一种高稳定性虫草多糖的微囊化方法及高稳定性虫草多糖与流程

0.05。
13.优选地，步骤(2)中，高速搅拌的虫草多糖溶液的搅拌速度为4000-10000r/min。
14.优选地，步骤(2)中，蒸发除去二氯甲烷的温度为40-46℃。
15.优选地，步骤(2)中，将离心所得固体物采用蒸馏水洗涤2-4次。
16.本发明将聚乳酸溶液加入至虫草多糖溶液中分散均匀，然后向其中加入聚乳酸溶液，40-46℃蒸发除去聚乳酸溶液中的溶剂二氯甲烷，所得固体微球沉降，其外层聚乙烯醇包覆层与内层聚乳酸相配合，包覆在虫草多糖表面，不仅可保护虫草多糖被氧化变质，而且可在胃肠道降解完全。但申请人经过多次试验发现，上述微囊化虫草多糖稳定性较差，在胃肠道释药速度较快。
17.本发明在外层与内层微囊化结构中分别加入乳酸钙与海藻酸钠，在低速搅拌状态下，内层与外层结构的界面结合，有效增强双层界面间的结合强度，使所得高稳定性虫草多糖不仅可具有较高的包埋率，而且可在低速剪切流作用下快速成型，可获得较高的成型率，并有效提高微胶囊稳定性。
18.本技术研究结果表明，本发明进入至生物体后，在含有胃蛋白酶的酸性条件中，高稳定性虫草多糖没有被水解，而在含有胰蛋白酶的碱性条件中，高稳定性虫草多糖裂解并释放虫草多糖，具有良好的靶向性。同时释放药物在开始阶段时由于扩散作用显著，呈现出明显的突释现象，即药物浓度迅速达到一定浓度，随后缓释成分逐渐被降解，药物被缓慢释放，累积释药量不断提高，缓释效果优异。
19.一种高稳定性虫草多糖，采用上述高稳定性虫草多糖的微囊化方法制得。
附图说明
20.图1为实施例5和对比例中包覆的多糖量和多糖的包覆效率对比图。
21.图2为实施例5和对比例所得产物在不同环境中累积释放曲线图。
具体实施方式
22.下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
23.实施例1
24.一种高稳定性虫草多糖的微囊化方法，包括如下步骤：
25.(1)将1kg虫草多糖、0.1kg海藻酸钠加入至10kg蒸馏水中搅拌均匀得到虫草多糖溶液。
26.将2kg聚乳酸加入至40kg二氯甲烷中搅拌均匀得到聚乳酸溶液。
27.将10kg聚乙烯醇、0.01kg乳酸钙加入至100kg水中，在温度80℃搅拌均匀，冷却至室温得到聚乙烯醇溶液。
28.(2)将聚乳酸溶液加入至以4000r/min的速度高速搅拌的虫草多糖溶液中，滴加完毕后继续搅拌5min，然后将产物加入至以100r/min的速度搅拌的聚乙烯醇溶液中，继续搅拌10min，在温度40℃蒸发除去二氯甲烷，自然冷却至室温，离心，将所得固体物采用蒸馏水洗涤2次，冷冻干燥得到高稳定性虫草多糖。
29.实施例2
30.一种高稳定性虫草多糖的微囊化方法，包括如下步骤：
31.(1)将4kg虫草多糖、0.2kg海藻酸钠加入至20kg蒸馏水中搅拌均匀得到虫草多糖溶液。
32.将6kg聚乳酸加入至60kg二氯甲烷中搅拌均匀得到聚乳酸溶液。
33.将20kg聚乙烯醇、0.05kg乳酸钙加入至200kg水中，在温度90℃搅拌均匀，冷却至室温得到聚乙烯醇溶液。
34.(2)将聚乳酸溶液加入至以10000r/min的速度高速搅拌的虫草多糖溶液中，滴加完毕后继续搅拌15min，然后将产物加入至以500r/min的速度搅拌的聚乙烯醇溶液中，继续搅拌20min，在温度46℃蒸发除去二氯甲烷，自然冷却至室温，离心，将所得固体物采用蒸馏水洗涤4次，冷冻干燥得到高稳定性虫草多糖。
35.实施例3
36.一种高稳定性虫草多糖的微囊化方法，包括如下步骤：
37.(1)将2kg虫草多糖、0.17kg海藻酸钠加入至13kg蒸馏水中搅拌均匀得到虫草多糖溶液。
38.将5kg聚乳酸加入至45kg二氯甲烷中搅拌均匀得到聚乳酸溶液。
39.将18kg聚乙烯醇、0.02kg乳酸钙加入至170kg水中，在温度82℃搅拌均匀，冷却至室温得到聚乙烯醇溶液。
40.(2)将聚乳酸溶液加入至以8000r/min的速度高速搅拌的虫草多糖溶液中，滴加完毕后继续搅拌8min，然后将产物加入至以400r/min的速度搅拌的聚乙烯醇溶液中，继续搅拌13min，在温度44℃蒸发除去二氯甲烷，自然冷却至室温，离心，将所得固体物采用蒸馏水洗涤3次，冷冻干燥得到高稳定性虫草多糖。
41.实施例4
42.一种高稳定性虫草多糖的微囊化方法，包括如下步骤：
43.(1)将3kg虫草多糖、0.13kg海藻酸钠加入至17kg蒸馏水中搅拌均匀得到虫草多糖溶液。
44.将3kg聚乳酸加入至55kg二氯甲烷中搅拌均匀得到聚乳酸溶液。
45.将12kg聚乙烯醇、0.04kg乳酸钙加入至130kg水中，在温度88℃搅拌均匀，冷却至室温得到聚乙烯醇溶液。
