一种屎肠球菌高密度发酵培养方法与流程

技术特征：
1.一种屎肠球菌高密度发酵培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)屎肠球菌一级种子液培养：取屎肠球菌平板单菌落，接种于一级种子培养基中，装液量50ml/150ml，37℃培养16小时，得到一级种子液；(2)屎肠球菌二级种子液培养：将步骤1培养的屎肠球菌一级种子液接种于二级种子培养基中装液量540ml/1000ml，接种量3％，37℃培养4～8h，得到二级种子液；(3)屎肠球菌液体发酵：发酵培养基灭菌结束后通冷却水保温至37℃，接入二级种子液，接种量3％，搅拌速度150rpm，维持ph6.0～7.5；发酵2h后开始流加补料培养基，补料培养基的补充体积为2l，发酵12h；所述步骤(3)发酵培养基组分及其用量为：糖蜜20g/l，胰蛋白胨10g/l，牛肉浸粉20g/l，乙酸钠6.42g/l，磷酸二氢钾2g/l，柠檬酸氢二铵2g/l，硫酸镁0.2g/l，硫酸锰0.04g/l。2.根据权利要求1所述的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述屎肠球菌为屎肠球菌cgmcc no.12851。3.根据权利要求1或2所述的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述一级种子培养基组分及其用量为：牛肉浸粉5g/l，蛋白胨10g/l，酵母浸粉5g/l，氯化钠5g/l，葡萄糖10g/l。4.根据权利要求1或2所述的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述二级种子培养基组分及其用量为：牛肉浸粉12.5g/l，蛋白胨5g/l，酵母浸粉2.5g/l，氯化钠2.5g/l，葡萄糖5g/l，糖蜜10g/l，胰蛋白胨5g/l，乙酸钠3.21g/l，磷酸二氢钾1g/l，柠檬酸氢二铵1g/l，硫酸镁0.1g/l，硫酸锰0.02g/l。5.根据权利要求1或2所述的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述步骤(2)二级种子培养时间为5-6h。6.根据权利要求1或2所述的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述步骤(3)液体发酵过程中维持ph 6.0-6.5。7.根据权利要求1或2所述的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述补料培养基由25％糖蜜、17.5％玉米浆制成。

技术总结
本发明涉及一株屎肠球菌的高密度发酵培养基及其发酵工艺，属于乳酸菌培养技术领域。其中，所述屎肠球菌的保藏编号为CGMCC NO.12851；利用本发明提供的高密度发酵培养基及分批补料发酵工艺，屎肠球菌在30L发酵罐规模条件下活菌数能达到4.0*10


技术研发人员：吴昊 庞远祥 高子昂 郭致君 刘雪连 张海亮
受保护的技术使用者：北京大北农科技集团股份有限公司
技术研发日：2022.01.07
技术公布日：2022/3/15