通过与磷酸化TAU蛋白结合检测神经疾病的方法与流程

通过与磷酸化tau蛋白结合检测神经疾病的方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术根据35 u.s.c.
§
119(e)主张2019年9月18日提交的美国临时申请系列号62/902,265的权益，所述申请以全文引用的方式并入本文中。


背景技术：

3.神经疾病是脑、脊髓和周围神经系统的疾病。就流行病学和个体发病率而言，最大的社会成本是由神经系统疾病所造成。在这些神经系统疾病中最突出的是阿尔茨海默氏病(alzheimer's disease)和帕金森氏病(parkinson's disease)。其它神经系统疾病包括：年龄相关的病状(例如，帕金森氏痴呆、血管性痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化症)、遗传综合症(例如，唐氏综合症)、损伤相关的病状(例如，创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病)以及通常在本质上被视为纯精神性的病状，如精神分裂症和抑郁症。
4.微管相关蛋白tau(mapt)是一类在组装和拆卸过程中使微管稳定的蛋白。mapt转录物在神经系统中被不同地表达，这取决于神经元成熟的阶段和神经元类型。mapt基因突变已与多种神经病症有关，如阿尔茨海默氏病、皮克氏病、额颞痴呆、皮质基底变性、和进行性核上性麻痹。与正常大脑相比，例如患有阿尔茨海默病的患者的患病大脑中的tau蛋白可能被异常磷酸化。因此需要用于检测磷酸化tau蛋白的材料和方法。


技术实现要素：

5.在一些实施方案中，提供了一种确定患者是否患有神经疾病或病症的方法，其包括检测患者的组织中磷酸化tau蛋白的存在，其中该检测包括使磷酸化tau蛋白与本文中所描述的化合物接触。该化合物可以是式i、ii、ia、ib、ic、id或ie的化合物。在一些实施方案中，化合物是化合物1、2、3、4或5。
6.在一些实施方案中，神经疾病或病症是选自年龄相关的疾病或病症、遗传疾病或病症、与损伤有关的疾病或病症、及精神疾病或病症。在一些实施方案中，与年龄相关的疾病或病症选自帕金森氏痴呆、血管性痴呆和肌萎缩性脊髓侧索硬化症，其中遗传疾病或病症是唐氏综合症，其中与损伤相关的疾病或病症选自创伤性脑损伤和慢性创伤性脑病，并且其中精神疾病或病症选自精神分裂症和抑郁症。神经系统疾病或病症可以是阿尔茨海默病或慢性创伤性脑病(cte)。神经疾病或病症可以是tau蛋白病。
7.在一些实施方案中，提供了一种用于准备患者以诊断神经疾病或病症的方法，该方法包括将本文中所描述的化合物施用给该患者。该化合物可以是式i、ii、ia、ib、ic、id或ie的化合物。在一些实施方案中，化合物是化合物1、2、3、4或5。在一些实施方案中，施用是静脉内施用或者位于眼睛的视网膜中。在一些实施方案中，施用是局部施用。
附图说明
8.图1a-1c说明了用3rtau ab、化合物5和dapi染色的不同年龄的3rtau小鼠在3个月(图1a)、6个月(图1b)和12个月(图1c)的视网膜切片。
9.图2a-2b说明用3rtau ab、化合物5和dapi染色的3rtau小鼠(12个月)视网膜切片(图2a)和用3rtau ab、化合物5和dapi染色的野生型小鼠(12个月)视网膜切片(图2b)。
10.图3说明用3rtau ab、化合物5和dapi染色的3rtau小鼠(12个月)视网膜切片。
具体实施方式
11.定义
12.下面的描述陈述了本公开的示例性实施方案。然而，应当认识到，该描述并非旨在限制本公开的范围，而是作为对示例性实施方案的描述而提供。
13.如本说明书中所使用的，以下词语、短语和符号通常旨在具有以下阐述的含义，除非在使用它们的上下文中另有说明。
14.术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分表示直链(即非支链)或支链或其组合，它们可以是完全饱和的、单不饱和或多不饱和的，并可包括二价和多价基团，具有指定的碳原子数(即c
1-c
10
表示一至十个碳)。饱和烃基的实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、(环己基)甲基，例如，正戊基、正己基、正庚基、正辛基等。
15.除非另外说明，术语“杂烷基”本身或与另一术语组合是指由至少一个碳原子和至少一个选自o、n、p、si和s的杂原子组成并且其中氮和硫原子可以任选地被氧化并且氮杂原子可以任选地被季铵化的稳定的直链或支链或环状烃基或其组合。杂原子o、n、p和s以及si可位于杂烷基的任何内部位置或烷基与分子的其余部分连接的位置。实例包括但不限于-ch
2-ch
2-o-ch3、-ch
2-ch
2-o-ch
2-ch
2-o-ch3、-ch
2-ch
2-o-ch
2-ch
2-o-ch
2-ch
2-o-ch3、-ch
2-ch
2-nh-ch3、-ch
2-ch
2-n(ch3)-ch3、-ch
2-s-ch
2-ch3、-ch
2-ch
2-s(o)-ch3、-ch
2-ch
2-s(o)
2-ch3、-ch＝ch-o-ch3、-si(ch3)3、-ch
2-ch＝n-och3、-ch＝ch-n(ch3)-ch3、o-ch3、-o-ch
2-ch3和-cn。两个或更多个杂原子也可以是连续的。
16.除非另有说明，术语“环烷基”和“杂环烷基”本身或与其他术语组合，分别表示“烷基”和“杂烷基”的环状形式。另外，对于杂环烷基，杂原子可以占据杂环与分子其余部分连接的位置。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环烷基的实例包括但不限于四氢吡喃、1-(1,2,5,6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。杂环烷基的实例包括但不限于葡萄糖、甘露糖、阿洛糖、阿卓糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖和塔罗糖。杂环烷基的实例包括但不限于：
17.等。
18.除非另有说明，术语“卤代”或“卤素”本身或者作为另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。另外，诸如“卤代烷基”的术语旨在包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“卤代(c
1-c4)烷基”旨在包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基和类似物。
19.除非另有说明，术语“芳基”是指多不饱和的芳族烃取代基，其可以是稠合在一起
(即稠合的环芳基)或共价连接的单环或多环(优选1-3个环)。稠合的环芳基是指稠合在一起的多个环，其中至少一个稠合环是芳基环。
20.术语“杂芳基”是指包含选自n、o和s的一至四个杂原子的芳基(或环)，其中氮和硫原子任选被氧化，并且氮原子任选被季铵化。因此，术语“杂芳基”包括稠合的环杂芳基基团(即多个稠合在一起的环，其中稠合的环中的至少一个是杂芳族环)。5,6-稠合的环杂亚芳基是指稠合在一起的两个环，其中一个环具有5个成员，另一个环具有6个成员，并且其中至少一个环是杂芳基环。同样，6,6-稠合的环杂亚芳基是指稠合在一起的两个环，其中一个环具有6个成员，另一个环具有6个成员，并且其中至少一个环是杂芳基环。以及6,5-稠合的环杂亚芳基是指稠合在一起的两个环，其中一个环具有6个成员，另一个环具有5个成员，并且其中至少一个环是杂芳基环。杂芳基可以通过碳或杂原子连接到分子的其余部分。芳基和杂芳基的非限制性实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、三唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、吡嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、2-苯基-4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。每个上述芳基和杂芳基环系统的取代基选自下述可接受的取代基。
21.单独或作为另一取代基的一部分的“亚芳基”和“杂亚芳基”是指分别衍生自芳基和杂芳基的二价基团。
22.为简洁起见，术语“芳基”当与其他术语组合使用时(例如，芳氧基、芳基硫基、芳烷基)，包括如上定义的芳基和杂芳基环。因此，术语“芳烷基”是指包括其中芳基与烷基连接的那些基团(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，包括其中碳原子(例如亚甲基)已被例如氧原子取代的那些烷基(例如苯氧基甲基、2-吡啶氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)。
23.每个上述术语(例如，“烷基”、“杂烷基”、“芳基”和“杂芳基”)意在包括所示基团的取代和未取代形式。下面提供了每种基团的优选取代基。
24.如本文所用，术语“杂原子”或“环杂原子”指包括氧(o)、氮(n)、硫(s)、磷(p)和硅(si)。
25.可使用某些常用的替代化学名称。例如，二价基(如二价“烷基”、二价“芳基”等)也可以分别被称为“亚烷基(alkylene)”或“亚烷基(alkylenyl)”、“亚芳基(arylene)”或“亚芳基(arylenyl)”。另外，除非另有明确说明，在本文中将基团的组合称为一个基团(例如芳烷基)的情况下，最后述及的基团含有经由其连接到分子的其余部分的原子。
26.术语“任选的”或“任选地”表示随后所描述的事件或情形可能或可能不发生，并且该描述包括其中该事件或情形发生的情况及其中它不发生的情况。另外，术语“任选地被取代”是指在指定的原子或基团上的任何一个或多个氢原子可被除氢以外的基团所取代或者可以不被取代。
27.部分的这些化合物是以互变异构体的形式而存在。互变异构体彼此平衡。例如，含酰胺的化合物可以与亚胺酸(imidic acid)互变异构体平衡存在。不论显示哪种互变异构体，并且无论互变异构体之间的平衡性质如何，本领域普通技术人员都将所述化合物理解为既包含酰胺互变异构体，又包含亚胺酸互变异构体。因此，含酰胺的化合物应理解为包括
其亚胺酸互变异构体。同样地，含亚胺酸的化合物应被理解成包括它们的酰胺互变异构体。
28.本文中所给出的任何化学式或结构也意图代表这些化合物的未标记形式以及同位素标记形式。同位素标记的化合物具有由本文中所给出化学式所描绘的结构，除了一个或多个原子被具有所选择原子质量或质量数的原子所取代。可以并入本公开的化合物中的同位素的示例包括：氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限于：2h(氘，d)、3h(氚)、
11
c、
13
c、
14
c、
15
n、
18
f、
31
p、
32
p、
35
s、
36
cl、和
125
i。本公开的各种同位素标记化合物，是例如其中并入放射性同位素(如3h、
13
c和
14
c)的化合物。此类同位素标记的化合物可用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术，例如正电子发射断层扫描(pet)或单光子发射计算机断层扫描(spect)，包括药物或基质组织分布测定法或患者的放射性同位素治疗。
29.本公开还包括式i的化合物的“氘代类似物”，其中连接至碳原子的1至n个氢被氘取代，其中n是分子中的氢数。此类化合物表现出增加的抗代谢性，因此当施用于哺乳动物，特别是人时，可用于增加任何式i化合物的半衰期。参见，例如，foster，“deuterium isotope effects in studies of drug metabolism,”trends pharmacol.sci.5(12):524-527(1984)。此类化合物是利用本领域中所熟知的方法而合成，例如通过使用其中一个或多个氢已被氘取代的起始物。
30.本公开的氘标记或取代的治疗性化合物可以具有改善的dmpk(药物代谢和药代动力学)特性，其涉及分布、代谢和排泄(adme)。由于更高的代谢稳定性，例如更长的体内半衰期，减少的剂量需求和/或治疗指数的提高，用较重的同位素如氘取代可以提供某些治疗优势。
18
f标记的化合物可用于pet或spect研究。本公开的同位素标记化合物及其前体药物通常可以通过执行在下述的方案或者在下述的实施例和制备中所公开的过程而制备，其是通过用容易获得的同位素标记试剂代替非同位素标记试剂而制备。应当理解的是，在本上下文中，氘被认为是本文中所描述化合物中的取代基。
31.此类较重同位素(具体地是氘)的浓度可由同位素富集系数所定义。在本公开的化合物中，未特别指定为特定同位素的任何原子旨在表示该原子的任何稳定同位素。除非另有说明，当把一个位置具体地指定为“h”或“氢”时，该位置应理解成以其天然丰度同位素组成而含有氢。因此，在本公开的化合物中，任何特别指定为氘(d)的原子表示氘。
32.在许多情况下，由于存在氨基和/或羧基或与其类似的基团，本公开的化合物能够形成酸和/或碱式盐。
33.还提供本文所述化合物的药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、互变异构形式、多晶型物和前药。“药学上可接受的”或“生理学上可接受的”指代可用于制备适用于兽医或人药学用途的药物组合物的化合物、盐、组合物、剂型、和其它材料。