46.(2)将聚乳酸溶液加入至以6000r/min的速度高速搅拌的虫草多糖溶液中，滴加完毕后继续搅拌12min，然后将产物加入至以200r/min的速度搅拌的聚乙烯醇溶液中，继续搅拌17min，在温度42℃蒸发除去二氯甲烷，自然冷却至室温，离心，将所得固体物采用蒸馏水洗涤3次，冷冻干燥得到高稳定性虫草多糖。
47.实施例5
48.一种高稳定性虫草多糖的微囊化方法，包括如下步骤：
49.(1)将2.5kg虫草多糖、0.15kg海藻酸钠加入至15kg蒸馏水中搅拌均匀得到虫草多糖溶液。
50.将4kg聚乳酸加入至50kg二氯甲烷中搅拌均匀得到聚乳酸溶液。
51.将15kg聚乙烯醇、0.03kg乳酸钙加入至150kg水中，在温度85℃搅拌均匀，冷却至室温得到聚乙烯醇溶液。
52.(2)将聚乳酸溶液加入至以7000r/min的速度高速搅拌的虫草多糖溶液中，滴加完
毕后继续搅拌10min，然后将产物加入至以300r/min的速度搅拌的聚乙烯醇溶液中，继续搅拌15min，在温度43℃蒸发除去二氯甲烷，自然冷却至室温，离心，将所得固体物采用蒸馏水洗涤3次，冷冻干燥得到高稳定性虫草多糖。
53.对比例
54.一种虫草多糖的微囊化方法，包括如下步骤：
55.(1)将2.5kg虫草多糖加入至15kg蒸馏水中搅拌均匀得到虫草多糖溶液。
56.将4kg聚乳酸加入至50kg二氯甲烷中搅拌均匀得到聚乳酸溶液。
57.将15kg聚乙烯醇加入至150kg水中，在温度85℃搅拌均匀，冷却至室温得到聚乙烯醇溶液。
58.(2)将聚乳酸溶液加入至以7000r/min的速度高速搅拌的虫草多糖溶液中，滴加完毕后继续搅拌10min，然后将产物加入至以300r/min的速度搅拌的聚乙烯醇溶液中，继续搅拌15min，在温度43℃蒸发除去二氯甲烷，自然冷却至室温，离心，将所得固体物采用蒸馏水洗涤3次，冷冻干燥得到虫草多糖微囊。
59.将实施例5和对比例的步骤(2)离心前物料采用紫外分光光度计测试221nm处吸收光谱强度，测得溶液中虫草多糖含量，进而计算包覆的多糖量和多糖的包覆效率。
60.包覆的多糖量＝(虫草多糖总质量-溶液中虫草多糖含量)/虫草多糖微囊
×
100％
61.多糖的包覆效率＝(虫草多糖总质量-溶液中虫草多糖含量)/虫草多糖总质量
×
100％
62.如图1所示，实施例5的包覆的多糖量和多糖的包覆效率均优于对比例。本技术人认为：这是由于本发明在外层与内层微囊化结构中分别加入乳酸钙与海藻酸钠，在低速搅拌状态下，内层与外层结构的界面结合，有效增强双层界面间的结合强度，所得高稳定性虫草多糖可获得较高的包埋率，而且可在低速剪切流作用下快速成型，可获得较高的成型率。
63.采用实施例5所得高稳定性虫草多糖和对比例所得虫草多糖微囊在不同环境(温度/ph)中的载药释放特性。具体如下：
64.取稀盐酸16.4ml(相当于盐酸3.84ml)，加水约800ml与胃蛋白酶10g，摇匀后，加水定容至1000ml，得到模拟胃液。
65.取6.8g磷酸二氢钾，加水500ml使溶解，用0.1mol/l氢氧化钠溶液调节ph值至7.4；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后，加水定容至1000ml，得到模拟肠液。
66.定量称取实施例5所得高稳定性虫草多糖和对比例所得虫草多糖微囊(保证各组中虫草多糖的含量均为100mg)，置于模拟胃液的离心管中处理2h，过滤后将滤饼置于模拟肠液的离心管中处理4h。在试验期间每隔半小时从相应的离心管中取出2ml上清液，并补充2ml新鲜模拟胃液或新鲜模拟肠液。取出的上清液经过滤后，采用紫外分光光度计测试221nm处吸收光谱强度，测得溶液中虫草多糖含量。
67.如图2所示，实施例5所得高稳定性虫草多糖在相同条件下优于对比例。
68.本技术人认为：这是由于本发明在外层与内层微囊化结构中分别加入乳酸钙与海藻酸钠，在低速搅拌状态下，内层与外层结构的界面结合，有效增强双层界面间的结合强度，所得高稳定性虫草多糖不仅可获得较高的包埋率，而且可在低速剪切流作用下快速成型，可获得较高的成型率，并有效提高微胶囊稳定性。
69.本发明所得高稳定性虫草多糖在含有胃蛋白酶的酸性条件中没有被水解，而在含
有胰蛋白酶的碱性条件中，高稳定性虫草多糖裂解并释放虫草多糖，具有良好的靶向性。同时释放药物在开始阶段时由于扩散作用显著，呈现出明显的突释现象，即药物浓度迅速达到一定浓度，随后缓释成分逐渐被降解，药物被缓慢释放，累积释药量不断提高，缓释效果优异。
70.以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。