一种DAPK1磷酸化底物的人工小分子干扰肽及其制药用途的制作方法

技术特征：
1.一种dapk1磷酸化底物的人工小分子干扰肽，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.1，seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4或seq id no.5所示。2.一种dapk1磷酸化底物的人工小分子干扰肽，其特征在于，其具有以下(a)或(b)所示的氨基酸基序：(a)xxx(r/k)(r/k)(r/k)(r/k)x2(s/t/a)x1 xxx；(b)xxx(r/k)(r/k)(r/k)x2(r/k)(s/t/a)x1 xxx其中每个x可以独立地选自任何氨基酸或无氨基酸；x1为极性氨基酸，选自天冬酰胺(n)，半胱氨酸(c)，谷氨酰胺(q)，丝氨酸(s)或苏氨酸(t)x2为非极性氨基酸，选自丙氨酸(a)，异亮氨酸(i)，亮氨酸(l)，甲硫氨酸(m)和缬氨酸(v)；其中r/k指该位置上可任意地采用精氨酸(r)或赖氨酸(k)；其中s/t/a指该位置上可任意地采用丝氨酸(s)、苏氨酸(t)或丙氨酸(a)；优选地，所述人工小分子干扰肽的氨基酸序列还与seq id no.1，seq id no.2或seq id no.3所示的氨基酸序列中的至少一个相比差异不多于2个氨基酸，即具有至少85％的一致性；优选地，所述人工小分子干扰肽，其氨基酸序列如seq id no.6-54任一所示；优选地，所述人工小分子干扰模拟肽，其结构为订书肽或环肽，如：首尾成环(酰胺键)，侧链成环，硫酯键成环，内酯键成环，se-cys和se-cys间氧化成环，或二硫键的环肽。3.权利要求1-2任一所述的人工小分子干扰肽的反向多肽或d型逆反肽或衍生肽，所述反向多肽与人工小分子干扰肽相比，肽链中氨基酸的顺序改为从c端到n端。所述d型逆反肽与所述人工小分子干扰肽相比，是所述人工小分子干扰肽中的每个l-氨基酸残基被其对应的d型氨基酸替换，其氨基酸序列是反转的同时其侧链的原始空间方向和手性与所述人工小分子干扰肽相同，即保持与所述人工小分子干扰肽相似的侧链拓扑结构；所述衍生肽是所述的人工小分子干扰肽中的任一个或多个氨基酸替换成其对应的d型氨基酸或高氨基酸而得。4.一种多聚肽，其特征在于，是两条以上小分子肽以同向并联方式聚合构成，其中的每个小分子肽的c端游离，所有小分子肽的n端聚集在一起用于与递送载体连接；所述小分子肽选自权利要求任一所述的人工小分子干扰肽，所述的反向多肽、所述的d型逆反肽，或所述的衍生肽。5.一种融合多肽，其特征在于，是在小分子肽的n末端或c末端融合一种或多种递送载体构成；所述小分子肽选自任一所述的人工小分子干扰肽，所述的反向多肽、所述的d型逆反肽，或所述的衍生肽；优选地，所述的多聚肽或所述的融合多肽，其特征在于，所述递送载体选自穿膜肽、配体，受体蛋白转导结构域(ptd)、抗体或高分子聚合物；所述穿膜肽选自阳离子型细胞穿膜肽、两亲型细胞穿膜肽、疏水型细胞穿膜肽或合成型细胞穿膜肽；
所述高分子聚合物选自聚乙二醇(peg)、聚乳酸，聚lactide-co-glycolide，聚乙醇酸，聚己酸内酯，聚环氧乙烷，聚二噁烷酮，聚丙烯富马酯，三亚甲基碳酸酯，聚酯酰胺环氧乙烷，酯酰胺，β-羟基苯丙酸酯，α-羟基酸，聚羟基烷酸，多聚羟基丁酸，聚酰亚胺碳酸盐，聚亚安酯，聚酸酐，透明质酸，甲壳胺，纤维素，明胶，胶原蛋白；优选地，所述阳离子型细胞穿膜肽选自seq.id no.55至seq.id no.72所示的氨基酸序列组成的组；所述两亲型细胞穿膜肽选自seq.id no.73至seq.id no.81所示的氨基酸序列组成的组；所述疏水型细胞穿膜肽选自seq.id no.82至seq.id no.85所示的氨基酸序列组成的组；所述合成型细胞穿膜肽具有seq.id no.86所示的氨基酸序列；优选地，所述的融合多肽，其特征在于,所述人工小分子干扰肽具有seq id no.1-3、seq id no.6-54任一所示的氨基酸序列；所述穿膜肽具有seq.id no.55-seq.id no.86任一所示的氨基酸序列；优选地，所述的融合多肽，其特征在于,其氨基酸序列如seq.id no.87-seq.id no.96任一所示。6.一种人工制备的核酸分子，其特征在于，其编码小分子多肽，所述小分子肽选自权利要求任一所述的人工小分子干扰肽，所述的反向多肽。7.一种表达载体，其特征在于，装载有前述任一核酸分子。8.一种表达系统，其特征在于，为细胞系或无细胞体系表达系统，含有前述载体。9.一种表达产物，其特征在于，由权利要求14所述的表达系统表达，其主要成分为小分子多肽；所述小分子肽选自权利要求1-3任一所述的人工小分子干扰肽，权利要求5所述的反向多肽。10.