34.给定化合物的术语“药学上可接受的盐”是指保留给定化合物的生物学效力和性质并且在生物学上或其他方面不是不期望的盐。“药学上可接受的盐”或“生理上可接受的盐”包括例如与无机酸的盐和与有机酸的盐。另外，如果获得了呈酸加成盐形式的本文所述的化合物，则可以通过对所述酸盐的溶液进行碱化来获得游离碱。相反，如果产物是游离碱，则可以根据用于从碱性化合物制备酸加成盐的常规程序，通过将游离碱溶解在合适的有机溶剂中并用酸对所述溶液进行处理来制造加成盐，具体地药学上可接受的加成盐。本领域技术人员将承认可用于制备无毒的药学上可接受加成盐的各种合成方法。药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸制备。由无机酸得到的盐包括：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝
酸、磷酸等。由有机酸得到的盐包括：乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。同样地，药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱制备。衍生自无机碱的盐包含例如仅钠、钾、锂、铵、钙和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺的盐，例如烷基胺(即nh2(烷基))、二烷基胺(即hn(烷基)2)、三烷基胺(即n(烷基)3)，取代的烷基胺(即nh2(取代的烷基))，二(取代的烷基)胺(即hn(取代的烷基)2)，三(取代的烷基)胺(即n(取代的烷基)3)，烯基胺(即nh2(烯基))，二烯基胺(即hn(烯基)2)，三烯基胺(即n(烯基)3)，取代的烯基胺(即nh2(取代的烯基))，二(取代的烯基)胺(即hn(取代的烯基)2)，三(取代的烯基)胺(即n(取代的烯基)3，单、二或三环烷基胺(即nh2(环烷基)、hn(环烷基)2、n(环烷基)3)，单、二或三芳基胺(即nh2(芳基)、hn(芳基)2、n(芳基)3)，或混合的胺等。合适的胺的具体实例仅作为示例包括异丙胺、三甲基胺、二乙胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、哌嗪、哌啶、吗啉、n-乙基哌啶等。
35.术语“取代的”是指指定原子或基团上的任何一个或多个氢原子被氢以外的一个或多个取代基取代，条件是不超过指定原子的正常价。一个或多个取代基包括但不限于烷基、烯基、炔基、烷氧基、酰基、氨基、酰胺基、脒基、芳基、叠氮基、氨基甲酰基、羧基、羧基酯、氰基、胍基、卤基、卤代烷基、卤代烷氧基、杂烷基、杂芳基、杂环基、羟基、肼基、亚氨基、氧代、硝基、烷基亚磺酰基、磺酸、烷基磺酰基、硫氰酸酯、硫醇、硫酮或其组合。通过限定无限地附加有进一步取代基的取代基而获得的聚合物或类似的不确定结构(例如，具有取代烷基的取代芳基，取代烷基本身被取代的芳基取代，又被取代的杂烷基进一步取代，等等)不打算包含在本文中。除非另有说明，否则本文所述的化合物中系列取代的最大数量为三。例如，两种其它经取代的芳基对经取代的芳基的系列取代限于(经(经取代的芳基)取代的芳基)经取代的芳基。类似地，以上定义不旨在包含不允许的取代模式(例如，被5个氟取代的甲基或具有两个相邻氧环原子的杂芳基)。此类不允许的取代模式是技术人员众所周知的。当用于修饰化学基团时，术语“经取代的”可以描述本文定义的其它化学基团。除非另有说明，否则当基团描述为任选被取代时，该基团的任何取代基本身都是未取代的。例如，在一些实施方案中，术语“取代的烷基”是指具有一个或多个取代基的烷基，所述取代基包括羟基、卤素、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。在其他实施方案中，一个或多个取代基可以进一步被卤素、烷基、卤代烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基(它们的每一个被取代)取代。在其他实施方案中，取代基可以进一步被卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、羟基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基(它们的每一个未被取代)取代。
36.如本文所用，“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。此类介质和试剂用于药物活性物质的用途是本领域众所周知的。除非任何常规介质或药剂与活性成分不相容，否则设想了将其用于治疗性组合物中。补充性活性成分也可以掺入组合物中。
[0037]“溶剂合物”是通过溶剂与化合物的相互作用而形成。还提供了本文中所描述化合物的盐的溶剂合物。还提供了本文中所描述化合物的水合物。
[0038]
磷酸化tau蛋白
[0039]
神经系统疾病，包括神经退行性疾病和损伤相关疾病，与磷酸化tau蛋白的释放和/或积累有关。可通过接触如本文所述的化合物检测磷酸化的tau蛋白，其中所述接触在
被光激活后引起可检测信号的发射。通常，本文所述的组合物和方法可用于检测患者任何组织中的磷酸化tau蛋白。然而，磷酸化的tau蛋白可能会积聚在患者的视网膜中。如实验实例所示，可以用结合磷酸化tau蛋白的化合物检测视网膜中磷酸化tau蛋白的这种存在，然后可以通过诸如激光激活的视网膜荧光扫描的手段检测该结合。
[0040]“微管相关蛋白tau”、“mapt”、“tau蛋白”或“tau”是一类在组装和拆卸过程中使微管稳定的蛋白，被归类为微管相关蛋白(maps)。tau异形体序列包括：np_001116538.2、np_001116539.1、np_001190180.1、np_001190181.1、np_005901.2、np_058518.1、np_058519.3、和np_058525.1。tau蛋白在微管的稳定和组装中是重要的，并相应地影响运载货物的神经元内传输。tau也可能通过酸性n末端与肌动蛋白的相互作用而参与信号通路，从而从微管中突出以促进在神经发育期间的神经突生长和稳定。本文中所提供的tau蛋白可包括任何异形体或者异形体的任意组合。mapt转录物在神经系统中被不同地表达，这取决于神经元成熟的阶段和神经元类型。mapt基因突变已与多种神经病症有关，如阿尔茨海默氏病、皮克氏病、额颞痴呆、皮质基底变性、和进行性核上性麻痹。tau蛋白可以包含或可以不包含翻译后修饰。tau蛋白家族的特征是所有成员共享的n末端片段，在n端片段中所插入的～50个氨基酸的序列，该序列在大脑中受到发育调控，由31-32个氨基酸的3或4个串联重复组成的特征串联重复序列区域、及c端尾巴。
[0041]
人tau基因位于17号染色体的长臂上的位置17q21处。一般认为，该基因含有16个外显子，其中外显子21是启动子的一部分。tau初级转录物含有13个外显子，并且外显子4a、6和8在人中不被转录。外显子21和14被转录但不被翻译。外显子1、4、5、7、9、11、12、13是组成性的，并且或者外显子2、3和10被剪接，从而产生了六种不同的在六种不同tau异形体中被翻译的mrna。这些异形体的不同之处是氨基末端部分中不存在或存在一个或两个由外显子2和3所编码的29个氨基酸重复序列(0n、1n或2n)，或者三个微管结合重复序列(r1、r3和r4)或羧基末端部分的四个重复区域(r1-r4)。第四个微管结合域是由外显子10所编码。已知人脑组织中存在六种tau蛋白异形体：(2 3 10 )异形体(具有441个氨基酸)、(2 3 10-)异形体(具有410个氨基酸)、(2 3 10-)异形体(具有412个氨基酸)、(2 3-10-)异形体(具有381个氨基酸)、(2-3-10 )异形体(具有383个氨基酸)、和(2-3-10-)异形体(具有352个氨基酸)。该tau可以是突变tau。该突变可以是ftdp-17突变。突变的示例包括：g272v、n279k、n296、p201l、p301s、g303v、s305n、l315r、s320f、p332l、v337m、e342v、s352l、k369i、g389r、r5h、r5l、k257t、i260v、l266v、g272v、delk280、n296h、n296n、deln296、p301l、p301s、k317m、g335v、q336r、r406w、和r427m。
[0042]“磷酸化tau蛋白”或“磷酸化tau”是具有至少一个被磷酸基团修饰的氨基酸残基的tau蛋白。一般认为tau包括多达85个与磷酸化相容的氨基酸残基。通常，磷酸基是翻译后修饰，并且可以在氨基酸残基的侧链上结合。磷酸化氨基酸残基可以是例如丝氨酸(s)、苏氨酸(t)或酪氨酸(y)残基、或者其组合。磷酸化tau蛋白可包括每摩尔蛋白质1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、至少20、至少25、至少30、至少40或至少50摩尔的磷酸酯。磷酸化tau蛋白可包含每摩尔蛋白至少3摩尔的磷酸酯。磷酸化tau蛋白可以包括一个或多个磷酸化氨基酸残基，该残基是选自thr39、ser46pro、thr50pro、thr69pro、thr153pro、thr175pro、thr181pro、ser198、ser199、ser202pro、thr205pro、ser208、ser210、thr212pro、ser214、thr217pro、thr231pro、ser235pro、ser237、ser241、ser262、
ser285、ser305、ser324、ser352、ser356、ser396pro、ser400、thr403、ser404pro、ser409、ser412、ser413、ser416、和ser422pro。磷酸化tau蛋白可以包括磷酸化的ser422。如本文中提供的磷酸化tau蛋白可以是沉积的或可以是未沉积的。如本文中提供的磷酸化tau蛋白可以是可溶的。tau蛋白或磷酸化tau蛋白可以是三重复tau、四重复tau或其组合。在一些实施方案中，tau蛋白或磷酸化tau蛋白可包含三重复tau与四重复tau的混合物，其中四重复tau是更普遍的。在一些实施方案中，tau蛋白或磷酸化tau蛋白可包含三重复tau与四重复tau的混合物，其中三重复tau更加普遍。磷酸化tau蛋白可以是纤丝的，例如作为神经纤维缠结(nft)。nft可发现于神经元的树突状室中。
[0043]
因此，根据本公开的一些实施方案，提供了一种用于确定患者是否患有神经疾病或病症的方法。该方法需要通过使患者的组织与本文所述的化合物接触检测患者组织中磷酸化tau蛋白的存在。接触可以是体内或离体的接触。接触可以通过对患者施用，例如通过局部或静脉内施用。预期磷酸化tau蛋白的积累可能发生在眼睛的视网膜中。因此，检测可以针对视网膜中的磷酸化tau蛋白。
[0044]
在另一个实施方案中，提供了一种准备患者以便诊断神经疾病或病症的方法，该方法包括将与磷酸化tau蛋白特异性结合的化合物施用给患者。该化合物可以施用于患者的眼睛。一旦将化合物施用于患者，其与磷酸化tau蛋白的结合可以用任何方法检测，包括本文描述的那些方法，该结合表明磷酸化tau蛋白的积累，其是神经疾病或病症的一种指征。
[0045]
磷酸化tau结合化合物
[0046]
本公开进一步提供了能够结合磷酸化tau的化合物。在一个实施方案中，该化合物可以选自wo 2011/072257、wo 2015/143185或wo 2017/004560中描述的那些化合物，其通过引用整体并入本文。
[0047]
在一个实施方案中，化合物可以选自wo 2015/143185中描述的化合物，该化合物描述如下。
[0048]
在一些实施方案中，本公开提供式i的化合物或其盐或溶剂化物：
[0049][0050]
其中
[0051]
edg是给电子基团；
[0052]
每个ar独立地为c
1-c
14
亚芳基或c
1-c
14
杂亚芳基，每一个任选地被一个或多个r1取代；
[0053]
每个r1独立地为卤素、-or2、-nr3r4、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基；
[0054]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r5取代；
[0055]
r2、r3和r4独立地是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，除了氢外，它们中每一个任选地被一个或多个r5取代；
[0056]
每个r5独立地为卤素、-or6、-nr7r8、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基；
[0057]
r6、r7、r8和r
84
独立地为氢或c
1-c
10
烷基；
[0058]r84
为氢或c
1-c
10
烷基；
[0059]
ewg是吸电子基团；
[0060]
wsg是水溶性基团；
[0061]
x是c＝o或so2或x和r
84
结合形成吡啶基；
[0062]
y是nh或s；
[0063]
每个x独立地是0到10的整数；
[0064]
每个w独立地是1-5的整数；
[0065]
每个y独立地是0-10的整数；和
[0066]
z是1-10的整数。
[0067]
在一些实施方案中，本公开提供式ii的化合物或其盐或溶剂化物：
