用于检测脂肪分解活性的组合物、方法和试剂盒与流程

技术特征：
1.一种组合物，其包含：a.包含蛋白质制剂的水性测定样品；和b.有机溶剂，其中所述有机溶剂进一步包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)；其中所述水性测定样品的ph为5.0至7.0；并且其中所述水性测定样品为所述组合物的约80％至约99.9％，并且所述有机溶剂为所述组合物的约0.1％至约20％。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述蛋白质制剂是细胞培养上清液。3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述蛋白质制剂是部分纯化的蛋白质制剂。4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述蛋白质制剂是纯化的蛋白质制剂。5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述蛋白质制剂包含治疗性蛋白质。6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述蛋白质制剂包含表面活性剂。7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述表面活性剂是聚山梨酯。8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述聚山梨酯是聚山梨酯-20、聚山梨酯-80或其组合。9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中所述蛋白质制剂进一步包含额外的宿主细胞蛋白质。10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述水性测定样品进一步包含缓冲剂、盐或两者。11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述盐是氯化钠、氯化钙或其组合。12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述盐是氯化钠和氯化钙。13.根据权利要求11或12所述的组合物，其中所述氯化钠在所述水性测定样品中为约50mm至约400mm。14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述氯化钠在所述水性测定样品中为约100mm至约200mm。15.根据权利要求11至14中任一项所述的组合物，其中所述氯化钙在所述水性测定样品中为约0.2mm至约10mm。16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述氯化钙在所述水性测定样品中为约1.0mm至约2.0mm。17.根据权利要求10至16中任一项所述的组合物，其中所述缓冲剂在约ph 6.0时具有缓冲能力。18.根据权利要求10至16中任一项所述的组合物，其中所述缓冲剂是tris。19.根据权利要求10至16中任一项所述的组合物，其中所述缓冲剂是bis-tris。20.根据权利要求10至19中任一项所述的组合物，其中所述缓冲剂在所述水性测定样品中为约2mm至约200mm。21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述缓冲剂在所述水性测定样品中为约10mm至约100mm。22.根据权利要求21所述的组合物，其中所述缓冲剂在所述水性测定样品中为约40mm至约60mm。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的组合物，其中所述有机溶剂是醇、亚砜、腈或其组合。24.根据权利要求23所述的组合物，其中所述有机溶剂是二甲亚砜(dmso)。25.根据权利要求23所述的组合物，其中所述有机溶剂包含乙腈。26.根据权利要求23所述的组合物，其中所述有机溶剂包含醇。27.根据权利要求23所述的组合物，其中所述有机溶剂包含乙腈和异丙醇的混合物。28.根据权利要求23所述的组合物，其中所述有机溶剂是c
1-c6醇。29.根据权利要求28所述的组合物，其中所述有机溶剂是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇、异丁醇、叔丁醇，或其组合。30.根据权利要求1至29中任一项所述的组合物，其中所述组合物进一步包含脂肪酶抑制剂。31.根据权利要求30所述的组合物，其中所述脂肪酶抑制剂是(s)-2-甲酰氨基-4-甲基-戊酸(s)-1-[[(2s,3s)-3-己基-4-氧代-2-氧杂环丁烷基]甲基]-十二烷基酯(奥利司他)。32.根据权利要求30或31所述的组合物，其中所述脂肪酶抑制剂在所述有机溶剂中。33.根据权利要求30至32中任一项所述的组合物，其中所述脂肪酶抑制剂在所述组合物中为约1μm至约50μm。34.根据权利要求33所述的组合物，其中所述脂肪酶抑制剂在所述组合物中为约5μm至约25μm。35.一种组合物，其包含：a.水性测定样品，所述水性测定样品包含i.纯化的蛋白质制剂；ii.缓冲剂；和iii.盐；和b.有机溶剂，其中所述有机溶剂进一步包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)；其中所述水性测定样品的ph为5.0至7.0；并且其中所述水性测定样品为所述组合物的约80％至约99.9％，并且其中所述有机溶剂为所述组合物的约0.1％至约20％。36.一种组合物，其包含：a.约90％至约99.9％(vol/vol)的水性测定样品，所述水性测定样品包含i.包含蛋白质和脂质的纯化的蛋白质制剂；ii.缓冲剂；iii.约1.0mm至约2.0mm的氯化钙；和iv.约100mm至约200mm的氯化钠；以及b.约10％至约0.1％(vol/vol)的有机溶剂，所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇、异丁醇、叔丁醇、二甲亚砜(dmso)、乙腈，或其组合，进一步包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)；其中所述水性测定样品的ph为5.0至7.0。37.一种检测水性测定样品中脂肪分解活性的方法，所述方法包括
