脂肪酶变体及其组合物的制作方法

技术特征：
1.一种如seq id no:2所示的多肽的亲本脂肪酶的变体，其中：i)所述变体是具有脂肪酶活性的多肽；并且ii)所述变体是与如seq id no:2所示的多肽具有至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但小于100％序列同一性的多肽；iii)所述变体是由以下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸与如seq id no:1所示的成熟多肽编码序列具有至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、但小于100％序列同一性；iv)所述变体是具有脂肪酶活性的ii)或iii)的多肽的片段；其中所述变体包含：(a)对应于以下的取代：d4a；i7d；k14e；t17s；g34d；r36e；r36m；r36v；r36q；s38d；s38e；g43d；g43h；n47d；n47e；n47g；n47h；q49t；q49v；l57s；d60g；d60v；g68i；e69m；e69t；k70d；k70h；k70q；a89y；v94d；v94l；n102m；g109r；q118s；k120a；k120d；k120e；k120n；k120m；k120g；k120p；k120q；k120s；k120v；a123e；k136g；h158e；h158q；h161d；h161e；a162s；n163e；n163h；i174a；p177g；p177i；p177k；p177l；a178i；a178l；a178t；a178v；n181k；n181l；n181t；n181w；y182w；v183m；i184v；g185a；g185i；g185k；g185r；g185t；g185w；g185y；k187g；k187l；p189a；p189l；p189m；p189n；p189q；p189r；p189t；p189v；p189w；i199t；i199v；e196m；s206g；s206v；a207n；l211c；r223a；r223e；r223g；r223h；r223k；r223n；r223q；s224t；i232p；232q；t234s；d235a；i248l；s252n；l260f；和/或(b)对应于以下的取代：n163e r223n；k70e s206g；r101v s206v；a15e k120q；d130r s206g；d130r s206v；t2s a15e；和/或(c)对应于以下的取代：r36v v183m r223n；n47h k70e s206g；n163e r223n s252n；n47d k120g r223n；g43d n47d k120g；k70e h195s s206g；k70e l156f s206g；a178y p189v r223n；r36e g43d n47d；k70d n163e s252n；n47d k120g n163e；k70e p189q s206g；r36t k70e s206g；r36i k70e s206g；q49t k70e s206g；g43d k70e s206g；r36k k70e s206g；k70e p189m s206g；k52a k70e s206g；r36m k70e s206g；r36e k70e s206g；r101v s206v r223s；r36v n47d k120g；k14a k70e s206g；d4c s206g n236c；k70e g185l s206g；r36y k70e s206g；r36l k70e s206g；k70e p189l s206g；r36a k70e s206g；r101v d130r s206g；d4c s206g n236c；d4c s206v n236c；r36f k70e s206g；k70e k120p s206g；和/或(d)对应于以下的取代：n163e g185h r223n s252n；n163e n181w r223n s252n；k70d n163e r223n s252n；d4c s206g n236c s252n；d4c s206g r223n n236c；a178y v183m p189v r223n；和/或(e)对应于以下的取代：d4c p189v s206g r223n n236c；d4c n163e s206g n236c s252n；d4c n163e s206g r223n n236c；d4c a178y s206g r223n n236c；d4c k108a d130r s206v n236c；
和/或(f)对应于以下的取代：s1c a8c t17c l225r n230c l254c；s1c a8c t17c l225r n230c l254c；d4c n97d r101v d130r s206v n236c；和/或(g)对应于以下的取代：s1c a8c t17c i184n l225c n230c l254c；s1c a8c t17c y75f l225c n230c l254c；s1c a8c t17c q49l l225c n230c l254c；s1c a8c t17c y167f l225c n230c l254c；s1c a8c t17c y190f l225c n230c l254c；s1c a8c t17c q49i l225c n230c l254c；s1c a8c t17c l225c n230c f244n l254c；s1c a8c a15e t17c l225c n230c l254c；s1c a8c t17c a162s l225c n230c l254c；s1c a8c t17c v183s l225c n230c l254c；s1c a8c t17c i164l l225c n230c l254c；s1c a8c t17c y19f l225c n230c l254c；s1c a8c t17c e165s l225c n230c l254c；s1c a8c t17c q49s l225c n230c l254c；s1c a8c t17c k187n l225c n230c l254c；s1c a8c a15r t17c l225c n230c l254c；和/或(h)对应于以下的取代：r101v a131r a152s n176t s206g r223s f247v g255d；s1c d4n r6s a8c t17c l225c n230c l254c；r101v a131r a152s n176t s206g r223s f247v g255d；s1c a8c t17c k136n v138s l225c n230c l254c；a26c i32c a45v q49k n97d d130r h159k s224r；s1c a8c t17c k70e i184n l225c n230c l254cs1c a8c t17c v76i l225c n230c l254c；和/或(i)对应于以下的取代：s1c a8c t17c h159k h161n n163s l225c n230c l254c；s1c a8c t17c v76i v138l i164l l225c n230c l254c；和/或(j)对应于以下的取代：s1c a8c t17c s38t v76i v138l i164l l225c n230c l254c；和/或(k)对应于以下的取代：a8c t17c r36n g43d q49t k70n k72s k120g s206v r223n l225c l254c；和/或(l)对应于以下的取代：a8c t17c r36v s38d g43d n47d q49n k70n k72s k120g t148v e165s n181w s206v
r223h l225c l254c。2.一种组合物，所述组合物包含如权利要求1所述的变体。3.如权利要求1所述的脂肪酶变体或如权利要求2所述的组合物用于水解脂肪酶底物的用途。4.一种用于清洁表面的方法，所述方法包括使所述表面与如权利要求1所述的脂肪酶变体或如权利要求2所述的组合物接触。5.一种水解脂肪酶底物的方法，所述方法包括用如权利要求1所述的脂肪酶变体或如权利要求2所述的组合物处理所述脂肪酶底物。6.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码如权利要求1所述的脂肪酶变体。7.一种核酸构建体，所述核酸构建体包含如权利要求6所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸可操作地连接至一个或多个控制序列，所述一个或多个控制序列指导如权利要求1所述的脂肪酶变体在重组宿主细胞中的产生。8.一种表达载体，所述表达载体包含如权利要求6所述的多核苷酸或如权利要求7所述的核酸构建体。9.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含如权利要求6所述的多核苷酸、如权利要求7所述的核酸构建体或如权利要求8所述的表达载体。10.一种产生脂肪酶变体的方法，所述方法包括：a)在适合于表达所述脂肪酶变体的条件下培养如权利要求9所述的宿主细胞；以及b)回收所述脂肪酶变体。

技术总结
本发明涉及如SEQ ID NO:2所示的亲本脂肪酶的脂肪酶变体，所述脂肪酶变体具有改善的洗涤性能。本发明还涉及编码本发明的脂肪酶变体的多核苷酸、包含本发明的脂肪酶变体的组合物、以及产生本发明的此类脂肪酶变体的方法和所述脂肪酶变体或其组合物的用途。所述脂肪酶变体或其组合物的用途。


技术研发人员：S.F.克里斯坦森 L.鲍恩斯加德 A.D.富尔顿 A.G.桑德斯特罗姆
受保护的技术使用者：诺维信公司
技术研发日：2020.07.01
技术公布日：2022/3/18