一种治疗脚气的组合物及其制备方法与流程

1.本发明涉及中医药技术领域，尤其涉及一种治疗脚气的组合物及其制备方法。


背景技术：

2.脚气又称足癣，是由真菌感染引起。现有的用于治疗脚气的抗真菌药物，如酮康唑、氟康唑、特比萘芬等属于化学药，多次使用后容易出现耐药菌株，耐药菌株的出现是抗真菌药物治疗失败的主要原因。天然抗真菌药物成分主要是提取自自然界中的植物或动物原料，提取得到的天然抗真菌药物成分复杂，往往存在多种有效成分共同作用的情况，因此出现耐药株的概率较低，但天然抗真菌药物目前主要的缺陷在于治疗效果差，难以满足临床治疗需求。因此，有必要提供一种联合药物组合物，在避免致病菌产生耐药性的同时，提高治疗效果。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于提供一种治疗脚气的组合物及其制备方法，在克服抗真菌药物耐药性的同时，提高其治疗效果。
4.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
5.本发明提供了一种治疗脚气的组合物，由包括如下重量份的原料制备得到：特比萘芬0.1～0.5份、富里酸1～3份、五加皮10～20份、黄柏10～20份、苍术5～15份、白芷1～10份、薏苡仁5～15份、大麦5～15份。
6.本发明还提供了一种治疗脚气的组合物的制备方法，包括如下步骤：
7.(1)所述五加皮、黄柏、苍术、白芷、薏苡仁、大麦经粉碎、烘烤，得到中药处理料；
8.(2)所述中药处理料经一次煎煮，得到一次滤液和一次滤渣；
9.(3)将所述一次滤渣粉碎，进行二次煎煮，得到二次滤液；
10.(4)将一次滤液和二次滤液合并，经浓缩、干燥、粉碎，得到中药粉；
11.(5)将特比萘芬、富里酸与所述中药粉混合，得到治疗脚气的组合物。
12.优选的，步骤(1)中所述粉碎的粒度为5～10目。
13.优选的，步骤(1)中所述烘烤的温度为100～140℃，所述烘烤的时间为6～10min。
14.优选的，步骤(2)中所述一次煎煮时中药处理料与水的质量比为1:2～4。
15.优选的，所述一次煎煮的温度为90～110℃，所述一次煎煮的时间为20～40min。
16.优选的，步骤(3)中所述一次滤渣粉碎的粒度为35～100目。
17.优选的，步骤(3)中所述二次煎煮时一次滤渣与水的质量比为1:1～2。
18.优选的，所述二次煎煮的温度为60～80℃，所述二次煎煮的时间为1～2h。
19.本发明提供的治疗脚气的组合物对脚气主要致病菌红色毛癣菌具有显著的抑制作用，且抑制作用要显著高于盐酸特比萘芬和富里酸的组合用药，而且经过试验验证，组合物中的盐酸特别萘芬和富里酸与中药组方之间存在协效作用，中药组合物能够明显提高盐酸特比萘芬和富里酸对脚气致病菌的抑制作用。同时，通过治疗实例还发现，本发明提供的
治疗脚气的组合物对脚裂和灰指甲还具有较好的治疗作用。
具体实施方式
20.本发明提供了一种治疗脚气的组合物，由包括如下重量份的原料制备得到：特比萘芬0.1～0.5份、富里酸1～3份、五加皮10～20份、黄柏10～20份、苍术5～15份、白芷1～10份、薏苡仁5～15份、大麦5～15份。
21.在本发明中，所述治疗脚气的组合物，优选由包括如下重量份的原料制备得到：所述特比萘芬为0.1～0.5份，优选为0.2～0.4份，进一步优选为0.3份；所述富里酸为1～3份，优选为1.5～2.5份，进一步优选为2份；所述五加皮为10～20份，优选为12～18份，进一步优选为15份；所述黄柏为10～20份，优选为13～17份，进一步优选为15份；所述苍术为5～15份，优选为8～12份，进一步优选为10份；所述白芷为1～10份，优选为2～8份，进一步优选为5份；所述薏苡仁为5～15份，优选为6～14份，进一步优选为10份；所述大麦为5～15份，优选为7～13份，进一步优选为10份。
22.本发明还提供了一种治疗脚气的组合物的制备方法，包括如下步骤：
23.(1)所述五加皮、黄柏、苍术、白芷、薏苡仁、大麦经粉碎、烘烤，得到中药处理料；
