一种提高热应激下绵羊发情率和受胎率的方法

1.本发明属于动物养殖领域，涉及一种提高热应激下绵羊发情率和受胎率的方法。


背景技术：

2.随着绵羊养殖集约化的发展和全球变暖加剧，热应激对绵羊繁殖性能的不良影响日益严重。热应激影响绵羊卵母细胞后期发育(ahmadi e etal；2019)、胚胎发育和植入、妊娠维持、胎儿发育，表现为发情周期延长、受胎率和胚胎成活率下降(gharibzadeh z et al，2015；mac
í
as-cruz u et al，2016；romo-barron cb et al,2019)。romo-barron cb等(2019)对36项研究的48个实验进行meta分析表明：热应激使母羊发情表现不明显，发情持续时间缩短7.09小时，发情周期延长0.57天，妊娠率下降58.8％，胚胎死亡率是正常对照组的12.36倍，另外胎盘重量显著减小(-183.62g)，羔羊初生重减少0.99kg，与对照组差异均达到显著水平(p《0.05)。一般而言，绵羊的适宜温度为21℃-25℃，如果环境温度过高，就会产生热应激。随着全球气温的逐渐升高，以及养羊业集约化规模化的发展，羊群热应激也越来越严重，给养殖业带来巨大的经济损失。
3.胆固醇是构成细胞膜的重要组分，占质膜脂类的20％以上。高温时胆固醇能阻止质膜双分子层的无序化，低温时又可阻止结晶的形成，保持其流动性，维持质膜结构的稳定性。同时胆固醇是类固醇激素(性激素和肾上腺皮质激素)合成的前体物质，胆固醇稳态失衡还可通过影响卵巢黄体生成素受体的表达，进而影响孕酮、雌激素的合成。但尚未见通过补充胆固醇缓解热应激对绵羊发情率和受胎率影响的报道。


