用于银龙鱼性别鉴定的SNP分子标记及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种用于银龙鱼性别鉴定的snp分子标记，其特征在于，碱基序列为：seq id no.1，长度为340bp；所述snp分子标记为seq id no.1中第243位。2.根据权利要求1所述的用于银龙鱼性别鉴定的snp分子标记，其特征在于，当第243位碱基为c/c纯合时，样品为雄性，为c/t杂合时，样品为雌性。3.一种用于鉴定或辅助鉴定银龙鱼性别的引物对，其特征在于，包括上游引物f和下游引物r，所述上游引物f的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述下游引物r的核苷酸序列如seq id no.3所示。4.一种用于鉴定或辅助鉴定银龙鱼性别的试剂盒，其特征在于，含有权利要求3所述的引物对、dntp以及dna聚合酶。5.一种银龙鱼性别鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测银龙鱼的基因组dna；(2)以待测银龙鱼的基因组dna为模板，利用权利要求3所述上游引物f和下游引物r，进行pcr扩增反应；(3)反应完成后进行分析，确定样品基因型，鉴定性别。6.根据权利要求5所述的银龙鱼性别鉴定方法，其特征在于，步骤(2)中pcr扩增反应时采用的反应体系为40μl，包括2*taqmastermix(dye)20μl、primerf1.6μl、primerr1.6μl、ddh2o15.8μl、基因组dna 1μl。7.根据权利要求5所述的银龙鱼性别鉴定方法，其特征在于，步骤(2)中pcr扩增反应时pcr扩增程序为：94℃2min；然后进行35个循环，包括94℃30s，56℃30s，72℃20s；然后72℃保持5min结束。8.根据权利要求5所述的银龙鱼性别鉴定方法，其特征在于，步骤(3)中结合sanger测序进行分析，确定样品基因型，鉴定性别。9.权利要求1～2任一项所述用于银龙鱼性别鉴定的snp分子标记、权利要求3所述引物对、权利要求4所述试剂盒和/或权利要求5～8任一项所述方法在银龙鱼性别鉴定和/或银龙鱼养殖中的应用。

技术总结
本发明公开了一种用于银龙鱼性别鉴定的SNP分子标记及其应用，碱基序列为：SEQ ID NO.1；所述SNP分子标记为SEQ ID NO.1中第243位。通过基因组高通量测序对比以获取银龙鱼雌雄个体之间存在差异且能表征雌雄性别的单核苷酸多肽性位点(SNP)，并结合引物扩增以获得包含SNP位点的扩增序列，在此基础上，通过引物实现待测样本的PCR扩增和测序，获得样本SNP位点信息，从而鉴别待测样本的性别。利用本发明的SNP位点，能在不剖解银龙鱼的前提下实现准确、快速的性别鉴定，且当该SNP位点应用于银龙鱼养殖时，便于实现成熟的人工养殖银龙鱼技术，以实现大量生产。以实现大量生产。以实现大量生产。


技术研发人员：牟希东 刘奕 刘超 杨叶欣 宋红梅 汪学杰 徐猛 顾党恩 房苗 胡隐昌
受保护的技术使用者：中国水产科学研究院珠江水产研究所
技术研发日：2020.12.25
技术公布日：2022/6/30