基因改造巨核细胞、改造血小板和它们的制造方法

技术特征：
1.一种基因改造巨核细胞的制造方法，其包括向巨核细胞中导入crispr相关(cas)家族蛋白和指导rna(grna)来改造对象基因的步骤，所述步骤中，要导入到所述巨核细胞中的所述cas家族蛋白与所述grna预先形成了复合物。2.根据权利要求1所述的制造方法，其中，所述cas家族蛋白和所述grna的导入通过适合于蛋白质导入的脂质体转染法或电穿孔法进行。3.根据权利要求1或2所述的制造方法，其中，所述cas家族蛋白和所述grna的导入通过电穿孔法进行。4.根据权利要求1～3中任一项所述的制造方法，其中，所述对象基因为(i)人白细胞抗原(hla)-a、hla-b和hla-c基因、或(ii)β2-微球蛋白(b2m)基因，所述改造为所述对象基因的破坏。5.根据权利要求1～4中任一项所述的制造方法，其中，所述巨核细胞是使多能干细胞分化而得到的巨核细胞。6.一种基因改造巨核细胞，其中，(i)hla-a、hla-b和hla-c基因、或(ii)b2m基因已被破坏。7.一种改造血小板的制造方法，其包括：向巨核细胞中导入cas家族蛋白和grna来改造对象基因，从而得到基因改造巨核细胞的步骤；以及由所述基因改造巨核细胞产生血小板而得到改造血小板的步骤，得到所述基因改造巨核细胞的步骤中，要导入到所述巨核细胞中的所述cas家族蛋白与所述grna预先形成了复合物。8.根据权利要求7所述的制造方法，其中，所述cas家族蛋白和所述grna的导入通过适合于蛋白质导入的脂质体转染法或电穿孔法进行。9.根据权利要求7或8所述的制造方法，其中，所述cas家族蛋白和所述grna的导入通过电穿孔法进行。10.根据权利要求7～9中任一项所述的制造方法，其中，所述对象基因为(i)hla-a、hla-b和hla-c基因、或(ii)b2m基因，所述改造为所述对象基因的破坏。11.根据权利要求7～10中任一项所述的制造方法，其中，所述巨核细胞是使多能干细胞分化而得到的巨核细胞。12.一种基因改造巨核细胞的制造方法，其包括向巨核细胞中导入cas家族蛋白和grna来改造对象基因的步骤，所述步骤中，所述cas家族蛋白和所述grna的导入通过电穿孔法进行。

技术总结
一种基因改造巨核细胞的制造方法，其包括向巨核细胞中导入CRISPR相关(Cas)家族蛋白和指导RNA(gRNA)来改造对象基因的步骤，上述步骤中，要导入到上述巨核细胞中的上述Cas家族蛋白和上述gRNA预先形成了复合物，该制造方法作为制造基因改造巨核细胞和改造血小板的技术有用。术有用。


技术研发人员：原田康男 堀田秋津 徐淮耕 杉本直志 江藤浩之
受保护的技术使用者：国立大学法人京都大学
技术研发日：2021.03.01
技术公布日：2022/8/19