一种具有抗肿瘤活性的茶碱乙酸衍生物及其制备方法与应用与流程

1.本发明涉及抗肿瘤药物的技术领域，具体涉及一种具有抗肿瘤活性的茶碱乙酸衍生物及其制备方法与应用。


背景技术：

2.恶性肿瘤严重危害人类健康，世界卫生组织国际癌症研究机构(iarc)发布的全球最新癌症数据显示，2020年全球新发癌症共计1930万例，死亡近1000万例。几乎每5人中就有1人在一生中会罹患癌症，而每8名男性、每11名女性中即有1人因癌症而死亡。肿瘤治疗是一个世界性的难题,目前治疗手段主要以外科手术、化疗和放疗为主。化疗是肿瘤治疗最广泛使用的方法,但具有不良反应大、易产生耐药性等缺点,因此设计一种安全、有效、副作用小的肿瘤药物具有很好的应用前景。
3.茶碱衍生物因其生物效应而被广泛研究。它们代表了一类重要的治疗药物，具有多种生物活性，如抗肿瘤活性、抗微生物、抗炎、中枢神经系统兴奋剂、腺苷受体拮抗、磷酸二酯酶(pde)抑制、平喘镇咳、免疫调节和降血糖活性。此外，对改善窒息新生儿肾功能和慢性支气管、慢性阻塞性肺疾病也有显著的治疗作用。
4.茶碱与卡氮芥或环磷酰胺合并用药，通过提高环磷腺苷可产生协同的抗肿瘤作用。茶碱和咖啡因可以增强阿霉素对肿瘤细胞的毒性。当茶碱与吉西他滨或顺铂联合使用时，发现茶碱在多种人类癌细胞系和恶性转化的颗粒细胞系中诱导细胞程序性死亡。已发现茶碱促凋亡作用的机制包括降低细胞内抗凋亡介质bcl-2的水平，或者作为有效的醛脱氢酶1家族成员a1(aldh1a1)蛋白抑制剂来抑制多种恶性肿瘤和癌症干细胞增值。茶碱衍生物二羟丙茶碱联合吗啡对肺癌呼吸困难患者进行联合治疗，可以有效改善患者的呼吸困难程度，提高治疗效果，是常用的临床呼吸困难缓解药物。其机理是茶碱类平喘药物可对磷酸二酯酶(camp)进行抑制，camp的分解会随之降低，气管平滑肌得到松弛后，会对气管黏膜出血情况进行适当的缓解。此外，采用多索茶碱治疗肺癌呼吸困难是一种有效、安全的方法，可显著改善患者肺功能，减轻临床症状，降低不良反应发生率，有较好临床推广价值。
5.1,2,3-三氮唑作为一种重要的氮杂环结构单元，在药物设计和合成中发挥了重要作用。带有1,2,3-三氮唑单元的化合物通常显示出对癌症、炎症和微生物的良好抑制活性。此外，三氮唑环可以通过铜催化叠氮化物和炔烃进行环加成反应很容易地构建，降低了合成难度，从而进一步提升了应用潜力。一些含1,2,3-三氮唑的化合物被广泛设计，其中头孢三嗪和羧胺三唑已经用于临床或正在进行癌症治疗的临床评估，他唑巴坦也用于抗微生物。总之，1,2,3-三氮唑可以通过不同的接头与其他抗癌药效团杂合，或者是充当连接两个抗癌药效团的连接子，使设计的新化合物具有更好的抗肿瘤活性。
6.因此，基于茶碱的多种功能及其强有吸引力的结构支架，结合1,2,3-三氮唑的优点，可以设计出一系列茶碱衍生物，在抗肿瘤活性方面具有良好的研究前景。


技术实现要素：

7.如上所述，本发明提供一种茶碱乙酸衍生物，并将其应用于抗肿瘤活性研究。
8.第一方面，本发明提供一种如式(ⅰ)所示化合物：
[0009][0010]
或其在药学可接受的盐；
[0011]
其中，
[0012]
a为c5～c6的碳环基团、含氮杂环基团或含硫杂环基团；
[0013]
n为0或1～4的整数；
[0014]
r选自氢、氟、氯、溴、碘、c1～c4烷基、硝基、c1～c4烷氧基、c1～c4卤代烷基或卤代烷氧基；
[0015]
m为1～3的整数，且当m＞1时，每个r可以是不同的。
[0016]
作为进一步优选的方案，所述的式(ⅰ)化合物中：
[0017]
a为苯基、吡啶基、噻吩基；
[0018]
n＝0或1；
[0019]
r选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、硝基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基；
[0020]
作为更一步优选的方案，所述的式(ⅰ)选自以下化合物：
[0021]
[0022]
[0023][0024]
作为更一步优选的方案，所述的式(ⅰ)选自如下化合物：
[0025][0026]
第二方面，本发明提供一种制备式(ⅰ)所示化合物的方法，反应式如下：
[0027][0028][0029]
包括以下步骤：
[0030]
(1)茶碱乙酸与4-氨基苯乙炔缩合反应得到式(ⅲ)化合物；
[0031]
或4-氨基苯乙炔先与氯乙酰氯反应，再与茶碱反应得到式(ⅲ)化合物；
[0032]
