(4-{4-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]哌嗪-1-基}苯基)乙酸乙酯的合成。在氩气下，将(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(0.89g,4.4mmol, 1.2eq)、乙酸钯(ii)(0.083g,0.37mmol,0.1eq)和xphos(0.176g,0.37 mmol,0.1eq)加入到搅拌的4-溴苯基乙酸乙酯(0.90g,3.7mmol,1.0 eq)的甲苯(22ml,0.2m)溶液中。将混合物用水(20ml)稀释，然后使用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机级分经硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过色谱法a纯化粗品，得到0.9g(67％收率)的标题化合物。
[1074]
步骤2：2-{4-[4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)苯基]哌嗪-1-基}乙酸钾的合成。将2-(4-{4-[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]哌嗪-1-基}苯基)乙酸乙酯 (0.61g,1.7mmol,1.0eq)溶于thf(12ml,0.14m)中，并加入三甲基硅烷醇钾(0.216g,1.68mmol,1.0eq)。将反应混合物搅拌过夜(通过 uplc监测进程)。滤出沉淀的白色固体并干燥，得到415mg(72％收率)标题化合物。
[1075]
步骤3：{4-[4-({[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚
‑ꢀ
4-基}氨基)乙基]氨基甲酰基}甲基)苯基]哌嗪-1-基}乙酸的合成。根据通用程序f，使用2-{4-[4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)苯基]哌嗪-1-基}乙酸钾(57mg,0.17mmol)和4-[(2-氨基乙基)氨基]-2-[2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基]异吲哚-1,3-二酮盐酸盐(60mg,0.17mmol)作为起始材料实施反应。将来自该反应的粗物质进行通用程序b，并将其根据色谱法c纯化，以提供标题化合物(40mg,41％)。
[1076]
步骤4：5-({6-[1'-(2-{4-[4-({[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)乙基]氨基甲酰基}甲基)苯基]哌嗪-1-基}乙酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺 [吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)
‑ꢀ
4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、{4-[4-({[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]
‑ꢀ
1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)乙基]氨基甲酰基}甲基)苯基]哌嗪-1-基} 乙酸(10mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(14.1mg,80％)；lcms:c
70h81
fn
14
o8理论值1264.6，实测值 1266.9[m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),9.99(s, 1h),9.50(s,1h),8.66(s,1h),8.41(s,1h),8.23(t,j＝5.7hz,1h),8.14 (d,j＝7.9hz,1h),7.89(s,1h),7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.64
–
7.42(m, 4h),7.25
–
7.08(m,5h),7.04(d,j＝7.0hz,1h),6.92(d,j＝8.4hz, 2h),6.74(s,1h),5.36
–
5.21(m,1h),5.07(dd,j＝12.8,5.4hz,1h), 4.54
–
3.04(m,17h),3.04
–
2.72(m,8h),2.68
–
2.55(m,1h),2.36(s, 3h),2.04(dd,j＝10.2,4.9hz,1h),1.92
–
1.38(m,21h),1.10(d,j＝ 6.6hz,6h)。
[1077]
实施例45
[1078]
5-{[6-(1'-{1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-基)甲基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]
氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1079][1080]
步骤1：1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)哌啶-4-基)甲基)哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序d，使用1-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(15mg, 0.04mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(7.4mg,0.04mmol)实施反应。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(15.4mg,80％)。
[1081]
步骤2：5-{[6-(1'-{1-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-基)甲基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f合成标题化合物，使用中间体1(10mg)、 1-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌啶-4-基) 甲基)哌啶-4-甲酸(6.5mg)作为起始材料。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(14.3mg,74.1％)；lcms:c
66h79
fn
12
o7理论值 1170.6，实测值1171.4[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.08 (s,1h),9.49(s,1h),8.99(s,1h),8.64(s,1h),8.40(s,1h),8.14(d,j＝ 7.8hz,1h),7.88(s,1h),7.68(dd,j＝10.1,8.0hz,2h),7.59(d,j＝8.2 hz,1h),7.51(d,j＝6.1hz,2h),7.37(d,j＝2.2hz,1h),7.28(dd,j＝ 8.8,2.1hz,1h),7.17(d,j＝12.2hz,1h),5.37
–
5.20(m,1h),5.07(dd, j＝12.8,5.4hz,1h),4.25
–
3.36(m,12h),3.19
–
2.74(m,8h),2.66
–
2.53(m,2h),2.36(s,3h),2.20
–
1.49(m,27h),1.47
–
1.21(m,4h), 1.10(d,j＝6.6hz,6h)。
[1082]
实施例46
[1083]
n-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)乙基)-7-(2-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)
‑ꢀ
3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-2-氧代乙基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷
ꢀ‑
2-甲酰胺
[1084]
[1085]
步骤1：n-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 氨基)乙基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用4-[(2-氨基乙基)氨基]-2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]异吲哚-1,3-二酮盐酸盐(55mg,0.16mmol)和7-(叔丁氧基羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸(46mg,0.17mmol)实施反应。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(56mg,77％)。
[1086]
步骤2：(2-{[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 氨基)乙基]氨基甲酰基}-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)乙酸的合成。根据通用程序e，使用n-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 氨基)乙基]-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酰胺(28mg,0.06mmol)和2-溴乙酸叔丁酯(12mg,0.06mmol)合成标题化合物。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(28mg,89％)。
[1087]
步骤3：n-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4
‑ꢀ
基)氨基)乙基)-7-(2-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-2-氧代乙基)-7-氮杂螺[3.5] 壬烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(12.7mg,0.02 mmol)和(2-{[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)乙基]氨基甲酰基}-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)乙酸(9.0mg,0.02mmol) 合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(4.9mg, 20％)；lcms:c
67h80
fn
13
o8理论值1213.6，实测值1214.7[m h]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.73(s,1h),8.08
–
7.97(m,1h),7.82
–ꢀ
7.67(m,2h),7.63(s,1h),7.57(t,j＝7.8hz,1h),7.48(d,j＝7.8hz, 1h),7.19
–
7.11(m,2h),7.08(d,j＝7.0hz,1h),5.29(p,j＝6.5hz, 1h),5.10
–
5.02(m,1h),4.40
–
4.03(m,4h),4.03
–
3.87(m,2h),3.72
ꢀ–
3.57(m,2h),3.57
–
3.38(m,9h),3.15
–
2.62(m,11h),2.43(s,3h), 2.22
–
1.48(m,26h),1.14(d,j＝6.6hz,6h)。
[1088]
实施例47
[1089]
(2s,4r)-1-[(2s)-2-(2-{4-[4-(2-{6-[4-({2-氟-4-甲基-5-[(丙-2-基)氨基甲酰基]苯基}氨基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-2-氧代
ꢀ‑
1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基}-2
‑ꢀ
氧代乙基)苯基]哌嗪-1-基}乙酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n
‑ꢀ
[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酰胺
[1090]
[1091]
步骤1：2-(4-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)苯基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯的合成。在氩气下将(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(0.89g,4.4mmol,1.2 eq)、乙酸钯(ii)(0.083g,0.37mmol,0.1eq)和xphos(0.176g,0.37mmol, 0.1eq)加入到搅拌的4-溴苯基乙酸乙酯(0.90g,3.7mmol,1.0eq)的无水甲苯(22ml,0.2m)溶液中。然后将反应混合物用氩气吹扫3分钟，移至预加热浴至100℃，并搅拌16小时。uplc显示形成标题化合物。将混合物用水(20ml)稀释，然后使用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机级分经硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过色谱法a 纯化粗产物，得到0.9g(67％收率)标题化合物。
[1092]
步骤2：2-{4-[4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)苯基]哌嗪-1-基}乙酸的合成。将2-(4-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)苯基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯 (0.13g,0.36mmol,1.0eq)溶于无水dcm(1.3ml)中，然后加入tfa (0.275ml,10.0eq)，并在rt下搅拌4h。uplc显示剩余的sm。再加入10eq的tfa加入，并将反应混合物再搅拌2h。将反应混合物蒸发至干，得到0.13g(86％收率)标题化合物，为tfa盐。
[1093]
步骤3：2-{4-[4-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基
‑ꢀ
1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基]苯基}乙酸乙酯的合成。根据通用程序f，使用(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基
‑ꢀ
n-[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐(50mg,0.10mmol)和{4-[4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)苯基]哌嗪-1-基} 乙酸(53mg,0.12mmol)合成标题化合物。将粗物质使用色谱法b纯化以产生标题化合物(75mg,98％)。
[1094]
步骤4：{4-[4-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基
‑ꢀ
1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基]苯基}乙酸的合成。根据通用程序c，使用2-{4-[4-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基
ꢀ‑
1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基]苯基}乙酸乙酯(75mg,0.10 mmol)合成标题化合物。该物质无需纯化即可使用。
[1095]
步骤5：(2s,4r)-1-[(2s)-2-{2-[4-(4-{2-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代
‑ꢀ
1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]-2-氧代乙基} 苯基)哌嗪-1-基]乙酰氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4
‑ꢀ
(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15.8mg,0.02mmol)和{4-[4-({[(2s)-1-[(2s,4r)
‑ꢀ
4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基} 吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌嗪-1-基] 苯基}乙酸(15mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc 以提供标题化合物(13mg,44％)；lcms:c
78h97
fn
14
o7s理论值 1392.7，实测值1393.8[m h]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.92
–ꢀ
8.80(m,2h),8.08
–
8.01(m,1h),7.80
–
7.67(m,2h),7.64
–
7.53(m, 1h),7.49
–
7.25(m,7h),7.19
–
7.02(m,2h),5.30(p,j＝6.6hz,1h), 5.02(t,j＝6.9hz,1h),4.61
–
4.24(m,2h),4.21
–
3.39(m,23h),3.19
ꢀ–
2.81(m,7h),2.50
–
2.37(m,6h),2.26
–
2.18(m,1h),2.07
–
1.45(m, 22h),1.15
–
1.06(m,15h)。
[1096]
实施例48
[1097]
(2s,4r)-1-((2s)-2-(2-(3-(3-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基)-3-氧代丙基)哌啶-1-基)乙酰氨基)-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-n-((s)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲酰胺
[1098][1099]
步骤1：3-[1-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3
‑ꢀ
噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁
ꢀ‑
2-基]氨基甲酰基}甲基)哌啶-3-基]丙酸乙酯的合成。根据通用程序f，使用(2s,4r)-1-[(2s)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4
‑ꢀ
(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐(110mg, 0.23mmol)和[3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)哌啶-1-基]乙酸(56mg,0.23 mmol)作为起始材料实施反应。使用色谱法b纯化，得到标题化合物 (128mg,83％)。
[1100]
步骤2：3-[1-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3
‑ꢀ
噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁
ꢀ‑
2-基]氨基甲酰基}甲基)哌啶-3-基]丙酸的合成。根据通用程序c，使用3-[1-({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基) 苯基]乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌啶-3-基]丙酸乙酯(128mg,0.19mmol)作为起始材料实施反应。残余物不经纯化用于下一步骤。
[1101]
步骤3：(2s,4r)-1-[(2s)-2-{2-[(3rs)-3-(3-{6-[4-({2-氟-4-甲基-5
‑ꢀ
[(丙-2-基)氨基甲酰基]苯基}氨基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶
‑ꢀ
6-基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基}-3-氧代丙基)哌啶-1-基]乙酰氨基}-3,3-二甲基丁酰基]-4-羟基-n-[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(12mg,0.02mmol)和3-[1
‑ꢀ
({[(2s)-1-[(2s,4r)-4-羟基-2-{[(1s)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基] 乙基]氨基甲酰基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁-2-基]氨基甲酰基}甲基)哌啶-3-基]丙酸(10mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(10.9mg,43％)；lcms: c
74h96
fn
13
o7s理论值1329.5，实测值1331.2[m 2h]

；1h nmr(500 mhz,乙腈-d3)δ8.84
–
8.73(m,1h),8.67(s,1h),8.06
–
7.96(m,1h), 7.96
–
7.86(m,1h),7.75
–
7.67(m,1h),7.53
–
7.13(m,10h),6.68(d,j ＝7.8hz,1h),5.23
–
5.10(m,1h),4.96(s,1h),4.71
–
4.57(m,1h), 4.57
–
4.45(m,1h),4.44
–
4.32(m,1h),4.32
–
4.00(m,3h),3.98
–
3.58 (m,8h),3.58
–
3.39(m,6h),3.09
–
2.39(m,10h),2.12(d,j＝5.1hz, 2h),1.92
–
1.38(m,28h),1.16(d,j＝6.6hz,8h),1.02(d,j＝8.4hz, 10h)。
[1102]
实施例49
[1103]
5-[(6-{1'-[1-{1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-异吲哚-4-基}氨基)乙酰基]哌啶-4-羰基}吡咯烷-3-羰基]-2-氧代
‑ꢀ
1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3
‑ꢀ
(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺
[1104][1105]
步骤1：1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 氨基)乙酰基]哌啶-4-甲酸苄酯的合成。根据通用程序f，使用({2-[-2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)乙酸(175mg,0.39 mmol)和哌啶-4-甲酸苄酯(86mg,0.39mmol)合成标题化合物。将粗物质使用色谱法b纯化以产生标题化合物(200mg,96％)。
[1106]
步骤2：1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 氨基)乙酰基]哌啶-4-甲酸的合成。通过向1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)乙酰基]哌啶-4-甲酸苄酯(200mg, 0.38mmol)中加入钯碳(15mg,10重量％)合成标题化合物。然后加入乙酸乙酯(2ml)和乙醇(2ml)，然后使h2气鼓泡通过搅拌的混合物5 分钟。然后将反应物在h2气球下搅拌5小时，然后用氮气吹扫并通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤。将滤液浓缩并根据色谱法c纯化，得到标题化合物(120mg,72％)。
[1107]
步骤3：1-{1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基}氨基)乙酰基]哌啶-4-羰基}吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)乙酰基]哌啶-4-甲酸(44mg,0.10mmol)和吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(19mg, 0.11mmol)合成标题化合物。将粗物质使用色谱法c，随后使用通用程序b纯化，以提供标题化合物(22mg,41％)。
[1108]
步骤4：5-[(6-{1'-[1-{1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代
‑ꢀ
2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)乙酰基]哌啶-4-羰基}吡咯烷-3-羰基]
‑ꢀ
2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(13mg,0.02 mmol)和1-{1-[2-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基} 氨基)乙酰基]哌啶-4-羰基}吡咯烷-3-甲酸(10mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(13.6mg,60％)； lcms:c
67h78
fn
13
o9理论值1227.6，实测值1230.0[m 2h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),9.31(s,1h),8.64(s,1h),8.39(s, 1h),8.14(d,j＝7.9hz,1h),7.89(d,j＝4.6hz,1h),7.68(d,j＝6.8 hz,1h),7.62(t,j＝8.2hz,2h),7.60
–
7.50(m,2h),7.19(d,j＝12.0 hz,1h),7.15
–
7.01(m,3h),5.30(p,j＝7.6,7.1hz,1h),5.08(dd,j＝ 12.8,5.4hz,1h),4.42(d,j＝12.0hz,1h),4.22(q,j＝19.3,17.2hz, 5h),4.08
