一种基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒的制作方法

1.本实用新型涉及核酸检测技术领域，具体为一种基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒。


背景技术：

2.随着新冠肺炎在全球范围内的大流行，发现传染源，切断传播途径成为控制疫情的关键，早期筛查出新冠病毒的无症状感染者一直是防疫的重中之重，核酸检测方法的灵敏度、特异性更好，是临床上最常用的方法，荧光定量pcr是新冠肺炎临床诊断的金标准，但该方法受限于昂贵的大型仪器、专业的检测人员以及严格的实验条件等，难以在资源匮乏地区实现大规模的筛查以及预后病情的持续监测，同时其普及范围受限，无法在基层医院和社区中开展，一旦某地疫情爆发，现有的核酸检测需求将会远远超出医疗负荷。
3.通过将目标核酸的检测转换为葡萄糖的检测，采用血糖仪作为信号读出装置，可实现对目标核酸的定量检测，且将目标核酸的检测转换为纳米金的检测，可实现裸眼的半定量检测，为了能够提供基于血糖仪法和金纳米法的新冠病毒核酸检测方法，均需提供三根试剂管作为试剂的载体，且需要磁铁和磁珠配合进行磁分离的步骤，因此本实用新型提出一种便于对以上工具进行收纳和便于磁分离步骤进行的便携式试剂盒来满足现有的需求。