[0068][0069]
其中
[0070]
edg是给电子基团；
[0071]
ar2和每个ar1独立地为c
1-c
14
亚芳基或c
1-c
14
亚杂芳基；
[0072]
每个任选地被一个或多个r
41
取代；
[0073]
每个r
41
独立地为卤素、-cn、-or
42
、-nr
43r44
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基
[0074]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
45
取代；
[0075]r42
、r
43
和r
44
独立地为氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，除了氢以外它们每个任选地被一个或多个r
45
取代；
[0076]
每个r
45
独立地为卤素、-or
46
、-nr
47r48
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基、或c
1-c
10
杂亚芳基；和
[0077]r46
、r
47
和r
48
独立地为氢或c
1-c
10
烷基；
[0078]
ewg是吸电子基团；
[0079]
y为不存在、o、nh或s；
[0080]
wsg是氢或水溶性基团；
[0081]
x是0-10的整数；
[0082]
y是0-10之间的整数；和
[0083]
z是1-10的整数。
[0084]
在一些实施方案中，r
84
是氢。在一些实施方案中，r
84
是c
1-c
10
烷基。在一些实施方案中，r
84
为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、庚基或癸基。在一些实施方案中，r
84
是甲基。
[0085]
如本领域中已知的，取代基edg是电子供体基团。在一些实施方案中，edg是能够将其一些电子密度贡献给共轭π系统的任何原子或官能团，从而使π系统更具亲核性。
[0086]
在一些实施方案中，
[0087]
edg是-or9、-nr
10r11
、-sr
12
、-pr
13r14
、-nr
15
c(o)r
16
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0088]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
17
取代；
[0089]
每个r
17
独立地为卤素、-or
18
、-nr
19r20
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基、或c
1-c
10
杂亚芳基；
[0090]
r9、r
10
、r
11
、r
12
、r
13
、r
14
、r
15
、r
16
、r
18
、r
19
和r
20
的每一个独立地是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0091]
除了氢以外，它们的每个任选地被一个或多个r
21
取代，并且其中r
10
和r
11
任选地连接在一起以形成任选地被r
21
取代的杂环烷基或杂芳基；
[0092]
每个r
21
独立地为卤素、-or
22
、-nr
23r24
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基、或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0093]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
25
取代；
[0094]r22
、r
23
和r
24
的每一个独立地为氢或c
1-c
10
烷基；和
[0095]
每个r
25
独立地为c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基。
[0096]
在一些实施方案中，edg选自：
[0097][0098]
在一些实施方案中，edg是在一些实施方案中，edg是
[0099]
ewg是吸电子基团。在一些实施方案中，本文所用的吸电子基团是能够通过共振或感应效应将电子密度从相邻原子向自身吸取的任何原子或基团。
[0100]
在一些实施方案中，
[0101]
ewg选自卤素、-cn、-no2、-so3h、-cr
26r27r28
、-cor
29
或-coor
30
；
[0102]
每个r
26
、r
27
和r
28
独立地为氢或卤素；
[0103]r29
为卤素、氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0104]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
31
取代；
[0105]r30
是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0106]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
32
取代；和
[0107]
每个r
31
和r
32
独立地为c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基。
[0108]
在一些实施方案中，ewg选自-f、-cl、-br、-ch＝o、no2、-cf3、-ccl3、-so3和-cn。在一些实施方案中，ewg为f、cl或br。在一些实施方案中，ewg是-cn。
[0109]
wsg是水溶性基团。在一些实施方案中，wsg基团用于改变化合物在水性体系中的溶解度。
[0110]
在一些实施方案中，
[0111]
wsg是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0112]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
33
取代；
[0113]
其中每个r
33
独立地为卤素、-or
34
、-nr
35r36
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0114]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
37
取代；
[0115]
每个r
34
、r
35
和r
36
独立地为氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，
[0116]
其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
37
取代；
[0117]
每个r
37
独立地为卤素、-or
38
、-nr
39r40
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、-(c
1-c6烷基)(c
1-c
10
杂亚环烷基)、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基；和
[0118]r38
、r
39
和r
40
的每一个独立地为氢或c
1-c
10
烷基。
[0119]
在一些实施方案中，wsg是
[0120]
在一些实施方案中，wsg是聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物或其烷氧基衍生物。
[0121]
在一些实施方案中，wsg是其中n是1-50的整数，r
81
是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烯基或c
1-c
10
炔基，其中每个烷基、烯基或炔基任选地被一个或多个c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基取代。在一些实施方案中，r
81
是氢。在一些实施方案中，r
81
是甲基。在一些实施方案中，r
81
是乙基。在一些实施方案中，r
81
是-ch
2-c≡ch。在一些实施方案中，n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22，23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47，48、49或50。在一些实施方案中，n是值2-10、1-10、1-20、1-30、1-40、1-50、10-20、10-30、10-40、10-50、20-30、20-40、20-50、30-40、30-50或40-50的整数。在一些实施方案中，n为1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n为3或6。
[0122]
在一些实施方案中，wsg是
[0123]
在一些实施方案中，wsg是
[0124]
在一些实施方案中，wsg是
[0125]
其中每个r
82
独立地为氢或c
1-c
10
烷基。
[0126]
在一些实施方案中，每个r
82
独立地为氢、甲基、乙基、丙基或丁基。
[0127]
在一些实施方案中，wsg是
[0128][0129]
在一些实施方案中，wsg是
[0130][0131]
在一些实施方案中，wsg是
[0132]
其中每个r
83
为氢或c
1-c
10
烷基。在一些实施方案中，每个r
83
独立地为氢、甲基、乙基、丙基或丁基。
[0133]
在一些实施方案中，wsg是
[0134][0135]
在一些实施方案中，wsg是
[0136][0137]
在一些实施方案中，wsg是-(c
1-c
10
亚烷基)-r
33-r
37
。在一些实施方案中，wsg为-(c
1-c
10
亚烷基)-r
33-r
37
且r
33
为c
1-c
10
杂亚芳基。在一些实施方案中，wsg为-(c
1-c
10
烷基)-r
33-r
37
，r
33
为c
1-c
10
杂亚芳基，且r
37
为-(c
1-c6烷基)(c
1-c
10)
环烷基)。在一些实施方案中，wsg是
–
ch
2-r
33-r
37
。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
且r
33
为三唑、咪唑或吡唑。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
且r
33
为三唑。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
且r
33
为1,2,4-三唑。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
且r
33
为1,2,3-三唑。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
，r
33
为1,2,3-三唑，且r
37
为-(c
1-c6烷基)(c
1-c
10
为杂环烷基)。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
，r
33
为1,2,3-三唑，且r
37
为-(c1烷基)(c
1-c
10
杂环烷基)。在一些实施方案中，wsg为
–
ch
2-r
33-r
37
，r
33
为1,2,3-三唑，r
37
为-(c1烷基)(c
1-c
10
杂环烷基)，和c
1-c
10
杂环烷基是四氢吡喃衍生物。
[0138]
在一些实施方案中，wsg是其中每个r
87
为氢、c
1-c
10
烷基或-c(＝o)c
1-c
10
烷基。在一些实施方案中，每个r
87
独立地为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、乙酸根、丙酸根或丁酸根。在一些实施方案中，每个r
87
独立地为氢或甲基。在一些实施方案中，每个r
87
独立地为甲基或乙酸根。
[0139]
在一些实施方案中，wsg是
[0140]
在一些实施方案中，wsg是
[0141]
在一些实施方案中，wsg是
–
(c
1-c
10
杂烷基)-r
33-r
37
。在一些实施方案中，wsg为
–
(c
1-c
10
杂烷基)-r
33-r
37
且r
33
为c
1-c
10
杂亚芳基。在一些实施方案中，wsg为
–
(c
1-c
10
杂烷基)-r
33-r
37
且r
33
为c
1-c
10
杂亚芳基，且r
37
为-(c
1-c6烷基)(c
1-c
10
杂环烷基)。
[0142]
在一些实施方案中，wsg为和p为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22，23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47，48、49或50。在一些实施方案中，p是值2-10、1-10、1-20、1-30、1-40、1-50、10-20、10-30、10-40、10-50、20-30、20-40、20-50、30-40、30-50或40-50的整数。在一些实施方案中，p是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，p是3或6。在一些实施方案中，p 3。