–
4.01(m,2h),3.49
–
3.22(m,8h),3.20
–
2.69(m,13h),2.62 (d,j＝
3.7hz,1h),2.37(s,3h),2.20
–
2.03(m,3h),1.93
–
1.54(m, 17h),1.50
–
1.33(m,2h),1.11(d,j＝6.6hz,6h)。
[1109]
实施例50
[1110]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'
‑ꢀ
[(1s,4s)-4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]环己烷羰基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]
‑ꢀ
6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1111][1112]
步骤1：4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成：向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(4.0g,14mmol,1eq.)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.48 g,17.3mmol,1.2eq.)在dmso(20ml)中的混合物加入dipea(5.61 g,43.4mmol,3eq.)。将所得混合物在80℃下搅拌过夜并随后冷却至室温。通过过滤收集沉淀的固体并用水(3
×
50ml)洗涤。这提供了标题化合物，为固体(4.0g,61％)。
[1113]
步骤2：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(哌啶-4-基氨基)异吲哚-1,3-二酮的合成：按照通用程序b，使用4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.0g,8.8mmol)作为起始材料获得标题化合物。在色谱法c之后，分离标题化合物(2.4g,77％)。
[1114]
步骤3：(1s,4s)-4-[4-([2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基]氨基)哌啶-1-羰基]环己烷-1-甲酸的合成：向2-(2,6-二氧代哌啶
ꢀ‑
3-基)-4-(哌啶-4-基氨基)异吲哚-1,3-二酮(1.3g,3.65mmol,1eq.)和 tea(2.21g,21.9mmol,6eq.)在dmf(8ml)中的混合物中加入(1s,4s)
‑ꢀ
环己烷-1,4-二甲酸(0.63g,3.7mmol,1eq.)。将所得混合物在氮气氛下在室温下搅拌30min。在0℃下，向上述混合物中加入t3p(3.48g, 5.47mmol,1.5eq.,50％w/w的etoac溶液)。然后加入水，并用 etoac(3
×
10ml)萃取反应混合物。将合并的有机层用无水na2so4干燥。过滤后，减压浓缩滤液。通过色谱法c纯化残余物。这提供标题化合物(230.2mg,7.65％收率)。
[1115]
步骤4：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(1r,4r)-4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基] 环己烷羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(10mg)和(1s,4s)-4
‑ꢀ
[4-([2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基)哌啶-1-羰基]环己烷-1-甲酸(7.2mg)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(11.5mg,64％)；lcms:c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1200.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h), 9.34(s,1h),8.70(s,1h),8.41(s,1h),8.14(d,j＝
7.8hz,1h),7.87(d, j＝2.3hz,1h),7.74
–
7.47(m,5h),7.31
–
7.14(m,2h),7.05(dd,j＝ 14.7,7.0hz,1h),6.23(dd,j＝55.9,8.2hz,1h),5.30(p,j＝6.7hz, 1h),5.08
–
5.01(m,1h),4.32(d,j＝13.1hz,3h),4.26
–
4.14(m,4h), 4.09
–
3.15(m,9h),3.07
–
2.72(m,8h),2.72
–
2.57(m,2h),2.36(s, 3h),2.20
–
1.89(m,4h),1.89
–
1.27(m,23h),1.10(d,j＝6.6hz,6h)。
[1116]
实施例51
[1117]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(1r,4r)-4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]环己烷羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1118][1119]
步骤-1：(1r,4r)-4-[4-([2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基]氨基)哌啶-1-羰基]环己烷-1-甲酸的合成：向2-(2,6-二氧代哌啶
ꢀ‑
3-基)-4-(哌啶-4-基氨基)异吲哚-1,3-二酮(1.7g,4.8mmol,1eq.)和 tea(2.9g,29mmol,6eq.)在dmf(8ml)中的混合物加入反式-环己烷-1,4-二甲酸(0.82g,4.8mmol,1equiv.)。将所得混合物在氮气氛下在室温下搅拌30min。在0℃下，向上述混合物中加入t3p(4.56g, 7.16mmol,1.50equiv.,50％w/w的etoac溶液)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。然后加入水，并将反应混合物用etoac(3
×
10ml)萃取。合并的有机层用无水na2so4干燥。过滤后，减压浓缩滤液。将残余物通过c18反相柱用acn/h2o(2/1)纯化。这得到(1r,4r)-4-[4-([2-[2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基)哌啶-1-羰基]环己烷
‑ꢀ
1-甲酸，为黄色固体(252mg,10％收率)
[1120]
步骤2：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(1r,4r)-4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基] 环己烷羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(10mg,0.01mmol) 和(1r,4r)-4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]环己烷-1-甲酸(7.2mg,0.01mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(10.2mg,60％)；lcms: c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1200.0[m h]

；1h nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),9.30(d,j＝9.4hz,1h),8.65(s,1h), 8.39(s,1h),8.15(d,j＝7.8hz,1h),7.89(s,1h),7.68(d,j＝7.8hz, 1h),7.63(t,j＝7.4hz,2h),7.57
–
7.51(m,2h),7.26(d,j＝8.7hz, 1h),7.19(d,j＝12.0hz,1h),7.08(d,j＝7.0hz,1h),6.30(d,j＝8.3 hz,1h),5.33
–
5.27(m,1h),5.07(dd,j＝12.6,5.4hz,1h),4.35(s, 1h),4.26
–
4.19(m,1h),4.05(q,j＝6.8hz,2h),3.53(q,j＝8.2hz, 2h),3.41(d,j＝11.5hz,3h),3.29
–
3.15(m,2h),3.05
–
2.72(m,11h), 2.67
–
2.55(m,1h),2.38(s,3h),2.07
–
1.93(m,3h),1.89
–
1.29(m, 27h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺
[1136][1137]
步骤1：3-羟基邻苯二甲酸1,2-二甲酯的合成。将4-羟基-2-苯并呋喃-1,3-二酮(1.0g,6.09mmol)的甲醇(12ml)溶液加热回流3h，然后冷却至室温。在真空下除去溶剂，并按顺序加入固体碳酸氢钠(1.43g, 17.1mmol)和dmf(8ml)。接着，加入碘甲烷(0.91ml,14.6mmol)，并将反应在50℃下搅拌2小时。除去溶剂，将残余物在乙酸乙酯(20ml) 和水(15ml)之间分配。将有机物用水再洗涤两次，经硫酸钠干燥，过滤，并使用色谱法a纯化，得到标题化合物(950mg,74％)。
[1138]
步骤2：3-{[(1r,4r)-4-(叔丁氧基羰基)环己基]氧基}邻苯二甲酸 1,2-二甲酯的合成。通过在thf(12.6ml)中混合3-羟基邻苯二甲酸 1,2-二甲酯(1.05g,4.99mmol)、三苯基膦(1.31g,4.99mmol)和 (1s,4s)-4-羟基环己烷-1-甲酸叔丁酯(500mg,2.50mmol)来合成标题化合物。将混合物冷却至0℃，然后滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.98ml, 5.0mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌16小时。此后，加入2n naoh(20ml)，并用乙酸乙酯(2
×
20ml)萃取混合物。将合并的有机物依次用水、然后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过色谱法a纯化所得残余物，得到标题化合物(600mg, 52％)。
[1139]
步骤3：3-{[(1r,4r)-4-(叔丁氧基羰基)环己基]氧基}苯-1,2-二甲酸的合成。通过在含有3n氢氧化钠(水溶液，4.1ml)的乙醇(16.3ml) 中回流3-{[(1r,4r)-4-(叔丁氧基羰基)环己基]氧基}邻苯二甲酸1,2-二甲酯(489mg,1.25mmol)2小时来合成标题化合物。然后除去溶剂并加入20ml水，然后用dcm(2
×
10ml)洗涤。然后将水层用hcl(1n，水溶液)酸化至ph～4。然后将其用乙酸乙酯(3
×
20ml)萃取，将合并的有机物依次用水(2
×
)和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物(225mg,50％)。
[1140]
步骤4：(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氧基}环己烷-1-甲酸的合成。通过将3-{[(1r,4r)-4-(叔丁氧基羰基) 环己基]氧基}苯-1,2-二甲酸(224mg,0.61mmol)和3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(101mg,0.61mmol)在吡啶(6ml)中混合，并在125℃加热16小时来合成标题化合物。然后将反应物浓缩并溶解在乙酸乙酯中，然后用1n hcl(2
×
20ml)、水(1
×
10ml)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物。
[1141]
步骤5：(3r)-1-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氧基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氧基}环己烷-1-甲酸(30mg,0.07mmol)和(3r)-吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(19mg,0.11mmol)合成标题化合物。使用色谱法c纯化该反应的产物，随后根据通用程序b处理，得到标题化合物(20mg,54％)。
[1142]
步骤6：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(3r)-1-[(1r,4r)-4-{[2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氧基}环己烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(30mg,0.04 mmol)和(3r)-1-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氧基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸(24mg,0.05mmol) 合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(17.5mg, 31％)；lcms:c
66h76
fn
11
o9理论值1185.6，实测值1186.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),9.35(s,1h),8.71(d,j＝ 4.0hz,1h),8.42(s,1h),8.14(d,j＝7.6hz,1h),7.87(d,j＝2.8hz, 1h),7.78(t,j＝7.9hz,1h),7.73
–
7.47(m,5h),7.43(d,j＝7.2hz, 1h),7.18(d,j＝11.9hz,1h),5.30(p,j＝6.7hz,1h),5.07(dd,j＝ 12.8,5.5hz,1h),4.71
–
4.58(m,1h),4.28
–
4.17(m,1h),4.04(q,j＝ 6.8hz,1h),3.97
–
3.78(m,2h),3.44
–
3.20(m,8h),3.06
–
2.74(m, 8h),2.64
–
2.55(m,1h),2.37(s,3h),2.19
–
1.93(m,5h),1.92
–
1.34 (m,24h),1.10(d,j＝6.3hz,6h)。
[1143]
实施例55
[1144]
1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)哌啶-4-基6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}
‑ꢀ
3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸酯
[1145][1146]
步骤1：哌啶-4-基6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸酯的合成：将中间体1(35mg, 0.05mmol)溶于acn(1ml)和dipea(0.03ml)中。加入4-[(4-硝基苯氧基羰基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(18mg,0.05mmol)，并将反应在50℃下搅拌4小时。通过氮气吹扫除去溶剂，并使反应进行通用程序b。色谱法c提供标题化合物(27mg,55％)。
[1147]
步骤2：1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)哌啶-4-基6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基] 氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1
‑ꢀ
基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸酯的合成：根据通用程序f，使用哌啶-4-基6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3
‑ꢀ
异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-甲酸酯(20mg,0.02mmol)和1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-甲酸(9.2mg,0.02mmol) 作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物(14.2mg, 48％)；lcms:c
66h77
fn
12
o9理论值1200.6，实测
值1202.1[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),9.38(d,j＝9.6hz,1h), 8.67(s,1h),8.41(s,1h),8.15(d,j＝7.9hz,1h),7.89(s,1h),7.68(d, j＝8.3hz,2h),7.61(d,j＝8.2hz,1h),7.58
–
7.49(m,2h),7.34(d,j ＝2.1hz,1h),7.30
–
7.23(m,1h),7.19(d,j＝12.1hz,1h),5.30(t,j＝ 6.6hz,1h),5.08(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.89(s,1h),4.22(t,j＝8.3 hz,3h),4.06(p,j＝7.1,6.7hz,5h),3.59
–
3.46(m,3h),3.41(d,j＝ 12.0hz,4h),3.10(t,j＝12.3hz,2h),3.05
–
2.74(m,9h),2.68
–
2.54 (m,2h),2.38(s,4h),2.07
–
1.99(m,1h),1.94(s,1h),1.85(d,j＝14.0 hz,3h),1.74(s,6h),1.69
–
1.33(m,16h),1.11(d,j＝6.6hz,6h)。
[1148]
实施例56
[1149]
4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{2-[(3s)-1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基] 吡咯烷-3-基]乙酰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺
[1150][1151]
步骤1：(3s)-3-[2-(苄氧基)-2-氧代乙基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成。向2-[(3s)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-基]乙酸(1.0g,4.4 mmol,1.0eq.)的dmf(10.0ml,0.43m)溶液中加入cs2co3(1.71g, 4.79mmol,1.1eq.)。将反应混合物置于冰浴中，并在氩气下剧烈混合 1小时。然后滴加苄基溴(0.570ml 4.8mmol,1.2eq.)，并将反应混合物保持在0℃至室温下过夜。完成后，将混合物倒入150ml水中，用乙酸乙酯(5x50ml)萃取。将合并的有机层用50ml盐水洗涤，用 mgso4干燥，并真空蒸发溶剂。将粗制的标题化合物(含有残留的dmf 作为杂质)用于下一步骤而无需额外的纯化。(1.31g,94％收率)。
[1152]
步骤2：2-[(3s)-吡咯烷-3-基]乙酸苄酯盐酸盐的合成。在10ml圆底烧瓶中，在ar下将(3s)-3-[2-(苄基氧基)-2-氧代乙基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg,0.313mmol,1.0eq.)溶解在dcm(5.0ml,0.062m) 中。然后加入2m hcl的et2o溶液(1.25ml,2.51mmol,8.0eq.)，并在室温下进行反应5小时。完成后，将反应混合物真空蒸发至干。所得粗产物(含有～25％ dmf w/w)不经进一步纯化即用于下一步骤。(104 mg；计算值80mg；99％收率)。
[1153]
步骤3：2-[(3s)-1-[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代
ꢀ‑
2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸苄酯的合成。将2-[(3s)-吡咯烷-3-基]乙酸苄酯盐酸盐(80mg,0.31mmol, 1.0eq)、(反)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}环己烷-1-甲酸(125mg,0.31mmol,1.0eq.)、hatu
(178mg,0.47 mmol,1.5eq.)和dipea(0.163ml,0.94mmol,3.0eq.)溶于dmf(10 ml,0.031m)中，并在氩气下在室温下搅拌24h。将反应混合物倒入 100ml盐水中，用dcm(3x 25ml)萃取。有机萃取物用na2so4干燥并真空蒸发。通过色谱法a纯化粗产物，得到标题化合物(185mg,98％收率)。
[1154]
步骤4：2-[(3s)-1-[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代
ꢀ‑
2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸的合成。将2-[(3s)-1-[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸苄酯(188 mg 0.313mmol,1.0eq)和20％ pd(oh)2/c(31mg,10重量％)在thf(5 ml,0.06m)中混合。烧瓶配备有氢气球，脱气并填充有来自气球的氢。将反应物在室温下搅拌过夜。此后，uplc显示～50％转化，因此加入另一部分催化剂(13mg,10重量％)，将反应混合物脱气，用h2填充并继续on/rt。uplc显示100％转化，然后将反应混合物通过硅藻土过滤并蒸发至干。通过溶解在thf(1ml)中并用20ml et2o沉淀来纯化粗产物。真空干燥后，获得标题化合物(91mg,57％收率)。
[1155]
步骤5：4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{2-[(3s)-1-[(1r,4r)-4-({2
‑ꢀ
[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2
‑ꢀ
二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基] 氨基}-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15 mg,0.02mmol)和[(3s)-1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸(12.3mg,0.02 mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(13.2 mg,54％)；lcms:c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1200.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),9.33
–
9.19(m,1h),8.62 (s,1h),8.37(s,1h),8.13(d,j＝7.6hz,1h),7.87(s,1h),7.67(d,j＝ 7.7hz,1h),7.63
–
7.54(m,2h),7.51(s,2h),7.24
–
7.14(m,2h),7.03 (dd,j＝7.0,2.9hz,1h),6.16(s,1h),5.04(dd,j＝12.9,5.4hz,1h), 4.21(s,1h),4.03(d,j＝7.0hz,1h),3.93
–
3.40(m,8h),3.01
–
2.70 (m,10h),2.66
–
2.55(m,2h),2.36(s,3h),2.16
–
1.50(m,31h),1.09 (d,j＝6.5hz,6h)。
[1156]
实施例57
[1157]
4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{2-[(3r)-1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基] 吡咯烷-3-基]乙酰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺
[1158][1159]
步骤1：[(3r)-1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸的合成。类似于2
‑ꢀ
[(3s)-1-[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-4-基]氨基}环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸，使用2-[(3r)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-基]乙酸作为实施例56的步骤1中的起始原料，合成标题化合物。
[1160]
步骤2：4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{2-[(3r)-1-[(1r,4r)-4-({2
‑ꢀ
[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2
‑ꢀ
二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基] 氨基}-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15 mg,0.02mmol)和[(3r)-1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-基]乙酸(12.3mg,0.02 mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(7.6 mg,28％)；lcms:c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1200.0[m h]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.88
–
8.79(m,1h),8.26
–
8.14(m,1h), 8.12
