一种吲唑类衍生物的药学上可接受的盐、结晶形式及其制备方法与流程

1.本公开涉及一种吲唑类衍生物的药学上可接受的盐、结晶形式及其制备方法，属于医药领域。


背景技术：

2.乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，据2012年globalcan统计数据显示(ca cancer j clin 2015；65:87
–
108)，全球一年约有170万新发癌症病例，52万死亡病例，无论发病率和死亡率都居女性恶性肿瘤首位。国家癌症中心发布的2017年《中国肿瘤登记年报》显示，乳腺癌居女性恶性肿瘤发病率首位，每年新发病例约27.9万，并以每年2％左右的速度递增。
3.约有70％的乳腺癌患者为雌激素受体(estrogen receptor，er)阳性乳腺癌，在这部分乳腺癌患者的治疗中，内分泌治疗(endocrine therapy)占有重要地位。内分泌治疗主要分三类，分别是芳香化酶抑制剂(aromatase inhibitor，ai)，能够抑制雄激素转化为雌激素，降低体内雌激素的水平，选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator，serm)，拮抗雌激素受体的活性，和选择性雌激素受体降解剂(selective estrogen receptor degrader，serd)，不仅可以拮抗雌激素受体的活性，还能够促进受体的降解(pharmacol ther.2017dec 28)。虽然内分泌治疗是雌激素受体阳性乳腺癌的首选治疗，但约有30％接受辅助治疗的病人会发生复发，而几乎所有的转移性乳腺癌病人都会产生耐药而发生进展。对内分泌治疗产生耐药的机制主要分两类，一类集中在雌激素受体信号通路本身，包括编码雌激素受体的基因esr1的激活突变、扩增、与其他基因的融合，雌激素受体共调解因子和下游控制细胞周期因子的失调等，另一类机制包括与雌激素受体信号通路有交叉反应的信号通路的激活，如生长因子受体通路等(nat rev clin oncol.2015oct；12(10):573-83)。
4.2013年两项研究，在11～55％的接受过芳香化酶抑制剂治疗的雌激素受体阳性转移性乳腺癌病人中检测到了esr1基因突变，进一步研究发现突变受体可以不依赖雌激素发生磷酸化，发挥转录作用，使雌激素依赖的mcf7接种的肿瘤在体内可以不再依赖雌激素生长，而且突变受体会使serm他莫昔芬(tamoxifen)和serd氟维司群(fulvestrant)的活性降低。因此esr1基因突变可能是雌激素阳性乳腺癌发生耐药的机制之一(nat rev clin oncol.2015oct；12(10):573-83and nat genet 2013；45:1439
–
45)。在随后进行的多个研究中，都在雌激素受体阳性转移性乳腺癌病人中发现了一定比例的esr1基因突变，突变比例大约在30％左右。在bolero-2临床试验中发现，经过ais治疗后进展的雌激素受体阳性转移性乳腺癌病人的ctdna中有29％存在er y537s和er d538g突变。在依西美坦(exemestane)单用组，发生突变病人的无进展生存期(progression free survival，pfs)和总生存期(overall survival，os)都比没有发生突变的病人短[nat genet 2013；45:1446
–
51]。
[0005]
综上所述，esr1基因突变大多发生在经过ais治疗而进展的转移性雌激素受体阳性乳腺癌病人中，这些病人对ais治疗不再敏感，因此需要开发针对esr1基因突变的雌激素受体拮抗剂。
[0006]
eisai公司开发的first-in-class的雌激素受体共价结合拮抗剂h3b-6545对野生型和突变型雌激素受体都有较强的抑制活性，且能够通过和受体的共价结合发挥更长时间的药效，目前正在进行临床一二期试验。目前公开的针对esr1基因突变的雌激素受体拮抗剂的专利有wo2016196346和wo2016196342。
[0007]
pct/cn2020/096744提供了一种吲唑类衍生物，其化学名为(e)-1-吗啉基-4-((1-(((5-((z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-1h-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)氨基)丁-2-烯-1-酮(式i)，为患者提供新的治疗选择。
[0008]


技术实现要素：

[0009]
本公开提供一种式(i)所示化合物的药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐选自草酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、己二酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐、乙酸盐、扁桃酸盐和硫酸盐，
[0010][0011]
本公开还提供了一种制备前述式(i)所述的可药用盐的方法，包括：式(i)化合物与酸成盐的步骤，所述酸选自草酸、酒石酸、富马酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、己二酸、甲磺酸、磷酸、乙酸、扁桃酸、硫酸或它们的溶液，所述成盐反应所用溶剂选自水、甲醇、正丙醇、异丙醇、乙醇、异丙醚、四氢呋喃、乙酸异丙酯、丙酮、丁酮、甲基叔丁基醚、乙腈、1,4-二氧六环、乙酸乙酯、正庚烷和正己烷中的一种或多种。
[0012]
进一步地，在可选实施方案中，制备前述可药用盐的方法还包括挥发溶剂或搅拌析晶，过滤、干燥等步骤。
[0013]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.465、16.486、17.362、19.624、20.341、21.890和22.816处有特征峰。
[0014]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.995、8.465、16.486、17.362、19.624、20.341、21.063、21.890、22.816和28.861处有特征峰。
[0015]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.879、7.995、8.465、16.486、17.362、19.624、20.341、21.063、21.890、22.816、23.550、25.925和28.861处有特征峰。
[0016]
本技术还提供了草酸盐a晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物和草酸与溶剂
(i)混合；2)析晶的步骤。
[0017]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.154、13.755、15.781、16.918、18.647、20.789和21.687处有特征峰。
[0018]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.154、13.755、15.781、16.401、16.918、18.647、20.346、20.789、21.687和24.670处有特征峰。
[0019]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.881、8.154、13.755、15.781、16.401、16.918、18.647、20.346、20.789、21.687、23.183、24.670和28.946处有特征峰。
[0020]
本技术还提供了草酸盐b晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物和草酸与溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0021]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.040、16.244、20.414、21.033、21.817、22.737和23.696处有特征峰。
[0022]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.854、8.040、15.442、16.244、20.414、21.033、21.817、22.737、23.274和23.696处有特征峰。
[0023]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.854、8.040、9.025、14.47、15.442、16.244、20.414、21.033、21.817、22.737、23.274、23.696和27.637处有特征峰。
[0024]
本技术还提供了草酸盐c晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物和草酸与溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0025]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的d晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为5.779、8.846、11.606、17.663、22.333、22.880和25.381处有特征峰。
[0026]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的d晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为5.779、8.846、11.606、13.965、17.663、18.713、22.333、22.880、23.420和25.381处有特征峰。
[0027]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的d晶型，x-射线粉末衍射谱图在2θ角为5.360、5.779、6.855、8.846、11.606、13.965、17.663、18.713、21.559、22.333、22.880、23.420和25.381处有特征峰。
[0028]
本技术还提供了草酸盐d晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物和草酸与溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0029]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的e晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.923、7.402、13.649、15.392、16.905、21.033和21.973处有特征峰。
[0030]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的e晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.923、7.402、9.521、10.398、13.649、15.392、16.905、19.893、21.033和21.973处有特征峰。
[0031]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的e晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.923、7.402、9.521、10.398、13.649、14.904、15.392、16.905、19.893、21.033、21.973、24.413和28.933处有特征峰。
[0032]
本技术还提供了草酸盐e晶型的制备方法，包括将前述制备得到的草酸盐b晶型室温放置数天的步骤。
[0033]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的f晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.808、10.268、15.409、16.455、17.225、19.706和21.942处有特征峰。
[0034]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的f晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.808、8.507、9.339、10.268、13.608、15.409、16.455、17.225、19.706和21.942处有特征峰。
[0035]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的f晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.808、8.507、9.339、10.268、13.608、15.409、16.455、17.225、19.706、21.942、24.313、25.864和28.920处有特征峰。
[0036]
本技术还提供了草酸盐f晶型的制备方法，包括将前述制备得到的草酸盐c晶型室温放置数天的步骤。
[0037]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的g晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.444、15.865、17.019、19.808、20.842、21.336和22.051处有特征峰。
