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一种赭鹿花菌分子身份证及其扩增引物、检测试剂盒和物种鉴定方法

2022-07-23 03:26:02 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种赭鹿花菌分子身份证,其特征在于,赭鹿花菌分子身份证的核苷酸序列如seq id no:1所示或与seq id no:1互补的序列。2.一种特异性扩增权利要求1所述赭鹿花菌分子身份证的引物,其特征在于,包括核苷酸序列如seq id no:2所示的正向引物和核苷酸序列如seq id no:3所示的反向引物。3.一种鉴定赭鹿花菌的检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求2所述引物和检测试剂。4.根据权利要求3所述检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂包括pcr扩增用试剂。5.根据权利要求3或4所述检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒还包括阳性标准品;所述阳性标准品为权利要求1所述赭鹿花菌分子身份证。6.一种赭鹿花菌的物种鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:1)提取待检测样本的基因组dna;2)以步骤1)中所述基因组dna为模板,用权利要求2所述引物进行pcr扩增,得到pcr产物;3)将所述pcr产物进行电泳和测序,得到122bp的序列判断待检测样本为赭鹿花菌。7.根据权利要求6所述物种鉴定方法,其特征在于,步骤2)中pcr扩增的反应体系总体系为25μl,包括12.5μl的2
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taq pcr master mix12.5μl,2μm上游引物和2μm下游引物各1μl,2μl10ng/μldna模板,余量的ddh2o。8.根据权利要求6所述物种鉴定方法,其特征在于,步骤2)中pcr扩增的反应程序为94℃4min;94℃40s,55℃30s,72℃30s,34个循环;72℃10min。9.权利要求1所述赭鹿花菌分子身份证、权利要求2所述引物或权利要求3~5任意一项所述检测试剂盒在鉴别赭鹿花菌和近缘种中的应用。10.根据权利要求9所述应用,其特征在于,所述近缘种包括以下一种或几种:鹿花菌、大鹿花菌、弹性马鞍菌、羊肚菌、波地钟菌、胶陀螺和粗柄马鞍菌。

技术总结
本发明提供了一种赭鹿花菌分子身份证及其扩增引物、检测试剂盒和物种鉴定方法,属于物种鉴定技术领域。本发明基于DNAmini-barcode技术开发出一种赭鹿花菌分子身份证,可有效鉴定赭鹿花菌物种,并且具有超高的检测灵敏度。本发明还基于赭鹿花菌分子身份证设计得到一对特异性引物,利用所述引物进行检测,可大大的降低了误食赭鹿花菌的检测时间和成本,且操作便利。可见本发明提供鉴定方法为蘑菇中毒事件的现场快速实时检测提供了基础,同时进一步完善了蘑菇产品质量与安全的监督检测体系。测体系。测体系。


技术研发人员:田恩静 谢晓梅 段仁和 曹广乘
受保护的技术使用者:吉林农业大学
技术研发日:2022.06.02
技术公布日:2022/7/22
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