–
8.00(m,1h),7.85
–
7.72(m,2h),7.64(s,1h),7.59
–
7.46(m, 2h),7.21
–
7.10(m,2h),7.10
–
7.02(m,1h),5.33(t,j＝6.9hz,1h), 5.08(dd,j＝12.2,5.6hz,1h),4.42
–
4.30(m,1h),4.25
–
3.48(m,14h), 3.21
–
2.52(m,15h),2.46(s,3h),2.35
–
1.49(m,26h),1.17(d,j＝6.6 hz,6h)。
[1161]
实施例58
[1162]
5-[(6-{1'-[4-({4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}磺酰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1163][1164]
步骤1：4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌嗪-1-基磺
酰基)苯甲酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(450mg,1.63mmol)和4-(哌嗪-1-磺酰基)苯甲酸盐酸盐(500mg,1.63mmol)合成标题化合物，以提供标题化合物(75mg,8.7％)。
[1165]
步骤2：5-[(6-{1'-[4-({4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}磺酰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(12mg,0.02mmol)和4-{4-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基磺酰基}苯甲酸(9.8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(4.4mg,22％)；lcms:c
65h71
fn
12
o9s理论值1214.5，实测值1215.7[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.06(s,1h), 9.27(s,1h),8.57(s,1h),8.36(s,1h),8.12(d,j＝7.8hz,1h),7.90
–ꢀ
7.83(m,3h),7.76(d,j＝8.0hz,2h),7.68(dd,j＝8.5,3.0hz,2h), 7.59(d,j＝8.1hz,2h),7.51(s,1h),7.34(d,j＝2.3hz,1h),7.28
–ꢀ
7.21(m,1h),7.17(d,j＝12.1hz,1h),5.28(q,j＝6.6hz,1h),5.05 (dd,j＝12.7,5.4hz,1h),4.25
–
3.98(m,4h),3.95
–
3.68(m,4h),3.55
ꢀ–
3.49(m,3h),3.12
–
2.69(m,12h),2.65
–
2.53(m,1),2.36(s,3h), 2.02
–
1.34(m,18h),1.09(d,j＝6.5hz,6h)。
[1166]
实施例59
[1167]
5-[(6-{1'-[4-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基]哌啶-4-基}甲基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
ꢀ‑
1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1168][1169]
步骤1：4-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 哌啶-4-基}甲基)苯甲酸的合成。根据通用程序a，使用4-(哌啶-4-基甲基)苯甲酸盐酸盐(762mg,2.53mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4
‑ꢀ
氟异吲哚-1,3-二酮(700mg,2.53mmol)合成标题化合物，得到产物(250 mg,21％)。
[1170]
步骤2：5-[(6-{1'-[4-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基]哌啶-4-基}甲基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(12mg,
0.02mmol)和4-((1-(2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌啶-4-基)甲基)苯甲酸(9.8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(5.8mg,31％)；lcms:c
67h74
fn
11
o7理论值1163.6，实测值1165.9[m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h), 9.29(d,j＝9.5hz,1h),8.37(s,1h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.88(s, 1h),7.67(dt,j＝11.3,5.9hz,2h),7.60(d,j＝8.2hz,2h),7.52(s,1h), 7.42(d,j＝7.7hz,2h),7.31(dd,j＝7.8,3.2hz,5h),7.18(d,j＝12.0 hz,1h),5.33
–
5.23(m,1h),5.08(dd,j＝12.9,5.5hz,1h),4.27
–
4.15 (m,1h),4.04(dt,j＝14.0,7.1hz,2h),3.96
–
3.65(m,4h),3.00
–
2.72 (m,10h),2.67
–
2.55(m,4h),2.36(s,3h),2.05
–
1.97(m,1h),1.90
–ꢀ
1.34(m,23h),1.10(d,j＝6.5hz,6h)。
[1171]
实施例60
[1172]
4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]哌啶-4
‑ꢀ
羰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1173][1174]
步骤1：1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序f，使用(反)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基}环己烷-1-甲酸(实施例26；40mg,0.1mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(18.5mg,0.1mmol)合成标题化合物。使用色谱法b分离产物，接着使中间体进行通用程序b，得到标题化合物(40mg,78％)。
[1175]
步骤2：4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基] 哌啶-4-羰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'
‑ꢀ
哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15mg,0.02mmol) 和1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]哌啶-4-甲酸(10mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(14.5mg,54％)；lcms: c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1199.9[m h]

；1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ8.89(d,j＝8.3hz,1h),8.02(d,j＝8.1hz,1h),7.82
ꢀ–
7.70(m,2h),7.65
–
7.48(m,3h),7.14(dd,j＝18.2,10.2hz,2h),7.05 (d,j＝7.0hz,1h),5.32(p,j＝6.6hz,1h),5.05(dd,j＝12.5,5.4hz, 1h),4.59(s,1h),4.34(p,j＝8.2hz,1h),4.25
–
3.84(m,7h),3.66(p, j＝8.2hz,1h),3.61
–
3.48(m,4h),3.17
–
3.01(m,3h),
2.97
–
2.63(m, 10h),2.44(s,3h),2.27
–
2.16(m,2h),2.16
–
1.49(m,24h),1.42(p,j ＝12.3hz,2h),1.18
–
1.11(m,7h)。
[1176]
实施例61
[1177]
4-氟-2-甲基-5-({6-[1'-(4-{甲基[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己基]氨基甲酰基} 苯甲酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺
[1178][1179]
步骤1：4-{甲基[(1r,4r)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]环己基]氨基甲酰基}苯甲酸甲酯的合成。按照通用程序f，使用对苯二甲酸甲酯(180 mg,1.0mmol)和n-[(1r,4r)-4-(甲基氨基)环己基]氨基甲酸叔丁酯(190 mg,0.83mmol)，获得标题化合物(257mg,79％)。
[1180]
步骤2：4-[n-甲基(1r,4r)-4-氨基环己烷酰氨基]苯甲酸盐酸盐的合成。根据通用程序c合成标题化合物，使用4-[n-甲基(1r,4r)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]环己烷酰氨基]苯甲酸甲酯(257mg,0.66mmol)，并在 50℃下加热反应。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(200mg,97％)。
[1181]
步骤3：4-{甲基[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}环己基]氨基}苯甲酸的合成。根据通用程序a，使用4-[n-甲基(1r,4r)-4-氨基环己烷酰氨基]苯甲酸盐酸盐(103mg,0.36 mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(100mg,0.36 mmol)合成标题化合物，运行反应16hr。将粗物质通过色谱法c纯化以产生标题化合物(6mg,3.3％)。
[1182]
步骤4：4-氟-2-甲基-5-({6-[1'-(4-{甲基[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己基]氨基甲酰基}苯甲酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺 [吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)
‑ꢀ
n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(28mg, 0.04mmol)和1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己烷羰基]哌啶-4-甲酸(20mg,0.04mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(6.4mg,13％)；lcms: c
69h77
fn
12
o8理论值1220.6，实测值611.9[(m 2h)/2]

；1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ8.88(s,1h),8.02(d,j＝8.0hz,1h),7.80
–
7.71(m, 2h),7.68
–
7.46(m,8h),7.18
–
7.00(m,3h),5.31(p,j＝6.5hz,1h), 4.37
–
3.47(m,12h),3.14
–
2.57(m,14h),2.44(s,3h),2.32
–
1.64(m, 26h),1.61
–
1.48(m,2h),1.15(d,j＝6.6hz,6h)。
[1183]
实施例62
[1184]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'
‑ꢀ
[(1s,4s)-4-(4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基](甲基)
氨基}哌啶-1-羰基)环己烷羰基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'
‑ꢀ
哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺
[1185][1186]
步骤1：(1s,4s)-4-{4-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]哌啶-1-羰基}环己烷-1-甲酸甲酯的合成。根据通用程序f，使用n-甲基-n-(哌啶-4
‑ꢀ
基)氨基甲酸叔丁酯(270mg,1.26mmol)和(1s,4s)-4-(甲氧基羰基)环己烷-1-甲酸(234ng,1.26mmol)合成标题化合物。将粗物质使用色谱法a纯化以提供标题化合物(400mg,83％)。
[1187]
步骤2：(1s,4s)-4-[4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基]环己烷-1-甲酸盐酸盐的合成。根据通用程序c，使用(1s,4s)-4-{4-[(叔丁氧基羰基)(甲基) 氨基]哌啶-1-羰基}环己烷-1-甲酸甲酯(400mg,1.05mmol)，并在 50℃下加热反应，合成标题化合物。然后将该反应的粗物质进行通用程序b，随后实施色谱法c以提供标题化合物(250mg,78％)。
[1188]
步骤3：(1s,4s)-4-(4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基](甲基)氨基}哌啶-1-羰基)环己烷-1-甲酸的合成。根据通用程序 a，使用(1s,4s)-4-[4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基]环己烷-1-甲酸盐酸盐(275 mg,0.91mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(250 mg,0.91mmol)合成标题化合物，运行反应16hr。将粗物质通过色谱法c纯化以产生标题化合物(13mg,2.7％)。
[1189]
步骤4：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'-[(1s,4s)-4-(4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基](甲基)氨基}哌啶-1-羰基)环己烷羰基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(21mg, 0.03mmol)和(1s,4s)-4-(4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基](甲基)氨基}哌啶-1-羰基)环己烷-1-甲酸合成标题化合物(13 mg,0.02mmol)，然后通过反相hplc以提供标题化合物(14.5mg, 46％)；lcms:c
68h81
fn
12
o8理论值1212.6，实测值1215.1[(m 2h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ9.03(s,1h),7.99(d,j＝8.0hz,1h),7.78 (s,1h),7.76
–
7.70(m,1h),7.66
–
7.56(m,2h),7.52(d,j＝7.8hz,1h), 7.35
–
7.26(m,2h),7.17(d,j＝11.8hz,1h),5.34(p,j＝6.6hz,1h), 5.11(dd,j＝12.5,5.5hz,1h),4.66(d,j＝13.3hz,1h),4.33(p,j＝8.3 hz,1h),4.19
–
3.96(m,6h),3.96
–
3.84(m,2h),3.66(p,j＝8.1hz, 1h),3.54(d,j＝12.2hz,2h),3.19
–
2.97(m,3h),2.97
–
2.54(m,12h), 2.45(s,3h),2.19
–
1.50(m,32h),1.16(d,j＝6.5hz,6h)。
[1190]
实施例63
[1191]
5-{[6-(1'-{4-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异
吲哚-4-基}哌啶-4-基)氧基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
ꢀ‑
1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1192][1193]
步骤1：4-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 哌啶-4-基}氧基)苯甲酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(350mg,1.27mmol)和4-(哌啶-4-基氧基)苯甲酸盐酸盐(326mg,1.27mmol)以及使用dmso作为溶剂来合成标题化合物。在纯化后，获得标题化合物(550mg,91％)。
[1194]
步骤2：5-{[6-(1'-{4-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-4-基)氧基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(13.7mg,0.02mmol)和4-({1-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶-4-基}氧基)苯甲酸(8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(9.8mg,50％)；lcms:c
66h72
fn
11
o8理论值1165.6，实测值1166.6[(m h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.99(s,1h),7.99 (d,j＝8.1hz,1h),7.82
–
7.71(m,2h),7.67(dd,j＝8.4,7.2hz,1h), 7.62
–
7.53(m,2h),7.52
–
7.46(m,2h),7.37(dd,j＝7.8,5.0hz,2h), 7.17(d,j＝11.8hz,1h),7.13
–
7.07(m,2h),5.34(p,j＝6.5hz,1h), 5.10(dd,j＝12.7,5.5hz,1h),4.74
–
4.68(m,1h),4.38
–
3.74(m,6h), 3.70
–
3.47(m,6h),3.14
–
3.02(m,2h),2.98
–
2.67(m,7h),2.45(s, 3h),2.26
–
1.69(m,22h),1.56(q,j＝14.4hz,1h),1.16(d,j＝6.5hz, 6h)。
[1195]
实施例64
[1196]
5-{[6-(1'-{4-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-基)氧基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
ꢀ‑
1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1197]
[1198]
步骤1：4-({1-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基] 哌啶-4-基}氧基)苯甲酸的合成。根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(350mg,1.27mmol)和4-(哌啶-4-基氧基)苯甲酸盐酸盐(326mg,1.27mmol)，使用dmso作为溶剂，在微波中在125℃下加热3小时，合成标题化合物。在纯化后，获得标题化合物(540mg,89％)。
[1199]
步骤2：5-{[6-(1'-{4-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}哌啶-4-基)氧基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(13.7mg,0.02mmol)和4-({1-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)苯甲酸(8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(7.5mg,36％)；lcms:c
66h72
fn
11
o8理论值1165.6，实测值1166.6[(m h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.98(s,1h),8.20 (d,j＝7.9hz,1h),7.99(d,j＝8.0hz,1h),7.78(s,1h),7.75(dd,j＝ 7.9,1.6hz,1h),7.69(d,j＝8.5hz,1h),7.62
–
7.54(m,2h),7.54
–
7.47 (m,2h),7.39(d,j＝2.3hz,1h),7.27(dd,j＝8.6,2.3hz,1h),7.17(d, j＝11.8hz,1h),7.13
–
7.07(m,2h),5.33(p,j＝6.6hz,1h),5.07(dd, j＝12.4,5.5hz,1h),4.76(d,j＝3.8hz,1h),4.33(p,j＝8.2hz,1h), 4.23
–
4.00(m,4h),3.85
–
3.78(m,3h),3.66(p,j＝8.2hz,1h),3.59
–ꢀ
3.42(m,5h),3.16
–
3.04(m,2h),2.98
–
2.79(m,5h),2.79
–
2.63(m, 3h),2.45(s,3h),2.21
–
2.05(m,3h),2.05
–
1.65(m,18h),1.63
–
1.52 (m,1h),1.16(d,j＝6.6hz,6h)。
[1200]
实施例65
[1201]
5-{[6-(1'-{1-[1-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}甲基)哌啶-4-基]-1h-吡唑-3-羰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1202][1203]
步骤1：4-[3-(甲氧基羰基)吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成。在0℃下在氮气氛下向1h-吡唑-3-甲酸甲酯(5.99g,47.5mmol,1eq.) 在dmf(30ml)中的混合物加入nah(2.28g,95mmol)。在0℃下经 10分钟向上述混合物中添加4-溴哌啶-1-甲酸叔丁酯(25.1g,95 mmol)。将所得混合物在室温下在氮气氛下搅拌过夜。用碳酸氢钠(水溶液，100ml)淬灭反应。将反应混合物用乙酸乙酯(3
×
30ml)萃取。将合并的有机层用水(3
×
10ml)洗涤，经无
水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过色谱法a纯化残余物，用石油醚/etoac(1/1)洗脱，得到4-[3-(甲氧基羰基)吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(750mg,5％收率)，为油状物。
[1204]
步骤2：1-[1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基]吡唑-3-甲酸的合成。在 0℃下向4-[3-(甲氧基羰基)吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg, 2.26mmol,1equiv.)在thf(2ml)、meoh(2ml)和h2o(2ml)中的混合物加入lioh(108mg,4.52mmol,2equiv.)。将所得混合物在室温下搅拌1h，然后在真空下浓缩。用hcl水溶液(2n)将混合物酸化至ph 3，并用乙酸乙酯(3
×
10ml)萃取水层。减压除去溶剂后得到标题化合物(400mg，粗品)。
[1205]
步骤-3：4-[3-(叔丁氧基羰基)吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成。在0℃下在氮气氛下向1-[1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基]吡唑-3-甲酸(400mg,1.35mmol,1equiv.)在dcm(5ml)中的混合物加入(z)
‑ꢀ
n,n'-二异丙基叔丁氧基甲脒(814mg,4.1mmol,3equiv.)。将所得混合物在室温下在氮气氛下搅拌过夜。通过色谱法a纯化残余物，用石油醚/etoac(1/1)洗脱，得到标题化合物(305mg,59％)，为无色油状物。
[1206]
步骤4：1-(哌啶-4-基)吡唑-3-甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序 b，使用4-[3-(叔丁氧基羰基)吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(305mg, 0.868mmol,1equiv.)作为起始材料实施反应。将所得混合物真空浓缩以提供标题化合物(200mg,粗品)，为粗制的油。
[1207]
步骤5：1-(1-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 甲基]哌啶-4-基)吡唑-3-甲酸叔丁酯的合成。向1-(哌啶-4-基)吡唑-3
‑ꢀ
甲酸叔丁酯(320mg,1.27mmol,1eq.)在dcm(4ml)和dmso(1ml) 中的混合物加入2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-甲醛 (364mg,1.27mmol,1eq.)。在0℃下在30min内向上述混合物中加入nabh(oac)3(2.7g,13mmol,10eq.)。在室温下将所得混合物搅拌过夜，然后在真空下浓缩。将残余物通过色谱法a纯化，用石油醚 /etoac(1/1)洗脱。这得到1-(1-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]甲基]哌啶-4-基)吡唑-3-甲酸叔丁酯(120mg,16％收率)，为白色固体。
[1208]