或茶碱先与tbhp(叔丁基过氧化氢)反应，再与4-氨基苯乙炔反应得到式(ⅲ)化合物；
[0033]
(2)式(ⅲ)化合物与式(ⅱ)化合物反应得式(ⅰ)化合物。
[0034]
其中，式(ⅱ)中a、r、m、n的定义与式(ⅰ)相同。
[0035]
优选的，所述步骤(1)具体过程为：在室温下，将茶碱乙酸、4-氨基苯乙炔、hatu、dipea和dmf混合，氮气保护下搅拌24小时。采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完全后，除去dmf，用二氯甲烷萃取产物。用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥后减压浓缩，在甲醇中重结晶，得到式(ⅲ)化合物。所述的茶碱乙酸、4-氨基苯乙炔、hatu、dipea的摩尔比是1:1.5:1.5:3。
[0036]
优选的，所述步骤(1)具体过程为：在室温下，将4-氨基苯乙炔加入到二氯甲烷中搅拌溶解，缓慢滴加氯乙酰氯，滴加完后搅拌1h，缓慢滴加溶有茶碱和三乙胺的二氯甲烷溶液，滴加完后在氮气保护下加热至回流搅拌24小时。采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完成后，用盐水洗涤多次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。浓缩物在甲醇中重结晶，抽滤，得到式(ⅲ)化合物。所述的茶碱、4-氨基苯乙炔、氯乙酰氯的摩尔比是1:1:1。
[0037]
优选的，所述步骤(1)具体过程为：在室温下，把茶碱和氢氧化钠加入二氯甲烷，搅拌均匀后缓慢滴加3-溴丙炔，搅拌反应2h，再加入含有tbhp和催化剂的水溶液，缓慢加热至70℃，反应5h，然后过滤反应液，分出有机相，有机相浓缩后加入四氢呋喃中，再加入4-氨基苯乙炔和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺，滴加完后搅拌1h，采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完成后，用盐水洗涤多次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。浓缩物在甲醇中重结晶，抽滤，得到式(ⅲ)化合物。所述的催化剂为三氯化铁或三氯化铟；所述的茶碱、三溴丙炔、tbhp、催化剂的摩尔比是1:1:2:0.1；所述茶碱、4-氨基苯乙炔、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺的摩尔比是1:1:1。
[0038]
优选的，所述步骤(2)具体过程为：依次向反应器中加入式(ⅲ)化合物、式(ⅱ)化合物、叔丁醇，水，四氢呋喃，无水硫酸铜和抗坏血酸钠，在70℃条件下反应一段时间，原料反应完全后，加入二氯甲烷，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷萃取两次，合并有机相，干燥后，减压浓缩，用层析柱分离，得到式(ⅰ)化合物；所述式(ⅲ)化合物、式(ⅱ)化合物的摩尔比为1:1～2。
[0039]
第三方面，提供一种式(ⅰ)化合物的应用，本发明的式(ⅰ)化合物用于制备治疗癌症的药物。
[0040]
所述癌症包括肺癌、卵巢癌、结肠癌和乳腺癌。
[0041]
本发明的有益效果为：
[0042]
本发明通过把茶碱乙酸和其他1,2,3-三氮唑类化合物连接起来，得到了一系列结构新颖的化合物，该类化合物具有优异的抗肿瘤性能，对多种肿瘤细胞都具有良好的抑制作用，对正常细胞毒性较小，能够较好地应用于药物中，并且该类化合物制备过程中工艺简单，易于控制且目标产物收率较高。
附图说明
[0043]
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0044]
图1是本发明实施例4制备的化合物的1hnmr图谱。
[0045]
图2是本发明化合物d17的1hnmr图谱。
[0046]
图3是本发明化合物d17的
13
cnmr图谱。
具体实施方式
[0047]
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
[0048]
实施例1
[0049]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-(4-乙炔基苯基)乙酰胺(式(ⅲ)化合物)