[0143]
在一些实施方案中，wsg是且r
33
为c
1-c
10
杂亚芳基。在一些实施方案中，r
33
是c5杂芳基。在一些实施方案中，r
33
为三唑、咪唑或吡唑。在一些实施方案中，r
33
为三唑。在一些实施方案中，r
33
为1,2,4-三唑。在一些实施方案中，r
33
为1,2,3-三唑。在一些实施方案中，r
33
为1,2,3-三唑，并且p为3。在一些实施方案中，r
33
为1,2,3-三唑，且r
37
为-(c
1-c6烷基)(c
1-c
10
杂环烷基)。在一些实施方案中，r
33
为1,2,3-三唑，且r
37
为-(c1烷基)(c
1-c
10
杂环烷基)。在一些实施方案中，r
33
为1,2,3-三唑，r
37
为四氢吡喃衍生物。在一些实施方
案中，r
33
为1,2,3-三唑，且r
37
为
[0144]
在一些实施方案中，wsg是r
33
为1,2,3-三唑，r
37
为p是3。
[0145]
在一些实施方案中，wsg是其中每个r
87
为氢、c
1-c
10
烷基或-c(＝o)c
1-c
10
烷基。在一些实施方案中，每个r
87
独立地为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、乙酸根、丙酸根或丁酸根。在一些实施方案中，每个r
87
独立地为氢或甲基。在一些实施方案中，每个r
87
独立地为甲基或乙酸根。
[0146]
在一些实施方案中，wsg是
[0147]
在一些实施方案中，wsg是
[0148]
在一些实施方案中，x为c＝o或so2。在一些实施方案中，x是c＝o。在一些实施方案中，x是so2。
[0149]
在一些实施方案中，y是nh或s。在一些实施方案中，y是nh。在一些实施方案中，y是s。
[0150]
式i中的变量w是1-5的整数。在一些实施方案中，w为1。在一些实施方案中，w为2。在一些实施方案中，w为3。在一些实施方案中，w为4。在一些实施方案中，w为5。
[0151]
式i中的变量x是0-10的整数。在一些实施方案中，x为0。在一些实施方案中，x为1。在一些实施方案中，x为2。在一些实施方案中，x为3。在一些实施方案中，x为4。在一些实施方案中，x为5。在一些实施方案中，x为6。在一些实施方案中，x为7。在一些实施方案中，x为8。在一些实施方案中，x为9。在一些实施方案中，x为10。
[0152]
式i中的变量y是0-10的整数。在一些实施方案中，y为0。在一些实施方案中，y为1。在一些实施方案中，y为2。在一些实施方案中，y为3。在一些实施方案中，y为4。在一些实施方案中，y为5。在一些实施方案中，y为6。在一些实施方案中，y为7。在一些实施方案中，y为8。在一些实施方案中，y为9。在一些实施方案中，y为10。
[0153]
式i中的变量z是1-10的整数。在一些实施方案中，z为1。在一些实施方案中，z为2。在一些实施方案中，z为3。在一些实施方案中，z为4。在一些实施方案中，z为5。在一些实施方案中，z为6。在一些实施方案中，z为7。在一些实施方案中，z为8。在一些实施方案中，z为9。在一些实施方案中，z为10。
[0154]
在一些实施方案中，x为0，w为1，y为0，z为1，x为c＝o，且y为nh。
[0155]
在一些实施方案中，x为0，w为1，y为0，z为1，x为so2，且y为nh。
[0156]
在一些实施方案中，x为0，w为2，y为0，z为1，x为c＝o，且y为nh。
[0157]
在一些实施方案中，x为0，w为2，y为0，z为1，x为so2，且y为nh。
[0158]
在一些实施方案中，本公开提供式ia的化合物或其盐或溶剂化物：其中edg、ar、r
84
、x、w、y、z、ewg和wsg如上所述定义。
[0159]
在一些实施方案中，本公开提供式ib的化合物或其盐或溶剂化物：其中edg、ar、r
84
、x、w、y、z、ewg和wsg如上所述定义。
[0160]
在一些实施方案中，本公开提供式ic的化合物或其盐或溶剂化物：其中edg、ar、r
84
、x、y、ewg和wsg如上所述定义。
[0161]
在一些实施方案中，本公开提供式ic的化合物或其盐或溶剂化物：
[0162][0163]
其中
[0164]
edg为：
[0165]
a)不超过10个碳的杂环烷基，其任选地被一个或多个r
17
取代；或
[0166]
b)-nr
10r11
；
[0167]
其中每个r
17
独立地为卤素、-or
18
、-nr
19r20
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基；
[0168]r10
、r
11
、r
18
、r
19
和r
20
的每一个独立地是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基，除了氢外，它们中每一个任选地被一个或多个r
21
取代；
[0169]r21
的每一个独立地为卤素、-or
22
、-nr
23r24
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基，其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
25
取代；
[0170]r22
、r
23
和r
24
的每一个独立地为氢或c
1-c
10
烷基；和
[0171]
每个r
25
独立地为c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基；
[0172]
ar是不超过14个碳原子的亚芳基或不超过14个碳原子的杂亚芳基，各自任选地被一个或多个r1取代；
[0173]
r1的每一个独立地为卤素、-or2、-nr3r4、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基，其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r5取代；
[0174]
r2、r3和r4独立地是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基，除了氢外，它们中每一个任选地被一个或多个r5取代；
[0175]
每个r5独立地为卤素、-or6、-nr7r8、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基、或不超过10个碳的杂亚芳基；
[0176]
r6、r7、r8和r
84
独立地为氢或c
1-c
10
烷基；
[0177]
ewg选自-f、-cl、-br、-ch＝o、no2、-cf3、-ccl3、-so3h和-cn；
[0178]
wsg是：
[0179]
i)
[0180][0181]
ii)聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物或其烷氧基衍生物；
[0182]
iii)
[0183][0184]
其中n是1-50的整数并且r
81
是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
烯基或c
1-c
10
炔基，其中烷基、烯基或炔基任选被一个或多个c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、不超过10个碳的环烷基、不超过10个碳的杂环烷基、不超过10个碳的亚芳基或不超过10个碳的杂亚芳基取代；
[0185]
iv)
[0186][0187]
v)
[0188][0189]
vi)
[0190]-(c
1-c
10
烷基)-r
33-r
37
，其中：
[0191]r33
为不超过10个碳的杂亚芳基；和
[0192]r37
为-(c
1-c6烷基)(不超过10个碳的杂环烷基)；
[0193]
vii)
[0194][0195]
viii)
[0196]
–
(c
1-c
10
杂烷基)-r
33-r
37
，其中：
[0197]r33
为不超过10个碳的杂亚芳基；和
[0198]r37
为-(c
1-c6烷基)(不超过10个碳的杂环烷基)；或
[0199]
ix)
[0200][0201]
x是c＝o或so2或x和r
84
结合形成吡啶基；
[0202]
y是nh或s。
[0203]
在一些实施方案中，本公开提供了式id的化合物或其盐或溶剂化物：其中edg、r
84
、ar、ewg和wsg如上定义。在一些实施方案中，本公开提供了式ie的化合物或其盐或溶剂化物：其中edg、r
84
、ar、ewg和wsg如上定义。在一些实施方案中，该化合物选自：
[0204]
[0205][0205]
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0206]
在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0207]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0208]
[0209][0210]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0211][0211][0212]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0213]
[0214]
其中p是值为1-50的整数。在一些实施方案中，p是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，p是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0215]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0216]
在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0217]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0218]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
[0219]
[0220]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
[0221]
[0222]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
[0223]
[0224]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0225][0225]
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0226]
在一些实施方案中，该化合物选自：
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0227]
在一些实施方案中，该化合物选自：
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0228]
在一些实施方案中，该化合物选自：
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0229]
在一些实施方案中，该化合物选自：
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0230]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
其中n是值为1-50的整数。在一些实施方案中，n是值1-10的整数，例如n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些实施方案中，n是值2-10的整数，例如n是2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0231]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0232]
[0233]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0234][0235]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0236]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0237]
[0238]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0239]