[0038]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的g晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.150、7.444、9.455、15.865、17.019、19.808、20.842、21.336、22.051和22.656处有特征峰。
[0039]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的g晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.150、7.444、9.455、13.670、15.302、15.865、17.019、19.808、20.842、21.336、22.051、22.656和23.130处有特征峰。
[0040]
本技术还提供了草酸盐g晶型的制备方法，包括将前述制备得到的草酸盐e晶型升温至120℃的步骤。
[0041]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的h晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.059、9.279、15.158、15.905、17.111、19.913和21.816处有特征峰。
[0042]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的草酸盐的h晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.059、9.279、10.623、15.158、15.905、17.111、18.504、19.913、21.816、25.824和29.147处有特征峰。
[0043]
本技术还提供了草酸盐h晶型的制备方法，包括将前述制备得到的草酸盐f晶型升温至120℃的步骤。
[0044]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.893、17.654、20.179、21.104、21.453、22.205和23.416处有特征峰。
[0045]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.281、15.894、16.893、17.654、19.479、20.179、21.104、21.453、22.205和23.416处有特征峰。
[0046]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.281、12.604、13.634、15.894、16.893、17.654、19.479、20.179、21.104、21.453、22.205、22.889和23.416处有特征峰。
[0047]
本技术还提供了酒石酸盐的i晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物和酒石酸酸
与溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0048]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的ii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.526、11.507、16.960、20.216、21.181、22.289和23.395处有特征峰。
[0049]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的ii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.526、11.507、13.673、16.960、20.216、21.181、22.289、23.395、25.975、27.634和29.246处有特征峰。
[0050]
本技术还提供了酒石酸盐的ii晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物和酒石酸与溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0051]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的iii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.280、14.572、15.143、18.434、20.347、22.056和23.657处有特征峰。
[0052]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的iii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.280、11.115、12.626、14.572、15.143、18.434、19.006、20.347、22.056和23.657处有特征峰。
[0053]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的iii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.280、11.115、12.626、14.572、15.143、16.344、18.434、19.006、19.281、20.347、22.056、22.448和23.657处有特征峰。
[0054]
本技术还提供了酒石酸盐的iii晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、溶剂(i)、酒石酸乙醇溶液和正庚烷混合；2)析晶的步骤。
[0055]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的iv晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.901、16.603、20.299、20.710、21.147、22.577和23.420处有特征峰。
[0056]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的iv晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.438、8.901、13.442、16.603、18.788、20.299、20.710、21.147、22.577和23.420处有特征峰。
[0057]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的iv晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.438、8.901、13.442、14.387、16.603、17.353、18.788、20.299、20.710、21.147、22.577、23.420和27.605处有特征峰。
[0058]
本技术还提供了酒石酸盐的iv晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、溶剂(i)、酒石酸乙醇溶液和正庚烷混合；2)析晶的步骤。
[0059]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的v晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.577、17.145、17.511、19.470、21.136、22.539和23.497处有特征峰。
[0060]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的v晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.862、14.389、16.577、17.145、17.511、19.470、21.136、22.539、23.497和25.942处有特征峰。
[0061]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的酒石酸盐的v晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.862、13.430、14.389、16.577、17.145、17.511、19.470、21.136、22.539、
23.497、25.942、27.572和34.379处有特征峰。
[0062]
本技术还提供了酒石酸盐的v晶型的制备方法，包括将前述制备得到的酒石酸盐ii晶型升温至120℃的步骤。
[0063]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.939、17.591、19.968、20.389、21.223、22.328和23.482处有特征峰。
[0064]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.909、13.695、16.939、17.591、19.968、20.389、21.223、22.328、23.482和25.929处有特征峰。
[0065]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.909、13.695、16.939、17.591、19.968、20.389、21.223、22.328、23.482、25.929、27.637和29.345处有特征峰。
[0066]
本技术还提供了苹果酸盐的a晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、苹果酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0067]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为11.505、15.445、16.174、20.299、21.025、21.686和23.225处有特征峰。
[0068]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.485、11.505、15.445、16.174、16.972、20.299、21.025、21.686、22.211和23.225处有特征峰。
[0069]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.294、8.485、11.505、14.415、15.445、16.174、16.972、20.299、21.025、21.686、22.211、23.225和26.562处有特征峰。
[0070]
本技术还提供了苹果酸盐的b晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、苹果酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0071]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.902、16.929、17.338、21.121、22.345、23.089和23.503处有特征峰。
[0072]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.902、16.929、17.338、20.380、21.121、22.345、23.089、23.503、27.485和28.935处有特征峰。
[0073]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的苹果酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.513、8.902、15.35、16.929、17.338、20.380、21.121、22.345、23.089、23.503、26.501、27.485和28.935处有特征峰。
[0074]
本技术还提供了苹果酸盐的c晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、苹果酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0075]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.894、16.942、17.681、19.814、21.003、22.326和23.410处有特征峰。
[0076]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为5.639、6.894、7.312、15.439、16.942、17.681、19.814、21.003、22.326和23.410处有特征峰。
[0077]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为5.639、6.894、7.312、8.362、15.439、16.942、17.681、18.878、19.814、21.003、22.326、23.410和26.507处有特征峰。
[0078]