步骤6：1-(1-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 甲基]哌啶-4-基)吡唑-3-甲酸的合成。根据通用程序b，使用1-(1-[[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]甲基]哌啶-4-基)吡唑
‑ꢀ
3-甲酸叔丁酯(170mg,0.326mmol)作为起始材料实施反应。通过色谱法c纯化残余物，提供标题化合物(42.5mg,27％收率)，为白色固体。
[1209]
步骤7：5-{[6-(1'-{1-[1-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}甲基)哌啶-4-基]-1h-吡唑-3-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(14mg,0.02mmol)和1
‑ꢀ
[1-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}甲基)哌啶-4-基] 吡唑-3-甲酸(8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc 以提供标题化合物(9.2mg,44％)；lcms:c
64h72
fn
13
o7理论值1153.6，实测值1155.4[(m 2h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.84(s,1h), 8.13
–
8.05(m,1h),8.06
–
7.95(m,3h),7.77(d,j＝16.5hz,2h),7.69
ꢀ–
7.50(m,3h),7.15(d,j＝11.8hz,1h),6.66
–
6.51(m,1h),5.31(p,j ＝6.6hz,1h),5.23(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.43
–
3.72(m,8h),3.72
ꢀ–
3.41(m,5h),3.14
–
2.98(m,2h),2.98
–
2.67(m,8h),2.60
–
2.25(m, 8h),2.25
–
2.12(m,1h),2.03
–
1.48(m,18h),
1.15(d,j＝6.6hz,6h)。
[1210]
实施例66
[1211]
4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}(甲基)氨基)环己烷羰基] 哌啶-4-羰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'
‑ꢀ
哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺
[1212][1213]
步骤1：(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}环己烷-1-甲酸甲酯的合成。将反式-4-(叔丁氧基羰基氨基)环己烷甲酸甲酯(3.0g,12 mmol,1.0eq)溶于dmf(20ml,0.6m)中，并在冰/盐浴上冷却至0℃。然后加入nah(0.536g,14.0mmol,1.2eq)，并将混合物在0℃下搅拌30min。将甲基碘(1.09ml,17.5mmol,1.5eq)加入到混合物中，除去冷却浴，并将反应物在室温下搅拌过夜。然后将混合物与甲苯 (3x100ml)共蒸发以共沸除去过量的dmf。将50ml饱和nh4cl水溶液添加至剩余固体，并用et2o(3
×
50ml)萃取产物。有机层用na2so4干燥，真空蒸发，得到标题化合物(3.28g,99％)。
[1214]
步骤2：(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}环己烷-1-甲酸的合成。将(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}环己烷-1-甲酸甲酯 (3.276g,12.07mmol,1.0eq)溶于thf/h2o(30ml,5:1v/v,0.40m)混合物中。将固体lioh
·
xh2o(1.04g,24.1mmol,2.0eq)加入到混合物中，并在室温下搅拌过夜。此后，nmr显示100％的底物消耗。在真空中除去thf，并将残余的水溶液用饱和的khso4水溶液酸化至ph 5，用乙酸乙酯(4
×
25ml)萃取，用na2so4干燥，真空蒸发。获得标题化合物，为乳白色固体，其不经额外纯化用于下一步骤。
[1215]
步骤3：(1r,4r)-4-(甲基氨基)环己烷-1-甲酸盐酸盐的合成。将 (1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基}环己烷-1-甲酸(2.51g,9.75 mmol,1.0eq)置于250ml圆底烧瓶中，并溶解于无水dcm(130ml, 0.07m)中。将反应混合物置于冰浴中并加入2m hcl的et2o溶液(39 ml,78mmol,8.0eq)。将反应混合物在0℃至rt搅拌过夜。此后，形成白色沉淀，nmr显示完全转化。将反应混合物真空蒸发。粗制的标题化合物不经额外纯化即用于下一步骤。
[1216]
步骤4：(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-异吲哚-4-基](甲基)氨基}环己烷-1-甲酸的合成：将(1r,4r)-4-(甲基氨基)环己烷-1-甲酸盐酸盐(1.74g,9.0mmol,1.0eq)、2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(2.5g,9.0mmol,1.0eq)、 kf(2.09g,36.0mmol,4.0eq)溶于dmso(50.0ml,0.18m)
中，并在氩气下在120℃搅拌过夜。将反应混合物倒入1000ml盐水中，用乙酸乙酯(5
×
100ml)萃取。将合并的有机层用na2so4干燥并真空蒸发。粗化合物用色谱法b、随后用色谱法c纯化，得到标题化合物(768mg, 21％)。
[1217]
步骤5：1-[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基](甲基)氨基}环己烷羰基]哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序f，使用(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基](甲基)氨基}环己烷-1-甲酸(100mg,0.24mmol)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(54 mg,0.29mmol)合成标题化合物。纯化后，使残余物进行通用程序b 以产生标题化合物(50mg,39％)。
[1218]
步骤6：4-氟-2-甲基-5-{[6-(2-氧代-1'-{1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}(甲基)氨基)环己烷羰基]哌啶-4-羰基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(13mg,0.02 mmol)和1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基}(甲基)氨基)环己烷羰基]哌啶-4-甲酸(9mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(6.2mg,44％)；lcms: c
68h81
fn
12
o8理论值1212.6，实测值1213.8[(m h)]

；1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ8.87(d,j＝11.8hz,1h),8.03(d,j＝8.0hz,1h),7.87
ꢀ–
7.67(m,2h),7.67
–
7.55(m,2h),7.52(d,j＝7.8hz,1h),7.28(dd,j ＝11.9,7.8hz,2h),7.16(d,j＝11.8hz,1h),5.31(p,j＝6.7hz,1h), 5.10(dd,j＝12.6,5.5hz,1h),4.62
–
4.50(m,1h),4.34(p,j＝8.1hz, 1h),4.24
–
3.73(m,8h),3.66(p,j＝8.3hz,1h),3.54(d,j＝12.3hz, 2h),3.15
–
2.99(m,3h),2.99
–
2.83(m,8h),2.81
–
2.65(m,4h),2.44 (s,3h),2.17
–
2.09(m,1h),2.06
–
1.48(m,30h),1.15(d,j＝6.6hz, 6h)。
[1219]
实施例67
[1220]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(3r)-1-[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}(甲基)氨基)环己烷羰基]吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺
[1221][1222]
步骤1：3-苄基1-(叔丁基)(r)-吡咯烷-1,3-二甲酸酯的合成。向 (3r)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸(5.00g,23.2mmol,1.0eq)的无水dmf(258ml,0.09m)溶液中加入
24h),1.15(d,j＝6.6hz,6h)。
[1227]
实施例68
[1228]
5-{[6-(1'-{1-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1229][1230]
步骤-1：1-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基]哌啶-1-羰基)哌啶-4-甲酸叔丁酯的合成。在0℃下向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(哌啶-4-基氨基)异吲哚-1,3-二酮(500mg,1.40mmol, 1eq.)和dipea(204mg,1.58mmol,1.13eq.)在dcm(30ml)中的混合物加入三光气(156mg,0.526mmol,0.375eq.)。在0℃下，向上述混合物中加入哌啶-4-甲酸叔丁酯(260mg,1.403mmol,1eq.)。在50℃下将所得混合物再搅拌过夜。将所得混合物减压浓缩。通过色谱法c 纯化残余物以提供标题化合物(470mg,59％)。
[1231]
步骤2：1-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基]哌啶-1-羰基)哌啶-4-甲酸的合成。根据通用程序b，使用1-(4
‑ꢀ
[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]哌啶-1-羰基) 哌啶-4-甲酸叔丁酯(380mg,0.669mmol)作为起始材料实施反应。将所得混合物减压浓缩。通过色谱法c纯化残余物以提供标题化合物 (131mg,37％)。
[1232]
步骤3：5-{[6-(1'-{1-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]哌啶-4-羰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15mg,0.02mmol)和1
‑ꢀ
[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]哌啶-4-甲酸(9mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相 hplc以提供标题化合物(10.7mg,48％)；lcms:c
66h78
fn
13
o8理论值1199.6，实测值1200.4[(m h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ 8.91(s,1h),8.02(d,j＝8.1hz,1h),7.80
–
7.70(m,2h),7.63
–
7.54(m, 2h),7.52(d,j＝7.9hz,1h),7.20
–
7.12(m,2h),7.08(d,j＝7.1hz, 1h),5.41
–
5.30(m,1h),5.06(dd,j＝12.4,5.5hz,1h),4.34(p,j＝8.3 hz,1h),4.19
–
4.00(m,3h),3.95(t,j＝12.5hz,2h),3.84
–
3.75(m, 3h),3.75
–
3.63(m,3h),3.54(d,j＝12.1hz,2h),3.19
–
2.66(m,15h), 2.44(s,3h),2.16
–
1.67(m,24h),1.56(q,j＝10.4,8.7hz,2h),1.15(d, j＝6.6hz,6h)。
[1233]
实施例69
[1234]
5-[(6-{1'-[(3r)-1-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]吡咯烷-3-羰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1235][1236]
步骤-1：(3r)-1-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸甲酯的合成。在室温下向2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-4-(哌啶-4-基氨基)异吲哚-1,3-二酮(300mg,0.842 mmol,1eq.)在dcm(10ml)中的混合物滴加三光气(74mg,0.25mmol, 0.3eq.)和dipea(652mg,5.05mmol,6eq.)。向上述混合物中加入 (3r)-吡咯烷-3-甲酸甲酯(108mg,0.842mmol,1eq.)。将所得混合物在50℃下搅拌过夜。将所得混合物真空浓缩。通过色谱法c纯化残余物以提供标题化合物(200mg,46％)。
[1237]
步骤2：(3r)-1-(4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸的合成。在室温下将(3r)-1-(4-[[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸甲酯(180mg,0.352mmol,1eq.)在浓hcl(3ml)中的混合物搅拌5h。通过色谱法c纯化残余物，得到标题化合物(93mg, 53％)。
[1238]
步骤3：5-[(6-{1'-[(3r)-1-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)哌啶-1-羰基]吡咯烷-3-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}
‑ꢀ
3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(11mg,0.02mmol) 和(3r)-1-(4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸(8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(8.8mg,48％)；lcms: c
66h78
fn
13
o8理论值1185.6，实测值1186.8[(m h)]

；1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ9.02(d,j＝4.2hz,1h),8.02
–
7.94(m,1h),7.84
–
7.64 (m,2h),7.64
–
7.46(m,3h),7.20
–
7.11(m,2h),7.11
–
7.02(m,1h), 5.34(p,j＝6.6hz,1h),5.09
–
4.98(m,1h),4.39
–
4.27(m,1h),4.21
–ꢀ
3.85(m,5h),3.85
–
3.74(m,3h),3.72
–
3.60(m,3h),3.59
–
3.42(m, 6h),3.18
–
3.00(m,4h),3.00
–
2.65(m,7h),2.45(s,3h),2.24
–
1.66 (m,22h),1.65
–
1.47(m,3h),1.16(d,j＝6.6hz,6h)。
[1239]
实施例70
[1240]
4-氟-2-甲基-5-({6-[2-氧代-1'-(1-{[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己基]甲基}-1h
‑ꢀ
吡唑-4-羰基)-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'
‑ꢀ
哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-n-(丙-2-基) 苯甲酰胺
[1241][1242]
步骤1：n-[(1r,4r)-4-(溴甲基)环己基]氨基甲酸叔丁酯的合成。向 n-[(1r,4r)-4-(羟基甲基)环己基]氨基甲酸叔丁酯(0.500g,2.18mmol, 1.0eq)的无水dcm(10ml,0.21m)溶液中加入四溴化碳(1.08g,3.27 mmol,1.5eq)和三苯基膦(0.857g,3.27mmol,1.5eq)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。然后，将反应混合物浓缩，并将残余物用甲基叔丁基醚研磨以除去三苯基氧化膦。将获得的甲基叔丁基醚溶液真空浓缩，得到标题化合物，为白色固体(0.482g,75％收率)。
[1243]
步骤2：1h-吡唑-4-甲酸苄酯的合成。向1h-吡唑-4-甲酸(1.00g, 8.92mmol,1.0eq)的无水dmso(31ml,0.29m)溶液中加入khco
3 (1.07g,10.7mmol,1.2eq)。将反应混合物在氩气氛下剧烈搅拌30分钟。接着滴加苄基溴(1.00ml,8.47mmol,0.95eq)，并将反应混合物保持在室温过夜。完成后，将反应混合物倒入250ml盐水中，用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用mgso4干燥并真空蒸发溶剂。将粗产物(1.30g,72％收率)不经额外纯化即用于下一步骤。
[1244]
步骤3：1-{[(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}环己基]甲基}-1h
‑ꢀ
吡唑-4-甲酸苄酯的合成。将1h-吡唑-4-甲酸苄酯(0.433g,2.14mmol, 1.3eq)、n-[(1r,4r)-4-(溴甲基)环己基]氨基甲酸叔丁酯(0.482g,1.65 mmol,1.0eq)和无水k2co3(0.455g,3.29mmol,2.0eq)在无水丙酮(15 ml,0.11m)中的混合物在60℃加热过夜。完成后，将反应混合物浓缩，将残余物用40ml的dcm溶解，并用水(3
×
20ml)洗涤。接着，将有机层用na2so4干燥，蒸发至干，并通过色谱法b纯化，得到标题化合物(0.360g,53％收率)。
[1245]
步骤4：1-{[(1r,4r)-4-氨基环己基]甲基}-1h-吡唑-4-甲酸苄酯盐酸盐的合成。将1-{[(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}环己基]甲基}-1h
‑ꢀ
吡唑-4-甲酸苄酯(0.411g,0.994mmol,1.0eq)溶于无水dcm(14ml, 0.07m)中，并在氩气氛下用冰浴冷却。然后加入2m hcl的et2o溶液(3.98ml,7.95mmol,8.0eq)，将反应在0℃至室温下进行过夜。完成后，将反应混合物在真空中蒸发至干。将剩余的粗制固体用 et2o(3x50ml)洗涤并真空干燥。所得产物不经额外纯化即用于下一步骤中(0.311g,89％收率)。
[1246]
步骤5：1-{[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己基]甲基}-1h-吡唑-4-甲酸苄酯的合成。将1-{[(1r,4r)-4-氨基环己基]甲基}-1h-吡唑-4-甲酸苄酯盐酸盐 (0.311g,0.887mmol,1.34eq)、2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异二氢吲哚-1,3-二酮(0.183g,0.662mmol,1eq)和dipea(0.46ml,2.65mmol, 4eq)的无水dmso(6.6ml,0.10m)溶液在压力容器中在90℃加热过夜。然后，将反
应混合物倒入100ml水中，用乙酸乙酯(5
×
40ml)萃取，经na2so4干燥，真空浓缩，并通过色谱法b纯化，得到标题化合物(0.189g,50％收率)。
[1247]
步骤6：1-{[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己基]甲基}-1h-吡唑-4-甲酸的合成。将 1-{[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己基]甲基}-1h-吡唑-4-甲酸苄酯(0.379g,0.631 mmol,1.0eq)的thf(7.9ml,0.08m)溶液脱气，并加入10％ pd/c(20 重量％)。然后用来自气球的氢气填充烧瓶，反应在室温下进行过夜。通过uplc监测反应进程：在1天后，反应混合物中存在起始材料(35％)，因此再添加一部分的pd/c(10重量％)，并且反应在室温下进行过夜。完成后，将反应混合物通过硅藻土过滤并在真空中浓缩。接着，将残余物溶解于少量dcm(～2ml)中，并滴加乙醚(15ml)直至产物沉淀，然后将混合物放置过夜。然后，倾析溶剂，真空干燥剩余的固体，得到标题化合物(0.157g,99％)。
[1248]
步骤7：4-氟-2-甲基-5-({6-[2-氧代-1'-(1-{[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己基]甲基}-1h-吡唑-4-羰基)-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-n
‑ꢀ
(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(11mg,0.02 mmol)和1-{[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基}氨基)环己基]甲基}吡唑-4-甲酸(8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(8.1mg,45％)；lcms: c
65h73
fn
13
o7理论值1167.6，实测值1169.5[(m 2h)]

；1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ8.94(s,1h),8.07(s,1h),8.01(d,j＝8.0hz,1h),7.81 (s,1h),7.78(s,1h),7.75(dd,j＝7.9,1.5hz,1h),7.61(d,j＝1.5hz, 1h),7.57
–
7.50(m,2h),7.16(d,j＝11.8hz,1h),7.07(d,j＝8.6hz, 1h),7.03(d,j＝7.1hz,1h),5.32(p,j＝6.6hz,1h),5.04(dd,j＝12.6, 5.4hz,1h),4.34(p,j＝8.3hz,1h),4.20
–
4.05(m,6h),3.66(p,j＝ 8.1hz,1h),3.60
–
3.46(m,4h),3.10(d,j＝10.0hz,2h),2.97
–
2.79 (m,5h),2.79
–
2.63(m,2h),2.44(s,3h),2.23
–
1.83(m,11h),1.82
–ꢀ
1.65(m,10h),1.56(q,j＝14.4hz,1h),1.29(q,j＝10.9hz,4h),1.15 (d,j＝6.6hz,6h)。
[1249]
实施例71
[1250]
5-[(6-{1'-[2-氯-4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基}哌嗪-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
ꢀ‑
1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1251][1252]
步骤1：4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪
ꢀ‑
1-甲酸叔丁酯的合成。
[1253]
在室温下向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(4.0g, 15mmol,1eq.)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.39g,28.9mmol,2eq.)在 dmso(6ml)中的混合物加入dipea(5.61g,43.4mmol,3eq.)。将所得混合物在90℃搅拌过夜。通过色谱法c纯化残余物，提供标题化合物(850mg,10％收率)。
[1254]
步骤2：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮的合成。根据通用程序b，使用4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(850mg,1.92mmol)作为起始材料实施反应。这提供了标题化合物(710mg,粗品)。
[1255]
步骤3：2-氯-4-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5
‑ꢀ
基]哌嗪-1-羰基]苯甲酸甲酯的合成。在室温下在氮气氛下，向3-氯-4
‑ꢀ
(甲氧基羰基)苯甲酸(250mg,1.17mmol,1eq.)和tea(354mg,3.50 mmol,3equiv)在dmf(6ml)中的混合物加入2-(2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基)-5-(哌嗪-1-基)异吲哚-1,3-二酮(399mg,1.17mmol,1eq.)。在0℃下，在15分钟内向上述混合物中加入t3p(741mg,1.17mmol,1equiv, 50％w/w于etoac中)。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后除去挥发物。通过色谱法c纯化残余物，得到标题化合物(240mg,58％收率)。
[1256]
步骤4：2-氯-4-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5
‑ꢀ
基]哌嗪-1-羰基]苯甲酸的合成。根据通用程序b，使用2-氯-4-[4-[2
‑ꢀ
(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-羰基]苯甲酸甲酯(470mg,0.872mmol,1equiv)作为起始材料实施反应。通过色谱法 c纯化粗残余物，提供2-氯-4-[4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-羰基]苯甲酸(117mg,24％收率)。
[1257]
步骤5：5-[(6-{1'-[2-氯-4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代
ꢀ‑