a.将包含蛋白质制剂的水性测定样品与包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)的有机溶剂组合；和b.通过荧光测量油酸酯和4-甲基伞形酮(4mu)的形成。38.一种检测水性测定样品中脂肪分解活性的方法，所述方法包括a.将包含蛋白质制剂的水性测定样品与包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)的有机溶剂组合以形成测定组合物；b.将包含蛋白质制剂和脂肪酶抑制剂的对照样品与包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)的有机溶剂组合以形成对照组合物；和c.通过荧光测量所述测定组合物和所述对照组合物中油酸酯和4-甲基伞形酮(4mu)的形成。39.一种确定蛋白质制剂稳定性的方法，其包括a.将包含蛋白质制剂的水性测定样品与包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)的有机溶剂组合；b.通过荧光测量油酸酯和4-甲基伞形酮(4mu)的形成；和c.根据测量的荧光确定所述蛋白质制剂的稳定性。40.根据权利要求37至39中任一项所述的方法，其中所述水性测定样品的ph为5.0至7.0。41.根据权利要求37至40中任一项所述的方法，其中所述水性测定样品和所述有机溶剂以约80:20至约99.9:0.1的比例组合。42.根据权利要求41所述的方法，其中所述水性测定样品和所述有机溶剂以约90:10至约98:2的比例组合。43.根据权利要求37至42中任一项所述的方法，其中通过在330nm的荧光激发和495nm的荧光发射来测量所述荧光。44.根据权利要求37至43中任一项所述的方法，其中测量所述荧光持续直至24小时。45.根据权利要求37至43中任一项所述的方法，其中测量所述荧光持续约24小时至约400小时。46.根据权利要求37至43中任一项所述的方法，其中测量所述荧光持续超过约100小时。47.根据权利要求37至46中任一项所述的方法，其中所述蛋白质制剂是细胞培养上清液。48.根据权利要求37至46中任一项所述的方法，其中所述蛋白质制剂是部分纯化的蛋白质制剂。49.根据权利要求37至46中任一项所述的方法，其中所述蛋白质制剂是纯化的蛋白质制剂。50.根据权利要求37至49中任一项所述的方法，其中所述蛋白质制剂包含治疗性蛋白质。51.根据权利要求37至50中任一项所述的方法，其中所述蛋白质制剂包含表面活性剂。52.根据权利要求51所述的方法，其中所述表面活性剂是聚山梨酯。53.根据权利要求52所述的方法，其中所述聚山梨酯是聚山梨酯-20、聚山梨酯-80或其
2-甲酰氨基-4-甲基-戊酸(s)-1-[[(2s,3s)-3-己基-4-氧代-2-氧杂环丁烷基]甲基]-十二烷基酯(奥利司他)。78.根据权利要求38或40至77中任一项所述的方法，其中所述脂肪酶抑制剂以约1μm至约50μm添加。79.根据权利要求78所述的方法，其中所述脂肪酶抑制剂以约5μm至约25μm添加。80.一种试剂盒，其包含在两个或更多个容器中的：a.有机溶剂；b.4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)；c.脂肪酶抑制剂。81.根据权利要求80所述的试剂盒，其进一步包含缓冲剂、盐或两者。82.根据权利要求80或81所述的试剂盒，其进一步包含缓冲剂交换柱。83.一种试剂盒，其包含：a.包含4-甲基伞形酮油酸酯(4muo)的有机溶剂；b.适合交换蛋白质制剂的缓冲剂的柱；和c.脂肪酶抑制剂。84.根据权利要求80至83中任一项所述的试剂盒，其中所述有机溶剂是醇、亚砜、腈或其组合。85.根据权利要求84所述的试剂盒，其中所述有机溶剂为二甲亚砜(dmso)。86.根据权利要求84所述的试剂盒，其中所述有机溶剂包含乙腈。87.根据权利要求84所述的试剂盒，其中所述有机溶剂包含醇。88.根据权利要求84所述的试剂盒，其中所述有机溶剂包含乙腈和异丙醇的混合物。89.根据权利要求84所述的试剂盒，其中所述有机溶剂是c
1-c6醇。90.根据权利要求89所述的试剂盒，其中所述有机溶剂是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇、异丁醇、叔丁醇，或其组合。91.根据权利要求80至90中任一项所述的试剂盒，其中所述脂肪酶抑制剂是(s)-2-甲酰氨基-4-甲基-戊酸(s)-1-[[(2s,3s)-3-己基-4-氧代-2-氧杂环丁烷基]甲基]-十二烷基酯。92.根据权利要求81所述的试剂盒，其中所述盐是氯化钠、氯化钙或其组合。93.根据权利要求81所述的试剂盒，其中所述盐为氯化钠和氯化钙。94.根据权利要求81、92或93中任一项所述的试剂盒，其中所述缓冲剂是tris。95.根据权利要求81、92或93中任一项所述的试剂盒，其中所述缓冲剂是bis-tris。

技术总结
本公开内容提供了用于检测脂肪分解活性的组合物、方法和试剂盒。在一些实施例中，该组合物包含水性测定样品和有机溶剂，其中有机溶剂包含4-甲基伞形酮油酸酯(4MuO)。本文还提供了用于确定蛋白质制剂稳定性的方法。了用于确定蛋白质制剂稳定性的方法。了用于确定蛋白质制剂稳定性的方法。


技术研发人员：汉斯-克里斯蒂安
受保护的技术使用者：隆萨有限公司
技术研发日：2020.09.09
技术公布日：2022/4/15