[0240]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0241][0242]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0243][0244]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0245][0246]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0247][0248]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0249][0250]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0251][0252]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0253][0254]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0255][0256]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
[0257]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0258][0258]
[0259]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0260][0261]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0262][0263]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0264]
[0265]
在一些实施方案中，所述化合物是：
[0266][0267]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，化合物是(z)-2-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺。
[0268]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0269][0270]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-1-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)乙烯磺酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-1-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)乙烯磺酰胺。
[0271]
在一些实施方案中，所述化合物是：
[0272][0273]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺。
[0274]
在一些实施方案中，所述化合物是：
[0275][0276]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-1-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)乙烯磺酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-1-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)乙烯磺酰胺。
[0277]
在一些实施方案中，所述化合物是：
[0278][0279]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺。
[0280]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0281][0282]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-1-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)乙烯磺酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-1-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)乙烯磺酰胺。
[0283]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0284][0285]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丁-2-烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丁-2-烯酰胺。
[0286]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0287][0288]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-1-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧
基)乙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙-1-烯-1-磺酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-1-氰基-n-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙-1-烯-1-磺酰胺。
[0289]
在一些实施方案中，所述化合物是：
[0290][0291]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丁-2-烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丁-2-烯酰胺。
[0292]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0293][0294]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-1-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙-1-烯-1-磺酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-1-氰基-n-(2,5,8,11,14,17-六氧杂十九烷-19-基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙-1-烯-1-磺酰胺。
[0295]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0296][0297]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丁-2-烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丁-2-烯酰胺。
[0298]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0299][0300]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-1-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙-1-烯-1-磺酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-1-氰基-n-(2,3-二羟丙基)-2-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙-1-烯-1-磺酰胺。
[0301]
在一些实施方案中，所述化合物是：
[0302][0303]
在一些实施方案中，所述化合物为(r,e)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-((3,4,5,6-四羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(r,z)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-((3,4,5,6-四羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)丙烯酰胺。
[0304]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0305][0306]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-(((2r,3s,4s,5r)-3,4,5,6-四羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-(((2r,3s,4s,5r)-3,4,5,6-四羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)丙烯酰胺。
[0307]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0308][0309]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-(2,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-3-基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-(2,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-3-基)丙烯酰胺。
[0310]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0311][0312]
在一些实施方案中，所述化合物为(e)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-((3r,4r,5s,6r)-2,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-3-基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-((3r,4r,5s,6r)-2,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-3-基)丙烯酰胺。
[0313]
在一些实施方案中，所述化合物为：
(2-(2-(2-((1-(((2r,3s,4s,5r,6s)-3,4,5-三羟基-6-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)丙烯酰胺。在一些实施方案中，所述化合物为(z)-2-氰基-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)-n-(2-(2-(2-((1-(((2r,3s,4s,5r,6s)-3,4,5-三羟基-6-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)丙烯酰胺。
[0325]
在一些实施方案中，化合物是
[0326]
在一些实施方案中，该化合物是化合物23的药学上可接受的盐或溶剂化物。
[0327]
在一些实施方案中，化合物是
[0328]
在一些实施方案中，该化合物是化合物24的药学上可接受的盐或溶剂化物。
[0329]
在一些实施方案中，化合物是
[0330][0331]
在一些实施方案中，化合物是
[0332][0333]
在一些实施方案中，化合物是
[0334]
[0335]
在一些实施方案中，每个ar1独立地为取代或未取代的亚萘基或取代或未取代的亚苯基。在一些实施方案中，ar2是取代或未取代的亚萘基或取代或未取代的亚苯基。在一些实施方案中，ar2是取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的吡嗪基或取代或未取代的哒嗪基。在一些实施方案中，ar2是取代或未取代的吡啶基。
[0336]
在一些实施方案中，式ii中的取代基edg可以是给电子基团。在一些实施方案中，edg是本领域已知的任何给电子基团。在一些实施方案中，任何原子或官能团都能够通过共振或感应电子撤离将其一些电子密度提供给共轭pi系统，从而使pi系统更具亲核性。在一些实施方案中，edg是-or
49
、-nr
50r51
、-sr
52
、-pr
53r54
、-nr
55
c(o)r
56
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
57
取代；其中每个r
57
独立地为卤素、-or
58
、-nr
59r60
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基、或c
1-c
10
杂亚芳基；r
49
、r
50
、r
51
、r
52
、r
53
、r
54
、r
55
、r
56
、r
58
、r
59
和r
60