本技术还提供了己二酸盐的i晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、己二酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0079]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的ii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.414、18.723、19.838、21.547、24.888、25.780和36.903处有特征峰。
[0080]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的ii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.414、17.105、18.723、19.838、21.078、21.547、24.888、25.780、31.158和36.903处有特征峰。
[0081]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的ii晶型，其优选x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.414、17.105、18.049、18.723、19.838、21.078、21.547、23.300、24.888、25.780、28.423、31.158和36.903处有特征峰。
[0082]
本技术还提供了己二酸盐的ii晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、己二酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0083]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的iii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.043、16.904、17.614、19.801、20.537、20.640和21.399处有特征峰。
[0084]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的iii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.043、16.904、17.614、18.777、19.801、20.537、20.640、21.399、22.040和22.820处有特征峰。
[0085]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的己二酸盐的iii晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.537、7.043、13.314、15.654、16.904、17.614、18.777、19.801、20.537、20.640、21.399、22.040和22.820处有特征峰。
[0086]
本技术还提供了己二酸盐的iii晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、己二酸、丙酮和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0087]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的甲磺酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.522、14.287、15.384、20.793、21.580、23.012和26.381处有特征峰。
[0088]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的甲磺酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.522、11.411、14.287、15.384、16.108、18.953、20.793、21.580、23.012和26.381处有特征峰。
[0089]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的甲磺酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.522、10.402、11.411、14.287、15.384、16.108、16.979、18.953、20.793、21.580、23.012、26.381和32.064处有特征峰。
[0090]
本技术还提供了甲磺酸盐的a晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、甲磺酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0091]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的甲磺酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为15.019、16.774、17.459、19.901、20.670、21.152和21.565处有特征峰。
[0092]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的甲磺酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为9.256、13.663、15.019、16.774、17.459、18.457、19.901、20.670、21.152和21.565处有特征峰。
[0093]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的甲磺酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.369、9.256、13.663、15.019、15.424、16.774、17.459、18.457、19.325、19.901、20.670、21.152和21.565处有特征峰。
[0094]
本技术还提供了甲磺酸盐的b晶型的制备方法，包括将前述制备得到的式(i)化合物甲磺酸盐的a晶型室温放置数天的步骤。
[0095]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的磷酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为17.008、19.512、19.784、20.140、21.109、22.006和22.708处有特征峰。
[0096]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的磷酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.207、9.804、17.008、18.124、19.512、19.784、20.140、21.109、22.006和22.708处有特征峰。
[0097]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的磷酸盐的i晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.207、9.804、14.959、17.008、18.124、19.512、19.784、20.140、21.109、22.006、22.708、26.494和30.067处有特征峰。
[0098]
本技术还提供了磷酸盐的i晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、磷酸水溶液和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0099]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的乙酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.433、7.144、17.124、19.593、21.686、22.791和23.240处有特征峰。
[0100]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的乙酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.433、7.144、14.328、17.124、19.593、20.281、20.699、21.686、22.791和23.240处有特征峰。
[0101]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的乙酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.433、7.144、13.768、14.328、17.124、18.066、19.593、20.281、20.699、20.952、21.686、22.791和23.240处有特征峰。
[0102]
本技术还提供了乙酸盐的α晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、乙酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0103]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的扁桃酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为4.680、5.023、9.295、10.094、17.889、20.326和23.633处有特征峰。
[0104]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的扁桃酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为4.680、5.023、9.295、10.094、17.889、18.712、20.326、21.574、22.720和23.633处有特征峰。
[0105]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的扁桃酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为4.680、5.023、8.260、9.295、10.094、12.942、16.711、17.889、18.712、20.326、21.574、22.720和23.633处有特征峰。
[0106]
本技术还提供了扁桃酸盐的a晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、扁桃酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0107]
进一步地，所述的式(i)所示化合物的扁桃酸盐的a晶型，其中式(i)所示化合物与扁桃酸的摩尔比为1:3-3:1，优选1:1。
[0108]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.295、16.738、20.787、21.807、22.396、23.004和28.755处有特征峰。
[0109]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.295、16.738、18.015、19.890、19.997、20.787、21.807、22.396、23.004和28.755处有特征峰。
[0110]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.295、16.738、18.015、19.890、19.997、20.787、21.807、22.396、23.004、23.568、25.441、28.755和29.358处有特征峰。
[0111]
本技术还提供了富马酸盐的α晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、富马酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0112]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的β晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为15.917、16.679、17.158、19.572、21.556、22.285和25.994处有特征峰。
[0113]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的β晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为13.507、15.917、16.679、17.158、19.572、21.556、22.285、23.348、25.994和29.264处有特征峰。
[0114]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的β晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为13.507、15.917、16.679、17.158、18.224、19.572、20.506、21.556、22.285、23.348、24.673、25.994和29.264处有特征峰。
