新型免疫活性白细胞介素-2类似物的制作方法

技术特征：
1.白细胞介素-2类似物，其相比于阿地白介素具有对白细胞介素-2β受体增加的结合亲和力，其中所述白细胞介素-2类似物包括对应于天然白细胞介素-2中第1、12、18、19、20、22、32、35、38、42、43、45、48、49、61、68、69、74、76、80、81、82、84、85、86、87、88、89、91、92、94、95、96、125、126和133位的氨基酸的一个或多个氨基酸被修饰的序列。2.根据权利要求1所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物相比于阿地白介素具有对白细胞介素-2α受体改变的结合亲和力。3.根据权利要求1所述的白细胞介素-2类似物，其中一个或多个氨基酸被添加到对应于第133位的氨基酸。4.根据权利要求1所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2。5.根据权利要求4所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物进一步包括1至10个氨基酸取代。6.根据权利要求5所述的白细胞介素-2类似物，其中第18、19、20、22、38、42、43、45、61、68、69、74、80、81、84、85、86、88、89、91、92、94和96位的一个或多个氨基酸进一步被不同的氨基酸取代。7.根据权利要求6所述的白细胞介素-2类似物，其中第18、19、22、38、42、43、45、61、68、74、80、81、84、85、86、88、91、92、94和96位的一个或多个氨基酸进一步被不同的氨基酸取代。8.根据权利要求1所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是以下类似物中的任一种：(a)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和32位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(b)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和35位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(c)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和38位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(d)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和42位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(e)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和43位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(f)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和48位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(g)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和49位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(h)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125和76位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(i)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、81、92、94和96位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(j)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且
第125和87位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(k)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38和42位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(l)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38和80位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(m)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38和84位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(n)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、19、38和42位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(o)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、12、38和42位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(p)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和61位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(q)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和84位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(r)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和88位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(s)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和89位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(t)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和91位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(u)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和94位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(v)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42和126位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(w)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、80和84位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(x)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、94和96位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(y)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(z)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、61、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(aa)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ab)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、80、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ac)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、81、84和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；