24.(2)所述中药处理料经一次煎煮，得到一次滤液和一次滤渣；
25.(3)将所述一次滤渣粉碎，进行二次煎煮，得到二次滤液；
26.(4)将一次滤液和二次滤液合并，经浓缩、干燥、粉碎，得到中药粉；
27.(5)将特比萘芬、富里酸与所述中药粉混合，得到治疗脚气的组合物。
28.本发明中五加皮、黄柏、苍术、白芷、薏苡仁、大麦经粉碎、烘烤，得到中药处理料。
29.在本发明中，所述粉碎的粒度优选为5～10目，进一步优选为6～8目，再进一步优选为8目。
30.在本发明中，所述烘烤的温度优选为100～140℃，进一步优选为110～130℃，再进一步优选为120℃。
31.在本发明中，所述烘烤的时间优选为6～10min，进一步优选为7～9min，再进一步优选为8min。
32.所述中药处理料经一次煎煮，得到一次滤液和一次滤渣。
33.在本发明中，所述一次煎煮时，中药处理料与水的质量比优选为1:2～4，进一步优选为1:2.5～3.5，再进一步优选为1:3。
34.在本发明中，所述一次煎煮的温度优选为90～110℃，进一步优选为95～105℃，再进一步优选为100℃。
35.在本发明中，所述一次煎煮的时间优选为20～40min，进一步优选为25～35min，再进一步优选为30min。
36.在本发明中，优选将一次煎煮后的一次煎煮液过滤得到一次滤液和一次滤渣。
37.将所述一次滤渣粉碎，进行二次煎煮，得到二次滤液。
38.在本发明中，所述一次滤渣的粉碎优选采用研磨粉碎。
39.在本发明中，所述粉碎的粒度优选为35～100目，进一步优选为40～60目，再进一步优选为50目。
40.在本发明中，所述二次煎煮时一次滤渣与水的质量比优选为1:1～2，进一步优选
为1:1.2～1.8，再进一步优选为1:1.5。
41.在本发明中，所述二次煎煮的温度优选为60～80℃，进一步优选为65～75℃，再进一步优选为70℃。
42.在本发明中，所述二次煎煮的时间优选为1～2h，进一步优选为1.5h。
43.在本发明中，优选将二次煎煮后的二次煎煮液过滤得到二次滤液和二次滤渣。
44.将一次滤液和二次滤液合并，经浓缩、干燥、粉碎，得到中药粉。
45.在本发明中，所述浓缩优选将合并后的一次滤液和二次滤液浓缩至合并后体积的1/3～1/5，进一步优选为1/4。
46.在本发明中，所述浓缩的温度优选为90～110℃，进一步优选为95～105℃，再进一步优选为100℃。
47.在本发明中，所述干燥的温度优选为60～80℃，进一步优选为65～75℃，再进一步优选为70℃。优选干燥成固体为止。
48.在本发明中，所述中药粉的粒度优选为80～150目，进一步优选为100～140目，再进一步优选为120目。
49.将特比萘芬与所述中药粉混合，得到治疗脚气的组合物。
50.在本发明中，所述特比萘芬优选为盐酸特比萘芬。
51.在本发明中，所述特比萘芬的粒度优选为80～150目，进一步优选为100～140目，再进一步优选为120目。
52.在本发明中，所述富里酸的粒度优选为80～150目，进一步优选为100～140目，再进一步优选为120目。
53.在本发明中，所述特比萘芬、富里酸与所述中药粉混合时，优选采用过筛混合，以保证混合的均匀性。
54.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
55.实施例1
56.取盐酸特比萘芬0.3份、富里酸2份、五加皮15份、黄柏15份、苍术10份、白芷5份、薏苡仁10份、大麦10份。将五加皮、黄柏、苍术、白芷、薏苡仁、大麦粉碎过8目筛，取筛下物，得到中药粉碎料。将中药粉碎料置于120℃下烘烤8min，得到中药处理料，按照中药处理料：水＝1:3的质量比加水进行一次煎煮，一次煎煮在100℃下煎煮为30min，过滤，得到一次滤液和一次滤渣；收集一次滤液备用，将一次滤渣进一步粉碎，过50目筛，取筛下物，加入一次滤渣1.5倍的水进行二次煎煮，二次煎煮在70℃下煎煮1.5h，过滤，收集二次滤液与一次滤液合并，然后置于100℃下浓缩至合并体积的1/4，再在70℃下干燥，得到中药固体，将中药固体粉碎，过120目筛，得到中药粉。将中药粉与预先粉碎过120目筛的盐酸特比萘芬和富里酸进行过筛混合，混合均匀后，得到治疗脚气用的组合物。