[0115]
本技术还提供了富马酸盐的β晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、富马酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0116]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的γ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.141、16.571、17.159、19.323、20.208、21.238和22.744处有特征峰。
[0117]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的γ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为14.259、16.141、16.571、17.159、19.323、20.208、20.712、21.238、22.744和24.019处有特征峰。
[0118]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的γ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.960、13.417、14.259、16.141、16.571、17.159、19.323、20.208、20.712、21.238、22.744、23.553和24.019处有特征峰。
[0119]
本技术还提供了富马酸盐的γ晶型的制备方法，包括将前述制备得到的富马酸盐
的β晶型升温至120℃的步骤。
[0120]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的δ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为9.042、15.495、16.754、19.051、21.092、22.885和23.494处有特征峰。
[0121]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的δ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.568、9.042、15.495、16.754、17.235、19.051、21.092、22.249、22.885和23.494处有特征峰。
[0122]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的富马酸盐的δ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.568、9.042、13.634、14.622、15.495、16.754、17.235、19.051、21.092、22.249、22.885、23.494和32.201处有特征峰。
[0123]
本技术还提供了富马酸盐的δ晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物与溶剂(i)混合后加热；2)加入富马酸的乙腈溶液；3)析晶的步骤。
[0124]
进一步地，所述的式(i)所示化合物的富马酸盐的δ晶型，其中式(i)所示化合物与富马酸的摩尔比为1:3-3:1，优选1:1。
[0125]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.451、7.134、11.088、16.462、18.111、18.583和19.858处有特征峰。
[0126]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.451、7.134、11.088、13.445、16.462、17.038、18.111、18.583、19.858和20.399处有特征峰。
[0127]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的a晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.451、7.134、11.088、13.445、14.372、16.462、17.038、18.111、18.583、19.858、20.399、21.752和21.984处有特征峰。
[0128]
本技术还提供了琥珀酸盐的a晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、琥珀酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0129]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.099、16.488、16.966、17.942、18.659、19.963和20.302处有特征峰。
[0130]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.329、7.099、12.367、16.488、16.966、17.942、18.659、19.963、20.302和21.528处有特征峰。
[0131]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的b晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.329、7.099、12.367、16.488、16.966、17.942、18.659、19.963、20.302、21.528、22.011、22.971和24.781处有特征峰。
[0132]
本技术还提供了琥珀酸盐的b晶型的制备方法，包括将前述制备得到的琥珀酸盐的a晶型升温至80℃的步骤。
[0133]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.512、16.693、17.002、20.924、22.355、22.781和23.393处有特征峰。
[0134]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.512、14.515、15.371、16.693、17.002、18.953、20.924、22.355、22.781和23.393处有特征峰。
[0135]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的c晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.512、8.979、13.522、14.515、15.371、16.693、17.002、18.953、20.924、22.355、22.781、23.393和28.914处有特征峰。
[0136]
本技术还提供了琥珀酸盐的c晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物与溶剂(i)混合后加热；2)加入琥珀酸的乙腈溶液；3)析晶的步骤。
[0137]
进一步地，所述的式(i)所示化合物的琥珀酸盐的c晶型，其中式(i)所示化合物与琥珀酸的摩尔比为1:3-3:1，优选1:1。
[0138]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的d晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.501、16.736、17.928、20.910、22.328、22.758和23.376处有特征峰。
[0139]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的d晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.501、8.976、15.326、16.736、17.928、18.869、20.910、22.328、22.758和23.376处有特征峰。
[0140]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的琥珀酸盐的d晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.501、8.976、13.533、14.491、15.326、16.736、17.928、18.869、20.910、22.328、22.758、23.376和28.915处有特征峰。
[0141]
本技术还提供了琥珀酸盐的d晶型的制备方法，包括1)将前述制备得到的琥珀酸盐的c晶型与溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0142]
进一步地，所述的式(i)所示化合物的琥珀酸盐的d晶型，其中式(i)所示化合物与琥珀酸的摩尔比为1:3-3:1，优选1:1。
[0143]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为16.910、19.924、20.615、21.652和22.344处有特征峰。
[0144]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.819、16.910、19.924、20.615、21.652、22.344和23.467处有特征峰。
[0145]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为8.819、11.801、16.910、19.924、20.615、21.652、22.344、23.467和25.930处有特征峰。
[0146]
本技术还提供了柠檬酸盐的α晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、柠檬酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0147]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的β晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.237、8.136、10.958、11.407、12.554、19.523和20.418处有特征峰。
[0148]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的β晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为6.237、8.136、10.958、11.407、12.554、14.303、18.437、19.523和20.418处有特征峰。
[0149]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的β晶型，其x-射线粉末衍射
谱图在2θ角为6.237、8.136、10.958、11.407、12.554、13.316、14.303、15.393、18.437、19.523和20.418处有特征峰。
[0150]
本技术还提供了柠檬酸盐的β晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、柠檬酸、溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0151]
进一步地，所述的式(i)所示化合物的柠檬酸盐的β晶型，其中式(i)所示化合物与柠檬酸的摩尔比为1:3-3:1，优选1:1。
[0152]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的γ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.528、8.063、11.423、18.245、18.937、19.776和20.594处有特征峰。
[0153]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的γ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.528、8.063、11.423、14.417、15.168、18.245、18.937、19.776、20.594和21.090处有特征峰。
[0154]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的柠檬酸盐的γ晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为7.528、8.063、11.423、14.417、15.168、18.245、18.937、19.776、20.594、21.090、22.681和24.237处有特征峰。
[0155]
本技术还提供了柠檬酸盐的γ晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、柠檬酸、溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0156]
进一步地，所述的式(i)所示化合物的柠檬酸盐的γ晶型，其中式(i)所示化合物与柠檬酸的摩尔比为1:3-3:1，优选1:1。
[0157]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为4.912、5.221、8.129、8.422、9.826、21.541和22.173处有特征峰。