2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基}哌嗪-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(11mg,0.02mmol)和2-氯-4
‑ꢀ
(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌嗪-1-羰基)苯甲酸(8mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(11.4mg,60％)；lcms:c
66h70
fcln
12
o8理论值1212.5，实测值1213.4[(m 1h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.92(s,1h), 8.35(d,j＝2.9hz,1h),7.97(d,j＝8.8hz,1h),7.72
–
7.50(m,4h), 7.45(dd,j＝9.0,3.0hz,1h),5.18
–
5.07(m,1h),4.60(s,1h),4.49(p, j＝
8.4hz,1h),4.28
–
4.09(m,3h),4.09
–
3.85(m,4h),3.68
–
3.51(m, 4h),3.27
–
3.10(m,4h),3.10
–
2.95(m,7h),2.95
–
2.70(m,6h),2.40
ꢀ–
2.27(m,1h),2.19(qd,j＝13.0,4.7hz,1h),2.07
–
1.71(m,19h), 1.68(d,j＝6.5hz,6h),1.66
–
1.51(m,2h),1.13(d,j＝6.5hz,2h), 0.94(s,2h)。
[1258]
实施例72
[1259]
5-[(6-{1'-[4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}-2-甲基哌嗪-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h
‑ꢀ
咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1260][1261]
步骤1：4-{4-[(叔丁氧基)羰基]苯甲酰基}-3-甲基哌嗪-1-甲酸酯的合成。将4-(叔丁氧基羰基)苯甲酸(0.5g,2mmol,1.0eq)、hatu(1.28 g,3.37mmol,1.5eq)和n,n-二异丙基乙胺(0.78ml,4.5mmol,2.0eq) 在dmf(4.5ml,0.5m)中混合，并搅拌1小时，然后向反应混合物中加入3-甲基哌嗪-1-甲酸苄酯(0.63g,2.7mmol,1.2eq)，并在室温下搅拌过夜。完成后，将反应混合物用盐水稀释，用dcm萃取，将有机层用水洗涤，用na2so4干燥。通过色谱法b纯化在溶剂蒸发后获得的残余物，得到标题化合物(0.975g,84％)。
[1262]
步骤2：4-(2-甲基哌嗪-1-羰基)苯甲酸叔丁酯的合成。将4-{4-[(叔丁氧基)羰基]苯甲酰基}-3-甲基哌嗪-1-甲酸苄酯(1.15g,2.22mmol, 1.0eq)溶于四氢呋喃(89ml,0.025m)中，将反应混合物脱气并加入 10％钯/碳60-65％湿度(1eq)，并在h2气氛下搅拌16小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用meoh洗涤并蒸发，得到标题化合物(0.75 g,2.5mmol，定量)。
[1263]
步骤3：4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-5-基]-2-甲基哌嗪-1-羰基}苯甲酸叔丁酯的合成。向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(1.05g,3.79mmol, 1.5eq)的无水dmso(5.06ml,0.5m)溶液中加入4-(2-甲基哌嗪-1-羰基)苯甲酸叔丁酯(0.856g,2.53mmol,1.0eq)和dipea(1.32ml,7.59 mmol,3.0eq)。将所得混合物在90℃下搅拌过夜。然后将其用盐水稀释，用dcm萃取。用水洗涤有机层，用na2so4干燥，浓缩后得到标题化合物粗品。通过色谱法b纯化粗品，得到标题化合物(0.32g, 0.571mmol,21％)。
[1264]
步骤4：4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
异吲哚-5-基]-2-甲基哌嗪-1-羰基}苯甲酸的合成。将4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-5-基]-2-甲基哌嗪-1-羰基}苯甲酸叔丁酯(0.295g,0.527mmol,
1.0eq)悬浮于六氟-2-丙醇(3.7 ml,35mmol,70eq)中，并在150℃下在微波中加热2小时。通过 uplc监测底物消耗。真空蒸发挥发物，用et2o(3
×
15ml)洗涤固体粘性残余物，得到标题化合物(0.139g,0.276mmol,53％)。
[1265]
步骤5：5-[(6-{1'-[4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}-2-甲基哌嗪-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙
ꢀ‑
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(12mg,0.02mmol)和(8 mg,0.02mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(11mg,56％)；lcms:c
67h73
fn
12
o8理论值1192.6，实测值1194.5 [(m 2h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.94(s,1h),8.00(d,j＝8.1 hz,1h),7.78(s,1h),7.76(d,j＝8.1hz,1h),7.71(d,j＝8.5hz,1h), 7.65(d,j＝8.0hz,2h),7.63
–
7.55(m,4h),7.37(d,j＝2.4hz,1h), 7.28
–
7.22(m,1h),7.16(d,j＝11.8hz,1h),5.33(p,j＝6.5hz,1h), 5.07(dd,j＝12.4,5.5hz,1h),4.34(p,j＝8.3hz,1h),4.14(p,j＝6.6 hz,2h),4.06
–
3.70(m,4h),3.65(q,j＝8.1hz,1h),3.54(d,j＝12.4 hz,2h),3.20
–
3.03(m,4h),3.00
–
2.79(m,6h),2.79
–
2.64(m,2h), 2.45(s,3h),2.15
–
2.05(m,1h),2.05
–
1.66(m,17h),1.56(q,j＝13.5, 13.0hz,1h),1.39(s,3h),1.15(d,j＝6.6hz,6h)。
[1266]
实施例73
[1267]
4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(3r)-1-{[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己基]甲基} 吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙
‑ꢀ
2-基)苯甲酰胺
[1268][1269]
步骤1：n-[(1r,4r)-4-甲酰基环己基]氨基甲酸叔丁酯的合成。在 0℃下，向溶于无水dcm(21.8ml,0.3m)中的反式-(4-羟基甲基)环己基氨基甲酸叔丁酯(1.5g,6.541mmol,1.0eq)中滴加dess-martin氧化剂(3.2g,7.2mmol,1.1eq)的无水dcm(43.6ml,0.15m)溶液。将反应混合物在室温下搅拌1h。完成后，用na2s2o3水溶液(3
×
100ml) 洗涤反应混合物，分离有机层，用nahco3水溶液(3
×
100ml)洗涤，然后合并水层并用dcm(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥并浓缩，得到标题化合物。产物不经额外纯化即用于下一步骤。 (0.917g,62％收率)。
[1270]
步骤2：(3r)-1-{[(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}环己基]甲基} 吡咯烷-3-甲酸苄酯的合成。向(3r)-吡咯烷-3-甲酸苄酯盐酸盐(0.521g, 2.16mmol,1.2eq)的无水dcm(30ml,0.06m)溶液中加入dipea (0.625ml,3.59mmol,2.0eq)，并在室温下搅拌15min。接着，加入 n-[(1r,4r)-4-甲酰基环己基]氨基甲酸叔丁酯(0.408g,1.79mmol,1.0 eq)，并将反应混合物在室温下搅拌3h。加入stab(1.14g,5.38mmol, 3.0eq)，并在室温下继续搅拌
过夜。此后，将反应混合物用10％k2co3水溶液淬灭并分离两相。将有机层用na2so4干燥，过滤，真空蒸发至干，并通过色谱法b纯化，得到标题化合物(0.482g,64％收率)。
[1271]
步骤3：(3r)-1-{[(1r,4r)-4-氨基环己基]甲基}吡咯烷-3-甲酸的合成。将(3r)-1-{[(1r,4r)-4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}环己基]甲基}吡咯烷-3-甲酸苄酯(0.569g,1.37mmol,1eq)的六氟异丙醇(8.20ml,77.9mmol,57.0eq)溶液置于配有磁力搅拌棒的g30微波小瓶中。将反应混合物在微波中在140℃加热2h并在150℃加热1h。完成后，将反应混合物真空浓缩，并将固体粘性残余物用et2o(3x15ml)洗涤，得到标题化合物，为沉淀(0.148g,48％收率)。
[1272]
步骤4：(3r)-1-{[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基]氨基}环己基]甲基}吡咯烷-3-甲酸的合成。将(3r)-1-{[(1r,4r)-4-氨基环己基]甲基}吡咯烷-3-甲酸(0.148g,0.654mmol,1.0eq)、2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异二氢吲哚-1,3-二酮(0.271g,0.981mmol,1.5eq)和氟化钾(0.19g,3.3mmol,5.0eq)的无水dmso(4.36ml,0.15m)溶液在压力容器中在120℃下加热35h。然后，将反应混合物倒入50ml水中，用乙酸乙酯(5
×
30ml)洗涤。蒸发水相，冷冻干燥过夜，用水除去残余的dmso，然后通过色谱法c纯化，得到标题化合物(0.068g,22％收率)。
[1273]
步骤5：4-氟-2-甲基-5-[(6-{2-氧代-1'-[(3r)-1-{[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-4-基}氨基)环己基]甲基}吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(10mg,0.01mmol)和(3r)-1-{[(1r,4r)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氨基)环己基]甲基}吡咯烷-3-甲酸(7mg,0.01mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(9.6mg,55％)；lcms:c
66h79
fn
12
o7理论值1170.6，实测值1172.4[(m 2h)]

；1hnmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.75(s,1h),8.05(d,j＝8.1hz,1h),7.81
–
7.71(m,2h),7.63(s,1h),7.60
–
7.47(m,2h),7.19
–
7.03(m,3h),5.29(p,j＝6.6hz,1h),5.06(dd,j＝12.5,5.5hz,1h),4.41
–
4.27(m,1h),4.19
–
3.47(m,14h),3.20
–
3.00(m,4h),2.98
–
2.57(m,8h),2.43(s,3h),2.30
–
2.05(m,5h),2.06
–
1.80(m,10h),1.80
–
1.63(m,8h),1.55(d,j＝12.7hz,1h),1.49
–
1.31(m,4h),1.14(d,j＝6.6hz,6h)。
[1274]
实施例74
[1275]
5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)-4-甲基哌啶-4-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1276][1277]
步骤1：4-氟-n-异丙基-5-({3-异丙基-6-[1'-(4-甲基哌啶-4-羰基)
‑ꢀ
2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用中间体1(25mg,0.04mmol)和1-(叔丁氧基羰基)-4-甲基哌啶-4
‑ꢀ
甲酸(8.6mg,0.04mmol)实施反应。色谱法c提供4-{[6-(4-{[2-氟-5
‑ꢀ
(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶
‑ꢀ
6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基] 羰基}-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯，将其直接进行通用程序b以提供标题化合物(15mg,51％)。
[1278]
步骤2：5-[(6-{1'-[1-(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-羰基)-4-甲基哌啶-4-羰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4
‑ꢀ
基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用4-氟-n-异丙基-5-({3-异丙基-6-[1'-(4-甲基哌啶-4-羰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-2-甲基苯甲酰胺(10mg,0.01mmol)和1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-甲酸(5.0mg,0.01mmol) 作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物(5.0mg, 30％)；lcms:c
67h79
fn
12
o8理论值1198.6，实测值1200.4[m h]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.71(s,1h),8.10(d,j＝8.2hz,1h),7.81
ꢀ–
7.75(m,2h),7.70(d,j＝8.4hz,1h),7.65(s,1h),7.56(d,j＝7.9hz, 1h),7.39(d,j＝2.2hz,1h),7.27(d,j＝8.6hz,1h),7.16(d,j＝11.9 hz,1h),5.30(t,j＝6.6hz,1h),5.09(dd,j＝12.5,5.5hz,1h),4.91(d, j＝2.7hz,1h),4.44
–
4.31(m,1h),4.18
–
4.02(m,8h),3.75
–
3.49(m, 5h),3.11(d,j＝12.8hz,6h),2.95
–
2.70(m,9h),2.45(s,3h),2.35(s, 1h),2.26(s,1h),2.21
–
1.80(m,12h),1.73(d,j＝6.6hz,8h),1.68
–ꢀ
1.52(m,4h),1.45(s,3h),1.16(d,j＝6.6hz,6h)。
[1279]
实施例75
[1280]
5-[(6-{1'-[4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}哌啶-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1
‑ꢀ
基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1281][1282]
步骤1：4-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的合成。向 4-溴-2-苯并呋喃-1,3-二酮(5.0g,22mmol,1equiv)和3-氨基哌啶-2,6
‑ꢀ
二酮盐酸盐(4.35g,26.4mmol,1.20equiv)在acoh(150ml)中的混合物加入naoac(2.17g,26.4mmol,1.2equiv)。将所得混合物在氮气氛下在110℃下搅拌过夜。通过过滤收集沉淀的固体，并用水和etoh 洗涤。这得到标题化合物(6.7g,90％)。
[1283]
步骤2：4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]-3,6
‑ꢀ
二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成。向4-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基) 异吲哚-1,3-二酮(1.0g,3.0mmol,1eq.)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.92g,3.0 mmol,1eq.)在1,4-二噁烷(10ml)中的混合物加入k2co3(1.23g,8.90 mmol,3eq.)的h2o(1ml)溶液和pd(dppf)cl2(0.22g,0.30mmol,0.1 eq.)。将所得混合物在氮气氛下在100℃下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。通过色谱法c纯化残余物，得到标题化合物(350mg, 27％)。
[1284]
步骤-3：4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌啶
ꢀ‑
1-甲酸叔丁酯的合成。向4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(460mg,1.05mmol,1equiv) 在thf(10ml)中的混合物加入pd/c(460mg)。将所得混合物在氢气氛下在室温下搅拌2h。过滤所得混合物。在减压下浓缩滤液。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。
[1285]
步骤4：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(哌啶-4-基)异吲哚-1,3-二酮盐酸盐的合成。根据通用程序b，使用4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3
‑ꢀ
二氧代异吲哚-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(460mg,1.04mmol)作为起始材料实施反应。将所得混合物真空浓缩，并通过色谱法c纯化以提供标题化合物(271mg,69％)。
[1286]
步骤5：4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}苯甲酸甲酯的合成。根据通用程序f，使用中间体1(41mg,0.06mmol)和4-(甲氧基羰基)苯甲酸(10 mg,0.06mmol)合成标题化合物，并在色谱法c之后分离(30mg,62％)。
[1287]
步骤6：4-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)
‑ꢀ
3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-羰基)苯甲酸的合成。根据通用程序 c，使用4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3
‑ꢀ
异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}苯甲酸甲酯(30mg,0.03mmol)合成标题化合物。将粗物质使用色谱法c纯化，得到标题化合物(22mg, 74％)。
[1288]
步骤7：5-[(6-{1'-[4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}哌啶-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用4-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-羰基)苯甲酸(8mg,0.01 mmol)和2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-4-(哌啶-4-基)异吲哚-1,3-二酮(4mg, 0.01mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物 (2.1mg,19％)；lcms:c
67h72
fn
11
o8理论值1177.6，实测值1178.2 [(m h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.71(s,1h),8.06(d,j＝8.1 hz,1h),7.87
–
7.71(m,5h),7.69
–
7.55(m,6h),7.14(d,j＝11.8hz, 1h),5.29(q,j＝6.6hz,1h),5.16(s,1h),4.35(p,j＝8.4hz,1h),4.30
ꢀ–
4.19(m,1h),4.19
–
3.93(m,4h),3.93
–
3.72(m,2h),3.72
–
3.59(m, 1h),3.54(d,j＝12.5hz,2h),3.14
–
2.68(m,10h),2.43(s,3h),2.19
–ꢀ
1.66(m,22h),1.66
–
1.50(m,1h),1.14(d,j＝6.5hz,6h)。
[1289]
实施例76
[1290]
5-[(6-{1'-[4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-5-基}哌啶-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1
‑ꢀ
基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1291][1292]
步骤1：5-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮的合成。向 5-溴-2-苯并呋喃-1,3-二酮(5.0g,22mmol,1eq.)和3-氨基哌啶-2,6-二酮(2.82g,22.0mmol,1equiv)在acoh(100ml)中的混合物加入 naoac(1.81g,22.0mmol,1eq.)。将所得混合物在120℃下搅拌过夜。通过过滤收集沉淀的固体并用水(3
×
100ml)洗涤。这得到标题化合物(6g,73％收率)。
[1293]
步骤2：4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-3,6
‑ꢀ
二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成。向5-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基) 异吲哚-1,3-二酮(2.0g,5.93mmol,1equiv)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2
‑ꢀ
二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g,7.1 mmol,1.2eq.)在二噁烷(50ml)中的混合物加入k3po4(2.52g,11.9 mmol,2equiv)和pd(pph3)2cl2(0.83g,1.2mmol,0.2equiv)。将所得混合物在氮气氛下在100℃下搅拌过夜。在真空下浓缩所得混合物并通过色谱法a纯化残余物，得到标题化合物(840mg,29％收率)。
[1294]
步骤3：4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌啶
ꢀ‑
1-甲酸叔
丁酯的合成。向4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-3,6-二氢-2h-吡啶-1-甲酸叔丁酯(820mg,1.87mmol,1eq.) 在thf(20ml)中的混合物加入pd/c(410mg)。将所得混合物在氢气氛下在室温下搅拌过夜。将所得混合物用鼓泡通过混合物的氮气吹扫并经硅藻土过滤。减压浓缩滤液，得到标题化合物(600mg，粗品)。
[1295]
步骤4：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)异吲哚-1,3-二酮盐酸盐的合成。根据通用程序b，使用4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3
‑ꢀ
二氧代异吲哚-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(590mg,1.34mmol,1equiv) 作为起始材料实施反应。将残余物用色谱法c纯化，得到标题化合物 (289mg,56％收率)。
[1296]
步骤5：5-[(6-{1'-[4-(4-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-5-基}哌啶-1-羰基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用4-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-羰基)苯甲酸(8mg,0.01 mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)异二氢吲哚-1,3-二酮盐酸盐(4mg,0.01mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(3.3mg,30％)；lcms:c
67h72
fn
11
o8理论值1177.6，实测值1179.2[(m 2h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.84(s,1h), 8.03(d,j＝8.1hz,1h),7.84(d,j＝5.9hz,2h),7.81
–
7.72(m,3h), 7.67
–
7.56(m,6h),7.15(d,j＝11.8hz,1h),5.30(p,j＝6.6hz,1h), 4.33(q,j＝8.4hz,1h),4.30
–
4.21(m,1h),4.20
–
4.05(m,2h),4.05