[0050][0051]
在室温下，将茶碱乙酸(5g,0.02mol)、4-氨基苯乙炔(3.69g,0.03mol)、hatu(12.96g,0.03mol)和dipea(8.13g,0.06mol)和溶剂dmf一起添加到500ml反应瓶中，氮气保护下搅拌24小时。采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完成后，用油泵除去dmf，用二氯甲烷萃取产物，用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。在甲醇中重结晶，抽滤，得到式(ⅲ)化合物3.64g。lc-ms m/z(％):338[m h]

.
[0052]
实施例2
[0053]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-(4-乙炔基苯基)乙酰胺(式(ⅲ)化合物)
[0054][0055]
在室温下，将4-氨基苯乙炔11.8g加入到700ml二氯甲烷中搅拌溶解，缓慢滴加氯乙酰氯11.3g，滴加完后搅拌1h，缓慢滴加溶有茶碱18g和三乙胺10g的二氯甲烷溶液500ml，
滴加完后在氮气保护下加热至回流搅拌24小时。采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完成后，用盐水洗涤多次，将有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。在甲醇中重结晶，抽滤，得到式(ⅲ)化合物31.6g。lc-ms m/z(％):338[m h]

.
[0056]
实施例3
[0057]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-(4-乙炔基苯基)乙酰胺(式(ⅲ)化合物)
[0058]
在室温下，把茶碱18g和氢氧化钠4g加入二氯甲烷500ml，搅拌均匀后缓慢滴加3-溴丙炔11.8g，搅拌反应2h，再加入含有tbhp 18g和六水合三氯化铁5.5g的水溶液550ml，缓慢加热至70℃，此时反应体系剧烈回流，注意保持密封，反应5h，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后加入四氢呋喃800ml中，再加入4-氨基苯乙炔11.8g和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺15.6g，滴加完后搅拌1h。采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完成后，用盐水洗涤多次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。在甲醇中重结晶，抽滤，得到式(ⅲ)化合物30.7g。lc-ms m/z(％):338[m h]

.
[0059]
实施例4
[0060]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-(4-乙炔基苯基)乙酰胺(式(ⅲ)化合物)
[0061]
在室温下，把茶碱18g和氢氧化钠4g加入到500ml二氯甲烷中，搅拌均匀后缓慢滴加3-溴丙炔11.8g，搅拌反应2h，再加入含有tbhp13.5g和四水合三氯化铟2.95g的水溶液300ml，缓慢加热至70℃，此时反应体系剧烈回流，注意保持密封，反应3h，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后加入四氢呋喃600ml中，再加入4-氨基苯乙炔11.8g和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺15.6g，滴加完后搅拌1h，采用薄层色谱法(tlc)监测反应过程。反应完成后，用盐水洗涤多次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。在甲醇中重结晶，抽滤，得到式(ⅲ)化合物33.1g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.62(s,1h),8.07(s,1h),7.59(d,j＝8.0,2h),7.44(d,j＝8.0,2h),5.22(s,2h),4.12(s,1h),3.45(s,3h),3.19(s,3h).