[0158]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为4.912、5.221、8.129、8.422、9.826、11.802、18.032、21.541、22.173和22.921处有特征峰。
[0159]
进一步地，本公开提供式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型，其x-射线粉末衍射谱图在2θ角为4.912、5.221、8.129、8.422、9.826、11.802、16.333、18.032、19.768、21.541、22.173、22.921和23.734处有特征峰。
[0160]
本技术还提供了硫酸盐的α晶型的制备方法，包括1)将式(i)化合物、硫酸和溶剂(i)混合；2)析晶的步骤。
[0161]
进一步地，前述晶型制备过程中所述的溶剂(i)选自水、甲醇、正丙醇、异丙醇、乙醇、异丙醚、四氢呋喃、乙酸异丙酯、丙酮、丁酮、甲基叔丁基醚、乙腈、1,4-二氧六环、乙酸乙酯、正庚烷和正己烷中的一种或多种。
[0162]
进一步地，所述溶剂(i)所用体积(ml)为化合物重量(g)的1～100倍，可以为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100倍。
[0163]
可选的实施方案中，本公开提供式(i)所示化合物上述所有晶型，其中，所述2θ角度的误差范围为
±
0.2。
[0164]
本公开还提供了由前述式(i)所示化合物药学上可接受的盐或药学上可接受的盐的晶型制备得到的药物组合物。
[0165]
本公开还提供了一种药物组合物，包含如下组分：i)前述式(i)所示化合物药学上可接受的盐，或者药学上可接受的盐的晶型，和ii)任选自药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0166]
本公开还提供了一种药物组合物的制备方法，包括将前述组分i)和组分ii)混合的步骤。
[0167]
本公开还提供了前述式(i)所示化合物的药学上可接受的盐或者前述式(i)所示化合物的药学上可接受的盐的晶型或前述组合物或由前述方法制备得到的组合物在制备雌激素受体调节剂中的用途。
[0168]
本公开还提供了前述式(i)所示化合物的药学上可接受的盐或者前述式(i)所示化合物的药学上可接受的盐的晶型或前述组合物或由前述方法制备得到的组合物在制备预防和/或治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途，优选所述雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症为癌症，更优选为乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或子宫癌，最优选乳腺癌。
[0169]
本公开所述的“2θ或2θ角度”是指衍射角，θ为布拉格角，单位为
°
或度；每个特征峰2θ的误差范围为
±
0.20，可以为-0.20、-0.19、-0.18、-0.17、-0.16、-0.15、-0.14、-0.13、-0.12、-0.11、-0.10、-0.09、-0.08、-0.07、-0.06、-0.05、-0.04、-0.03、-0.02、-0.01、0.00、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10、0.11、0.12、0.13、0.14、0.15、0.16、0.17、0.18、0.19、0.20。
[0170]
本公开所述的“结晶析出”“析晶”包括但不限于搅拌结晶、打浆结晶和挥发结晶。
[0171]
本公开所述晶型的制备方法中还包括过滤，干燥等步骤。
[0172]
本公开中所述干燥温度一般为25℃-100℃，优选40℃-70℃，可以常压干燥，也可以减压干燥。
附图说明
[0173]
图1.式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型的xrpd谱图；
[0174]
图2.式(i)所示化合物的草酸盐的b晶型的xrpd谱图；
[0175]
图3.式(i)所示化合物的草酸盐的c晶型的xrpd谱图；
[0176]
图4.式(i)所示化合物的草酸盐的d晶型的xrpd谱图；
[0177]
图5.式(i)所示化合物的草酸盐的e晶型的xrpd谱图；
[0178]
图6.式(i)所示化合物的草酸盐的f晶型的xrpd谱图；
[0179]
图7.式(i)所示化合物的草酸盐的g晶型的xrpd谱图；
[0180]
图8.式(i)所示化合物的草酸盐的h晶型的xrpd谱图；
[0181]
图9.式(i)所示化合物的酒石酸盐的i晶型xrpd谱图；
[0182]
图10.式(i)所示化合物的酒石酸盐的ii晶型xrpd谱图；
[0183]
图11.式(i)所示化合物的酒石酸盐的iii晶型xrpd谱图；
[0184]
图12.式(i)所示化合物的酒石酸盐的iv晶型xrpd谱图；
[0185]
图13.式(i)所示化合物的酒石酸盐的v晶型xrpd谱图；
[0186]
图14.式(i)所示化合物的苹果酸盐的a晶型xrpd谱图；
[0187]
图15.式(i)所示化合物的苹果酸盐的b晶型xrpd谱图；
[0188]
图16.式(i)所示化合物的苹果酸盐的c晶型xrpd谱图；
[0189]
图17.式(i)所示化合物的己二酸盐的i晶型xrpd谱图；
[0190]
图18.式(i)所示化合物的己二酸盐的ii晶型xrpd谱图；
[0191]
图19.式(i)所示化合物的己二酸盐的iii晶型xrpd谱图；
[0192]
图20.式(i)所示化合物的甲磺酸盐的a晶型xrpd谱图；
[0193]
图21.式(i)所示化合物的甲磺酸盐的b晶型xrpd谱图；
[0194]
图22.式(i)所示化合物的磷酸盐的i晶型xrpd谱图；
[0195]
图23.式(i)所示化合物的乙酸盐的α晶型xrpd谱图；
[0196]
图24.式(i)所示化合物的扁桃酸盐的a晶型xrpd谱图；
[0197]
图25.式(i)所示化合物的富马酸盐的α晶型xrpd谱图；
[0198]
图26.式(i)所示化合物的富马酸盐的β晶型xrpd谱图；
[0199]
图27.式(i)所示化合物的富马酸盐的γ晶型xrpd谱图；
[0200]
图28.式(i)所示化合物的富马酸盐的δ晶型xrpd谱图；
[0201]
图29.式(i)所示化合物的琥珀酸盐的a晶型xrpd谱图；
[0202]
图30.式(i)所示化合物的琥珀酸盐的b晶型xrpd谱图；
[0203]
图31.式(i)所示化合物的琥珀酸盐的c晶型xrpd谱图；
[0204]
图32.式(i)所示化合物的琥珀酸盐的d晶型xrpd谱图；
[0205]
图33.式(i)所示化合物的柠檬酸盐的α晶型xrpd谱图；
[0206]
图34.式(i)所示化合物的柠檬酸盐的β晶型xrpd谱图；
[0207]
图35.式(i)所示化合物的柠檬酸盐的γ晶型xrpd谱图；
[0208]
图36.式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型xrpd谱图；
具体实施方式
[0209]
以下将结合实施例更详细地解释本发明，本发明的实施例仅用于说明本发明的技术方案，并非限定本发明的实质和范围。
[0210]
实验所用仪器的测试条件：
[0211]
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr位移(δ)以10-6
(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪或bruker avance neo 500m，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0212]
ms的测定用agilent 1200/1290dad-6110/6120quadrupole ms液质联用仪(生产商：agilent，ms型号：6110/6120quadrupole ms)。
[0213]
waters acquity uplc-qd/sqd(生产商：waters，ms型号：waters acquity qda detector/waters sq detector)
[0214]
thermo ultimate 3000-q exactive(生产商：thermo，ms型号：thermo q exactive)
[0215]
高效液相色谱法(hplc)分析使用agilent hplc 1200dad、agilent hplc1200vwd
和waters hplc e2695-2489高压液相色谱仪。
[0216]
手性hplc分析测定使用agilent 1260dad高效液相色谱仪。
[0217]
高效液相制备使用waters 2545-2767、waters 2767-sq detecor2、shimadzu lc-20ap和gilson gx-281制备型色谱仪。
[0218]
手性制备使用shimadzu lc-20ap制备型色谱仪。
[0219]
离子色谱使用thermo scientific dionex intergrion，色谱柱型号：dionexionpactm as11-hc(4μm，4
×
250cm)。
[0220]
xrpd为x射线粉末衍射检测：测定使用bruker d8 discover型x射线衍射仪进行，具体采集信息：cu阳极(40kv，40ma)，cu-kα射线扫描方式：θ/2θ，扫描范围(2θ范围)：3～50
°
。
[0221]
dsc为差示扫描量热：测定采用mettler toledo dsc 3 示差扫描量热仪，升温速率10℃/min，温度具体范围参照相应图谱(多为25-300或25-350℃)，氮气吹扫速度50ml/min。
[0222]
tga为热重分析：检测采用mettler toledo tga 2型热重分析仪，升温速率10℃/min，温度具体范围参照相应图谱(多为25-300℃)，氮气吹扫速度50ml/min。
[0223]
dvs为动态水分吸附：检测采用sms dvs advantage，在25℃，湿度变化为50％-95％-0％-95％-50％，步进为10％(最后一步为5％)(湿度具体范围以相应图谱为准，此处所列为大多使用方法)，判断标准为dm/dt不大于0.002％。
[0224]
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
[0225]
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
[0226]
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(tlc)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：a：二氯甲烷/甲醇体系，b：正己烷/乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
[0227]
实施例1、式i化合物(e)-1-吗啉基-4-((1-(((5-((z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-1h-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)氨基)丁-2-烯-1-酮的制备
[0228][0229]
第一步：(1-(((5-碘吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯1c
[0230]
将氢化钠(0.4g,10.7mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)，室温下加入1-(羟甲基)环丙基氨基甲酸叔丁酯1b(1.0g,5.3mmol，采用公知的方法“journal of organic chemistry,2002,67(11),3965-3968”制备而得)，加完后缓慢加入2-氟-5-碘吡啶1a(1.8g,8.0mmol)。室温搅拌2小时后停止反应。反应液减压浓缩，残余物用薄层色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题产物1c(2.4g)，产率：86％。
[0231]
ms m/z(esi):391.0[m 1]
[0232]
第二步：(z)-(1-(((5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯1f
[0233]
将3-氟-1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-5-(4,4,4-三氟丁-1-炔-1-基)-1h-吲唑1d(1.8g,5.5mmol,采用专利申请wo2018098305中说明书第84页的实施例3公开的方法制备得到)溶于甲基四氢呋喃(40ml)，加入双联频哪醇硼酸酯(1.7g,6.6mmol)，四三苯基膦铂(137mg,0.1mmol)，抽换氩气3次，升温至85℃搅拌3小时。冷却至室温，加入化合物1c(2.0g,5.2mmol)，双三苯基磷二氯化钯(741mg,1.1mmol)，碳酸铯(3.6g,11.0mmol)和水(1ml)，室温搅拌过夜。加入碘苯1e(1.2g,6.1mmol)，氢氧化钾(1.5g,27.6mmol)，抽换氩气3次，升温至85℃搅拌2小时后冷却至室温停止反应。反应液减压浓缩，残余物用薄层色谱法以展开剂体系b纯化所得残余物，得到标题产物1f(3.0g)，产率：88％。
[0234]
ms m/z(esi):667.2[m 1]
[0235]
第三步：(z)-(1-(((5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2h-吡喃-2-基)-1h-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)-1-胺1g