技术实现要素：

4.本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供胆固醇在制备缓解热应激对绵羊发情率和受胎率影响的添加剂或饲料中的应用。
5.本发明的另一目的是提供一种提高热应激下绵羊发情率和受胎率的方法。
6.本发明的又一目的是提供一种绵羊饲料。
7.本发明的目的可通过以下技术方案实现：
8.胆固醇类物质在制备缓解热应激对绵羊发情率和受胎率影响的添加剂或饲料中的应用。
9.作为本发明的一种优选，所述的胆固醇类物质的添加量为每只母羊每天0.2g～1.0g。
10.作为本发明的一种优选，所述的胆固醇类物质为胆固醇或具有胆固醇活性的胆固醇衍生物。
11.一种提高热应激下绵羊发情率和受胎率的方法，将胆固醇类物质以0.05％～0.2％的添加量加入绵羊饲料或饮用水中，在高温季节饲喂发情间期、发情期或者配种至配种后30天的绵羊母羊。
12.作为本发明的一种优选，所述的绵羊饲料选自全混合日粮、全价颗粒料、浓缩料、
精补料、预混料或饲料原料。
13.作为本发明的一种优选，所述补饲胆固醇类物质的量为每只母羊每天0.2g～1.0g。
14.作为本发明的一种优选，所述的胆固醇类物质为胆固醇或具有胆固醇活性的胆固醇衍生物。
15.一种绵羊饲料，所述的绵羊饲料为在基础饲料中添加0.05％～0.2％的胆固醇类物质。
16.作为本发明的一种优选，所述的基础饲料选自全混合日粮、全价颗粒料、浓缩料、精补料、预混料或饲料原料。
17.作为本发明的一种优选，所述的胆固醇类物质为胆固醇或具有胆固醇活性的胆固醇衍生物。
18.有益效果：
19.随着绵羊养殖集约化的发展和全球变暖加剧，热应激对绵羊繁殖性能的不良影响日益严重。热应激影响绵羊卵母细胞后期发育、胚胎发育和植入、妊娠维持、胎儿发育，表现为发情周期延长、受胎率和胚胎成活率下降。本发明选择在高温季节，发情前至配种后30天时间段里，向绵羊母羊饲料或者饮水中添加0.2g-1.0g/只*天的胆固醇，可以显著缓解热应激对绵羊发情率和配种率的影响，显著提高绵羊的发情率和受胎率，提高养殖场的经济效益。
附图说明
20.图1饲喂胆固醇后0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h、96h和120h不同组实验羊血清中总胆固醇水平
21.图2补饲胆固醇后不同时间点湖羊血清中总胆固醇含量
具体实施方式
22.下述实施例子中提到的试验方法，如无特别说明均为常规方法，总胆固醇测定试剂盒购自南京建成生物工程有限公司，雌二醇和孕酮测定试剂盒购自北京北方生物技术研究所有限公司，饲料级胆固醇购自郑州苍宇食品化工有限公司。实施例1、夏季补饲胆固醇提高湖羊血清中胆固醇水平(一)材料和方法：
23.(1)实施例子所需饲料的制备：按照0.1％、0.5％的胆固醇添加量加入湖羊饲料中，饲料组成为39.0％玉米，4.3％麸皮，5.0％米糠，9.0％豆粕，3.0％玉米ddgs,3.0％玉米胚芽豆粕，32.0％花生秸粉，3.0％正昌预混料(育肥)，1.0％小苏打，0.7％石粉；对照组饲料不含胆固醇。
24.(2)60头经产湖羊母羊来自江苏省农业科学院六合动物基地，健康、无孕。随机分成3组。三组羊分别开始饲喂没有添加胆固醇的饲料(对照组)、添加0.1％的胆固醇饲料(0.1％试验组)和添加0.5％的胆固醇饲料(0.5％试验组)。
25.(3)三组实验羊分别在饲喂前、饲喂后2h、4h、8h、12h、24h、48h、96h和120h采集血液，分离血清。用elisa方法检测不同组实验羊血清中总胆固醇水平。
26.(二)结果与分析
27.(1)补饲胆固醇显著提高湖羊血清中总胆固醇水平elisa方法检测对照组、0.1％实验组和0.5％实验组湖羊血清中总胆固醇水平。结果发现与对照组相比，0.1％实验组和0.5％实验组湖羊血清中总胆固醇含量在饲喂后2h-48h逐渐增加，48h后到一直到120h胆固醇不再增加，但是0.1％实验组和0.5％实验组之间胆固醇的增加差异不显著(图1)。
28.实施例2、夏季补饲胆固醇提高湖羊发情率和受胎率的方法
29.(一)材料和方法：
30.(1)实施案例试验开始时间为2021年7月14日，结束时间为2021年9月14日，江苏苏州市太仓市平均气温均高于25℃。
31.(2)实施例子所需饲料的制备：按0.1％胆固醇添加量加入湖羊饲料中，饲料组成为39.0％玉米，4.3％麸皮，5.0％米糠，9.0％豆粕，3.0％玉米ddgs,3.0％玉米胚芽豆粕，32.0％花生秸粉，3.0％正昌预混料(育肥)，1.0％小苏打，0.7％石粉，压成直径为6mm的颗粒饲料；对照组饲料为不含0.1％胆固醇的直径为6mm的颗粒饲料。
32.(3)78头经产湖羊母羊来自江苏省太仓市东林试验羊场，健康、无孕。随机分成2组，采用常规同期发情方法处理两组湖羊母羊，即羊用阴道栓放置入绵羊阴道中，并于放置后第13天取出，立即肌肉注射前列腺素1ml/只羊。同期发情处理当天，两组羊分别开始饲喂没有添加胆固醇的饲料和添加胆固醇饲料，分别命名对照组和胆固醇补饲组；两组羊每只羊每天饲喂500g颗粒饲料，胆固醇补饲组每只羊每天补饲胆固醇的量为0.5g
33.(4)同期发情处理的湖羊在第一个发情周期不统计发情情况，在下一个自然发情周期统计两组的发情率，采用公羊试情的方式鉴定湖羊发情情况，统计发情率。对照组和胆固醇补饲组母羊使用相同的精液人工授精配种，配种后30天检测血清中孕酮含量，据此判断2组湖羊的受胎率。
34.(5)对照组和补饲组发情率和受胎率差异显著性分析，采用spss19.0中的one-way anova方法进行。
35.(二)、结果与分析
36.(1)胆固醇补饲组血清中胆固醇含量显著提高
37.对照组和胆固醇补饲组湖羊母羊分别进行同期发情处理，胆固醇补饲组羊分别在补饲前、补饲第3天和补饲第30分别采集血液分离血清。用总胆固醇测定试剂盒检测血清中胆固醇含量的变化。结果(图2)发现，与补饲前相比，补饲胆固醇后的第三天和第30天的湖羊血清中胆固醇含量均极显著上升(p《0.01)；。
38.(2)补饲胆固醇提高湖羊发情率
39.对照组和胆固醇补饲组湖羊母羊分别在同期发情处理后第32天至34天采用公羊爬跨试情进行发情鉴定，结果发现，与对照组相比，胆固醇补饲组湖羊发情率高7.6％。
40.(3)补饲胆固醇显著提高湖羊受胎率
41.结果2中发情湖羊母羊进行人工授精处理，30天后采血分离血清，elisa方法检测对照组和胆固醇补饲组中湖羊血清孕酮含量，确认受胎率。结果发现，与对照组相比，胆固醇补饲组湖羊受胎率提高16.7％。
42.表1补饲胆固醇对湖羊发情率和受胎率的影响
[0043] 对照组实验组自然发情率82.7％89.1％
受胎率46.9％a63.6％b