[0062]
实施例5
[0063]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-甲基-3-硝基-苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d1)
[0064][0065]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-2-甲基-3-硝基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d1(9.03g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),8.97(s,1h),8.19(d,j＝7.3,1h),8.09(s,1h),7.94
–
7.89(m,3h),7.74
–
7.69(m,3h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,
3h),2.24(s,3h).
[0066]
实施例6
[0067]
制备n-{4-[1-(2-氯苄基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}
‑‑
2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)乙酰胺(d2)
[0068][0069]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-2-氯苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩得到固体，用层析柱分离，得到化合物d2(0.94g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.53(s,1h),8.53(s,1h),8.08(s,1h),7.82(d,j＝8.3,2h),7.65(d,j＝8.3,2h),7.54(d,j＝7.6,1h),7.43
–
7.37(m,2h),7.28(d,j＝7.0,1h),5.75(d,j＝7.5,2h),5.22(s,2h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0070]
实施例7
[0071]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-[4-(1-苯基-1h-[1,2,3]三唑-4-基)-苯基]乙酰胺(d3)
[0072][0073]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、叠氮苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d3(1.13g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),9.23(s,1h),8.09(s,1h),7.93(dd,j1＝14.5,j2＝8.2,4h),7.71(d,j＝8.4,2h),7.64(t,j＝7.7,2h),7.52(t,j＝7.3,1h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h)。
[0074]
实施例8
[0075]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(3-甲氧基-苄基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d4)
[0076][0077]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮甲基-3-甲氧基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d4(1.02g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.53(s,1h),8.55(s,1h),8.08(s,1h),7.81(d,j＝8.3,2h),7.65(d,j＝8.3,2h),7.30(t,j＝7.8,1h),6.91(dd,j1＝16.6,j2＝8.0,3h),5.60(s,2h),5.22(s,2h),3.75(s,3h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0078]
实施例9
[0079]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-氟苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d5)
[0080][0081]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、2-叠氮基氟苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d5(0.76g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.59(s,1h),9.01(s,1h),8.10(s,1h),7.92(s,3h),7.67(d,j＝31.5,4h),7.48(s,1h),5.24(s,2h),3.46(d,j＝4.5,3h),3.21(s,3h)。
[0082]
实施例10
[0083]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-氟苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d6)
[0084][0085]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮甲基-4-氯苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完
全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d6(1.09g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.51(s,1h),8.54(s,1h),8.08(s,1h),7.80(d,j＝8.7,2h),7.64(d,j＝8.7,2h),7.48
–
7.43(m,2h),7.37(d,j＝8.5,2h),5.64(s,2h),5.22(s,2h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0086]
实施例11
[0087]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-三氟甲基苄基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d7)
[0088][0089]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮甲基-2-三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d7(0.83g)。1h nmr(400mhz,methanol-d4)δ10.55(s,1h),8.55(s,1h),8.08(s,1h),7.82(s,3h),7.65(d,j＝44.0,4h),7.24(d,j＝4.4,1h),5.83(s,2h),5.23(s,2h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0090]
实施例12
[0091]
制备n-[4-(1-苄基-1h-[1,2,3]三唑-4-基)-苯基]-2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)乙酰胺(d8)
[0092][0093]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、叠氮甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d8(0.82g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.53(s,1h),8.56(s,1h),8.09(s,1h),7.80(s,2h),7.68
–
7.62(m,2h),7.42
–
7.31(m,5h),5.64(s,2h),5.22(s,2h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0094]
实施例13
[0095]
制备n-{4-[1-(2-溴苄基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}-2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢-嘌呤-7-基)乙酰胺(d9)