57.实施例2
58.取盐酸特比萘芬0.5份、富里酸3份、五加皮18份、黄柏10份、苍术8份、白芷2份、薏苡仁14份、大麦7份。将五加皮、黄柏、苍术、白芷、薏苡仁、大麦粉碎过5目筛，取筛下物，得到中药粉碎料。将中药粉碎料置于100℃下烘烤10min，得到中药处理料，按照中药处理料：水＝1:2的质量比加水进行一次煎煮，一次煎煮在95℃下煎煮为40min，过滤，得到一次滤液和
一次滤渣；收集一次滤液备用，将一次滤渣进一步粉碎，过35目筛，取筛下物，加入一次滤渣1倍的水进行二次煎煮，二次煎煮在80℃下煎煮1h，过滤，收集二次滤液与一次滤液合并，然后置于110℃下浓缩至合并体积的1/3，再在80℃下干燥，得到中药固体，将中药固体粉碎，过150目筛，得到中药粉。将中药粉与预先粉碎过150目筛的盐酸特比萘芬和富里酸进行过筛混合，混合均匀后，得到治疗脚气用的组合物。
59.实施例3
60.取盐酸特比萘芬0.2份、富里酸1.5份、五加皮20份、黄柏20份、苍术5份、白芷8份、薏苡仁6份、大麦13份。将五加皮、黄柏、苍术、白芷、薏苡仁、大麦粉碎过10目筛，取筛下物，得到中药粉碎料。将中药粉碎料置于130℃下烘烤6min，得到中药处理料，按照中药处理料：水＝1:4的质量比加水进行一次煎煮，一次煎煮在110℃下煎煮为20min，过滤，得到一次滤液和一次滤渣；收集一次滤液备用，将一次滤渣进一步粉碎，过100目筛，取筛下物，加入一次滤渣2倍的水进行二次煎煮，二次煎煮在75℃下煎煮2h，过滤，收集二次滤液与一次滤液合并，然后置于90℃下浓缩至合并体积的1/5，再在75℃下干燥，得到中药固体，将中药固体粉碎，过80目筛，得到中药粉。将中药粉与预先粉碎过80目筛的盐酸特比萘芬和富里酸进行过筛混合，混合均匀后，得到治疗脚气用的组合物。
61.实验例1
62.本发明采用棋盘微量稀释法，考察实施例1～3制备的组合物对红色毛癣菌的抑菌效果。
63.将实施例1～3制备的组合物分别采用沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基进行倍比稀释，得到终浓度为0.0312、0.0625、0.1250、0.2500、0.5000、1.0000、2.0000、4.0000、8.0000、16.0000μg/ml的稀释药液，备用。将盐酸特比萘芬和富里酸(质量比0.3:2混合，作为基础药)用沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基进行稀释，得到终质量浓度为0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、2.00、4.00、8.00μg/ml的稀释药液，备用。
64.红色毛癣菌活化后用rpmi 1640液体培养基调解红色毛癣菌的浓度为(2～6)
×
105cfu/ml。使用时，再用rpmi 1640液体培养基稀释50倍进行接种，菌悬液最终浓度为(2～6)
×
103cfu/ml。
65.通过微量移液器移取实施例1～3各浓度下的组合物和不同浓度下的基础药的稀释药液100μl，依次加入各自96孔板的第1～10列孔(基础药组加入1～8列孔)，每孔设5个平行；然后加入100μl红色毛癣菌悬液，第11列孔加入红色毛癣菌悬液100μl、rpmi 1640液体培养基100μl作为阳性对照，第12列只加入rpmi 1640液体培养基200μl作为阴性对照，28℃恒温培养5d，进行结果判定，计算平均mic80值。
66.表1实施例1～3的组合物和基础药对红色毛癣菌的mic80值
67.药液实施例1实施例2实施例3基础药mic80(μg/ml)0.06870.08120.07501.15