[0236]
将化合物1f(1.8g,2.7mmol)溶于二氯甲烷(15ml)，加入三氟乙酸(3ml)，室温搅拌反应5小时，停止反应。反应液减压浓缩，用饱和碳酸氢钠溶液(100ml)将反应液调至ph 8左右，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到标题产物1g粗品(1.4g)，产率：89％，产物不经纯化直接进行下一步反应。
[0237]
第四步：(e)-1-吗啉基-4-((1-(((5-((z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2h-吡
喃-2-基)-1h-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)氨基)丁-2-烯-1-酮1i
[0238]
将化合物1g(1.7g,2.8mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)，室温下加入二异丙基乙胺(1.1g，8.5mmol)，然后加入(e)-4-溴-1-吗啡啉基丁-2-烯-1-酮1h(0.7g,2.8mmol，采用专利申请us2016347717中说明书第65页的实施例15公开的方法制备得到)，搅拌反应2小时。停止并冷却反应，加入饱和碳酸氢钠溶液(15ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml
×
2)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(50ml
×
4)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题产物1i(1.3g)，产率：65％。
[0239]
ms m/z(esi):720.2[m 1]
[0240]
第五步：(e)-1-吗啉基-4-((1-(((5-((z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-1h-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)环丙基)氨基)丁-2-烯-1-酮i
[0241]
将化合物1i(2.0g,2.8mmol)溶于甲醇(5ml)，加入盐酸(12n,10ml)搅拌反应3小时。停止并冷却反应，浓缩反应液，加入饱和碳酸氢钠溶液(15ml)，用二氯甲烷萃取(50ml
×
4)，合并有机相，依次用水洗(30ml
×
3)，饱和氯化钠溶液洗涤(50ml)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系a纯化所得残余物，得到标题产物1(1.3g)，产率：73％。
[0242]
ms m/z(esi):636.2[m 1]；
[0243]1h nmr(400mhz,cd3od)7.65(d,2h),7.49(d,1h),7.30-7.22(m,7h),6.82-6.76(m,1h),6.60-6.52(m,2h),4.15(s,2h),3.62-3.39(m,12h),0.76-0.64(m,4h)。经x-射线粉末衍射检测，该产物晶型为无定型。
[0244]
测试例1：式i化合物对雌激素受体报告基因活性的抑制作用的测定
[0245]
1、实验目的
[0246]
本实验的目的是测试本公开化合物对雌激素受体报告基因活性的抑制作用，根据ic
50
大小评价化合物的体外活性。
[0247]
2、实验方法
[0248]
表达雌激素受体反应元件控制的荧光素酶报告基因ere-luc(金唯智生物科技有限公司合成)的mcf7细胞(atcc，htb-22)mcf7/ere-luc使用含有10％胎牛血清和500μg/ml g418的mem(ge healthcare，sh30024.01)培养基进行培养。实验第一天，使用含有10％活性炭处理的胎牛血清(biosun，bs-0004-500)的mem不完全培养基将mcf7/ere-luc细胞以30,000个/孔的密度种于96孔板，每孔100μl细胞悬液，放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养过夜。第二天，每孔加入10μl用不完全培养基配制的β-雌二醇和不同浓度的待测化合物，β-雌二醇的终浓度是0.1nm，化合物的终浓度是从10μm开始进行10倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养20小时。第三天，取出96孔板，每孔加入100μl one-glo
tm
luciferase assay system(promega，e6110)检测荧光素酶的活性，室温放置3分钟至细胞充分裂解后，使用多标记微孔板酶标仪(perkinelmer，victor 3)读取发光信号值，用graphpad prism软件根据化合物的浓度和发光信号值计算化合物抑制活性的ic
50
值。
[0249]
3、测试结果
[0250]
本公开中化合物对雌激素受体报告基因活性的抑制作用通过以上的试验进行测
定，用graghpad prism对化学发光信号值与化合物的对数浓度作图，测得式i化合物的ic
50
值为1nm。
[0251]
因此，本公开化合物对雌激素受体报告基因具有明显的抑制作用。
[0252]
测试例2：本公开化合物对mcf7细胞增殖的抑制效应
[0253]
1、实验目的
[0254]
本实验的目的是测定本公开化合物对mcf7细胞增殖的抑制活性，根据ic
50
大小评价化合物的体外活性。
[0255]
2、实验方法
[0256]
mcf7细胞(atcc，htb-22)用含有10％胎牛血清的mem(ge healthcare，sh30024.01)完全培养基进行培养。实验第一天，使用完全培养基将mcf7细胞以3,000个/孔的密度种于96孔板，每孔100μl细胞悬液，放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养过夜。第二天吸掉培养基，每孔更换为135μl含有2％胎牛血清的mem不完全培养基，同时每孔加入15μl用不完全培养基配制的不同浓度的待测化合物，化合物的终浓度是从100nm开始进行4倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养144小时。第八天，取出96孔细胞培养板，每孔加入150μl luminescent cell viability assay(promega，g7573)，室温放置10分钟后，使用多标记微孔板酶标仪(perkinelmer，victor 3)读取发光信号值，用graphpad prism软件根据化合物的浓度和发光信号值计算化合物抑制活性的ic
50
值。
[0257]
3、数据分析
[0258]
用graghpad prism对化学发光信号值与化合物的对数浓度作图，得出化合物的ic
50
值为0.5nm，结果显示本公开化合物对mcf7细胞增殖具有明显的抑制作用。
[0259]
测试例3：表达erα突变体mcf7细胞增殖抑制实验生物学评价
[0260]
1、实验目的
[0261]
本实验的目的是测定本公开化合物对表达erα突变体mcf7细胞增殖的抑制活性。
[0262]
2、实验方法
[0263]
定点突变和细胞系构建
[0264]
人雌激素受体α(estrogen receptorα，erα)蛋白的突变体erαy537s与erαd538g使用双引物pcr的方式以野生型esr1基因的cdna(accession no.nm000125)为模板进行定点突变获得。突变所使用的引物序列如下(下划线标出的核苷酸为突变的位点)：y537s:f-aag aac gtg gtg ccc ctc tct gac ctg ctg ctg gag atg；r-cat ctc cag cag cag gtc aga gag ggg cac cac gtt ctt；d538g:f-aac gtg gtg ccc ctc tat ggc ctg ctg ctg gag atg ctg；r-cag cat ctc cag cag cag gcc ata gag ggg cac cac gtt。将突变体esr1的cdna克隆至目标慢病毒载体pcdh-cmv-mcs-ef1-puro上。然后将带有突变体esr1基因序列的慢病毒质粒以及慢病毒包装质粒通过lipofectamine 3000 transfection reagent(thermofisher scientific，cat#l3000075)转染到hek-293t细胞(atcc，crl-3216)中。转染后48小时，将带有病毒的培养基上清过滤、超速离心获得病毒沉淀，用适量的培养基重悬溶解后，加入到mcf7细胞(atcc，htb-22)中，并加入终浓度为8μg/ml的polybrene孵育过夜。转染两天后，在细胞培养液中加入1μg/ml的嘌呤霉素进行抗性筛选，约两周后得到能够稳定表达erαy537s与erαd538g突变体的mcf7细胞系。
[0265]
细胞增殖抑制实验
[0266]
将表达erα突变体的mcf7细胞用含有10％胎牛血清的mem(ge healthcare，sh30024.01)完全培养基进行培养。实验第一天，使用完全培养基将细胞以3,000个/孔的密度种于96孔板，每孔100μl细胞悬液，放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养过夜。第二天吸掉培养基，每孔更换为135μl含有2％胎牛血清的mem不完全培养基，同时每孔加入15μl用不完全培养基配制的不同浓度的待测化合物，化合物的终浓度是从100nm开始进行4倍梯度稀释的9个浓度点，设置含有0.5％dmso的空白对照，放置37℃，5％co2的细胞培养箱培养144小时。第八天，取出96孔细胞培养板，每孔加入150μlluminescent cell viability assay(promega，g7573)，室温放置10分钟后，使用多标记微孔板酶标仪(perkinelmer，victor 3)读取发光信号值，用graphpad prism软件根据化合物的浓度和发光信号值计算化合物抑制活性的ic
50
值，本公开化合物对表达erα突变体mcf7 d538g细胞增殖的抑制效应的ic
50
为2nm，对表达erα突变体mcf7erαy537s细胞增殖的抑制效应的ic
50
为3nm，结果显示本公开化合物对表达erα突变体mcf7细胞增殖具有明显的抑制作用。
[0267]
测试例4、本公开化合物的balb/c裸鼠药代动力学测试
[0268]
1、摘要
[0269]
以balb/c裸鼠为受试动物，应用lc/ms/ms法测定了balb/c裸鼠灌胃给予式i化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本公开式i化合物在balb/c裸鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
[0270]
2、试验方案
[0271]
2.1试验药品
[0272]
式i化合物。
[0273]
2.2试验动物
[0274]
balb/c裸鼠36只，雌性，平均分成4组，9只为1组，购自杰思捷实验动物有限公司提供，动物生产许可证号scxk(沪)2013-0006。
[0275]
2.3药物配制
[0276]
称取适量样品，加5％体积的dmso、5％体积的吐温80和90％体积的生理盐水配制成0.1mg/ml的无色澄清透明液体。
[0277]
2.4给药
[0278]
禁食一夜后分别灌胃给药，给药体积0.2ml/10g，式i化合物给药剂量为30mg/kg。
[0279]
3、操作
[0280]
balb/c裸鼠36只，雌性；禁食一夜后灌胃给药。于给药后0.5,1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,11.0,24.0h采血0.1ml(每个时间点3只动物)，置于肝素化试管中，3500rpm离心10min分离血浆，于-20℃保存。测定不同浓度的药物灌胃给药后裸鼠血浆中的待测化合物含量：取给药后各时刻的裸鼠血浆25μl，加入内标溶液喜树碱40μl(100ng/ml)，乙腈200μl，涡旋混合5分钟，离心10分钟(4000转/分钟)，血浆样品取上清液0.5μl进行lc/ms/ms分析。
[0281]
4、balb/c裸鼠药代动力学参数结果
[0282]
本公开式i化合物的药代动力学参数如下：
[0283][0284]
结论：本公开化合物的药代吸收良好，具有明显的药代吸收效果。
[0285]
测试例5、雌激素受体erα野生型和erαy537s突变型共价修饰生物学评价
[0286]
1、实验目的
[0287]
本实验的目的是测定本公开化合物对雌激素受体erα野生型和erαy537s突变型的共价修饰作用。
[0288]
2、实验方法
[0289]
雌激素受体erα野生型和erαy537s突变型的配体结合区域(lbd,ligand binding domain,aa296-554)由大肠杆菌表达并纯化。将2μm erα野生型或erαy537s突变型蛋白和10μm化合物加入到含有50mm tris-hcl,ph7.5,150mm nacl,1mm tcep,5％glycerol的缓冲液中混匀，置于4℃孵育24小时后，进行高分辨质谱检测。或者将1μm erα野生型或erαy537s突变型蛋白和3μm化合物加入到含有50mm tris-hcl,ph7.5,150mm nacl,1mm tcep,5％glycerol的缓冲液中混匀，置于37℃孵育15分钟后，进行高分辨质谱检测。在质谱检测结果图谱中分子量为蛋白与化合物之和的峰即为共价修饰产物，通过计算未结合化合物蛋白与总蛋白的比值算出共价修饰的百分比。
[0290]
共价修饰24小时后共价修饰比：
[0291][0292]