的每一个独立地是氢、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基，除了氢以外，它们的每个任选地被一个或多个r
61
取代，并且其中r
50
和r
51
任选地连接在一起以形成任选地被r
61
取代的杂环烷基或杂芳基；每个r
61
独立地为卤素、-or
62
、-nr
63r64
、c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基、或c
1-c
10
杂亚芳基，其中烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、亚芳基或杂亚芳基任选地被一个或多个r
65
取代；r
62
、r
63
和r
64
的每一个独立地为氢或c
1-c
10
烷基；和每个r
65
独立地为c
1-c
10
烷基、c
1-c
10
杂烷基、c
1-c
10
环烷基、c
1-c
10
杂环烷基、c
1-c
10
亚芳基或c
1-c
10
杂亚芳基。
[0337]
在一些实施方案中，y为不存在、o、nh或s。在一些实施方案中，y不存在(即y是一个键)。在一些实施方案中，y是o。在一些实施方案中，y是nh。在一些实施方案中，y是s。
[0338]
式ii中的变量x是0-10的整数。在一些实施方案中，x是0。在一些实施方案中，x是1。在一些实施方案中，x是2。在一些实施方案中，x是3。在一些实施方案中，x是4。在一些实施方案中，x是5。在一些实施方案中，x是6。在一些实施方案中，x是7。在一些实施方案中，x是8。在一些实施方案中，x是9。在一些实施方案中，x是10。
[0339]
式ii中的变量y是0-10的整数。在一些实施方案中，y为0。在一些实施方案中，y为1。在一些实施方案中，y为2。在一些实施方案中，y为3。在一些实施方案中，y为4。在一些实施方案中，y为5。在一些实施方案中，y为6。在一些实施方案中，y为7。在一些实施方案中，y为8。在一些实施方案中，y为9。在一些实施方案中，y为10。
[0340]
式ii中的变量z是1-10的整数。在一些实施方案中，z为1。在一些实施方案中，z为2。在一些实施方案中，z为3。在一些实施方案中，z为4。在一些实施方案中，z为5。在一些实施方案中，z为6。在一些实施方案中，z为7。在一些实施方案中，z为8。在一些实施方案中，z为9。在一些实施方案中，z为10。
[0341]
在一些实施方案中，x为0，y为0，z为1，且y为o。
[0342]
在一些实施方案中，x为0，y为0，z为1，且y为s。
[0343]
在一些实施方案中，x为0，y为0，z为1，且y为nh。
[0344]
在一些实施方案中，x是0，y是0，z是1，并且y不存在。
[0345]
在一些实施方案中，x为0，y为0，z为2，且y为o。
[0346]
在一些实施方案中，x为0，y为0，z为2，且y为s。
[0347]
在一些实施方案中，x为0，y为0，z为2，且y为nh。
[0348]
在一些实施方案中，x是0，y是0，z是2，并且y不存在。
[0349]
一方面，本公开提供式iia的化合物：其中edg、ar1、ar2、y、ewg和wsg的定义如上式ii。
[0350]
一方面，本公开提供式iib的化合物：其中edg、ar1、ar2、y、ewg和wsg的定义如上式ii。
[0351]
在一些实施方案中，根据式ii的化合物选自：
[0352]
其中n是值为0-50的整数。在一些实施方案中，n是值为0-10的整数，例如n为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0353]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0354]
[0355]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
[0356][0356]
其中r
85
为h或cn。
[0357]
在一些实施方案中，该化合物选自：在一些实施方案中，该化合物选自：
其中r
85
为h或cn，r
86
为其中n是值为0-50的整数。在一些实施方案中，n是值0-10的整数，例如，n是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0358]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0359][0360]
其中r
85
为h或cn且r
86
为h。
[0361]
在一些实施方案中，该化合物选自：
[0362][0363]
其中r
85
为h或cn且r
86
为其中n是值为0-50的整数。在一些实施方案中，n是值0-10的整数，例如，n是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。
[0364]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0365][0366]
在一些实施方案中，该化合物是2-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-4-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)烟腈。
[0367]
在一些实施方案中，所述化合物为：
[0368][0369]
在一些实施方案中，所述化合物为4-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)烟腈。
[0370]
在一些实施方案中，所述化合物选自以下：
[0371]
[0372]
[0373]
或其盐或溶剂化物。
[0374]
神经疾病和疾病及其治疗
[0375]
本文提供了确定患者是否患有神经疾病或病症的方法，其包括检测患者的组织中磷酸化tau蛋白的存在，其中该检测包括使磷酸化tau蛋白与本文中所描述的化合物接触。该化合物可以是式i、ii、ia、ib、ic、id或ie的化合物。在一些实施方案中，所述化合物是式ic化合物。在一些实施方案中，所述化合物是化合物1、2、3、4或5。接触可以是体内接触。该组织可以是眼组织。在一些实施方案中，神经疾病或病症是选自年龄相关的疾病或病症、遗传疾病或病症、与损伤有关的疾病或病症、及精神疾病或病症。在一些实施方案中，与年龄相关的疾病或病症选自帕金森氏痴呆、血管性痴呆和肌萎缩性脊髓侧索硬化症，其中遗传疾病或病症是唐氏综合症，其中与损伤相关的疾病或病症选自创伤性脑损伤和慢性创伤性脑病，并且其中精神疾病或病症选自精神分裂症和抑郁症。神经疾病或病症可以是tau蛋白病。在一些实施方案中，神经疾病或病症是阿尔茨海默病或慢性创伤性脑病(cte)。
[0376]
神经疾病或病症可以是tau蛋白病。颅脑病是与人脑神经原纤维或胶质原纤维缠结中tau蛋白的病理性沉积有关的一类神经疾病。缠结可通过tau的过度磷酸化而形成，从而导致tau蛋白从微管中解离并形成不溶形式的沉积体。高磷酸化tau蛋白的沉积体也可被
称为配对螺旋样纤维。缠结形成的确切机制尚不完全明了，并且关于缠结是该病的主要致病因素还是发挥更大的外围作用仍是有争议的。已经在许多神经疾病中发现了tau蛋白病，如创伤后变性、感染、代谢疾病和运动神经元变性。在各种神经疾病中，tau蛋白的空间分布、暂时表观观和结构变化有不同的表现。ad患者具有扭曲的、高磷酸化和非周期性的tau单丝，而患有进行性超核麻痹和额颞痴呆(ftd)的患者往往仅有直的tau单丝。tau的蛋白病常常与共核蛋白病重叠，这可能是由于突触核蛋白与tau蛋白之间的相互作用。非阿尔茨海默氏病有时与“匹克氏综合症”共同地分成一组，这是由于它们与额颞叶痴呆或额颞叶变性相关。tau过度磷酸化的标志是tau ps422。慢性外伤性脑病(cte)与反复性轻度外伤性脑损伤(mtbi)相关，并且与taopathies有许多相似之处，包括tau蛋白的过度磷酸化和沉积，例如神经原纤维缠结(nfts)。
[0377]
神经元疾病或病症可以是神经退行性疾病或病症。在一些实施方案中，神经疾病或病症是阿尔茨海默氏病。ad被认为是继发性tau蛋白病。阿尔茨海默氏病的特征是在疾病的早期阶段失忆的症状。神经原纤维缠结是阿尔茨海默氏病的早期描述。当tau变得被过度磷酸化时，蛋白质会从轴突的微管中分离。然后，tau会变得错误折叠并开始沉积，这可能会形成神经原纤维缠结(nft)。当tau被分离时微管也不稳定，并且神经原纤维缠结和不稳定的微管的组合导致诸如轴突运输和神经沟通的过程的破坏。nft参与阿尔茨海默氏病的程度是由braak阶段所限定。当nft受累主要局限于大脑的跨肠区时，使用braak i和ii期。当涉及海马等边缘区域时进入iii和iv期；当表明广泛参与新皮层时，进入v和vi期由于存在老年斑，阿尔茨海默氏病也被分类为淀粉样变性病。另外，某些apoε4载体患上阿尔茨海默氏病的风险更大。一般认为apoε4在清除aε方面不如其它同种型有效，并因此会与更大的淀粉样负荷、tau磷酸化、突触毒性和突触密度降低相关。已经历创伤性脑损伤(tbi)是患上ad的另一风险因素，并且研究表明，经历tbi的那些患ad的风险显著增加。
[0378]
随着疾病进展，症状包括意识错乱、长期失忆、错语、词汇丢失、攻击性、易怒和/或情绪波动。在疾病的更晚期阶段，存在身体功能的丧失。患有阿尔茨海默氏病(ad)的患者表现出许多特征性神经病，如氧化应激增加、线粒体功能障碍、突触功能障碍、钙稳态破坏、老年斑和神经原纤维缠结的沉积以及脑萎缩。ad相关的病症包括：ad型老年性痴呆(sdat)、额颞叶痴呆(ftd)、血管性痴呆、轻度认知受损(mci)和年龄相关联的记忆受损(aami)。在一些实施方案中，确定患者是否患有阿尔茨海默氏病包括检测患者的组织中磷酸化tau蛋白的存在，其中该检测包括使磷酸化tau蛋白与本文中所描述的化合物接触。
[0379]
在一些实施方案中，神经疾病或病症是额颞叶变性(ftld)(例如，ftld-tau、ftld-tdp或ftld-fus)。在一些实施方案中，神经疾病或病症是额颞叶痴呆。在一些实施方案中，神经疾病或病症包括记忆丧失。在一些实施方案中，神经疾病或病症是年龄相关的记忆丧失。在一些实施方案中，神经疾病或病症是a型ftld-tdp。在一些实施方案中，神经疾病或病症是b型ftld-tdp。在一些实施方案中，神经疾病或病症是c型ftld-tdp。在一些实施方案中，神经疾病或病症是d型ftld-tdp。
[0380]
在一些实施方案中，神经疾病或病症是帕金森氏病。在一些实施方案中，神经疾病或病症是帕金森氏痴呆。在一些实施方案中，所述神经疾病或病症与淀粉样斑块的累积有关(例如，以其为特征)。在一些实施方案中，患有神经疾病或病症的患者在神经元疾病发作之前、期间或之后已遭受创伤性脑损伤。在一些实施方案中，神经疾病或病症包括神经元损
伤。神经元受损可包括萎缩或者神经元的有效功能的其它降低。例如，已知阿尔茨海默氏病表现为神经元受损，尤其是皮质神经元，例如海马神经元和靠近海马的神经元受损。
[0381]
在一些实施方案中，神经疾病或病症是创伤性轴索损伤(tai)、创伤性脑病(tbd)、痴呆症(例如普通痴呆症)、额叶痴呆、伴有与17号染色体相关的帕金森氏症(ftdp-17)、原发性年龄相关tau蛋白病(part)、神经纤维缠结为主的老年性痴呆、进行性核上性麻痹(psp)、皮质基底变性、lytico-bodig病(关岛的parkinson-痴呆复合体)、神经节胶质瘤、神经节细胞瘤、脑膜血管瘤病、脑脊髓炎、脑脊髓灰质炎、脑脊髓炎、结节性硬化症、泛酸激酶相关的神经变性、脂褐质沉积症、皮克氏病、皮质基底变性、嗜银粒病(agd)或皮质基底变性。
[0382]
神经疾病或障碍可以是与损伤相关的疾病，例如脑外伤(tbi)或慢性创伤性脑病变(cte)。创伤性脑损伤(tbi)是一种慢性疾病，定义为由外力引起的对大脑的损害，外力例如撞击、打击、颠簸、快速加速或减速、或者弹丸穿透。导致tbi的损伤可导致意识减弱或改变的状态，从而导致认知、感觉运动和社会心理功能的暂时或永久性损害。cte是进行性变性疾病，在患有反复性脑外伤的人中发现，包括不导致tbi症状的头部撞击。cte的物理方面包括：大脑萎缩，额叶和颞叶的萎缩，脑室扩大、海马、丘脑、脑干和小脑的萎缩。患有cte的个体可能有痴呆，记忆力减退，攻击性，意识错乱，沮丧和自杀意识的症状，这些症状可能在受伤多年后发生。
[0383]
神经疾病或病症可以是眼睛的，例如青光眼、高眼压、黄斑变性、糖尿病性视网膜病、年龄相关性黄斑变性(amd)或色素性视网膜炎。
[0384]
可以用本文中所描述的化合物或方法治疗的神经元疾病的示例包括：亚历山大氏病(alexander's disease)、阿尔珀斯病(alper's disease)、阿尔茨海默氏病、抑郁症、围产期窒息、帕金森氏病痴呆(“pd痴呆”)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、共济失调性毛细血管扩张症、貝登氏病(batten disease)(也被称为spielmeyer-vogt-sjogren-貝登氏病)、海绵状脑病(例如牛海绵状脑病(疯牛病)、库鲁病(kuru disease)、克罗伊茨费尔特-雅各布病(creutzfeldt-jakob disease)、致命性家族失眠、canavan病、科克因综合征(cockayne syndrome)、皮质基底节变性、脆性x综合征、额颞叶痴呆、格斯特曼
–
斯特劳斯勒
–