一种药物，其特征在于，含有多肽分子以及药学可接受的杂质、辅料、溶剂、保护剂、佐剂、载体和/或赋形剂；其中所述多肽分子为：(1)小分子肽，所述小分子肽选自任一所述的人工小分子干扰肽，所述的反向多肽、所述的d型逆反肽，或所述的衍生肽或(2)小分子肽的修饰产物，所述小分子肽选自任一所述的人工小分子干扰肽，所述的反向多肽、所述的d型逆反肽，或所述的衍生肽；；所述修饰指以下一种或多种：n末端、c末端修饰、标记、环化、脂化、n-甲基化、豆蔻酰化和棕榈酰化、糖基化、生物素化、peg修饰、荧光标记；优选地，所述的药物，其特征在于，剂型为：吸入气雾剂、口服剂、静脉内给药、动脉内给药、颅内给药、腹膜内给药、鼻内给药、肌肉内给药、皮下给药、滑膜(腔)内给药、胸骨内给药，脊椎内给药制剂；优选地，小分子肽的的制药用途，其特征在于，所述小分子肽选自权利要求1-3任一所述的人工小分子干扰肽，权利要求5所述的反向多肽、权利要求6所述的d型逆反肽，或权利要求7所述的衍生肽；所述制药用途是指用于制备治疗或预防与兴奋性氨基酸毒性机制相关的疾病的药物，所述疾病包括但不限于脑卒中、创伤性脑损伤、脊髓损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、神经系
统退行性疾病、抑郁症、自闭症；所述神经系统退行性疾病指多发性硬化症，阿尔茨海默氏病，肌萎缩侧索硬化，帕金森病或亨廷顿病；优选地，小分子肽的的制药用途，其特征在于，所述小分子肽选自权利要求1-3任一所述的人工小分子干扰肽，权利要求5所述的反向多肽、权利要求6所述的d型逆反肽，或权利要求7所述的衍生肽；所述制药用途是指用于制备治疗或预防与dapk1-pkd1通路相关的生理异常的药物，所述疾病包括但不限于脑卒中、创伤性脑损伤、脊髓损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、神经系统退行性疾病、抑郁症、自闭症；所述神经系统退行性疾病指多发性硬化症，阿尔茨海默氏病，肌萎缩侧索硬化，帕金森病或亨廷顿病；优选地，一种药物组合，其特征在于，包含权利要求18或19所述的药物以及抗凝血药或抗血小板药；优选，所述的药物以及所述抗凝血药或抗血小板药被按照单次剂量、单日剂量或疗程剂量为单位组合包装在一起；其中所述抗凝血药是指醋硝香豆素、4-羟基-3-(1,2,3,4-四氢-1-萘基)香豆素(杀鼠醚)、双香豆素、双香豆素乙酯、苯丙香豆素、苄丙酮香豆素、二苯茚酮、苯茚二酮、噻氯香豆醇、贝米肝素、舍托肝素钠、达肝素、依诺肝素、那屈肝素、帕肝素、瑞维肝素、亭扎肝素、磺达肝素、依达肝素、达那肝素、舒洛地特、硫酸皮肤素、阿哌沙班、贝曲西班、依杜沙班、奥米沙班、利伐沙班、水蛭素、比伐卢定、重组水蛭素、地西卢定水蛭素、阿加曲班、达比加群酯、美拉加群、希美加群、去纤维蛋白多核苷酸、抗凝血酶ⅲ、肝素、可迈丁锭、达比加群酯、艾乐妥、依度沙班、依诺肝素、磺达肝素、重组组织型纤溶酶原激活剂、组织型纤溶酶原激活剂、阿替普酶、瑞替普酶、替奈普酶、尿激酶、沙芦普酶、链激酶、阿尼普酶、孟替普酶、安克洛酶、溶纤维蛋白酵素、纤维蛋白酶，或其组合物；所述抗血小板药是指氯吡格雷、替格瑞洛、普拉格雷、双嘧达莫、西洛他唑、噻氯匹啶、埃替非巴肽、阿司匹林、阿昔单抗、替罗非班、贝前列素、环前列腺素、伊洛前列素、曲前列环素、阿洛普令、卡巴匹林钙、吲哚布芬、三氟醋柳酸、吡考他胺、特鲁曲班、氯克罗孟、地他唑，或其组合物；优选地，小分子肽的的疾病治疗用途，其特征在于，所述小分子肽选自权利要求1-3任一所述的人工小分子干扰肽，权利要求5所述的反向多肽、权利要求6所述的d型逆反肽，或权利要求7所述的衍生肽；其中给药量是从0.001mg/kg体重至50mg/kg；在此所述的小分子肽的浓度可以广泛地改变，并且根据所选择的给药方式及受试者的体重，年龄，性别等进行选择；优选的剂量范围为剂量从0.01mg/kg体重至50mg/kg；进一步优选的剂量范围为剂量从0.1mg/kg体重至10mg/kg；或者改变剂量范围以便优化一个受试者或一组受试者中的治疗方；所述疾病包括但不限于脑卒中、创伤性脑损伤、脊髓损伤、新生儿缺氧缺血性脑病、神经系统退行性疾病、抑郁症、自闭症；所述神经系统退行性疾病指多发性硬化症，阿尔茨海默氏病，肌萎缩侧索硬化，帕金森病或亨廷顿病。

技术总结
本申请“一种DAPK1磷酸化底物的人工小分子干扰肽及其制药用途”，涉及小分子多肽类药物研发领域，所提供的小分子多肽可用于制备预防和治疗缺血性卒中药物，以及基于相同机制的如脑卒中，创伤性脑损伤，脊髓损伤，新生儿缺氧缺血性脑病，抑郁症和自闭症、神经系统退行性疾病如多发性硬化症，阿尔茨海默氏病，肌萎缩侧索硬化，帕金森病，亨廷顿病等。亨廷顿病等。


技术研发人员：崔虹
受保护的技术使用者：北京欣安诚科技有限公司
技术研发日：2022.01.29
技术公布日：2022/6/10