结论：测试化合物对erα野生型或erαy537s突变型蛋白均具有很好的共价修饰作用。
[0293]
实施例2、草酸盐a晶型的制备
[0294]
称量10mg式(i)化合物和3.3mg草酸，加入500μl乙醇室温搅拌溶清，慢挥发得结晶产物。
[0295]
经x-射线粉末衍射检测，将该产物定义为晶型a，xrpd谱图如图1，峰位置如表1所示。
[0296]
表1.草酸盐a晶型峰位置
[0297]
[0298][0299]
dsc谱图显示吸热峰峰值68.81℃、85.48℃、133.49℃；tga谱图显示25℃-150℃失重6.33％。
[0300]
实施例3、草酸盐b晶型的制备
[0301]
称量10mg式(i)化合物和3.3mg草酸，加入500μl 10％水/丙酮室温搅拌溶清，慢挥发得结晶产物。
[0302]
经x-射线粉末衍射检测，将该产物定义为晶型b，xrpd谱图如图2，峰位置如表2所示。
[0303]
表2.草酸盐b晶型峰位置
[0304]
[0305][0306]
dsc谱图显示吸热峰峰值58.47℃、98.13℃、144.62℃；tga谱图显示25℃-150℃失重3.92％。
[0307]
实施例4、草酸盐c晶型的制备
[0308]
称量10mg式(i)化合物和3.3mg草酸，加入500μl 10％水/甲醇室温搅拌溶清，慢挥发得结晶产物。
[0309]
经x-射线粉末衍射检测，将该产物定义为晶型c，xrpd谱图如图3，峰位置如表3所示。
[0310]
表3.草酸盐c晶型峰位置
[0311]
[0312][0313]
dsc谱图显示吸热峰峰值68.79℃、141.45℃；tga谱图显示25℃-150℃失重1.87％。
[0314]
实施例5、草酸盐d晶型的制备
[0315]
称量10mg式(i)化合物和3.3mg草酸，加入500μl四氢呋喃溶剂搅拌过夜后析出固体，离心干燥得产物，经x-射线粉末衍射检测，该产物定义为晶型d，如图4，峰位置如表4所示。
[0316]
dsc谱图显示吸热峰峰值172.06℃；tga谱图显示25℃-150℃失重4.03％。
[0317]
表4.草酸盐d晶型峰位置
[0318]
[0319][0320]
实施例6、草酸盐e晶型的制备
[0321]
取实施例3制备得到的b晶型室温放置数天，经x-射线粉末衍射检测，晶型发生转变，将该产物定义为晶型e，xrpd谱图如图5，峰位置如表5所示。
[0322]
表5.草酸盐e晶型峰位置
[0323][0324]
实施例7、草酸盐f晶型的制备
[0325]
取实施例3制备得到的c晶型室温放置数天，经x-射线粉末衍射检测，晶型发生转变，将该产物定义为晶型f，xrpd谱图如图6，峰位置如表6所示。
[0326]
表6.草酸盐f晶型峰位置
[0327]
[0328][0329]
实施例8、草酸盐g晶型的制备
[0330]
取实施例6制备得到的e晶型升温至120℃，经x-射线粉末衍射检测，晶型发生转变，将该产物定义为晶型g，xrpd谱图如图7，峰位置如表7所示。
[0331]
表7.草酸盐g晶型峰位置
[0332][0333]
实施例9、草酸盐h晶型的制备
[0334]
取实施例7制备得到的f晶型升温至120℃，经x-射线粉末衍射检测，晶型发生转变，将该产物定义为晶型h，xrpd谱图如图8，峰位置如表8所示。
[0335]
表8.草酸盐h晶型峰位置
[0336]
[0337][0338]
实施例10、酒石酸盐的i晶型的制备
[0339]
称量10mg式(i)化合物和3.9mg酒石酸，加入500μl乙醇溶剂搅拌溶清，慢挥发得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，将该产物晶型定义为晶型i，如图9，峰位置如表9所示。
[0340]
表9.酒石酸盐i晶型峰位置
[0341][0342]
dsc谱图显示吸热峰峰值76.05℃；tga谱图显示25℃-190℃失重3.91％。
[0343]
实施例11、酒石酸盐的ii晶型的制备
[0344]
称量10mg式(i)化合物和3.9mg酒石酸，加入500μl10％水/丙酮溶剂搅拌溶清，慢挥发得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，将该产物晶型定义为晶型ii，如图10，峰位置如
表10所示。
[0345]
表10.酒石酸盐ii晶型峰位置
[0346][0347]
dsc谱图显示吸热峰峰值61.14℃、94.64℃、136.14℃；tga谱图显示25℃-170℃失重2.48％。
[0348]
实施例12、酒石酸盐的iii晶型的制备
[0349]
称量10mg的式(i)化合物，加入100μl乙酸乙酯溶剂和39μl 67mg/ml的酒石酸乙醇溶液搅拌溶清，加入200μl正庚烷析出，1天后离心干燥得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，将该产物晶型定义为晶型iii，如图11，峰位置如表11所示。
[0350]
表11.酒石酸盐iii晶型峰位置
[0351][0352]
[0353]
dsc谱图显示吸热峰峰值112.13℃；tga谱图显示25℃-150℃失重3.97％。
[0354]
实施例13、酒石酸盐的iv晶型的制备
[0355]
称量10mg的式(i)化合物，加入100μl丙酮溶剂搅拌澄清，加入39μl 67mg/ml的酒石酸乙醇溶液澄清，加入200μl正庚烷出现混浊，1天后离心干燥得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，将该产物晶型定义为晶型iv，如图12，峰位置如表12所示。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与酒石酸的摩尔比为1:1。
[0356]
表12.酒石酸盐iv晶型峰位置
[0357][0358]
[0359]
dsc谱图显示吸热峰峰值158.39℃；tga谱图显示25℃-150℃失重2.03％。
[0360]
实施例14、酒石酸盐的v晶型的制备
[0361]
取实施例11制备得到的ii晶型升温至120℃，经x-射线粉末衍射检测，晶型发生转变，将该产物定义为晶型v，xrpd谱图如图13，峰位置如表13所示。
[0362]
表13.酒石酸盐v晶型峰位置
[0363][0364]
实施例15、苹果酸盐的a晶型的制备
[0365]
称量10mg式(i)化合物和3.5mg苹果酸，加入500μl乙醇溶剂搅拌溶清，2天有固体析出，升降温后极少量的不溶物，慢挥发得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，该产物定义为晶型a，xrpd谱图如图14，峰位置如表14所示。
[0366]
dsc谱图显示吸热峰峰值为59.48℃、127.46℃；tga谱图显示25℃-150℃失重1.16％。
[0367]
表14.苹果酸盐a晶型峰位置
[0368][0369]
[0370]
实施例16、苹果酸盐的b晶型的制备
[0371]
称量10mg式(i)化合物和3.5mg苹果酸，加入500μl 10％水/甲醇溶剂搅拌溶清，慢挥发得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，该产物定义为晶型b，xrpd谱图如图15，峰位置如表15所示。
[0372]
dsc谱图显示吸热峰峰值为132.59℃；tga谱图显示25℃-150℃失重0.90％。
[0373]
表15.苹果酸盐b晶型峰位置
[0374][0375]
实施例17、苹果酸盐的c晶型的制备
[0376]
称量200mg式(i)化合物和46.4mg苹果酸，加入3.34ml 10％水/甲醇溶剂搅拌溶清，慢挥发得结晶产物，经x-射线粉末衍射检测，该产物定义为晶型c，xrpd谱图如图16，峰位置如表16所示。
[0377]
表16.苹果酸盐c晶型峰位置
[0378][0379]
dsc谱图显示吸热峰峰值为155.30℃；tga谱图显示25℃-160℃失重0.86％。
[0380]
实施例18、己二酸盐的i晶型的制备
[0381]
称量10mg式(i)化合物和3.8mg己二酸，加入500μl 10％水/丙酮溶剂搅拌溶清，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测，定义产物为晶型i。xrpd谱图如图17，峰位置如表17所示。
[0382]
dsc谱图显示吸热峰峰值为109.83℃、119.80℃；tga谱图显示25℃-150℃失重2.14％。
[0383]
表17.己二酸盐的i晶型峰位置
[0384][0385]
实施例19、己二酸盐的ii晶型的制备
[0386]
称量10mg式(i)化合物和3.8mg己二酸，加入500μl 10％水/甲醇溶剂搅拌溶清，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测，定义产物为晶型ii。xrpd谱图如图18，峰位置如表18所示。
[0387]
dsc谱图显示吸热峰峰值为118.47℃；tga谱图显示25℃-150℃失重1.35％。
[0388]
表18.己二酸盐的ii晶型峰位置
[0389]
[0390][0391]
实施例20、己二酸盐的iii晶型的制备
[0392]
称量10mg的式(i)化合物，加入100μl 10％水/丙酮溶剂澄清，加入25.3μl100mg/ml的己二酸溶液无析出，加入200μl丙酮无析出，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测，定义产物为晶型iii。xrpd谱图如图19，峰位置如表19所示。dsc谱图显示吸热峰峰值为123.05℃。
[0393]
表19.己二酸盐的iii晶型峰位置
[0394][0395]
实施例21、甲磺酸盐的a晶型的制备
[0396]
称量15mg式(i)化合物，加入500μl 10％水/丙酮溶剂搅拌澄清，加入1.7μl甲磺酸无析出，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测，定义产物为晶型a。xrpd谱图如图20，峰位置如表20所示。
[0397]
dsc谱图显示吸热峰峰值为85.48℃、143.82℃；tga谱图显示25℃-150℃失重2.37％。
[0398]
表20.甲磺酸盐的a晶型峰位置
[0399][0400]
实施例22、甲磺酸盐的b晶型的制备
[0401]
将实施例21制备得到的甲磺酸盐的a晶型室温放置数天后，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型b。xrpd谱图如图21，峰位置如表21所示。
[0402]
表21.甲磺酸盐的b晶型峰位置
[0403]
[0404][0405]
实施例23、磷酸盐的i晶型的制备
[0406]
称量15mg式(i)化合物，加入500μl 10％水/丙酮溶剂搅拌澄清，加入1m磷酸水溶液26.0μl无析出，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型i。xrpd谱图如图22，峰位置如表22所示。dsc谱图显示吸热峰峰值为83.46℃、143.94℃；tga谱图显示25℃-150℃失重2.21％。
[0407]
表22.磷酸盐的i晶型峰位置
[0408][0409]
实施例24、乙酸盐的α晶型的制备
[0410]
称量15mg式(i)化合物，加入500μl四氢呋喃溶剂搅拌澄清，加入1m乙酸水溶液26.0μl无析出，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型α。xrpd谱图如图23，峰位置如表23所示。dsc谱图显示吸热峰峰值为84.41℃、150.48℃、185.91℃；tga谱图显示25℃-110℃失重5.99％。
[0411]
表23.乙酸盐的α晶型峰位置
[0412]
[0413][0414]
实施例25、扁桃酸盐的a晶型的制备
[0415]
称量200mg式(i)化合物和52.7mg扁桃酸，加入2.7ml乙醇，室温搅拌得产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型a。xrpd谱图如图24，峰位置如表24所示。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与扁桃酸的摩尔比为1:1。dsc谱图显示吸热峰峰值156.31℃；tga谱图显示25℃-150℃失重0.78％。
[0416]
表24.扁桃酸盐的a晶型峰位置
[0417]
[0418][0419]
实施例26、富马酸盐的α晶型的制备
[0420]
称量10mg式(i)化合物和3mg富马酸，加入500μl乙醇溶剂搅拌溶清，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型α。xrpd谱图如图25，峰位置如表25所示。dsc谱图显示吸热峰峰值44.15℃、77.13℃、154.77℃；tga谱图显示25℃-150℃失重1.86％。
[0421]
表25.富马酸盐的α晶型峰位置
[0422]
[0423][0424]
实施例27、富马酸盐的β晶型的制备
[0425]
称量10mg式(i)化合物和3.0mg富马酸，加入500μl 10％水/丙酮溶剂搅拌溶清，慢挥发得产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型β。xrpd谱图如图26，峰位置如表26所示。dsc谱图显示吸热峰峰值67.23℃、141.79℃；tga谱图显示25℃-150℃失重1.36％。
[0426]
表26.富马酸盐的β晶型峰位置
[0427]
[0428][0429]
实施例28、富马酸盐的γ晶型的制备
[0430]
将实施例27制备得到的富马酸盐的β晶型升温至120℃得产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型γ。xrpd谱图如图27，峰位置如表27所示。
[0431]