–ꢀ
3.83(m,2h),3.81
–
3.59(m,2h),3.54(d,j＝12.4hz,2h),3.20
–
2.81 (m,10h),2.79
–
2.68(m,2h),2.44(s,3h),2.18
–
1.66(m,22h),1.64
–ꢀ
1.49(m,1h),1.14(d,j＝6.5hz,6h)。
[1297]
实施例77
[1298]
5-{[6-(1'-{4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-异吲哚-4-基}甲基)哌啶-1-羰基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙-2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺
[1299][1300]
步骤1：4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成。向4-溴-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮(1.0g,3.0mmol,1eq.)和4-[(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.96g,3.0mmol,1 equiv)在二噁烷(5ml)中的混合物加入k2co3(1.23g,
8.9mmol,3eq.) 的h2o(0.5ml)溶液和pd(dppf)cl2(0.22g,0.1eq.)。将所得混合物在氮气氛下在100℃下搅拌2h。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过色谱法c纯化，得到标题化合物(500mg,33％收率)。
[1301]
步骤2：4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]甲基] 哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成。向4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]亚甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(490mg,1.08mmol,1 equiv)在thf(20ml)中的混合物加入pd/c(245mg)。将所得混合物在氢气氛下在室温下搅拌2h。将氮气鼓泡通过混合物，然后通过硅藻土过滤。在减压下浓缩滤液。这得到标题化合物(450mg，粗品)。
[1302]
步骤3：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(哌啶-4-基甲基)异吲哚-1,3-二酮盐酸盐的合成。根据通用程序b，使用4-[[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)
‑ꢀ
1,3-二氧代异吲哚-4-基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(490mg,1.08mmol) 作为起始材料实施反应。通过色谱法c纯化粗残余物，提供标题化合物(226mg,53％收率)。
[1303]
步骤4：5-{[6-(1'-{4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代-2,3
‑ꢀ
二氢-1h-异吲哚-4-基}甲基)哌啶-1-羰基]苯甲酰基}-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1,2-二氢螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-(丙
‑ꢀ
2-基)-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-2-甲基-n-(丙-2-基)苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用4-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-羰基)苯甲酸(8mg,0.01mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-(哌啶-4-基甲基) 异吲哚-1,3-二酮盐酸盐(4mg,0.01mmol)合成标题化合物，然后通过反相hplc以提供标题化合物(4.2mg,37％)；lcms:c
68h74
fn
11
o8理论值1191.6，实测值1192.4[(m h)]

；1h nmr(500mhz,甲醇
‑ꢀ
d4)δ8.88(s,1h),8.02(d,j＝8.1hz,1h),7.82
–
7.68(m,4h),7.68
–ꢀ
7.55(m,5h),7.53(d,j＝7.8hz,2h),7.16(d,j＝11.9hz,1h),5.31(p, j＝6.6hz,1h),5.13(dd,j＝12.6,5.5hz,1h),4.39
–
4.19(m,2h),4.17
ꢀ–
3.89(m,3h),3.79
–
3.60(m,3h),3.54(d,j＝12.1hz,2h),3.11(d,j ＝7.2hz,5h),3.00
–
2.64(m,8h),2.44(s,3h),2.19
–
1.35(m,22h), 1.15(d,j＝6.6hz,6h)。
[1304]
实施例78
[1305]
5-((6-(1'-(4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
‑ꢀ
5-基)哌嗪-1-羰基)苯甲酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基) 螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基) 氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1306][1307]
步骤1：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮的合成。
根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异二氢吲哚-1,3-二酮(500mg,1.81mmol)和1-boc-哌嗪(337mg,1.81 mmol)合成标题化合物。随后将该物质用通用程序b处理，提供标题化合物(278mg,45％)。
[1308]
步骤2：4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5
‑ꢀ
基)哌嗪-1-羰基)苯甲酸的合成。根据通用程序f，使用2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(100mg,0.29mmol)和 4-叔丁氧基羰基苯甲酸(65mg,0.29mmol)合成标题化合物。随后将该物质用通用程序b处理，提供标题化合物(201mg,70％)。
[1309]
步骤3：5-((6-(1'-(4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-羰基)苯甲酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶
ꢀ‑
4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15mg)、4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-羰基)苯甲酸(10.8mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(6.7mg,25％)； lcms:c
66h71
fn
12
o8理论值：1178.6，实测值：m/z＝1179.9[m h]

. 1
h nmr(500mhz,dmso-d6)δ:11.09(s,1h),9.39(d,j＝9.9hz,1h), 8.71(s,1h),8.43(s,1h),8.15(d,j＝7.8hz,1h),7.90(s,1h),7.72(dd, j＝14.9,8.1hz,2h),7.64
–
7.56(m,6h),7.52(s,1h),7.38(d,j＝2.3 hz,1h),7.28(dd,j＝8.5,2.3hz,1h),7.20(d,j＝12.1hz,1h),5.31(p, j＝6.7hz,1h),5.09(dd,j＝12.7,5.5hz,1h),4.23(q,j＝8.3hz,3h), 4.06(dt,j＝13.7,6.7hz,3h),3.95
–
3.38(m,12h),3.01
–
2.78(m,8h), 2.38(s,3h),2.04(dd,j＝11.4,5.7hz,1h),1.89
–
1.81(m,4h),1.73(d, j＝12.3hz,2h),1.61(d,j＝6.6hz,7h),1.44(t,j＝13.2hz,2h),1.11 (d,j＝6.6hz,6h)。
[1310]
实施例79
[1311]
5-((6-(1'-((1s,4s)-4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-羰基)环己烷-1-羰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c] 吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1312][1313]
步骤1：(1s,4s)-4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}环己烷-1-甲酸的合成。根据通用程序f，使用中间体1(44mg 0.06mmol)和(1s,4s)-4-(甲氧基羰基)环己烷-1-甲酸(14.3mg,0.08mmol)实施反应。在色谱法c之后，分离标题化合物(32mg,62％)。
[1314]
步骤2：(1s,4s)-4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}环己烷-1-甲酸的合成。根据通用程序c，使用(1s,4s)-4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}环己烷-1-甲酸 (50mg,0.06mmol)作为起始材料实施反应。所得化合物不经进一步纯化即使用。
[1315]
步骤3：5-((6-(1'-((1s,4s)-4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-羰基)环己烷-1-羰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用(1s,4s)-4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3
‑ꢀ
(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}环己烷-1-甲酸(17 mg)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)异二氢吲哚-1,3-二酮 (11.6mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(17mg,68％)；lcms:c
66h77
fn
12
o8理论值：1184.6，实测值：m/z＝1186.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ:11.09 (s,1h),9.36(s,1h),8.66(s,1h),8.40(s,1h),8.15(d,j＝7.9hz,1h), 7.89(s,1h),7.73(d,j＝8.4hz,1h),7.68(d,j＝7.9hz,1h),7.61(d,j ＝8.2hz,1h),7.53(d,j＝7.5hz,2h),7.37(d,j＝2.3hz,1h),7.28(dd, j＝8.6,2.3hz,1h),7.19(d,j＝12.1hz,1h),5.30(p,j＝6.5hz,1h), 5.09(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.22(p,j＝8.3hz,1h),4.05(h,j＝6.8 hz,1h),3.95
–
3.33(m,11h),3.00
–
2.54(m,12h),2.37(s,3h),2.08
–ꢀ
1.99(m,1h),1.89
–
1.34(m,26),1.11(d,j＝6.6hz,6h)。
[1316]
实施例80
[1317]
5-((6-(1'-(2-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己基)乙酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶
‑ꢀ
4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1318][1319]
步骤1：[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
‑ꢀ
4-基]氨基}环己基]乙酸的合成。根据通用程序a，使用[(1r,4r)-4-氨基环己基]乙酸(196mg,1.24mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(200mg,0.72mmol)实施反应，随后实施色谱法c，提供标题化合物(46mg,15％)。
[1320]
步骤2：5-((6-(1'-(2-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己基)乙酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基)螺
[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c] 吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(25mg)、[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3
‑ꢀ
二氧代异吲哚-4-基]氨基}环己基]乙酸(15mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(13.6mg, 34％)；lcms:c
62h72
fn
11
o7理论值：1101.6，实测值：m/z＝1102.9 [m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ:11.11(s,1h),9.31(s,1h), 8.62(s,1h),8.38(s,1h),8.14(d,j＝7.9hz,1h),7.89(s,1h),7.64
–ꢀ
7.58(m,2h),7.56
–
7.50(m,2h),7.18(dd,j＝10.4,7.1hz,2h),7.05 (d,j＝6.9hz,1h),6.21(d,j＝8.2hz,1h),5.29(p,j＝6.8hz,1h), 5.06(dd,j＝12.7,5.5hz,1h),4.23(t,j＝8.3hz,1h),4.09
–
4.01(m, 1h),3.93
–
3.73(m,4h),3.04
–
2.77(m,8h),2.66
–
2.56(m,2h),2.39
ꢀ–
2.38(m,5h),2.08
–
2.00(m,4h),1.90
–
1.52(m,18h),1.48
–
1.15(m, 7h),1.11(d,j＝6.6hz,6h)。
[1321]
实施例81
[1322]
5-((6-(1'-((3r)-1-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-羰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1323][1324]
步骤1：(1s,4s)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5
‑ꢀ
基}氨基)环己烷-1-甲酸的合成。根据通用程序a，使用(1r,4r)-4-氨基环己烷-1-甲酸(131mg,0.91mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(200mg,0.72mmol)实施反应，随后实施色谱法c，提供标题化合物(36mg,12％)。
[1325]
步骤2：4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1'-[(3r)-吡咯烷
‑ꢀ
3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(174mg,0.25mmol)和(3r)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3
‑ꢀ
甲酸(63.58g,0.3mmol)进行反应。通过色谱法c纯化该反应的产物，然后进行通用程序b，提供标题化合物(48.7mg,25％，经过两个步骤)。
[1326]
步骤3：5-((6-(1'-((3r)-1-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3
‑ꢀ
二氧代异二氢吲哚-5-基)氨基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-羰基)-2-氧代
‑ꢀ
1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1'-[(3r)-吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环
丁基]螺[吲哚
‑ꢀ
3,4'-哌啶]-6-基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺(30.2 mg)、(1s,4s)-4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}氨基)环己烷-1-甲酸(15mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相 hplc纯化粗物质，提供标题化合物(32.7mg,73％)；lcms: c
66h77
fn
12
o8理论值：1184.6，实测值：m/z＝1186.0[m h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ:11.06(s,1h),9.32(s,1h),8.68(d,j＝5.9hz, 1h),8.41(s,1h),8.14(dd,j＝7.8,3.3hz,1h),7.89(s,1h),7.68(d,j ＝7.8hz,1h),7.61(dd,j＝8.3,4.3hz,1h),7.57(t,j＝7.2hz,2h), 7.52(s,1h),7.19(d,j＝11.8hz,1h),7.00(t,j＝2.7hz,1h),6.91
–ꢀ
6.88(m,1h),5.30(p,j＝6.8hz,1h),5.03(dd,j＝12.6,5.5hz,1h), 4.26
–
4.18(m,2h),4.08
–
4.01(m,2h),3.89(d,j＝46.9hz,7h),3.05
ꢀ–
2.72(m,8h),2.38(s,3h),2.21
–
1.67(m,17h),1.60(d,j＝6.6hz, 10h),1.52
–
1.37(m,3h),1.34
–
1.22(m,3h),1.11(d,j＝6.4hz,6h)。
[1327]
实施例82
[1328]
5-((6-(1'-((3r)-1-(2-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己基)乙酰基)吡咯烷-3-羰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1329][1330]
步骤1：4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1'-[(3r)-吡咯烷
‑ꢀ
3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(174mg,0.25mmol)和(3r)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3
‑ꢀ
甲酸(63.6mg,0.3mmol)进行反应。通过色谱法c纯化该反应的产物，然后进行通用程序b以提供标题化合物(49mg,25％，经过两个步骤)。
[1331]
步骤2：5-((6-(1'-((3r)-1-(2-((1r,4r)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)
‑ꢀ
1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己基)乙酰基)吡咯烷-3-羰基)-2
‑ꢀ
氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3
‑ꢀ
异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6
‑ꢀ
{2-氧代-1'-[(3r)-吡咯烷-3-羰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺 [吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺 (19.5mg)和[(1r,4r)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基}环己基]乙酸(10mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(8mg,27％)；lcms: c
67h79
fn
12
o8理论值：1198.6，实测值：m/z＝1199.9[m h]

；1h nmr (500mhz,dmso-d6)δ:11.10(s,1h),9.29(s,1h),8.61(s,1h),8.38(s, 1h),8.14(d,j＝
7.8hz,1h),7.89(d,j＝2.9hz,1h),7.68(d,j＝7.8 hz,1h),7.63
–
7.51(m,4h),7.17(dd,j＝14.5,10.3hz,2h),7.04(d,j ＝7.1hz,1h),6.19(d,j＝8.1hz,1h),5.34
–
5.25(m,1h),5.05(dd,j ＝12.8,5.5hz,1h),4.23(s,1h),4.08
–
4.01(m,1h),3.94
–
3.74(m, 2h),3.02
–
2.71(m,6h),2.64
–
2.55(m,2h),2.37(s,3h),2.22
–
1.92 (m,8h),1.90
–
1.54(m,24h),1.44
–
1.34(m,1h),1.36
–
1.04(m,14h)。
[1332]
实施例83
[1333]
5-((6-(1'-(6-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
‑ꢀ
4-基)哌嗪-1-基)烟酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)
‑ꢀ
4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1334][1335]
步骤1：4-[5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成。将6-氯吡啶-3-甲酸甲酯(532mg,3.08mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (631mg,3.39mmol)溶于dmf(4.85ml)中。然后，加入tea(0.86ml, 6.17mmol)，并将反应混合物在80℃下加热16小时。将反应混合物倒入水中并通过过滤收集沉淀。将滤饼在氮气流下干燥，同时施加真空，得到标题化合物(1.18g,126％)。
[1336]
步骤2：6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-甲酸的合成。在60℃下将4-[5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.12g,3.49mmol)和2m naoh(15ml)在thf(15ml)和etoh(15ml)中的混合物搅拌4h。将混合物冷却至室温并真空浓缩，得到浆状物。加入hcl(1m)水溶液调节至ph 7，过滤混合物，通过在滤饼上吹氮气同时施加真空来进行干燥，得到标题化合物，为白色固体(797mg,74％)。然后对该产物进行通用程序b，提供标题化合物(定量)。
[1337]
步骤3：6-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌嗪-1-基}吡啶-3-甲酸的合成。根据通用程序a，使用6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-甲酸(265mg,1.09mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg,0.91mmol)实施反应，随后实施色谱法c，提供标题化合物(313mg,75％)。
[1338]
步骤4：5-((6-(1'-(6-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌嗪-1-基)烟酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4
‑ꢀ
基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(20mg)、6-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基]哌嗪-1-基}吡啶-3-甲酸(14.4mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(1.2mg,3.2％)； lcms:c
64h70
fn
13
o7理论值：1151.6，实测值：m/z＝1152.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ:11.11(s,1h),8.56(s,1h),8.35(d,j＝ 12.2hz,1h),8.14(d,j＝7.7hz,1h),7.90(s,1h),7.77
–
7.68(m,2h), 7.62(d,j＝7.1hz,1h),7.53(s,1h),7.42(d,j＝7.8hz,1h),7.19(d,j ＝12.1hz,1h),6.97
(d,j＝8.7hz,1h),5.31
–
5.21(m,1),5.16
–
5.08 (m,1h),4.26
–
3.84(m,4h),3.80(s,3h),3.02
–
2.71(m,6h),2.66(s, 3h),2.07
–
1.44(m,30h),1.25(s,3h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
[1339]