技术实现要素：

4.（一）解决的技术问题
5.针对现有技术的不足，本实用新型提供了一种基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒，解决不便于对工具进行收纳和不便于磁分离步骤进行的问题。
6.（二）技术方案
7.为实现以上目的，本实用新型通过以下技术方案予以实现：一种基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒，包括开口朝上的盒体，所述盒体上侧固定有衬板，盒体中部固定有定位板，衬板上开设有多个沿左右方向均布的放置槽，放置槽内设有试剂管，试剂管后侧通过连接带固定有遮盖，最左侧的遮盖内设有可滑入对应的试剂管内的磁珠，放置槽内连通有上下贯通的插孔，定位板上开设有多个与插孔一一对应且上下贯通的定位孔，定位板下侧转动连接有上下轴向的l型杆，l型杆右端固定有磁铁，磁铁可位于最左侧的定位孔的正下方。
8.可选的，所述盒体上可拆卸连接有盒盖，盒盖内固定有软垫。
9.可选的，所述衬板右侧开设有定位槽，定位槽内设有吸管。
10.可选的，最左侧的所述遮盖上开设有开口朝下的限位槽，限位槽内滑动连接有挡块，挡块后侧可与磁珠接触，最左侧的遮盖上开设有前后贯通的通槽，通槽内滑动连接有工型柱，工型柱前侧可与磁珠接触，挡块上侧经弹簧与最左侧的遮盖连接。
11.可选的，所述l型杆上侧固定有t型柱，t型柱上侧贯穿定位板且伸出衬板。
12.可选的，所述衬板上开设有弧形槽，t型柱上侧固定有限位板，限位板与弧形槽滑动连接。
13.（三）有益效果
14.本实用新型提供了一种基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒，具备以下有益效果：
15.该基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒，通过盒体、衬板、放置槽、试剂管和遮盖之间的配合设置，能够将试剂管放置在放置槽内，从而便于对试剂管携带，且试剂管可插入对顶的插孔和定位孔内，使得试剂管呈竖立状态，从而便于检测工作的进行，最左侧的遮盖内的磁珠可进入对应的试剂管内，磁铁可位于最左侧的定位孔的正下方，从而通过磁珠和磁铁配合，对最左侧试剂管内的试剂进行磁分离。
附图说明
16.图1为本实用新型的轴测图；
17.图2为本实用新型去除盒盖后的轴测图；
18.图3为本实用新型的主视剖切轴测图；
19.图4为本实用新型的右视剖切轴测图；
20.图5为本实用新型的左视剖切轴测图；
21.图6为本实用新型图4中a处放大的结构示意图。
22.图中：1、盒体；2、衬板；3、定位板；4、放置槽；5、试剂管；6、遮盖；7、磁珠；8、插孔；9、定位孔；10、l型杆；11、磁铁；12、盒盖；13、吸管；14、挡块；15、工型柱；16、t型柱。
具体实施方式
23.下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
24.请参阅图1至图6，本实用新型提供一种技术方案：一种基于血糖仪和金纳米的新冠病毒核酸检测试剂盒，包括开口朝上的盒体1，盒体1上侧固定有衬板2，盒体1中部固定有定位板3，衬板2上开设有多个沿左右方向均布的放置槽4，放置槽4内设有试剂管5，试剂管5后侧通过连接带固定有遮盖6，最左侧的遮盖6内设有可滑入对应的试剂管5内的磁珠7，放置槽4内连通有上下贯通的插孔8，定位板3上开设有多个与插孔8一一对应且上下贯通的定位孔9，定位板3下侧转动连接有上下轴向的l型杆10，l型杆10右端固定有磁铁11，磁铁11可位于最左侧的定位孔9的正下方，该装置能够将试剂管5放置在放置槽4内，从而便于对试剂管5携带，且试剂管5可插入对顶的插孔8和定位孔9内，使得试剂管5呈竖立状态，从而便于检测工作的进行，最左侧的遮盖6内的磁珠7可进入对应的试剂管5内，磁铁11可位于最左侧的定位孔9的正下方，从而通过磁珠7和磁铁11配合，对最左侧试剂管5内的试剂进行磁分离；
25.为了便于将该装置封盒携带和运输，因此在盒体1上可拆卸连接有盒盖12，盒盖12内固定有软垫；
26.为了使该装置便于对吸管13放置，因此在衬板2右侧开设有定位槽，定位槽内设有
吸管13；
27.为了便于在不使用磁珠7时，使磁珠7位于对应的遮盖6内，因此在最左侧的遮盖6上开设有开口朝下的限位槽，限位槽内滑动连接有挡块14，挡块14后侧可与磁珠7接触，最左侧的遮盖6上开设有前后贯通的通槽，通槽内滑动连接有工型柱15，工型柱15前侧可与磁珠7接触，挡块14上侧经弹簧与最左侧的遮盖6连接；
28.为了便于转动l型杆10使磁铁11能够位于最左侧的定位孔9的正下方，因此在l型杆10上侧固定有t型柱16，t型柱16上侧贯穿定位板3且伸出衬板2；
29.为了使该装置能够对t型柱16的转动角度进行限定，因此在衬板2上开设有弧形槽，t型柱16上侧固定有限位板，限位板与弧形槽滑动连接。
