一种冻虾仁致病菌污染模型的建立及应用

技术特征：
1.一种冻虾仁致病菌污染模型的建立，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、取未被金黄葡萄球菌和沙门氏菌污染的冻虾仁进行解冻，蒸馏水洗涤，然后接入金黄葡萄球菌和沙门氏菌两种致病菌，得到污染后的冻虾仁；步骤二、对所述污染后的冻虾仁进行培养，得到培养后的冻虾仁；步骤三、对所述培养后的冻虾仁进行冻干处理，除去水分，得到冻干的冻虾仁；步骤四、在所述冻干的冻虾仁中加入有机溶剂并提取，得提取液；步骤五、对所述提取液进行离心处理，除去沉淀，要上清液，对上清液进行过滤，要滤液；步骤六、对步骤五中的滤液进行lc-ms检测，再对检测结果进行代谢组学分析，得到污染代谢标志物，污染模型建立完成。2.根据权利要求1所述冻虾仁致病菌污染模型的建立，其特征在于：所述步骤四中加入溶剂后采用超声提取，得所述提取液。3.根据权利要求1或2所述冻虾仁致病菌污染模型的建立，其特征在于：所述步骤四中的溶剂为甲醇，每0.1g冻干虾仁加入1ml甲醇进行提取。4.根据权利要求1所述冻虾仁致病菌污染模型的建立，其特征在于：所述步骤五中过滤采用微孔滤膜，微孔滤膜为0.22μm的有机系滤膜。5.根据权利要求1所述冻虾仁致病菌污染模型的建立，其特征在于：所述步骤六中的污染代谢标志物为：l-norleucine、dl-dipalmitoylphosphatidylcholine、4-dodecylbenzenesulfonic acid、2,2'-methylenebis(4-methyl-6-tert-butylphenol)、adenine、l(-)-carnitine、hypoxanthine、5'-s-methyl-5'-thioadenosine、myristyl sulfate、palmitoyl ethanolamide、dodecyl sulfate、(r)-3-hydroxy myristic acid、adenosine和bis(2-ethylhexyl)phthalate。6.根据权利要求1至5任意一项冻虾仁致病菌污染模型的应用，其特征在于：包括以下步骤：第一步、取市售虾仁，进行冻干处理，除去水分，得到冻干的待检测样品；第二步、在所述得到冻干的待检测样品中加入甲醇并提取，得待检测提取液；第三步、对所述待检测提取液进行离心处理，除去沉淀，要上清液，对上清液进行过滤，要滤液，得到待检测滤液；第四步、对待检测滤液进行lc-ms检测，再对检测结果进行代谢组学分析，得代谢物；第五步、检测到的代谢物与污染模型代谢标志物进行比对，如相符则说明市售虾仁被相应的致病菌污染。

技术总结
本发明属于冻虾仁致病菌检测技术领域，具体涉及一种冻虾仁致病菌污染模型的建立及应用。其建立方案为:取无污染冻虾仁接入致病菌，进行培养，冻干除去水分，加入甲醇提取，离心除去沉淀，过滤,进行LC-MS检测，代谢组学分析，得到污染代谢标志物。其应用为：取市售虾仁，冻干除去水分，加入甲醇提取,离心除去沉淀，过滤,进行LC-MS检测，代谢组学分析，得代谢物；判断代谢物是否与污染模型代谢标志物相符，如相符则说明被同样的致病菌污染。本方案能同时检测金黄葡萄球菌和沙门氏菌，检测用时较短，较好满足虾仁被致病菌污染快速反应的需要。满足虾仁被致病菌污染快速反应的需要。


技术研发人员：祝子坪 李娜 李钧敏 丁佳佳
受保护的技术使用者：台州学院
技术研发日：2022.07.12
技术公布日：2022/9/9