68.由表1可知，本发明提供的治疗脚气的组合物对脚气主要致病菌红色毛癣菌的抑制作用要显著高于基础药单独用药。表明基础药(盐酸比特萘芬和富里酸)在中药组合物的作用下药效得到了提高。
69.实验例2
70.按照实验例1的方法分别检测实施例1～3制备的中药粉对红色毛癣菌的mic80值。
将按照实施例1～3方法制备得到的中药粉用沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基溶解，并倍比稀释成1.25、2.5、5、10、20、40μg/ml。后续按照实验例1的方法进行实验，并测定mic80值。结果如表2所示。
71.表2实施例1～3制备的中药粉对红色毛癣菌的mic80值
72.药液实施例1实施例2实施例3mic80(μg/ml)4.254.504.00
73.fic(联合抑菌分数)值为联合用药时各药的mic80值分别除以各药单独用药时的mic80值所得商之和。
74.联合用药效果评价标准，fic≤0.5，为协同作用；0.5＜fic≤4，为不相关；fic＞4，为拮抗作用。
75.通过计算得到：基础药与实施例1～3制备的中药粉联合用药时的fic值分别为0.0759、0.0886和0.840。可见，本发明的组方中提供的中药组合物与基础药联合用药时fic值均小于0.5，表明本发明提供的组合物之间具有协同作用。
76.实验例3
77.取五加皮60份、黄柏60份、苍术60份、白芷60份、薏苡仁60份和大麦60份，分别按照实施例1的制备方法，单独制备成五加皮粉、黄柏粉、苍术粉、白芷粉、薏苡仁粉和大麦粉，然后分别与基础药(盐酸特比萘芬和富里酸质量比0.3:2)混合，制备成单一中药组合物，并用沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基将各单一中药组合物稀释成终浓度为0.0312、0.0625、0.1250、0.2500、0.5000、1.0000、2.0000、4.0000、8.0000、16.0000μg/ml的单一中药组合物稀释药液。然后按照实施例1的方法进行实验，测定各单一中药组合物对红色毛癣菌的mic80值，结果如表3所示。
78.表3单一中药组合物对红色毛癣菌的mic80值
[0079][0080]
由表3可以看出，采用各单一中药与基础药联合用药时，五加皮和黄柏的mic80值低于基础药单独用药，其他单一中药组合物的mic80值均高于基础药单独用药。
[0081]
按照上述方法制备得到五加皮粉、黄柏粉、苍术粉、白芷粉、薏苡仁粉和大麦粉，并用沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基将各中药粉稀释成终浓度为1.25、2.5、5、10、20、40μg/ml的单一中药粉稀释药液。然后按照实施例1的方法进行实验，测定各单一中药粉对红色毛癣菌的mic80值，计算fic值，结果如表4所示。
[0082]
表4单一中药粉对红色毛癣菌的mic80值
[0083]
药液五加皮黄柏苍术白芷薏苡仁大麦mic80(μg/ml)11.0018.0014.0024.0016.0018.00fic值1.05650.92511.31741.09351.21173.700
[0084]
由表4的结果可知，各单一中药与基础药之间并无协同作用。可见，各单一中药只有以组方的形式用药时，才能产生协同增效的作用。
[0085]
由以上实施例可知，本发明提供的治疗脚气的组合物对脚气主要致病菌红色毛癣菌具有显著的抑制作用，且抑制作用明显强于盐酸特比萘芬和富里酸的组合用药，而且经过试验验证组合物中的盐酸特别萘芬和富里酸与中药组方之间存在协效作用，中药组合物能够明显提高盐酸特别萘芬和富里酸对脚气致病菌的抑制作用。同时，通过治疗实例还发现，本发明提供的治疗脚气的组合物对脚裂和灰指甲还具有显著的治疗作用。
[0086]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。