[0096][0097]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮甲基-2-溴苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d9(0.78g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.51(s,1h),8.51(s,1h),8.08(s,1h),7.82(d,j＝8.6,2h),7.68(dd,j1＝21.2,j2＝8.3,3h),7.45
–
7.40(m,1h),7.33(d,j＝16.8,1h),7.22(d,j＝8.9,1h),5.72(s,2h),5.22(s,2h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0098]
实施例14
[0099]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(4-三氟甲基苄基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d10)
[0100][0101]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮甲基-4-三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d10(0.95g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.53(s,1h),8.60(s,1h),8.08(s,1h),7.79(dd,j1＝16.5,j1＝8.4,4h),7.66(d,j＝8.7,2h),7.54(d,j＝8.1,2h),5.77(s,2h),5.23(s,2h),3.46(s,3h),3.20(s,3h)。
[0102]
实施例15
[0103]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-三氟甲氧基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d11)
[0104][0105]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-2-三氟甲氧基苯1g，叔丁醇
20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d11(0.81g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),8.98(s,1h),8.10(s,1h),7.91(t,j＝7.5,3h),7.76
–
7.68(m,5h),5.25(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h)。
[0106]
实施例16
[0107]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(3-三氟甲基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d12)
[0108][0109]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-3-三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d12(0.96g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.60(s,1h),9.41(s,1h),8.32(s,2h),8.09(s,1h),7.91(d,j＝9.1,4h),7.73(d,j＝8.4,2h),5.25(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h)。
[0110]
实施例17
[0111]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-[4-(1-间甲苯基-1h-[1,2,3]三唑-4-基)-苯基]乙酰胺(d13)
[0112][0113]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、3-叠氮基甲苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d13(0.97g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),9.20(s,1h),8.09(s,1h),7.91(d,j＝6.8,2h),7.79(s,1h),7.72(s,3h),7.50(t,j＝6.5,1h),7.33(s,1h),5.76(s,2h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h)。
[0114]
实施例18
[0115]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-三氟甲基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d14)
[0116][0117]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-2-三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d14(0.83g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.59(s,1h),9.28(s,1h),8.09(s,1h),7.87(dd,j1＝19.7,j2＝7.2,4h),7.78
–
7.64(m,3h),7.37(s,1h),5.25(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0118]
实施例19
[0119]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-乙基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d15)
[0120][0121]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-2-乙苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d15(0.74g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),8.87(s,1h),8.10(s,1h),7.92(d,j＝8.5,2h),7.71(d,j＝8.6,2h),7.58(s,2h),7.42(s,2h),5.25(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h),2.52(s,2h),1.06(t,j＝7.5,3h).
[0122]
实施例20
[0123]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2,4,6-三甲基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d16)
[0124][0125]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、2-叠氮基-1,3,5-三甲基苯1g，叔丁醇
20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d16(1.07g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),8.72(s,1h),8.09(s,1h),7.90(d,j＝8.5,2h),7.70(d,j＝8.5,2h),7.12(s,2h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h),2.34(s,3h),1.94(s,6h)。
[0126]
实施例21
[0127]
制备n-{4-[1-(2,5-双三氟甲基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}-2-(1,3-二甲基-2,2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)乙酰胺(d17)
[0128][0129]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、2-叠氮基-1,4-双三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d17(0.73g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),9.02(s,1h),8.40(s,1h),8.30(q,j＝8.4,2h),8.10
–
8.07(m,1h),7.91(d,j＝7.4,2h),7.72(d,j＝7.5,2h),5.24(s,2h),3.49
–
3.46(m,3h),3.23
–
3.20(m,3h).
