一种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法及其应用与流程

1.本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法及其应用。


背景技术：

2.生物活性肽(bioactive peptide,bap)是蛋白质中20种天然以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物。生物活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能，易消化吸收，有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用。
3.酵素渣是酵素生产过程中的副产物，是经过发酵后，不溶于酵素液的残余固形物，含有机质、氮磷养分和酵素菌，多用于制作有机肥料，或污染土壤的修复。生姜蛋白酶是从生姜中发现的一种植物蛋白酶，属于木瓜蛋白酶类，与木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶及猕猴桃蛋白酶共同组成4种重要植物蛋白酶。生姜蛋白酶酶学性质较佳，在50℃左右仍具备较高酶活，能够有效降解反应体系中粗蛋白，形成小分子肽和氨基酸。
4.目前制取生物活性肽的原料多采用大豆、花生、鱼粉等，本发明利用生姜蛋白酶降解酵素残渣中的粗蛋白，提供了一种新的生物活性肽制备方法。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提供一种新的生物活性肽制备方法。
6.为此，本发明提供了一种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：
7.(1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；
8.(2)取酵素渣进行预处理，然后加入生姜匀浆进行酶解，得到酶解液；
9.(3)将酶解液加热灭活后过滤离心，上清液即为生物活性肽产品。
10.具体的，上述步骤(1)具体为：取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加维生素c，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。
11.具体的，以生姜质量计，上述维生素c的添加量为0.1％-5％。
12.具体的，上述酵素渣为红枣酵素渣或枸杞酵素渣。
13.具体的，上述步骤(2)中预处理具体为：向酵素渣中加入水或缓冲液，煮沸熬制。
14.具体的，上述缓冲液为pbs缓冲液或ph6.0磷酸缓冲液。
15.具体的，上述步骤(2)中生姜匀浆添加量为酵素渣质量的2倍以上。
16.具体的，上述步骤(2)中酶解条件为50℃恒温水浴4-16h。
17.与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：
18.本发明提供的这种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法直接利用生姜对酵素残渣中的残存粗蛋白进行酶解，替代了繁杂的生姜蛋白酶提取工艺，且对酵素残渣底物实现再利用，大大降低了酵素生产过程中废渣处理的环保压力，而且反应原料均为纯天然、可食用型原料，绿色环保。此外，本发明在酵素渣中添加生姜，一方面使用天然性植物蛋白继续酶
25kda周围。
36.将上清液进行灌装、灭菌即得生物活性肽产品。
37.实施例2：
38.本实施例提供了一种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：
39.(1)取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加1％的维生素c，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。
40.(2)取50g红枣酵素渣，加入150g水，煮沸熬制15min，冷却后加入200g生姜匀浆在50℃恒温水浴酶解16h，得到酶解液。
41.(3)将酶解液加热煮沸15min灭活后过滤离心，检测上清液dpph清除率ic
50
值为86mg/ml，将酶解液进行sds-page蛋白分离胶，结果如图2所示，测定其分子量分布在10-15kda周围。
42.将上清液进行灌装、灭菌即得生物活性肽产品。
43.比较例1：
44.本比较例提供了一种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：
45.取0.5kg红枣酵素渣，加入1.5kg水，煮沸熬制15min，冷却后加入2kg酶活为300u/g的生姜蛋白酶在50℃恒温水浴酶解16h，得到酶解液。
46.(3)将酶解液加热煮沸15min灭活后过滤离心，检测上清液dpph清除率ic
50
值为20mg/ml，小于实施例2中dpph清除率。将酶解液进行sds-page蛋白分离胶，结果如图3所示，测定其分子量分布在10-15kda周围。
47.以上例举仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。


技术特征：
1.一种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；(2)取酵素渣进行预处理，然后加入生姜匀浆进行酶解，得到酶解液；(3)将酶解液加热灭活后过滤离心，上清液即为生物活性肽产品。2.如权利要求1所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加维生素c，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。3.如权利要求2所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于：以生姜质量计，所述维生素c的添加量为0.1％-5％。4.如权利要求1所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于：所述步骤(2)中的酵素渣为红枣酵素渣或枸杞酵素渣。5.如权利要求1所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于，所述步骤(2)中预处理具体为：向酵素渣中加入水或缓冲液，煮沸熬制。6.如权利要求5所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于：所述缓冲液为pbs缓冲液或ph6.0磷酸缓冲液。7.如权利要求5所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于：所述步骤(2)中生姜匀浆添加量为酵素渣质量的2倍以上。8.如权利要求1所述的酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，其特征在于：所述步骤(2)中酶解条件为50℃恒温水浴4-16h。9.一种生物活性肽，其特征在于：所述生物活性肽采用权利要求1-8任意一项所述方法制备。

技术总结
本发明属于生物工程技术领域，具体提供了酶解酵素渣制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：(1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；(2)取酵素渣进行预处理，然后加入生姜匀浆进行酶解，得到酶解液；(3)将酶解液加热灭活后过滤离心，上清液即为生物活性肽产品。本发明提供的这种酶解酵素渣制备生物活性肽的方法直接利用生姜对酵素残渣中的残存粗蛋白进行酶解，替代了繁杂的生姜蛋白酶提取工艺，且对酵素残渣底物实现再利用，大大降低了酵素生产过程中废渣处理的环保压力，而且反应原料均为纯天然、可食用型原料，绿色环保。绿色环保。绿色环保。


技术研发人员：吴微 张茜茜 周樱 詹泽涛 张立 刘营 辜玲芳 詹志春
受保护的技术使用者：武汉新华扬生物股份有限公司
技术研发日：2022.08.25
技术公布日：2022/11/11