实施例84
[1340]
5-((6-(1'-(5-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
‑ꢀ
4-基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-羰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基) 螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基) 氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1341][1342]
步骤1：5-[4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]吡嗪-2-甲酸甲酯的合成。将5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(532mg,3.08mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (631mg,3.39mmol)溶于dmf(4.85ml)中。加入tea(0.86ml,6.17 mmol)，并将反应混合物在80℃加热3小时。将反应混合物倒入水中并过滤。将滤饼在氮气流下干燥，同时施加真空，得到标题化合物(950 mg,96％)。
[1343]
步骤2：5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-甲酸的合成。将5-[4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]吡嗪-2-甲酸甲酯(950mg,2.95mmol)和2m naoh(12.7 ml)在thf(12.7ml)和etoh(12.7ml)中的混合物在60℃搅拌4h。将混合物冷却至室温并在真空中浓缩，获得浆液。加入hcl(1m)水溶液调节至ph 7。过滤混合物，通过在滤饼上吹氮气同时施加真空进行干燥，得到标题化合物，为白色固体(787mg,87％)。然后对该产物进行通用程序b，提供标题化合物(753mg,141％)。
[1344]
步骤3：5-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}吡嗪-2-甲酸的合成。根据通用程序a，使用5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-甲酸盐酸盐(243mg,1.00mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg,0.91mmol)实施反应，随后实施色谱法c，提供标题化合物(116mg,28％)。
[1345]
步骤4：5-((6-(1'-(5-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-羰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶
ꢀ‑
4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15mg)、5-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌嗪-1-基}吡嗪-2-甲酸(10.84mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(11.7mg,48％)； lcms:c
63h69
fn
14
o7理论值：1152.6，实测值：m/z＝1153.89[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ:11.12(s,1h),
9.31(s,1h),8.62(s,1h), 8.49(s,1h),8.39(s,2h),8.15(d,j＝7.3hz,1h),7.89(s,1h),7.76(t, j＝7.9hz,1h),7.69(d,j＝8.0hz,1h),7.63
–
7.52(m,3h),7.45
–
7.40 (m,2h),7.19(d,j＝12.0hz,1h),5.33
–
5.26(m,1h),5.14(dd,j＝12.9, 5.4hz,1h),4.23(t,j＝8.6hz,1h),4.10
–
3.87(m,9h),3.03
–
2.77(m, 10h),2.38(s,3h),2.10
–
2.01(m,1h),1.93
–
1.53(m,19h),1.49
–
1.37 (m,1h),1.25(s,1h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
[1346]
实施例85
[1347]
5-((6-(1'-(6-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚
‑ꢀ
5-基)哌嗪-1-基)烟酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)
‑ꢀ
4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1348][1349]
步骤1：4-[5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成。将6-氯吡啶-3-甲酸甲酯(532mg,3.08mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (631mg,3.39mmol)溶于dmf(4.85ml)中。然后加入tea(0.86ml, 6.2mmol)，并将反应混合物在80℃加热16小时。将反应混合物倒入水中并通过过滤收集沉淀。将滤饼在氮气流下干燥，同时施加真空，得到标题化合物(1.18g,126％)。
[1350]
步骤2：6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-甲酸的合成。将4-[5-(甲氧基羰基) 吡啶-2-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.12g,3.49mmol)和2m naoh(15ml) 在thf(15ml)和etoh(15ml)中的混合物在60℃搅拌4h。将混合物冷却至室温并在真空中浓缩，获得浆液，添加hcl(1m)水溶液以将 ph调节至7，将混合物过滤，并通过在滤饼上吹氮气同时施加真空来干燥，得到标题化合物，为白色固体(797mg,74％)。然后对该产物进行通用程序b，提供标题化合物(690mg,130％)。
[1351]
步骤3：6-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}吡啶-3-甲酸的合成。根据通用程序a，使用6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-甲酸盐酸盐(221mg,0.91mmol)和2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg,0.91mmol)实施反应，随后实施色谱法c，提供标题化合物(284mg,68％)。
[1352]
步骤4：5-((6-(1'-(6-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-5-基)哌嗪-1-基)烟酰基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4
‑ꢀ
基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15mg)、6-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
5-基]哌嗪-1-基}吡啶-3-甲酸(10.82mg)作为起始材料合成标题化合
2-甲酸甲酯(50mg,0.11mmol)和(3r)-吡咯烷
ꢀ‑
3-甲酸叔丁酯(18mg,0.11mmol)的混合物溶于dcm(1ml)中。加入dipea(0.1ml,0.65mmol)，然后加入bop(62mg,0.14mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h，然后根据色谱法b纯化。然后将该物质进行通用程序b，提供标题化合物.(8mg,88％)。
[1360]
步骤5：5-((6-(1'-((3r)-1-(5-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-羰基)吡咯烷-3-羰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(40mg)、(3r)-1-(5-{4-[2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌嗪-1-基}吡嗪-2-羰基)吡咯烷-3-甲酸(32mg)作为起始材料合成标题化合物。通过反相hplc 纯化粗物质，提供标题化合物(9.1mg,13％)；lcms:c
68h76
fn
15
o8理论值：1249.60，实测值：m/z＝1251.01[m h]

；1h nmr(500mhz, dmso-d6)δ:11.12(s,1h),9.29(s,2h),8.60(d,j＝19.4hz,2h),8.38 (s,2h),8.15(d,j＝8.1hz,1h),7.90(s,1h),7.79
–
7.67(m,3h),7.63
ꢀ–
7.52(m,3h),7.43(s,1h),7.19(d,j＝12.2hz,1h),5.29(s,1h),5.14 (d,j＝11.3hz,1h),4.25
–
4.16(m,1h),4.07
–
3.75(m,13h),3.06
–ꢀ
2.75(m,12h),2.35(s,3h),2.18
–
1.98(m,4h),1.91
–
1.49(m,16h), 1.46
–
1.37(m,1h),1.25(s,1h),1.10(dd,j＝11.4,6.6hz,6h)。
[1361]
实施例87
[1362]
5-((6-(1'-((3s)-1-((1r,4s)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-羰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
((1s,3r)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基
‑ꢀ
3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1363][1364]
步骤1：(3s)-1-((1r,4s)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸的合成。根据通用程序f，使用(反)-4-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
‑ꢀ
4-基]氨基}环己烷-1-甲酸(实施例26；40mg,0.1mmol)和(s)-吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(25mg,0.15mmol)合成标题化合物。然后将该反应的产物进行通用程序b，得到标题化合物(30mg,60％)。
[1365]
步骤2：5-((6-(1'-((3s)-1-((1r,4s)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3
‑ꢀ
二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-羰基)-2-氧代
‑ꢀ
1-((1s,3r)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(15mg,0.02mmol)、(3s)-1
‑ꢀ
((1r,4s)-4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异二氢吲哚-4-基)氨基)环己烷-1-羰基)吡咯烷-3-甲酸(12mg.0.02mmol)作为起始材料合成标题化合
物。通过反相hplc纯化粗物质，提供标题化合物(11.4 mg,48％)；lcms:c
66h77
fn
12
o8理论值：1184.6，实测值：m/z＝1186.0 [m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ:11.11(s,1h),9.34(s,1h), 8.68(d,j＝4.6hz,1h),8.41(s,1h),8.15(d,j＝7.7hz,1h),7.89(d,j ＝2.6hz,1h),7.68(d,j＝7.8hz,1h),7.64
–
7.50(m,4h),7.26
–
7.15 (m,2h),7.05(d,j＝7.0hz,1h),6.18(d,j＝8.1hz,1h),5.31(p,j＝ 6.7hz,1h),5.06(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.26
–
3.29(m,17h),3.04
–
2.74(m,7h),2.37(d,j＝5.3hz,3h),2.13
–
1.98(m,6h),1.89
–
1.67 (m,8h),1.60(d,j＝6.5hz,9h),1.47
–
1.31(m,3h),1.11(t,j＝5.3hz, 6h)。
[1366]
实施例88
[1367]
5-[(6-{1'-[4-(1-{[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
ꢀ‑
4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]甲基}哌啶-4-基)苯甲酰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1368][1369]
步骤1：4-(1-(2-(苄基氧基)-2-氧代乙基)哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序e，使用4-(哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯(200mg, 0.765mmol)和2-溴乙酸苄酯(175mg,0.765mmol)实施反应。用色谱法a纯化，得到标题化合物(250mg,80％)
[1370]
步骤2：2-(4-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)哌啶-1-基)乙酸的合成。4
‑ꢀ
(1-(2-(苄基氧基)-2-氧代乙基)哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯(107mg,0.261 mmol)和10％ pd/c(11mg)混合，然后加入甲醇(15ml)进行反应。将反应物在氢气氛下搅拌4小时，然后用氮气吹扫，通过硅藻土过滤，浓缩滤液，得到标题化合物(75mg,90％)。
[1371]
步骤3：4-(1-{[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基}乙基)氨基甲酰基]甲基}哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序f，使用4-[(2-氨基乙基)氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮(50mg,0.16mmol)和2-(4-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)哌啶
ꢀ‑
1-基)乙酸(50.5mg,0.16mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物 (59mg,60％)。
[1372]
步骤4：4-(1-{[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基}乙基)氨基甲酰基]甲基}哌啶-4-基)苯甲酸的合成：根据通用程序b，使用4-(1-{[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚
‑ꢀ
4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]甲基}哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯(60mg)实施反应，提供标题化合物(55mg,95％)。
[1373]
步骤5：5-[(6-{1'-[4-(1-{[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]甲基}哌啶-4-基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(20mg,0.04mmol)和4-(1-{[(2-{[2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]甲基}哌啶-4-基)苯甲酸(15mg,0.04mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供
标题化合物(5.8mg,13％)；lcms:c
70h80
fn
13
o8理论值1249.6，实测值1250.9[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso
‑ꢀ
d6)δ11.11(d,j＝3.6 5.34
–
5.23(m,1h),5.06(dd,j＝13.0,5.4hz,1h), 4.26
–
3.98(m,2h)3.hz,1h),9.71(s,1h),9.34(s,1h),8.79(s,1h), 8.58(s,1h),8.37(s,1h),8.14(d,j＝7.8hz,1h),7.97(d,j＝7.8hz, 1h),7.89(s,1h),7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.66
–
7.56(m,3h),7.56
–ꢀ
7.45(m,3h),7.41(d,j＝8.0hz,1h),7.34(d,j＝7.9hz,2h),7.24
–ꢀ
7.15(m,2h),7.07(d,j＝7.0hz,1h),6.76(t,j＝6.1hz,1h),92(s,4h), 3.75(s,2h),3.62
–
3.22(m,12h),3.02
–
2.75(m,8h),2.37(s,3h),2.13
ꢀ–
1.51(m,16h),1.42(d,j＝13.2hz,1h),1.24(s,1h),1.11(d,j＝6.6 hz,6h)。
[1374]
实施例89
[1375]
n-(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)-5-[(4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基] 螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}哌啶-1-基)甲基]吡啶-2-甲酰胺
[1376][1377]
步骤1：1-({6-[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基}乙基)氨基甲酰基]吡啶-3-基}甲基)哌啶-4-甲酸叔丁酯的合成：根据通用程序f，使用4-[(2-氨基乙基)氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶
‑ꢀ
3-基)异吲哚-1,3-二酮(30mg,0.09mmol)和5-{[4-(叔丁氧基羰基)哌啶
ꢀ‑
1-基]甲基}吡啶-2-甲酸(30mg,0.09mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物(36mg,61％)。
[1378]
步骤2：1-({6-[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4
‑ꢀ
基]氨基}乙基)氨基甲酰基]吡啶-3-基}甲基)哌啶-4-甲酸的合成：根据通用程序b，使用1-({6-[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]吡啶-3-基}甲基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(36mg,0.06mmol)实施反应，提供标题化合物(31mg,98％)。
[1379]
步骤3：n-(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 氨基}乙基)-5-[(4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}哌啶-1-基)甲基]吡啶-2-甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用中间体1(37.7mg)和1-({6-[(2-{[2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]吡啶-3-基}甲基)哌啶-4-甲酸(30mg)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物(29.9mg,45％)；lcms:c
69h79
fn
14
o8理论值 1250.6，实测值1251.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.11 (s,1h),9.72(s,1h),9.39(d,j＝9.9hz,1h),8.80(t,j
＝5.7hz,1h), 8.62(s,1h),8.39(s,1h),8.15(d,j＝7.8hz,1h),7.89(s,1h),7.69(d, j＝7.8hz,1h),7.65
–
7.58(m,3h),7.52(s,1h),7.49(d,j＝7.8hz, 2h),7.34(d,j＝8.0hz,2h),7.20(t,j＝10.5hz,2h),7.07(d,j＝7.0 hz,1h),6.76(t,j＝6.1hz,1h),5.29(p,j＝6.5hz,1h),5.06(dd,j＝ 12.8,5.4hz,1h),4.22(t,j＝8.3hz,1h),4.15
–
3.99(m,2h),3.93(s, 4h),3.91
–
3.25(m,8h),3.05
–
2.77(m,9h),2.38(s,3h),2.09
–
1.94 (m,6h),1.94
–
1.69(m,8h),1.60(d,j＝6.5hz,8h),1.44(t,j＝13.0 hz,1h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
[1380]
实施例90
[1381]
5-[(6-{1'-[2-(4-{4-[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]苯基}哌啶-1-基)乙酰基]-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1382][1383]
步骤1：{4-[4-(叔丁氧基羰基)苯基]哌啶-1-基}乙酸的合成：根据通用程序e，随后根据通用程序c使用4-(哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯 (100mg,0.383mmol)和2-溴乙酸甲酯(58.6mg,0.383mmol)实施反应。色谱法c后得到标题化合物(50mg,41％)。
[1384]
步骤2：4-(1-{2-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基] 氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1
‑ꢀ
基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]-2-氧代乙基}哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯的合成。根据通用程序f，使用中间体1(50mg,0.07mmol)和{4
‑ꢀ
[4-(叔丁氧基羰基)苯基]哌啶-1-基}乙酸(22.6mg,0.07mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物(45mg,63％)。
[1385]
步骤3：4-(1-{2-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基] 氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1
‑ꢀ
基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]-2-氧代乙基}哌啶-4-基)苯甲酸的合成。根据通用程序b，使用4-(1-{2-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]-2-氧代乙基} 哌啶-4-基)苯甲酸叔丁酯(45mg)实施反应，提供标题化合物(42mg, 98％)。
[1386]
步骤4：5-[(6-{1'-[2-(4-{4-[(2-{[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]苯基}哌啶-1-基)乙酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用4-(1-{2-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4
‑ꢀ
甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]-2-氧代乙基}哌啶-4-基) 苯甲酸(20mg,0.021mmol)和4-[(2-氨基乙基)氨基]-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚-1,3-二酮(6.6mg,0.021mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物
(9.6mg,37％)；lcms:c
70h80
fn
13
o8理论值1249.6，实测值1252.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso
‑ꢀ
d6)δ11.10(d,j＝4.3hz,1h),9.70
–
9.39(m,2h),8.65(d,j＝15.5hz, 2h),8.40(s,1h),8.15(d,j＝7.8hz,1h),7.90(s,1h),7.84(d,j＝7.9 hz,2h),7.70(d,j＝7.8hz,1h),7.65
–
7.55(m,2h),7.54(s,1h),7.48 (dd,j＝13.8,8.0hz,1h),7.38(d,j＝8.0hz,2h),7.27(d,j＝8.6hz, 1h),7.19(d,j＝12.1hz,1h),7.05(d,j＝6.9hz,1h),6.84(t,j＝6.0 hz,1h),5.30(p,j＝6.5hz,1h),5.06(dd,j＝12.7,5.5hz,1h),4.57