30.基于新冠病毒的n基因构建三明治杂交复合物，在此基础上，根据读出信号的不同，开发了两种便携式新型冠状病毒核酸检测方法，第一种是将目标核酸的检测转换为葡萄糖的检测，采用血糖仪作为信号读出装置，可实现对目标核酸的定量检测，适用于社区医院及门诊的常规检查；
31.第二种是将目标核酸的检测转换为纳米金的检测，可实现裸眼的半定量检测，无需依赖任何设备，适用于医疗资源匮乏地区对疾病的大规模筛查，该试剂盒若与紫外可见吸收光谱仪或者暗场散射显微镜联合，也可实现自动化定量检测。
32.以血糖仪为读出信号，基本原理：当目标核酸（n-gene）存在时，dna-蔗糖酶复合物（n-gene-hs-蔗糖酶）、n-gene 和生物素修饰的核酸探针（n-gene-biotin）三者通过碱基对结合成三明治复合结构，向体系中加入链霉亲和素修饰的磁纳米颗粒，通过生物素与链霉亲和素之间的相互作用，该三明治复合结构将结合在磁纳米颗粒的表面，磁分离后，向体系中加入蔗糖溶液，蔗糖酶将催化其水解为葡萄糖，从而将目标核酸的浓度转化为葡萄糖浓度，借助便携式血糖仪即可实现检测；
33.采用以血糖仪为读出信号，应选取最左侧的试剂管5内置入有dna-蔗糖酶复合物和n-gene-biotin的试剂液，且磁珠7位于其对应的遮盖6内，中部的试剂管5内置入洗涤液，最右侧的试剂管5内置入蔗糖溶液。
34.以金纳米为检测信号，基本原理：由于 au 可以与巯基连接，因此可以将一个末端巯基修饰的 dna 序列修饰到金纳米表面，得到一个金纳米修饰的核酸探针，当目标核酸存在时，表面修饰 dna 的 aunp（aunp-dna）、目标核酸（n-gene）以及生物素修饰的核酸探针（n-gene-biotin）可以通过碱基互补配对形成三明治结构复合物，由于生物素可以与链霉亲和素特异性结合，因此当加入链霉亲和素修饰的磁珠7后，三明治结构复合物就可以结合到磁珠7上，磁分离并洗涤，最后加入 naoh 破坏 dna 的双螺旋结构，金纳米又重新游离到上清液中，将目标核酸的检测转换为金纳米的检测，可实现裸眼的半定量检测，无需依赖任何设备，该方法与紫外可见吸收光谱仪或者暗场散射显微镜联合，也可实现自动化定量检测。
35.采用以金纳米为检测信号时，应选取最左侧的试剂管5内置入金纳米探针和n-gene-biotin的试剂液，且磁珠7位于其对应的遮盖6内，中部的试剂管5内置入洗涤液，最右侧的试剂管5内置入naoh溶液。
36.本实用新型中，该装置的工作步骤如下：
37.该装置初始状态时，三个试剂管5平躺的放置在对应的放置槽4内，l型杆10为左右
方向，此时磁铁11距离最左侧的定位孔9一定距离，吸管13置于定位槽，且吸管13可从定位槽内取出，试剂管5可从对应的放置槽4内取出，磁珠7位于最左侧遮盖6内；
38.该装置使用时，将三个试剂管5从放置槽4内取出，并分别插入对应的插孔8和定位孔9内，使其处于竖直状态；
39.当使用以血糖仪为读出信号时，应使该装置最左侧的试剂管5内含有dna-蔗糖酶复合物和n-gene-biotin的试剂液，且磁珠7位于其对应的遮盖6内，中部的试剂管5内含有洗涤液，最右侧的试剂管5内含有蔗糖溶液，先把提取出来的dna加入含有dna-蔗糖酶复合物和n-gene-biotin的试剂液的试剂管5中室温反应三十分钟，然后按压工型柱15，使得磁珠7移动，挡块14缩入限位槽内，弹簧压缩，磁珠7进入到该试剂管5内，当磁珠7加入到试剂液内后震荡摇匀后反应三十分钟，之后向右旋转t型柱16带动l型杆10和磁铁11转动，使得磁铁11转动到最左侧的定位孔9的正下方进行磁分离十分钟，磁分离后通过吸管13移去上清液，用吸管13抽取中部的试剂管5内的洗涤液加入到最左侧的试剂管5内中，震荡摇匀使试管中物质混匀，磁分离十分钟后并移去上清液，最后加入最右侧的试剂管5内的蔗糖溶液，蔗糖反应一百二十分钟后用血糖仪读数；
40.当采用以金纳米为检测信号时，应使该装置最左侧的试剂管5内含有金纳米探针和n-gene-biotin的试剂液，且磁珠7位于其对应的遮盖6内，中部的试剂管5内含有洗涤液，最右侧的试剂管5内含有naoh溶液，先把提取出来的dna加入含有金纳米探针和n-gene-biotin的试剂液的试剂管5中室温反应三十分钟，然后按压工型柱15，使得磁珠7移动，挡块14缩入限位槽内，弹簧压缩，磁珠7进入到该试剂管5内，当磁珠7加入到试剂液内后震荡摇匀后反应三十分钟，之后向右旋转t型柱16带动l型杆10和磁铁11转动，使得磁铁11转动到最左侧的定位孔9的正下方进行磁分离十分钟，磁分离后通过吸管13移去上清液，用吸管13抽取中部的试剂管5内的洗涤液加入到最左侧的试剂管5内中，震荡摇匀使试管中物质混匀，磁分离十分钟后并移去上清液，最后加入最右侧的试剂管5内的naoh溶液震荡反应十五分钟后观察颜色反应，并利用紫外可见吸收光谱仪或者暗场散射显微镜技术定量检测。
41.该装置在使用时不依赖昂贵的大型仪器以及严格的实验环境，使得核酸检测工作可在基层或社区医院开展，需在三个试剂管5内置入相配的试剂，操作便捷。
42.尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。