表27.富马酸盐的γ晶型峰位置
[0432][0433]
实施例29、富马酸盐的δ晶型的制备
[0434]
将式(i)所示化合物(1g，1.57mmol)加入40ml乙腈中搅拌，加热至60℃，搅拌溶清，在60℃下滴加入5ml富马酸(200.9mg，1.73mmol)的乙腈溶液，搅拌溶清，继续搅拌2小时，缓慢冷却至室温，搅拌16小时，形成白色浑浊液，过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型δ。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与富马酸的摩尔比为1:1。xrpd谱图如图28，峰位置如表28所示。dsc谱图显示吸热峰峰值170.03℃，放热峰峰值173.46℃；tga谱图显示25℃-145℃失重0.38％。
[0435]
表28.富马酸盐的δ晶型峰位置
[0436][0437]
实施例30、琥珀酸盐的a晶型的制备
[0438]
称量10mg式(i)化合物和3.0mg琥珀酸，加入500μl乙醇溶剂搅拌溶清，慢挥发得到产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型a。xrpd谱图如图29，峰位置如表29所示。dsc谱图显示吸热峰峰值60.47℃、112.12℃；tga谱图显示25℃-150℃失重2.11％。
[0439]
表29.琥珀酸盐的a晶型峰位置
[0440][0441]
实施例31、琥珀酸盐的b晶型的制备
[0442]
将实施例30制备得到的琥珀酸盐的a晶型升温至80℃得到产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型b。xrpd谱图如图30，峰位置如表30所示。
[0443]
表30.琥珀酸盐的b晶型峰位置
[0444]
[0445][0446]
实施例32、琥珀酸盐的c晶型的制备
[0447]
将式(i)所示化合物(1g，1.57mmol)加入40ml乙腈中搅拌，加热至60℃，溶清，在60℃下滴加入5ml丁二酸的(200.86mg，1.73mmol)乙腈溶液，搅拌溶清，继续搅拌2小时，缓慢冷却至室温，再搅拌16小时，形成白色浑浊液，过滤，收集滤饼，真空干燥，得到标题产物(480mg，收率：48％)，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型c。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与丁二酸的摩尔比为1:1。xrpd谱图如图31，峰位置如表31所示。dsc谱图显示吸热峰峰值150.47℃，放热峰峰值158.25℃；tga谱图显示25℃-140℃失重0.25％。
[0448]
表31.琥珀酸盐的c晶型峰位置
[0449]
[0450][0451]
实施例33、琥珀酸盐的d晶型的制备
[0452]
将式(i)所示化合物琥珀酸盐的c晶型20mg加入到1ml异丙醚中，室温打浆72小时，过滤，收集滤饼，真空干燥，得到标题产物(10mg，收率：50％)，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型d。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与丁二酸的摩尔比为1:1。xrpd谱图如图32，峰位置如表32所示。
[0453]
表32.琥珀酸盐的d晶型峰位置
[0454][0455]
实施例34、柠檬酸盐的α晶型的制备
[0456]
称量10mg式(i)化合物和5.0mg柠檬酸，加入500μl 10％水/甲醇溶剂搅拌溶清，搅拌析出产物，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型α，xrpd谱图如图33，峰位置
如表33所示。dsc谱图显示吸热峰峰值62.15℃、128.15℃；tga谱图显示25℃-150℃失重1.83％。
[0457]
表33.柠檬酸盐的α晶型峰位置
[0458][0459]
实施例35、柠檬酸盐的β晶型的制备
[0460]
将式(i)所示化合物(25mg，39.3μmol)加入到1.5ml丁酮和正己烷(v/v＝1:1)混合溶剂中，搅拌，溶清，加入柠檬酸(7.56mg，39.3μmol)，升温至50℃，搅拌0.5小时后逐渐形成白色浑浊液，在室温下继续搅拌16小时，过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(20mg，收率：80％)，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型β。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与柠檬酸的摩尔比为1:1。xrpd谱图如图34，峰位置如表34所示。
[0461]
表34.柠檬酸盐的β晶型峰位置
[0462][0463]
实施例36、柠檬酸盐的γ晶型的制备
[0464]
将式(i)所示化合物(25mg，39.3μmol)加入到1.5ml正己烷和乙酸乙酯(v/v＝1:1)混合溶剂中，搅拌，溶清，加入柠檬酸(7.56mg，39.3μmol)，升温至50℃，搅拌0.5小时后逐渐形成白色浑浊液，在室温下继续搅拌16小时，过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(20mg，收率：80％)，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型γ。所得产物1h-nmr表征，核磁数据表明该盐中主成分与柠檬酸的摩尔比为1:1。xrpd谱图如图35，峰位置如表35所示。
[0465]
表35.柠檬酸盐的γ晶型峰位置
[0466][0467]
实施例37、硫酸盐的α晶型的制备
[0468]
将式(i)所示化合物(100mg，157.3μmol)加入2ml乙腈中搅拌，加热到40℃溶清再冷却至室温，滴加硫酸(9.23mg，94.4μmol)，在室温下搅拌16小时，逐渐形成白色浑浊液，过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，收率：50％)，经x-射线粉末衍射检测产物晶型，定义产物为晶型α。xrpd谱图如图36，峰位置如表36所示。
[0469]
表36.硫酸盐的α晶型峰位置
[0470][0471][0472]
实施例38草酸盐d晶型、酒石酸盐iv晶型、苹果酸盐c晶型、富马酸盐δ晶型、琥珀酸盐c晶型、扁桃酸盐a晶型稳定性研究
[0473]
将草酸盐d晶型、酒石酸盐iv晶型、苹果酸盐c晶型敞口平摊放置，分别考察在光照(4500lux)、高温(40℃、60℃)、高湿(rh 75％、rh 92.5％)条件下样品的稳定性，取样考察期为1个月。结果如下表所示。
[0474]
表37
[0475]
[0476][0477]
实验结果显示：上述晶型在光照、高温40℃和60℃、高湿75％和92.5％条件下，具有较好的物理、化学稳定性。
[0478]
取式(i)化合物富马酸盐δ晶型、琥珀酸盐c晶型、扁桃酸盐a晶型于开口的洁净称量瓶中，考察在高温(40℃、60℃)、光照(4500lx
±
500lx)、高湿(90％
±
5％、75％
±
5％)条件下样品的稳定性，取样考察期为30天，结果如下表38、39和40所示。
[0479]
表38
[0480][0481]
表39
[0482]
[0483][0484]
表40
[0485][0486]
实验结果显示：上述晶型在高温(40℃、60℃)、光照(4500lx
±
500lx)、高湿(90％rh
±
5％、75％rh
±
5％)条件下，具有较好的物理、化学稳定性。
[0487]
实施例39草酸盐d晶型、酒石酸盐iv晶型、苹果酸盐c晶型、扁桃酸盐a晶型长期/加速稳定性研究
[0488]
将草酸盐d晶型、酒石酸盐iv晶型、苹果酸盐c晶型、扁桃酸盐a晶型，分别放置25℃，60％rh和40℃，75％rh条件考察其稳定性，结果如下表所示。
[0489]
表41、草酸盐d晶型
[0490][0491]
表42、酒石酸盐iv晶型
[0492][0493]
表43、苹果酸盐c晶型
[0494][0495]
表44、扁桃酸盐a晶型
[0496][0497]
长期/加速稳定性实验显示：上述晶型长期加速稳定性条件下放置6个月的物理、化学稳定性好。
[0498]
实施例40草酸盐d晶型、酒石酸盐iv晶型、苹果酸盐c晶型、磷酸盐i晶型、扁桃酸盐a晶型的引湿性研究
[0499]
采用surface measurement systems advantage 2，在25℃，湿度从50％起，考察湿度范围为0％-95％，步进为10％，判断标准为每个梯度质量变化dm/dt小于0.002，tmax小于360min，循环两圈，结果如下表45所示。
[0500]
表45
[0501]
[0502][0503]
实施例41式i化合物扁桃酸盐a晶型、富马酸盐δ晶型分别在fassif溶液、pbs7.4溶液、fessif溶液以及水中的溶解度测试
[0504]
测试例1：式i化合物扁桃酸盐a晶型、富马酸盐δ晶型分别在fassif溶液中的溶解度测试
[0505]
1、实验步骤
[0506]
1.1fassif溶液的配制
[0507]
溶液(a)：在900ml超纯水中加入4.441g nah2po4·
2h2o、0.348g naoh颗粒和6.186g nacl，混合均匀，并加入1m naoh调节溶液ph至6.5
±
0.05，用水定容至1000ml。4℃冷藏备用。
[0508]
fassif溶液(b)：20ml溶液(a)中溶解0.161g牛胆磺酸钠(natc，分子量537.68)和59mg卵磷脂(分子量788.13)，强力搅拌过夜，形成澄清的胶束溶液，加入溶液(a)至体积为100ml，4℃冷藏备用(不超过2周)。
[0509]
1.2称取适量待测化合物用dmso作为溶剂，配制10mm储备液。精密量取10μl储备液(浓度10mm，溶解在dmso中)与990μl有机混合溶剂(通常为dmso：乙腈：乙醇＝1:1:1)于2ml样品瓶中，混匀，得到澄清的100μm样品溶液，作为参比溶液。
[0510]
1.3溶解1mg待测样品至900μl fassif溶液(b)，强力混合，平行配制溶液两份；在37℃水浴中振摇24小时后，在4000rpm离心30min，上清液作为样品溶液，转移至液相色谱分析。
[0511]
2、数据处理
[0512]
fassif溶解度(μm)＝样品的峰面积/参比的峰面积*参比溶液浓度(μm)*样品溶液稀释倍数，取两次测量值得平均值，测试结果如下表46。
[0513]
测试例2：式i化合物扁桃酸盐a晶型、富马酸盐δ晶型分别在pbs 7.4溶液中的溶解度测试
[0514]
1、实验步骤
[0515]
1.1ph 7.4pbs溶液的配制：称取0.57g nah2po4
·
2h2o、5.55g na2hpo4
·
12h2o和6.48g nacl，加入超纯水，用1m naoh或1m hcl调节ph至7.4
±
0.05，加水定容至1l。放置4℃冰箱保存(保存期限为6个月)
[0516]
1.2化合物pbs 7.4溶液的配制：称取适量待测化合物用dmso或dmso：乙腈：乙醇＝1:1:1溶解，配制10mm待测化合物储备液。精密量取10μl待测化合物储备液与990μl ph7.4 pbs溶液于2ml样品瓶中，混匀，最终溶液dmso浓度为1％(v/v)。该溶液平行配制两份，在平板床上室温振摇24小时，在5000rpm离心20min，上清液转移至液相色谱仪分析。
[0517]
1.3参比溶液的配制：精密量取10μl待测样品储备液(浓度10mm，溶解在dmso中)与
990μl有机混合溶剂(通常为dmso：乙腈：乙醇＝1:1:1)于2ml样品瓶中，混匀，得到澄清的100μm样品溶液。用0.45μm的有机相微孔滤膜过滤，续滤液进液相色谱仪分析。
[0518]
2.数据处理
[0519]
溶解度(μm)＝样品的峰面积/参比的峰面积*参比浓度(μm)*样品溶液稀释倍数取两次测量值得平均值，测试结果如下表46。
[0520]
测试例3：式i化合物扁桃酸盐a晶型、富马酸盐δ晶型分别在fessif溶液中的溶解度测试
[0521]
1、实验步骤
[0522]
1.1fessif溶液的配制
[0523]
溶液(a)：准确称量20.2g naoh颗粒，43.25g冰醋酸与59.37g氯化钠，用适量超纯水溶解并定容至5l，用1m naoh或1m hcl调节ph至5.0。4℃冷藏备用。
[0524]
fessif溶液(b)：25ml溶液(a)中溶解0.80652g牛胆磺酸钠(natc，分子量537.68)和295.5mg卵磷脂(分子量788.13)，强力搅拌过夜，形成澄清的胶束溶液，加入溶液(a)至体积为100ml，4℃冷藏备用(不超过2周)。
[0525]
1.2称取适量待测化合物用dmso作为溶剂，配制10mm储备液。精密量取10μl储备液(浓度10mm，溶解在dmso中)与990μl有机混合溶剂(通常为dmso：乙腈：乙醇＝1:1:1)于2ml样品瓶中，混匀，得到澄清的100μm样品溶液，作为参比溶液。
[0526]
1.3溶解1mg待测样品至900μl fessif溶液(b)，强力混合，平行配制溶液两份；在37℃水浴中振摇24小时后，在4000rpm离心30min，上清液作为样品溶液，转移至液相色谱分析。
[0527]
2、数据处理
[0528]
fessif溶解度(μm)＝样品的峰面积/参比的峰面积*参比溶液浓度(μm)*样品溶液稀释倍数取两次测量值得平均值，测试结果如下表46。
[0529]
测试例4：式i化合物扁桃酸盐a晶型、富马酸盐δ晶型分别在水中的溶解度测试
[0530]
称取一定量的固定样品，加入适量体积的水溶液，配制成饱和溶液，磁力搅拌24h，测试溶液ph值，溶液在4000rpm离心30min，上清液作为样品溶液，转移至液相色谱分析，方法同上，测试结果如下表46。
[0531]
表46
[0532]