用于接种前培养基处理的方法与流程

技术特征：
1.一种用于处理细胞培养基的方法，所述方法包括：将细胞培养基保持在处于适合用已被工程化以重组表达外源蛋白的真核细胞接种培养基的条件下的容器中，其特征在于所述培养基包含以下营养物-胱氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸衍生物中的一种或多种；和-一种或多种氧化还原活性痕量金属，以及在于，在接种前不存在细胞的情况下，将包含所述营养物的所述培养基在适合接种的所述条件下保持至少10小时的一段时间。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述培养基用以下两者补充：(1)胱氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸衍生物中的一种或多种；和(2)氧化还原活性痕量金属；所述补充进行于：(i)添加所述培养基至所述容器之前；(ii)添加所述培养基至所述容器的同时；(iii)添加所述培养基至所述容器之后且在所述容器处于适合用所述真核细胞接种所述培养基的条件下之前；或(iv)当所述容器处于适合用所述真核细胞接种所述培养基的条件下时，在所述容器中进行所述补充。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中将所述培养基在适合接种的所述条件下保持至少约24小时、至少约48小时、至少约72小时或至少约96小时的一段时间。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述补充在添加所述培养基至所述容器之前进行。5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述补充在添加所述培养基至所述容器之后进行。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述容器为生物反应器。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述经补充的培养基在接种之时或之前是在生物反应器中。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述半胱氨酸衍生物选自由以下项组成的组：s-磺基半胱氨酸、s-磺基半胱氨酰甘氨酸、n-乙酰基半胱氨酸(nac)、半胱氨酸s-连接的n-乙酰基葡萄糖胺(glcnac-cys)、同型半胱氨酸、l-半胱氨酸混合的二硫化物或各种肽类、具有硫醇保护基团的s-烷基化半胱氨酸、具有硫醇保护基团的半胱氨酸、还原的谷胱甘肽(gsh)、氧化的gsh、s-磺基谷胱甘肽、γ-谷氨酰半胱氨酸、半胱氨酰甘氨酸、n-丁酰基α-谷氨酰基-半胱氨酰基-甘氨酸、s-酰基-gsh和s-羧基-l-半胱氨酸。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述培养基在适合接种的条件下包含约0.5mm至约16mm的以下中的一种或多种至少约10小时：胱氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸衍生物。10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述氧化还原活性痕量金属为选自由铁、铜、铬、钴、硒、锰、钒和钼所组成的组中的一种或多种。11.根据权利要求10所述的方法，其中将铁、铜、铬、钴、硒、锰、钒和钼中的一种或多种添加至所述培养基中，作为累积浓度为约6μm至约350μm的痕量元素溶液。12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中适合接种的条件为：ph约ph 6.0至约ph 8.0，温度约20℃至约39℃；且o2％约10％至约80％。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述真核细胞为哺乳动物细胞、酵母细胞或昆虫细胞。14.一种细胞培养基，其能够通过根据权利要求1至13中任一项所述的方法获得。15.根据权利要求14所述的培养基在真核细胞发酵过程中用于产生重组蛋白的用途。16.一种用于通过重组表达而从真核细胞生产重组蛋白的方法，所述方法包括：-使适合培养所述真核细胞的细胞培养基经历根据权利要求1至13中任一项所述的方法，-用经工程化以重组表达外源蛋白的真核细胞接种经处理的细胞培养基，以形成细胞培养物，-培养所述细胞培养物使得产生所述重组蛋白。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述重组蛋白为抗体。18.根据权利要求16或17所述的方法，其进一步包括从所述细胞培养物中回收所述重组蛋白的步骤。

技术总结
本公开涉及用于处理和补充细胞培养基以改善真核重组表达系统中的过程性能的方法。改善真核重组表达系统中的过程性能的方法。改善真核重组表达系统中的过程性能的方法。


技术研发人员：O
受保护的技术使用者：豪夫迈
技术研发日：2021.04.14
技术公布日：2022/11/25