(ad)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、20、38、42、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ae)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、80、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(af)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、74、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ag)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、81、84和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ah)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、81、88和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ai)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(aj)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、80、81、85和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ak)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、80、81、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(al)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(am)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、45、74、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(an)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、74、80、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ao)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、80、81、84和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ap)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、45、80、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(aq)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ar)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、42、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(as)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、61、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(at)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、69、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(au)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、80、81、85、86、91和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(av)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、18、22、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(aw)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并
且第125、38、42、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ax)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、45、74、80、81和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ay)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、68、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(az)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、69、74、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(ba)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、80、81、84、85、86、91和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bb)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、80、81、85、86、92、94和96位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bc)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、18、19、22、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bd)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、18、22、38、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(be)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、18、22、61、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bf)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、18、22、68、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bg)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、35、38、42、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bh)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、45、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bi)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、80、81、85、86、91和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bj)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、80、81、85、86、92和95位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bk)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、35、38、42、74、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bl)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并
且第125、38、42、43、61、80、81、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；(bm)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、38、42、80、81、85、86、91、92和95位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2；和(bn)白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物是第1位的氨基酸被去除并且第125、35、38、42、74、80、81、82、85、86和92位的氨基酸被不同的氨基酸取代的天然白细胞介素-2。9.根据权利要求8所述的白细胞介素-2类似物，其中所述氨基酸取代是选自以下氨基酸取代的任一种：(a)第12位的氨基酸被缬氨酸或苯丙氨酸取代的取代；(b)第18位的氨基酸被精氨酸取代的取代；(c)第19位的氨基酸被酪氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或精氨酸取代的取代；(d)第20位的氨基酸被缬氨酸或苯丙氨酸取代的取代；(e)第22位的氨基酸被谷氨酸取代的取代；(f)第32位的氨基酸被半胱氨酸取代的取代；(g)第35位的氨基酸被半胱氨酸或谷氨酸取代的取代；(h)第38位的氨基酸被丙氨酸或天冬氨酸取代的取代；(i)第42位的氨基酸被赖氨酸、丙氨酸或色氨酸取代的取代；(j)第43位的氨基酸被半胱氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺取代的取代；(k)第45位的氨基酸被丙氨酸取代的取代；(l)第48位的氨基酸被半胱氨酸取代的取代；(m)第49位的氨基酸被半胱氨酸取代的取代；(n)第61位的氨基酸被谷氨酰胺、精氨酸或天冬氨酸取代的取代；(o)第68位的氨基酸被天冬氨酸或谷氨酰胺取代的取代；(p)第69位的氨基酸被甘氨酸取代的取代；(q)第74位的氨基酸被组氨酸或丙氨酸取代的取代；(r)第76位的氨基酸被半胱氨酸取代的取代；(s)第80位的氨基酸被苯丙氨酸、酪氨酸、缬氨酸、天冬氨酸或色氨酸取代的取代；(t)第81位的氨基酸被天冬氨酸、谷氨酸或天冬酰胺取代的取代；(u)第82位的氨基酸被甘氨酸或缬氨酸取代的取代；(v)第84位的氨基酸被谷氨酸、缬氨酸或苯丙氨酸取代的取代；(w)第85位的氨基酸被缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、酪氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、谷氨酸或苯丙氨酸取代的取代；(x)第86位的氨基酸被缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸或亮氨酸取代的取代；(y)第87位的氨基酸被半胱氨酸取代的取代；(z)第88位的氨基酸被谷氨酰胺、缬氨酸或苯丙氨酸取代的取代；(aa)第89位的氨基酸被苯丙氨酸取代的取代；(ab)第91位的氨基酸被苏氨酸、苯丙氨酸或谷氨酸取代的取代；
(ac)第92位的氨基酸被苯丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸或色氨酸取代的取代；(ad)第95位的氨基酸被天冬氨酸取代的取代；(ae)第96位的氨基酸被苯丙氨酸、缬氨酸或异亮氨酸取代的取代；和(af)第126位的氨基酸被苏氨酸取代的取代。10.分离的核酸，其编码根据权利要求1至9中任一项所述的白细胞介素-2类似物。11.重组表达载体，其包括根据权利要求10所述的核酸。12.转化体，其包括根据权利要求11所述的重组表达载体，不包括人。13.白细胞介素-2类似物，其包括选自seq id no:3至106的氨基酸序列的任一个序列。14.白细胞介素-2类似物，其包括由以下通式1表示的氨基酸序列：[通式1]x1-p-t-s-s-s-t-k-k-t-q-l-q-l-e-h-l-x18-x19-d-l-x22-m-i-l-n-g-i-n-n-y-k-n-p-k-l-t-x38-m-l-t-x42-x43-f-x45-m-p-k-k-a-t-e-l-k-h-l-q-c-l-e-x61-e-l-k-p-l-e-x68-v-l-n-l-a-x74-s-k-n-f-h-x80-x81-p-r-x84-x85-x86-s-n-i-n-x91-x92-v-x94-e-x96-k-g-s-e-t-t-f-m-c-e-y-a-d-e-t-a-t-i-v-e-f-l-n-r-w-i-t-f-s-q-s-i-i-s-t-l-t(通式1，seq id no:212)其中在上述通式1中，x1是缺失；x18是亮氨酸(l)或精氨酸(r)；x19是亮氨酸(l)或酪氨酸(y)；x22是谷氨酸(e)或谷氨酰胺(q)；x38是丙氨酸(a)、天冬氨酸(d)或精氨酸(r)；x42是丙氨酸(a)、苯丙氨酸(f)、赖氨酸(k)或色氨酸(w)；x43是谷氨酸(e)、赖氨酸(k)或谷氨酰胺(q)；x45是丙氨酸(a)或酪氨酸(y)；x61是天冬氨酸(d)、谷氨酸(e)、谷氨酰胺(q)或精氨酸(r)；x68是天冬氨酸(d)或谷氨酸(e)；x74是组氨酸(h)或谷氨酰胺(q)；x80是苯丙氨酸(f)、亮氨酸(l)、缬氨酸(v)或酪氨酸(y)；x81是天冬氨酸(d)、谷氨酸(e)或精氨酸(r)；x84是天冬氨酸(d)或谷氨酸(e)；x85是丙氨酸(a)、谷氨酸(e)、甘氨酸(g)、亮氨酸(l)、缬氨酸(v)、色氨酸(w)或酪氨酸(y)；x86是丙氨酸(a)、甘氨酸(g)、异亮氨酸(i)或缬氨酸(v)；x91是苏氨酸(t)或缬氨酸(v)；x92是苯丙氨酸(f)、异亮氨酸(i)或酪氨酸(y)；x94是苯丙氨酸(f)或亮氨酸(l)；以及x96是苯丙氨酸(f)或亮氨酸(l)。15.根据权利要求14所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物包括选自seq id no:10、13、14、15、16、17、20、21、22、32、35、36、42、53、54、56、58、59、60、62、71、
72、74、75、76、77、78、85、87、89、91、92、93、94、95、98、99、100、101、103、104、105和106的氨基酸序列的任一个序列。16.根据权利要求14所述的白细胞介素-2类似物，其中在上述通式1中，x43是赖氨酸(k)；x45是酪氨酸(y)；x61是天冬氨酸(d)、谷氨酸(e)或谷氨酰胺(q)；x68是谷氨酸(e)；x74是谷氨酰胺(q)；x80是苯丙氨酸(f)或亮氨酸(l)；x85是亮氨酸(l)、缬氨酸(v)或酪氨酸(y)；x86是异亮氨酸(i)或缬氨酸(v)；和x92是苯丙氨酸(f)或异亮氨酸(i)。17.根据权利要求16所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物包括选自seq id no:10、13、14、16、17、20、21、22、32、35、36、42、53、54、87、89、91、92、93、94、98、99、100、101、103、104和105的氨基酸序列的任一个序列。18.根据权利要求14所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物进一步包括在其c-末端的一个或多个氨基酸。19.白细胞介素-2类似物，其包括由以下通式2表示的氨基酸序列：[通式2]x1-p-t-s-s-t-k-t-q-l-q-l-e-h-l-x18-l-d-l-x22-m-i-l-n-g-i-n-y-k-n-p-k-l-t-x38-m-l-l-x42-k-f-y-m-p-h-k-a-t-e-l-k-c-l-e-x61-e-k-p-l-x68-v-l
‑‑
a-q-s-k-n-f-h-f-x81-p-r-d-x85-x86-s-n-i-n-v-v-l-e-l-k-g-s-e-t-t-f-m-c-e-y-a-d-e-t-a-i-v-e-f-l-n-r-w-i-t-f-s-s-i-s-l-t(通式2，seq id no:213)其中在上述通式2中，x1是缺失；x18是亮氨酸(l)或精氨酸(r)；x22是谷氨酸(e)或谷氨酰胺(q)；x38是丙氨酸(a)或精氨酸(r)；x42是苯丙氨酸(f)或赖氨酸(k)；x61是天冬氨酸(d)或谷氨酸(e)；x68是天冬氨酸(d)或谷氨酸(e)；x81是天冬氨酸(d)或谷氨酸(e)；x85是亮氨酸(l)或缬氨酸(v)；以及x86是异亮氨酸(i)或缬氨酸(v)。20.根据权利要求19所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物包括选自seq id no:22、42、53、87、105和106的氨基酸序列的任一个序列。21.根据权利要求19所述的白细胞介素-2类似物，其中所述白细胞介素-2类似物进一步包括在其c-末端的一个或多个氨基酸。

技术总结
本发明涉及白细胞介素-2α受体的改变和具有对白细胞介素-2β受体增加的结合亲和力的白细胞介素-2类似物。2类似物。2类似物。


技术研发人员：吴宜林 金尚允 许容豪 金真荣 C
受保护的技术使用者：韩美药品株式会社
技术研发日：2021.03.31
技术公布日：2022/12/1