[0130]
实施例22
[0131]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(3-氟苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d18)
[0132][0133]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-3-氟苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d18(0.77g).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.59(s,1h),9.28(s,1h),8.09(s,1h),7.87(d,j＝12.5,4h),7.72(s,3h),7.37(s,1h),5.25(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0134]
实施例23
[0135]
制备n-{4-[1-(2-氯苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}-2-(1,3-二甲基-2,6-二
氧-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)乙酰胺(d19)
[0136][0137]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、2-叠氮基氯苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d19(1.08g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),8.97(s,1h),8.09(s,1h),7.91(d,j＝8.4,2h),7.79(dd,j＝15.4,7.6,2h),7.71(d,j＝8.4,2h),7.67
–
7.59(m,2h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0138]
实施例24
[0139]
制备n-{4-[1-(3-溴苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}-2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢-嘌呤-7-基)乙酰胺(d20)
[0140][0141]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、3-叠氮基溴苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d20(0.85g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.59(s,1h),9.31(s,1h),8.20(s,1h),8.09(d,j＝4.1,1h),8.00(t,j＝5.5,1h),7.89(t,j＝6.1,2h),7.72(dd,j1＝8.3,j2＝3.8,3h),7.59(s,1h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0142]
实施例25
[0143]
制备n-{4-[1-(3,5-双三氟甲基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}-2-(1,3-二甲基-2,2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)乙酰胺(d21)
[0144]
[0145]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-3,5-双三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d21(1.02g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.60(s,1h),9.55(s,1h),8.67(s,2h),8.28(s,1h),8.09(s,1h),7.90(d,j＝7.4,2h),7.74(d,j＝7.6,2h),5.25(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0146]
实施例26
[0147]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-碘苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}乙酰胺(d22)
[0148][0149]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、2-叠氮基碘苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d22(0.92g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.58(s,1h),8.90(s,1h),8.13
–
8.09(m,2h),7.91(d,j＝8.5,2h),7.71(d,j＝8.6,2h),7.64(d,j＝4.2,2h),7.39(dt,j1＝8.6,j2＝4.5,1h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0150]
实施例27
[0151]
制备n-{4-[1-(3-氯-苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}-2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-嘌呤-7-基)乙酰胺(d23)
[0152][0153]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、3-叠氮基氯苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d23(1.02g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.59(s,1h),9.31(s,1h),8.09(d,j＝5.7,2h),7.97(d,j＝8.2,1h),7.90(d,j＝8.4,2h),7.69(dd,j1＝24.6,j2＝8.2,3h),7.59(d,j＝8.0,1h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0154]
实施例28
[0155]
制备n-{4-[1-(4-氯苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}-2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢-嘌呤-7-基)乙酰胺(d24)
[0156][0157]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、4-叠氮基氯苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d24(1.05g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.56(s,1h),9.25(s,1h),8.09(s,1h),7.98(d,j＝8.8,2h),7.89(d,j＝8.6,2h),7.71(d,j＝8.8,4h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0158]
实施例29
[0159]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(3-甲氧基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d25)
[0160][0161]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-3-甲氧基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d25(0.93g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.50(s,1h),8.54(s,1h),8.08(s,1h),7.80(d,j＝8.7,2h),7.64(d,j＝8.7,2h),7.30(t,j＝7.9,1h),6.91(d,j＝23.8,3h),5.22(s,2h),3.75(s,3h),3.46(s,3h),3.20(s,3h).
[0162]
实施例30
[0163]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(2-甲氧基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d26)
[0164][0165]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-2-甲氧基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d26(0.87g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.56(s,1h),8.84(s,1h),8.09(s,1h),7.91(d,j＝7.1,2h),7.74
–
7.64(m,3h),7.55(s,1h),7.34(d,j＝7.8,1h),7.17(s,1h),5.24(s,2h),3.88(s,3h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0166]
实施例31
[0167]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(4-氟苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d27)
[0168][0169]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、4-叠氮基氟苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d27(1.13g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.56(s,1h),9.20(s,1h),8.09(s,1h),7.99(d,j＝12.4,2h),7.89(d,j＝8.1,2h),7.71(d,j＝8.2,2h),7.49(t,j＝8.5,2h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0170]
实施例32
[0171]
制备n-{4-[1-(2-溴苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]-苯基}-2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)乙酰胺(d28)
[0172][0173]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、2-叠氮基溴苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四
氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d28(0.95g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.56(s,1h),8.94(s,1h),8.09(s,1h),7.93(d,j＝20.7,3h),7.77
–
7.56(m,5h),5.24(s,2h),3.47(d,j＝3.0,3h),3.21(s,3h).