–ꢀ
4.37(m,1h),4.22(t,j＝8.3hz,1h),4.11
–
3.93(m,3h),3.91
–
3.30 (m,8h),3.26
–
2.70(m,10h),2.62(s,2h),2.37(s,3h),2.21
–
1.97(m, 5h),1.86(d,j＝13.1hz,4h),1.76(dd,j＝17.2,10.6hz,3h),1.69
–ꢀ
1.52(m,8h),1.50
–
1.37(m,1h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
[1387]
实施例91
[1388]
5-[(6-{1'-[4-({4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基] 哌嗪-1-基}甲基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺 [吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟
‑ꢀ
n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1389][1390]
步骤1：4-[(4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}苯基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成：根据通用程序f，使用中间体1(100mg,0.14mmol)和4-{[4
‑ꢀ
(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]甲基}苯甲酸(50mg,0.14mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物(104mg,73％)。
[1391]
步骤2：4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1'-[4-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序b，使用4-[(4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基] 氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1
‑ꢀ
基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}苯基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg,0.1mmol)实施反应，提供标题化合物(95mg,98％)。
[1392]
步骤3：5-[(6-{1'-[4-({4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}甲基)苯甲酰基]-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序a，使用4
‑ꢀ
氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1'-[4-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰基]-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺(30mg,0.033mmol)和2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(10mg,0.036mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱
nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),9.92(d,j＝35.3hz,1h),9.45(d,j＝ 35.3hz,1h),8.60(s,1h),8.40(d,j＝27.8hz,1h),8.17(d,j＝8.8hz, 1h),7.93(d,j＝39.0hz,2h),7.78
–
7.66(m,4h),7.65
–
7.56(m,2h), 7.54(d,j＝7.8hz,1h),7.39(s,1h),7.29(d,j＝8.5hz,1h),7.19(d,j ＝12.0hz,1h),5.30(s,1h),5.10(dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.66(s,1h), 4.53(s,1h),4.22(s,1h),3.91
–
3.73(m,2h),3.73
–
3.58(m,7h),3.05
ꢀ–
2.75(m,10h),2.43
–
1.52(m,24h),1.47
–
1.38(m,1h),1.11(d,j＝ 5.8hz,6h)。
[1399]
实施例93
[1400]
5-({6-[1'-(4-{3-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5
‑ꢀ
基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羰基}苯甲酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)
‑ꢀ
3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-异丙基咪唑并[4,5-c] 吡啶-4-基}氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1401][1402]
步骤1：3-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-3,8
‑ꢀ
二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯的合成：根据通用程序a，使用 2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg,0.91mmol)和 3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(192mg,0.91mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物(272mg,64％)。
[1403]
步骤2：5-{3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基}-2-(2,6-二氧代哌啶-3
‑ꢀ
基)异吲哚-1,3-二酮的合成：根据通用程序b，使用3-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(232mg,0.50mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物 (137mg,75％)。
[1404]
步骤3：4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}苯甲酸的合成：根据通用程序 f，使用中间体1(200mg,0.28mmol)和对苯二甲酸(50mg,0.28mmol) 实施反应。色谱法c提供标题化合物(132mg,70％)。
[1405]
步骤4：5-({6-[1'-(4-{3-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羰基}苯甲酰基)-2-氧代-1
‑ꢀ
[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}苯甲酸(20mg,0.04mmol) 和5-{3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基}-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚
‑ꢀ
1,3-二酮(10mg,
0.04mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c 提供标题化合物(2.0mg,6％)；lcms:c
68h73
fn
12
o8理论值1204.6，实测值1206.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,2h), 8.18(d,j＝33.0hz,1h),8.02(dd,j＝19.3,8.0hz,4h),7.89(d,j＝ 13.6hz,1h),7.72(d,j＝8.7hz,2h),7.66(t,j＝8.2hz,4h),7.60(d,j ＝7.9hz,2h),7.44(t,j＝9.4hz,1h),7.33(s,2h),7.21(d,j＝8.2hz, 3h),5.30(s,1h),5.09(dd,j＝12.5,5.3hz,1h),4.85(s,1h),3.23
–
3.11 (m,7h),3.05
–
2.75(m,8h),2.70
–
2.61(m,2h),2.37(s,3h),2.08
–ꢀ
1.54(m,15h),1.15
–
1.07(m,6h)。
[1406]
实施例94
[1407]
5-{[6-(1'-{[4-({4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5
‑ꢀ
基]哌嗪-1-基}甲基)苯基]甲基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}
‑ꢀ
4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1408][1409]
步骤1：4-氟-n-异丙基-5-{[3-异丙基-6-(2-氧代-1'-{[4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]甲基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]
‑ꢀ
6-基)咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序d，使用中间体1(100mg,0.14mmol)和4-[(4-甲酰基苯基)甲基] 哌嗪-1-甲酸叔丁酯(40mg,0.14mmol)实施反应。色谱法c提供4
‑ꢀ
({4-[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基甲基]苯基}甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(105mg,71％)，将其直接进行通用程序b，提供标题化合物(92mg,98％)。
[1410]
步骤2：5-{[6-(1'-{[4-({4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基]哌嗪-1-基}甲基)苯基]甲基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序a，使用4
‑ꢀ
氟-n-异丙基-5-{[3-异丙基-6-(2-氧代-1'-{[4-(哌嗪-1-基甲基)苯基]甲基}-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-2-甲基苯甲酰胺(30mg,0.03mmol)和2-(2,6
‑ꢀ
二氧代哌啶-3-基)-5-氟异吲哚-1,3-二酮(10mg,0.03mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物(8.0mg,17％)；lcms: c
66h75
fn
12
o6理论值1150.6，实测值1152.3[m 2h]

；1h nmr(500 mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),8.59(s,1h),8.39(d,j＝26.9hz,1h), 8.15(d,j＝8.2hz,1h),7.96(s,1h),7.88(s,1h),7.81
–
7.43(m,9h), 7.35(d,j＝8.5hz,1h),7.18(d,j＝12.1hz,1h),5.29(d,j＝6.7hz, 1h),5.10(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.64(s,2h),4.50(s,4h),4.22(s, 5h),4.05(s,4h),3.64
–
3.34(m,7h),2.98
–
2.76(m,9h),2.63
(s,2h), 2.38(d,j＝8.5hz,3h),2.31(s,1h),2.17(s,1h),2.11
–
1.90(m,3h), 1.85(d,j＝13.9hz,3h),1.73(d,j＝12.2hz,1h),1.69
–
1.53(m,9h), 1.43(d,j＝14.9hz,1h),1.30
–
1.17(m,1h),1.11(t,j＝6.3hz,6h)。
[1411]
实施例95
[1412]
5-({6-[1'-(4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基] 哌嗪-1-羰基}苯甲酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1413][1414]
步骤1：4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌嗪-1-羰基}苯甲酸的合成：根据通用程序a，使用2-(2,6-二氧代哌啶
ꢀ‑
3-基)-4-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg,0.91mmol)和4-(哌嗪-1-羰基)苯甲酸(210mg,0.91mmol)实施反应。色谱法c提供标题化合物(320mg, 68％)。
[1415]
步骤2：5-({6-[1'-(4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌嗪-1-羰基}苯甲酰基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基]-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基}氨基)
‑ꢀ
4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用中间体 1(30mg,0.04mmol)和4-{4-[2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-4-基]哌嗪-1-羰基}苯甲酸(20mg,0.04mmol)实施反应。色谱法c 提供标题化合物(40mg,81％)。lcms:c
66h71
fn
12
o8理论值1178.6，实测值1180.4.0[m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h), 9.37(d,j＝9.9hz,1h),8.69(s,1h),8.42(s,1h),8.15(d,j＝7.8hz, 1h),7.90(s,1h),7.78
–
7.72(m,1h),7.70(d,j＝7.8hz,1h),7.65
–ꢀ
7.54(m,6h),7.52(s,1h),7.42(d,j＝7.1hz,1h),7.37(d,j＝8.4hz, 1h),7.20(d,j＝12.2hz,1h),5.31(p,j＝6.6hz,1h),5.11(dd,j＝12.7, 5.5hz,1h),4.22(p,j＝8.5hz,2h),4.13(s,1h),4.05(dq,j＝13.7,6.7 hz,2h),3.89(s,5h),3.70
–
3.47(m,4h),3.41(d,j＝11.5hz,4h),3.02
ꢀ–
2.74(m,7h),2.67
–
2.54(m,1h),2.38(s,4h),2.08
–
1.96(m,1h), 1.85(d,j＝14.4hz,5h),1.72(s,2h),1.60(d,j＝6.6hz,9h),1.50
–ꢀ
1.36(m,2h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
[1416]
实施例96
[1417]
4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基) 环丁基]-1'-[(1s,4s)-4-[4-({2-[(3s)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氧基)哌啶-1-羰基]环己烷羰基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺
[1418][1419]
步骤1：2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-4-(哌啶-4-基氧基)异吲哚-1,3-二酮的合成：将2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-4-氟异吲哚-1,3-二酮(250mg. 0.91mmol)和4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(180mg,0.91mmol)溶于 nmp(5ml)。加入氢化钠(72mg,1.8mmol)，并将反应在25℃下搅拌 12小时。将反应混合物倒入水(100ml)中并用乙酸乙酯(2
×
100ml)萃取。在减压下浓缩萃取物。将该粗物质立即进行通用程序b。色谱法 c提供标题化合物(195mg,60％)。
[1420]
步骤2：(1s,4s)-4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}环己烷-1-甲酸的合成：根据通用程序f，使用中间体1(50mg,0.07mmol)和(顺)-4-(甲氧基羰基)环己烷-1-甲酸(15mg,0.07mmol)实施反应。通过氮气吹扫除去溶剂，并将粗物质立即进行通用程序c。色谱法c提供标题化合物(47 mg,76％)。
[1421]
步骤3：4-氟-n-异丙基-5-[(3-异丙基-6-{2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]-1'-[(1s,4s)-4-[4-({2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-4-基}氧基)哌啶-1-羰基]环己烷羰基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6
‑ꢀ
基}咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基)氨基]-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序f，使用(1s,4s)-4-{[6-(4-{[2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基]氨基}-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-1'-基]羰基}环己烷-1-甲酸(20mg, 0.02mmol)和2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-4-(哌啶-4-基氧基)异吲哚-1,3
‑ꢀ
二酮(8.3mg,0.02mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物(25.5mg,84％)；lcms:c
67h78
fn
11
o9理论值1199.6，实测值1202.1[m 2h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.12(s,1h), 9.34(d,j＝9.2hz,1h),8.67(s,1h),8.40(s,1h),8.15(d,j＝7.8hz, 1h),7.89(s,1h),7.86
–
7.79(m,1h),7.71
–
7.57(m,3h),7.57
–
7.46 (m,3h),7.19(d,j＝12.1hz,1h),5.36
–
5.25(m,1h),5.10(dd,j＝12.8, 5.4hz,1h),5.00(s,1h),4.22(t,j＝8.3hz,2h),4.05(h,j＝6.6hz, 2h),3.92
–
3.60(m,8h),3.53(d,j＝8.1hz,4h),3.04
–
2.76(m,8h), 2.67
–
2.54(m,2h),2.38(s,3h),2.10
–
1.49(m,24h),1.42(d,j＝12.7 hz,1h),1.31
–
1.14(m,1h),1.11(d,j＝6.5hz,6h)。
[1422]
实施例97
[1423]
5-{[6-(1'-{4-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基} 哌啶-4-基)(甲基)氨基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}
‑ꢀ
4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺
[1424][1425]
步骤1：4-氟-n-异丙基-5-{[3-异丙基-6-(1'-{4-[甲基(哌啶-4-基)氨基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-2-甲基苯甲酰胺的合成。根据通用程序f，使用中间体1(50mg,0.07mmol)和4-{[1-(叔丁氧基羰基) 哌啶-4-基](甲基)氨基}苯甲酸(24mg,0.07mmol)实施反应。色谱法c 提供4-((4-(6-(4-((2-氟-5-(异丙基氨基甲酰基)-4-甲基苯基)氨基)-3-异丙基-3h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1-((1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基)螺[二氢吲哚-3,4'-哌啶]-1'-羰基)苯基)(甲基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，将其直接进行通用程序b，提供标题化合物(43mg,66％)。
[1426]
步骤2：5-{[6-(1'-{4-[(1-{2-[2,6-二氧代哌啶-3-基]-1,3-二氧代异吲哚-5-基}哌啶-4-基)(甲基)氨基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶
‑ꢀ
1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基)-3-异丙基咪唑并[4,5-c]吡啶-4
‑ꢀ
基]氨基}-4-氟-n-异丙基-2-甲基苯甲酰胺的合成：根据通用程序a，使用4-氟-n-异丙基-5-{[3-异丙基-6-(1'-{4-[甲基(哌啶-4-基)氨基]苯甲酰基}-2-氧代-1-[(1s,3s)-3-(哌啶-1-基)环丁基]螺[吲哚-3,4'-哌啶]-6-基) 咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]氨基}-2-甲基苯甲酰胺(20mg,0.02mmol)和外消旋-2-[(3r)-2,6-二氧代哌啶-3-基]-5-氟异吲哚-1,3-二酮(6.0mg, 0.02mmol)作为起始材料合成标题化合物。色谱法c提供标题化合物. (5.5mg,19％)；lcms:c
67h75
fn
12
o7理论值1178.6，实测值1180.0 [m h]

；1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.10(d,j＝6.4hz,1h),9.33 (s,1h),8.63(s,1h),8.39(s,1h),8.15(d,j＝7.9hz,1h),7.89(s,1h), 7.76
–
7.56(m,4h),7.53(s,1h),7.43
–
7.24(m,3h),7.19(d,j＝12.1 hz,1h),6.90(d,j＝8.5hz,1h),5.36
–
5.22(m,1h),5.17
–
5.00(m, 1h),4.21(d,j＝11.0hz,2h),4.04(dt,j＝13.5,6.7hz,2h),3.53(d,j ＝8.4hz,2h),3.41(d,j＝11.3hz,2h),3.22
–
3.03(m,2h),3.03
–
2.55 (m,13h),2.38(s,3h),2.08
–
1.69(m,16h),1.60(d,j＝6.5hz,8h), 1.42(d,j＝12.8hz,2h),1.27(t,j＝7.0hz,1h),1.11(d,j＝6.6hz, 6h)。
[1427]
生物学实施例
[1428]
hpk1细胞hibit降解测定
[1429]
材料和方法
[1430]
在jurkat细胞(tib-152)中通过在hpk1的n末端上 crispr引入hibit标签，以允许在单克隆人细胞系中定量hpk1蛋白水平。将细胞以1x106细胞/ml、30ul/孔(3x104细胞/孔)铺板在 384孔测定板(corning,cat.no.3570)中的完全rpmi 1640(10％热灭活的fbs,1％ l-谷氨酰胺)中。以11点稀释系列(3.16倍)加入hpk1嵌合靶向分子(ctm)，最终测定浓度范围为10μm至0.1nm。在该测定中包括没有hibit插入的亲代jurkat细胞系作为背景对照。用dmso 媒介物对照处理的细胞用于测定细胞中定义100％ hpk1的最大信号。将细胞
在7℃/5％ co2下孵育24小时。孵育后，加入30μl的完全 nano-glo hibit lytic检测试剂(promega cat.no.n3040)。将细胞在室温下孵育10分钟，并在envision酶标仪(perkin elmer,0.1秒/孔)上读取发光。使用cell titer glo(promega)评估平行板的存活力，并在 envision酶标仪上读取以确保结果不是细胞毒性的影响。如下计算每个样品剩余的hpk1百分比：
[1431][1432]
将剩余的％hpk1数值绘制为化合物浓度的函数，并使用prism (graphpad)方程“log(抑制剂)vs响应
–
可变斜率(四个参数)”拟合曲线。通过确定最低的剩余％并从100中减去来计算d
max
值。在表1中提供d
max
值，其中a》65％、45％≤b≤65％和c《45％。
[1433]
表1.代表性化合物的活性
[1434]
[1435]
[1436][1437]
可以将上述各种实施方案组合以提供其它实施方案。本说明书中提及和/或在申请数据表中列出的所有美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利出版物均通过援引整体并入本文。如果需要，可以修改实施方案的各方面以采用各种专利、申请和出版物的概念来提供其它实施方案。可以根据以上具体实施方式对实施方案进行这些和其它的改变。通常，在以下权利要求中，所使用的术语不应解释为将权利要求限制为说明书和权利要求中公开的具体实施方案，而应解释为包括所有可能的实施方案以及这些权利要求要求的等同物的全部范围。因此，权利要求并不受限于本公开内容。