申克综合征(gerstmann-straussler-scheinker syndrome)、亨廷顿病(huntington's disease)、hiv相关痴呆、肯尼迪病(kennedy'sdisease)、克拉伯氏病(krabbe's disease)，路易体痴呆(lewy body dementia)、马查多-约瑟夫病(machado-joseph disease)(脊髓小脑性共济失调3型)、多发性硬化症、多系统萎缩、发作性睡病、神经疏螺旋体病、帕金森氏病、比利牛斯-默兹巴赫病(pelizaeus-merzbacher disease)、皮克氏病(pick'sdisease)、原发性侧索硬化症、朊病毒病、雷夫苏姆氏病(refsum's disease)、山德霍夫氏病(sandhoff's disease)、希尔德氏病(schilder's disease)、继发于恶性贫血的脊髓亚急性合并变性、精神分裂症、脊髓小脑性共济失调(具有不同特性的多种类型)、脊髓性肌萎缩、steele-richardson-olszewski病、tabes dorsalis、药物诱发的帕金森征、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、多系统萎缩、特发性帕金森氏病、常染色体显性帕金森病、家族性1型(park1)、帕金森病3、常染色体显性路易体(park3)、帕金森病4、常染色体显性路易体(park4)、帕金森病5(park5)、帕金森病6、常染色体隐性遗传性早发性(park6)、帕金森病2、常染色体隐性遗传性幼年(park2)、帕金森病7、常染色体隐性遗传性早发性(park7)、帕金
森病8(park8)、帕金森病9(park9)、帕金森病10(park10)、帕金森病11(park11)、帕金森病12(park12)、帕金森疾病13(park13)、和线粒体帕金森氏病。
[0385]
在对患者中的神经疾病或病症进行判定后，可以提供某些程序来治疗或改善神经疾病或病症的症状，或者减缓或阻止其进展。一旦诊断出神经疾病或病症，也可以利用本文中所描述的方法监测疾病的进展。一旦被诊断，主治医师还可以建议如本文中所描述的其它治疗。
[0386]“处理”或“治疗”是获得有益或期望结果(包括临床结果)的方法。有益的或期望的临床结果可以包括以下一项或多项：a)抑制疾病或病症(例如，减少由疾病或病症引起的一种或多种症状，和/或减少疾病或病症的程度)；b)改善、减缓或阻止与疾病或病症相关的一种或多种临床症状的发展(例如，稳定疾病或病症，预防或延缓疾病或病症的恶化或进展和/或预防或延迟疾病或病症的扩散(例如转移)；和/或c)缓解疾病，即引起临床症状消退(例如，改善疾病状态，部分或全部缓解疾病或病症，增强另一种药物的疗效，延缓疾病的进展，提高生活质量和/或延长生存期。
[0387]“预防(prevention)或预防(preventing)”是指导致疾病或病症的临床症状不发展的任何疾病或病症的治疗。在一些实施方案中，可以将化合物施用于有疾病或病状的风险或具有疾病或病状的家族史的受试者(包括人)。
[0388]“患者”是指已经或将成为治疗、观察或实验对象的动物，例如哺乳动物(包括人)。本文所述的方法可用于人类治疗和/或兽医应用。在一些实施方案中，患者是哺乳动物。在一个实施方案中，患者是人。
[0389]
术语“治疗有效量”或“有效量”的本文所述化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体、立体异构体的混合物、前药或其氘代类似物是指当施用于患者时足以进行治疗、提供治疗益处例如症状改善或疾病进展减慢的量。例如，治疗有效量可以是足以减轻神经疾病或病症的疾病或病况的症状的量。治疗有效量可以根据受试者和所治疗的疾病或病状、受试者的体重和年龄、疾病或病状的严重度以及施用方式而变化，所述治疗有销量可以由本领域的普通技术人员容易地判定。
[0390]
本文描述的方法可以应用于体内或离体的细胞群体。“体内”是指在活的个体中，例如在动物或人类中。在本文中，本文所述的方法可以在个体中治疗性地使用。“离体”是指在活的个体之外。离体细胞群的例子包括体外细胞培养物和生物样品，其包括从个体获得的液体或组织样品。这样的样品可以通过本领域众所周知的方法获得。示例性生物流体样品包含血液、脑脊髓液、尿液和唾液。在本文中，本文所述的化合物和组合物可用于多种目的，包括治疗和实验目的。例如，对于给定的适应症、细胞类型、个体和其他参数，本文所述的化合物和组合物可以离体用于确定本发明化合物的最佳施用方案和/或剂量。从这种用途中收集的信息可用于实验目的或在临床中用于设置体内治疗方案。下文描述了本文描述的化合物和组合物可能适合的其他离体用途，或者对于本领域技术人员而言将变得显而易见。所选化合物可以进一步被表征为检查人类或非人类受试者的安全剂量或耐受剂量。此类性质可以使用本领域技术人员通常已知的方法检查。
[0391]
磷酸化tau的检测
[0392]
本文中提供了用于诊断神经疾病或病症的方法，该方法包括将本文中所描述的化合物向患者的组织进行施用。该化合物可以是式i、ii、ia、ib、ic、id或ie的化合物。在一些
700mg、200-800mg、200-900mg、200-1000mg、300-400mg、300-500mg、300-600mg、300-700mg、300-800mg、300-900mg、300-1000mg、400-500mg、400-600mg、400-700mg、400-800mg、400-900mg、400-1000mg、500-600mg、500-700mg、500-800mg、500-900mg、500-1000mg、600-700mg、600-800mg、600-900mg、600-1000mg、700-800mg、700-900mg、700-1000mg、800-900mg、800-1000mg 或约900-1000mg。在一些实施方案中，有效量对应于每个成人每剂量约50-100mg、50-400mg、50-500mg、100-200mg、100-300mg、100-400mg、100-500mg、200-300mg、200-400mg、200-500、300-400mg、300-500mg或400-500mg。
[0402]
在一些实施方案中，化合物以单剂量而施用。在一些实施方案中，化合物以多剂量而施用。在一些实施方案中，每天施用约为一次、两次、三次、四次、五次、六次或六次以上。在一些实施方案中，施用大约每月一次、每两周一次、每周一次或隔天一次。在另一种情况下，化合物和另一种药剂每天约一次至每天约6次一起施用。在一些实施方案中，化合物和药剂的施用持续不到约7天。在另一种情况下，施用持续超过约6、10、14、28天，两个月，六个月或一年。在一些实施方案中，只要需要，就可以实现并保持连续施用。
[0403]
在一些实施方案中，化合物每天施用一至十次、一至四次或一次。在一些实施方案中，一天施用1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次化合物。在一些实施方案中，所述化合物是以滴剂的方式而施用。在一些实施方案中，所施用的滴剂的大小在大约10-100μl、大约10-90μl、大约10-80μl、大约10-70μl、大约10-60μl、大约10-50μl、大约10-40μl、大约10-30μl、大约20-100μl、大约20-90μl、大约20-80μl、大约20-70μl、大约20-60μl、大约20-50μl、大约20-40μl或大约20-30μl的范围内。本公开内容的一个实例施用在约10至约30μl范围内的滴剂。本公开内容的一个实例施用在约10至约100μl范围内的滴剂。本公开内容的一个实例施用在约20至约50μl范围内的滴剂。本公开内容的一个实例施用在约20至约40μl范围内的滴剂。本公开内容的一个实例施用在约10至约60μl范围内的滴剂。在一些实施方案中，本公开的眼用制剂每次施用数滴，例如每次1-3滴，每次1-3滴，每次1-4滴，每次1-5滴，每次1-6滴，每次1-7滴，每次1-8滴，每次1-9滴，每次1-10滴，每次3-4滴，每次3-5滴，每次3-6滴，每次3-7滴，每次3-8滴，每次3-9滴，每次3-10滴，每次5-6滴，每次5-7滴，每次5-8滴，每次5-9滴，每次5-10滴，每次7-8滴，每次7-9滴或每次9-10滴。在一个实施例中，本公开的制剂每次施用约一滴且每天1-6次。
[0404]
药物组合物/制剂
[0405]
在一些实施方案中，将本文中所描述的化合物配制成药物组合物。在某些情况下，使用一种或多种生理学上可接受的载体以常规方式配制药物组合物，该载体包括赋形剂和辅助剂，它们有助于将活性化合物加工成可药用的制剂。正确的配制取决于所选择的施用途径。使用任何药学上可接受的技术、载体和赋形剂，以适合于配制本文所述的药物组合物：remington:the science and practice of pharmacy，第十九版(easton,pa.:mack publishing company,1995)；hoover,john e.,remington’spharmaceutical sciences,mack publishing co.,easton,pennsylvania 1975；liberman,h.a.和lachman,l.编著，pharmaceutical dosage forms,marcel decker,new york,n.y.,1980；和pharmaceutical dosage forms and drug delivery systems第七版(lippincott williams&wilkins 1999)。
[0406]
本文中所提供的药物组合物包含本文中所述的探针和药学上可接受的稀释剂、赋
形剂、或载体。在某些情况下，如在联合疗法中，将本文所述化合物作为药物组合物施用，其中一种或多种化合物与其他活性成分混合。在特定情况下，药物组合物包括一种或多种本文所述的化合物。
[0407]
如本文中所使用的药物组合物是指本文中所描述的化合物与其它化学成分(例如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂)的混合物。在某些情况下，药物组合物促进化合物向生物体的施用。在用于实践本文提供的治疗方法或用途的一些实施方案中，将治疗有效量的本文提供的一种或多种本文所述的化合物以药物组合物的形式施用于患有待检测、诊断或治疗的疾病或病状的哺乳动物。在特定情况下，哺乳动物是人类。在某些情况下，治疗有效量取决于疾病的严重程度、患者的年龄和相对健康状况、所用化合物的效力以及其他因素。本文所述的化合物单独使用或与作为混合物的组分的一种或多种治疗剂联合使用。
[0408]
在一些实施方案中，将一种或多种化合物配制在水溶液中。在特定情况下，仅作为示例，水溶液选自生理相容的缓冲液，例如汉克氏溶液、林格氏溶液、乙酸盐缓冲水溶液、柠檬酸盐缓冲水溶液、碳酸盐缓冲水溶液、磷酸盐缓冲水溶液或生理盐水缓冲液。
[0409]
在某些情况下，本文中所描述的化合物被配制用于眼部施用。在某些情况下，眼用制剂是液体(采用溶液、悬浮剂、复溶粉、溶胶至凝胶系统的形式)、半固体(软膏和凝胶剂)、固体(眼用制剂)、和眼内剂型(注射剂、冲洗液和植入物)。
[0410]
本文中提供了包含本文中所描述化合物和眼科可接受组分的眼用制剂。眼用制剂可以以适合于眼用药物施用的任何形式施用，例如作为溶液、悬浮液、软膏、凝胶、脂质体分散体、胶体微粒悬浮液或类似物，或在眼插入物中，例如在任选生物可降解的控释聚合物基质中。
[0411]“药学上可接受的”或“眼科上可接受的”组分是指生物学上或其它方面不是不期望的组分，即该组分可以被掺入本发明的眼用制剂中并局部施用于患者的眼睛，而不会引起任何不希望的生物学作用或以有害的方式与其中制剂组合物所含的任何其它组分相互作用。当术语“药学上可接受的”用于指除药理活性剂以外的组分时，其表示该组分已达到毒理学和生产测试的要求标准，或者包含在由美国食品和药物管理局准备的不活性成分指南(inactive ingredient guide)中。
[0412]
眼用制剂可以适于以混悬剂或乳剂的形式向眼睛进行局部施用。眼科制剂可包含眼科上可接受的载体。这样的载体包括例如：水；例如磷酸盐缓冲剂、硼酸、氯化钠和硼酸钠的水的混合物；及可与水混溶的溶剂，例如低级醇、芳基醇、聚亚烷基二醇、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和肉豆蔻酸异丙酯。眼用制剂还可包含一种或多种辅料，例如乳化剂、防腐剂、湿润剂、增稠剂。例如，眼用制剂可包含聚乙二醇200、300、400和600；聚乙二醇1,000、1,500、4,000、6,000和10,000；抗菌成分，例如季铵化合物、苯汞盐、硫柳汞、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯，苄醇、苯乙醇；缓冲剂，如硼酸钠、乙酸钠、葡萄糖酸盐缓冲剂；以及其它试剂，如脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺、油酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单棕榈酸酯、二辛基磺基琥珀酸钠、单硫代甘油、硫代山梨醇、和乙二胺四乙酸。该眼科制剂可以是等渗的。该眼科制剂还可包含表面活性剂或稳定剂。表面活性剂包括稳定剂包括亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、和硫代硫酸钠。