[0174]
实施例33
[0175]
制备2-(1,3-二甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘌呤-7-基)-n-{4-[1-(4-三氟甲基苯基)-1h-[1,2,3]三唑-4-基]苯基}乙酰胺(d29)
[0176][0177]
在反应瓶中，依次加入式(ⅲ)化合物1g、1-叠氮基-4-三氟甲基苯1g，叔丁醇20ml，水20ml，四氢呋喃20ml，无水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，在70℃条件下反应6h，原料反应完全，加入二氯甲烷50ml，过滤反应液，得到黄色液体，分出有机相，水相用二氯甲烷20ml萃取两次，合并有机相经无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到固体，用层析柱分离，得到化合物d29(0.97g)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.57(s,1h),9.38(s,1h),8.21(d,j＝7.7,2h),8.10
–
8.00(m,3h),7.92(d,j＝7.9,2h),7.72(d,j＝7.8,2h),5.24(s,2h),3.47(s,3h),3.21(s,3h).
[0178]
实施例34
[0179]
为了从29种茶碱乙酸衍生物和茶碱乙酸中筛选出具有良好抗肿瘤活性的化合物，我们选择了两种肿瘤细胞系a549和mcf-7作为治疗对象。用cck-8评估该系列茶碱乙酸衍生物对a549和mcf-7增殖活性的影响。具体操作如下：
[0180]
收集生长期的肺癌细胞a549和mcf-7，取0.25％胰蛋白酶消化液使其贴壁细胞脱落，制成细胞悬液，将处于对数生长期的细胞按2000-4000细胞/孔接种到96孔板。种板24小时后，用不同浓度的药物(1μm，2μm，8μm，16μm，32μm)处理细胞72小时，0.1％dmso作为阴性对照。最后加入cck-8试剂孵育1-4小时，在波长450nm处检测各孔吸光度(od值)。将阴性对照组的细胞存活率看作100％，借助graph pad prism 8.0软件，使用非线性回归计算化合物ic50值。下表便是应用cck-8法测出所合成的30个化合物对于肿瘤细胞a549和mcf-7的抗增殖活性。
[0181][0182]
实施例35
[0183]
为证实化合物d17的抗肿瘤活性，筛选出对化合物d17最敏感的细胞系，我们添加了7个细胞系h460、a2780、lovo、mb-231、ovcar3、sw480和pc9作为治疗对象。结构表明化合物d17对这9种癌细胞系：a549(ic
50
＝6.76
±
0.25μm)、h460(ic
50
＝5.93
±
0.97μm)、a2780(ic
50
＝26.84
±
6.96μm)、lovo(ic
50
＝37.42
±
0.82μm)、mb-231(ic
50
＝18.78
±
3.84μm)、mcf-7(ic
50
＝12.61
±
1.76μm)、ovcar3(ic
50
＝29.33
±
6.20μm)、sw480(ic
50
＝15.66
±
2.37μm)和pc9(ic
50
＝18.20
±
14.15μm)均表现出抗增殖性和细胞毒性。
[0184]
实施例36
[0185]
为证实化合物d17的对正常细胞的毒性，我们选择了正常细胞系lo2，通过cck8法，在浓度为16μm时，作用72h后细胞的存活率约为78％。
[0186]
尽管通过参考附图并结合优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以权利要求所述的保护范围为准。