体外动脉粥样硬化斑块模型、制备方法及应用

技术特征：
1.体外动脉粥样硬化斑块模型的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括，将平滑肌细胞和单核吞噬细胞混合后，加入细胞损伤刺激剂培养获得斑块内核，而后，在斑块内核单侧接种损伤的内皮细胞，经培养得到类病理结构的动脉粥样硬化斑块模型。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述单核吞噬细胞与平滑肌细胞的数量比为2～10：1。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述单核吞噬细胞包括预分化单核细胞或巨噬细胞中的至少一种。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述细胞损伤刺激剂包括氧化低密度脂蛋白和/或葡萄糖转运蛋白抑制剂；优选地，所述葡萄糖转运蛋白抑制剂包括stf31。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述细胞损伤刺激剂加入的终浓度为10～300μg/ml。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，平滑肌细胞和单核吞噬细胞混合在趋化小室或细胞球模型制备板中培养。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述损伤的内皮细胞的制备方法包括，使用细胞损伤刺激剂预处理内皮细胞；优选地，所述细胞损伤刺激剂包括氧化低密度脂蛋白和/或葡萄糖转运蛋白抑制剂；进一步优选地，所述葡萄糖转运蛋白抑制剂包括stf31。8.根据权利要求1～7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(a)分别培养巨噬细胞和平滑肌细胞备用，将巨噬细胞与平滑肌细胞按照数量比2～10：1的比例混合接种于细胞趋化小室，利用10～300μg/ml氧化低密度脂蛋白处理12～48小时获得斑块模型内核；(b)用10～300μg/ml氧化低密度脂蛋白预处理内皮细胞12～48小时后，接种于(a)步骤得到的斑块模型内核的上侧或下侧，继续培养12～72小时获得类病理结构的动脉粥样硬化斑块模型；优选地，所述巨噬细胞与平滑肌细胞数量比为3～9：1；优选地，所述氧化低密度脂蛋白加入后的终浓度为20～100μg/ml。9.采用权利要求1～8任一项所述制备方法得到的体外动脉粥样硬化斑块模型。10.权利要求9所述体外动脉粥样硬化斑块模型在(a)～(c)任一项中的应用：(a)动脉粥样硬化发生发展的研究；(b)治疗动脉粥样硬化药物的筛选；(c)治疗动脉粥样硬化的介入器械的功能评估。

技术总结
本发明涉及疾病模型技术领域，尤其是涉及体外动脉粥样硬化斑块模型、制备方法及应用。在本发明提供的技术方案中，在细胞损伤刺激剂的处理下，平滑肌细胞和单核吞噬细胞混合培养形成斑块内核，而后与损伤的内皮细胞组合形成类病理结构的动脉粥样硬化斑块模型。该模型对AS发生发展研究、药物筛选，及介入器械功能的针对性评估具有重大意义。针对性评估具有重大意义。针对性评估具有重大意义。


技术研发人员：杨苹 邹丹 刘稼楠 歹帆帆 肖杨杨
受保护的技术使用者：西南交通大学
技术研发日：2022.09.05
技术公布日：2022/11/22