[0413]
制剂可包含有效量的渗透促进剂，其促进制剂成分穿过细胞膜、组织和细胞外基
质(包括角膜)。渗透促进剂的“有效量”表示足以提供一种或多种制剂组分经过膜、组织、和细胞外基质而渗透的可测量的浓度增加，如刚刚所描述的。合适的渗透促进剂包括例如：甲基磺酰基甲烷(msm；也称为甲基砜)、msm与二甲基亚砜(dmso)的组合，或者在次优选的实施方案中，msm与dmso的组合，其中msm是尤其优选的。
[0414]
套件和包装
[0415]
本文还提供了套件和包装，其包括本发明的化合物、视网膜成像设备和任选的合适包装。在一个实施方案中，套件进一步包含用于使用的说明书。
[0416]
视网膜成像设备可以包括透镜和图像传感器(从而形成合适的视网膜扫描仪)，用于检测发射的信号。在一些实施方案中，视网膜成像设备检测荧光信号。在一些实施方案中，视网膜成像设备还包括激光光源，其可以用于激活荧光信号。
[0417]
实施例
[0418]
本文中包括以下实施例以揭示本公开的具体实施方案。本领域技术人员应当理解，在接下来的实施例中所公开的技术代表了在本公开的实践中很好地发挥作用的技术，并因此可以认为构成其实施的特定模式。然而，本领域技术人员应当理解，在不背离本公开的精神和范围的情况下，根据本发明公开的内容，可以对公开的特定实施方案做出许多变更并且仍然获得相同或相似的结果。
[0419]
实施例1：tau蛋白视网膜染色
[0420]
将不同年龄的三重复tau(“3rtau”)小鼠(3个月、6个月和12个月)的视网膜安装在载玻片上。用时5分钟将视网膜用pbs洗涤2次。用时5分钟加入98％的甲酸溶液以回收抗原。样品用蒸馏水洗涤2次，每次5分钟。将样品在1
×
pbs中平衡15分钟，然后用10
×
山羊/驴血清在1
×
pbst(取决于抗体)中封闭1小时。然后将样品与含10％山羊血清的三重复tau抗体在1x pbst中在4℃温育过夜，然后用1x pbst冲洗3次，每次5分钟。将样品与二抗(alexa fluor 568anti mouse)在1x pbst中温育1小时，然后用箔纸覆盖，然后用1x pbst冲洗3次，每次5分钟。将样品用化合物5工作溶液在室温下染色30分钟，用箔纸覆盖，并用1
×
pbs洗涤3次，每次5分钟。将样品在黑处用dapi(300nm或100ng/ml)染色10分钟，然后用pbs清洗组织3
×
10分钟。加入防褪色dako封片剂，盖玻片并保持在箔片下直到成像。使用徕卡共聚焦显微镜获得图像。
[0421]
在不同年龄的3rtau转基因小鼠的视网膜中检测到过度磷酸化的3rtau。图1a、1b和1c显示了12个月大的3rtau小鼠视网膜切片中荧光聚集体(直径约5-10μm)的出现，而对照视网膜切片中不存在。正如预期的，3rtau抗体的免疫荧光显示3rtau小鼠的血管和神经元中存在累积的tau聚集体。合并的图像显示了化合物5与3rtau抗体在神经元细胞体中的共定位。使用image j评估共定位程度和关系的统计测试的分析显示，3rtau小鼠的pearson相关系数(pcc)为0.67，而对照小鼠的为0.04(pcc测量两个报告通道的像素值之间的相关性，其中-1＝完全反共定位；0＝非共定位；1＝完全共定位)。
[0422]
随着年龄的增长，视网膜中与3rtau ab的免疫反应性增加。与6个月和3个月的转基因小鼠相比，在12个月的转基因小鼠中，3rtau染色是稳健的。视网膜中的3rtau免疫反应性与化合物5共定位。通过免疫染色观察化合物5和3rtau抗体的共定位，确认对tau的特异性。有趣的是，在3个月时，观察到tau聚集体更靠近视盘，而在12个月时，tau的增加在视网膜周边更为普遍。在年龄相当的野生型小鼠中，未检测到3rtau ab的免疫染色。总之，该研
究表明化合物5有可能用作检测视网膜中过度磷酸化tau的诊断剂。显示在图1a、1b和1c的结果提供了本文描述的化合物具有诊断阿尔茨海默病和其他tau蛋白病和监测疾病进展的潜力的证据。
[0423]
实施例2：成像
[0424]
荧光成像研究是在配备有tcs spe相机和leica 10、20和40x物镜的leica dmi 4000b显微镜(德国，leica公司)上进行。以下的激光器用于使与dapi(蓝色，核染色)、化合物5(绿色)和3rtau(红色)有关的荧光探针：408、488和568nm可视化。z堆叠图像按0.5μm增量以40倍拍摄，以可视化组织的整个厚度。
[0425]
图1a、1b和1c说明了用3rtau ab、化合物5和dapi染色的不同年龄的3rtau小鼠在3个月(图1a)、6个月(图1b)和12个月(图1c)的视网膜切片。
[0426]
图2a和2b说明用3rtau ab、化合物5和dapi染色的3rtau小鼠(12个月)视网膜切片(图2a)和用3rtau ab、化合物5和dapi染色的野生型小鼠(12个月)视网膜切片(图2b)。
[0427]
图3说明用3rtau ab、化合物5和dapi染色的3rtau小鼠(12个月)视网膜切片。
[0428]
实施例3：合成
[0429]
化合物23的合成
[0430][0431]
(6-溴萘-2-基)甲醇(27)的合成
[0432]
在n2下，在0℃，向lialh4(8.2g，217mmol在500ml thf中)的溶液)中逐滴加入6-溴-2-萘甲酸甲酯(26)(50.0g，189mmol)在500ml无水thf中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。在利用tlc监测反应完成后，将混合物用h2o、15％naoh、h2o(1:1:3，v/v/v)进行处理。过滤后，将滤液浓缩再用ea进行萃取，用naso4干燥。将粗产物从(pe:ea＝3:1)中进行纯化，以获得标题化合物。
[0433]
6-溴-2-萘甲醛(28)的合成
[0434]
在(6-溴萘-2-基)甲醇(27)(42.0g，177mmol)和硅胶(76.4g)在dcm(500ml)中的悬浮液中，添加pcc(76.4g，354mmol)。将反应物在rt(室温，25
±
5℃)下搅拌1.5小时。完成后，使其经过二氧化硅的垫进行过滤并在减压下浓缩，以获得标题化合物。
[0435]
6-(哌啶-1-基)-2-萘醛(29)的合成
[0436]
在干燥和脱气的甲苯(300ml)中，添加pd(oac)2(1.5g，6.3mmol)、binap(4.4g，7.1mmol)、6-溴-2-萘甲醛(28)(30.0g，127.8mmol)、cs2co3(60.0g，183.9mmol)和哌啶(12.7g，149.5mmol)。将反应物在115℃下搅拌8小时。冷却后，将混合物过滤再用ea洗涤，然
后浓缩至体积的三分之一，在充分搅拌下向其中加入200ml的6n盐酸。将水相分离，用dcm萃取三次，然后用5n naoh调节至碱性，再用ea进行萃取。将有机相浓缩以得到粗产物，利用硅胶色谱法将其进一步纯化(pe:ea＝20:1至2:1)，以获得标题化合物。
[0437]
2-氰基-n-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺(31)的合成
[0438]
在梨形烧瓶中，在搅拌下将30(6.0g，40mmol)加入2-氰基乙酸甲酯(4.0g，40mmol)中。将混合物在室温下搅拌一夜，再浓缩成粗物质。将该粗物质直接地用于下一步骤。
[0439]
(e)-2-氰基-n-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)-3-(6-(哌啶-1-基)萘-2-基)丙烯酰胺(化合物23)的合成
[0440]
向6-(哌啶-1-基)-2-萘醛(29)(7.0g，29.3mmol)和2-氰基-n-(2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺(31)(7.9g,36.5mmol)在无水thf(250ml)的溶液中加入哌啶(0.5g，5.9mmol)，并将所得混合物回流12小时。然后将反应混合物减压浓缩成粗物质，将其通过硅胶色谱纯化，得到标题化合物。精确重量437.23；m/e 437.23(100％),438.23(28.9％),439.24(4.7％)；元素分析(c
25h31
n3o4):c 68.63％,h 7.14％,n 9.60％,o 14.63％。
[0441]
化合物24的合成
[0442][0443]
33的合成
[0444]
在零度下，向在15ml thf中的1g(2.3mm)的化合物23中添加1.6g(3mm)的使用默克有机合成法制备的焦磷酸四苄基酯，得到深红色溶液。加入氢化钠(100mg，2.5mm，60％油中)。15分钟后，升温至室温，固体开始沉淀。加入dmf(5ml)，并在rt下搅拌1小时。加入水(200ml)和乙酸乙酯(200ml)。将乙酸乙酯层干燥并蒸发。通过使用0-100％己烷/乙酸乙酯在80g硅胶柱上的的纯化，得到标题化合物。图1a至图1c中给出了化合物8的1h nmr谱。ms(m/z)701.3[m h]

。
[0445]
化合物24的合成
[0446]
向1克(化合物33)中，添加用氩气脱气的95％乙醇(150ml)。加入120mg的10％pd/c，再将氢气向反应混合物中鼓泡达5分钟。然后将混合物在氢气球中搅拌3小时。将反应混合物用氩气进行脱气并蒸发。通过在25
×
250mm的c18色谱柱上使用0至100％的水(每升乙酸铵含2g)的制备型lc/ms进行纯化。自由干燥后，获得化合物24。图2a和图2b中给出了化合物9的1h nmr谱(d2o)。
[0447]
化合物25的合成
[0448][0449]
将化合物33(5mmol，3.49g，1当量)在无水ch2cl2(100ml)中的溶液在氩气下冷却至0℃，并通过注射器加入三甲基甲硅烷基溴(50mmol，6.8ml，10当量)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，利用hplc监测转化的完成。然后将混合物用meoh(50ml)进行淬灭并搅拌10分钟。将该溶液蒸发至干；重复此步骤四次。
[0450]
在真空下使有机溶剂蒸发，将残留物悬浮于痕量的meoh中，再加入etoac以导致膦酸的沉淀。将残留物过滤再用etoac(
×
2)洗涤。然后将残余物真空干燥，得到所需的磷酸。
[0451]
在室温下用nh4oac(25mmol，1.93g，5当量)和150ml水处理膦酸，并再搅拌15分钟，得到澄清的红色/橙色溶液。然后将反应混合物冻干，得到最终产物。lc-ms:(es,m/z)518[m 1]

。1h-nmr:(400mhz,cd3od)δ8.31
–
8.22(m,2h),8.08(dd,j＝8.8,1.9hz,1h),7.81(d,j＝9.2hz,1h),7.74(d,j＝8.8hz,1h),7.40(dd,j＝9.2,2.5hz,1h),7.18(d,j＝2.5hz,1h),4.08
–
3.98(m,2h),3.79
–
3.65(m,8h),3.58(t,j＝5.5hz,2h),3.45
–
3.39(m,4h),1.86
–
1.63(m,6h)。
[0452]
实施例4：体内测定
[0453]
实验设计：对氯胺酮麻醉的小鼠进行体内荧光视网膜成像实验，如下表所示：
[0454][0455]
由于3r和4r tau同种型的平衡在包括ad在内的多种tau蛋白疾病中受到影响，3rtau和4rtau tg模型将用于探索发荧光的本文所述的化合物与tau的任一种变体的相互作用。可以使用雌性tg小鼠，因为据报道它们比雄性更快地形成淀粉样蛋白斑块。将使用phoenix micron iv成像系统捕获视网膜的实时体内荧光成像。将增加iv剂量(选自使用本文所述化合物的生物相容性制剂的试验性药代动力学研究)给予小鼠，并在给药后不同时间测定视网膜荧光。将在卫星动物(wt对照品系)中测定全身和视网膜浓度，以了解剂量、浓
度和反应之间的关系。活体成像完成后，将处死小鼠以进行离体大脑和视网膜分析，以通过免疫荧光(if)显微镜使用识别总tau、过度磷酸化tau和tau构象表位(3rtau和4rtau)的抗体来确认tau的存在。
[0456]
***
[0457]
除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。
[0458]
本文中示例性地描述的公开，可以在不存在本文未具体公开的任何一个或多个元素、一个或多个限制的情况下，适当地实施。因此，例如术语“包括”、“包含”、“含有”等应被广泛地且不受限制地进行阅读。另外，本文所采用的术语和表达已被用作描述的术语但并非限制，并且此类术语和表达的使用并非意图排除所示出和描述的特征或其部分的任何等同形式，但应认识到在要求保护的公开的范围内各种修改是可行的。
[0459]
本文中所述及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献都明确地以全部内容作为参考而并入，如同各文献单独作为参考而并入。在发生冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。
[0460]
应当理解的是，虽然已结合以上实施方案描述了本公开，但前面的描述和实施例是用来说明出而不是限制本公开的范围。对于本公开所属领域的技术人员而言，在本公开范围内的其它方面、优点和修改将是显而易见的。