一株降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌的驯化培育方法与流程

技术特征：
1.一株降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌的驯化培育方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，提供16份含同一浓度玉米赤霉烯酮的mrs液体培养基分别接入公司菌种库保存的16份凝结芽孢杆菌菌株，然后37℃条件下进行混合培养24h，分别检测16份上述混合菌株液中上清液的玉米赤霉烯酮浓度，选取玉米赤霉烯酮浓度降解率最大的混合菌株液在mrs平板上进行划线扩增培养，挑选单菌得到目的菌株；步骤二，提供n份mrs液体培养基和上述凝结芽孢杆菌种子液；分别向n份所述mrs液体培养基中添加玉米赤霉烯酮甲醇储备液，制得n份不同玉米赤霉烯酮浓度的驯化培养基；步骤三，以相同接种量将所述凝结芽孢杆菌种子液分别接种到n个不同玉米赤霉烯酮浓度的所述驯化培养基中进行培养，得到n份一次诱导混合菌株液；分别检测n份所述一次诱导混合菌株液中上清液的玉米赤霉烯酮浓度，选取玉米赤霉烯酮浓度降解率最大的一次诱导混合菌株液在mrs培养平板上进行划线扩增培养，得到循环出发菌种；步骤四，依次采用n份所含玉米赤霉烯酮浓度由低到高的所述驯化培养基对所述循环菌种进行逐级传代培养，当逐级传代培养后的上清液中的玉米赤霉烯酮浓度不变时，保留此菌种作为降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌生产菌种，其中，n为大于等于3的自然数。2.根据权利要求1所述的降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌菌株的驯化培育方法，其特征在于， 所述步骤一中，所述mrs液体培养基的制备方法包括：蛋白胨 10.0g、牛肉浸取物 10.0g、酵母提取液 5.0g、葡萄糖 20.0g、乙酸钠 5.0g、柠檬酸二胺 2.0g、吐温-80 1.0g、磷酸氢二钾 0.4g、硫酸镁 0.58g、硫酸锰0.29、碳酸钙20.0g、琼脂15-20g、加入蒸馏水定容至100ml，ph调至6.3，121℃，0.1mpa，灭菌20min，制得所述菌种保存培养基。3.根据权利要求2所述的降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌菌株的驯化培育方法，其特征在于， 所述步骤二中，所述凝结芽孢杆菌种子液的制备方法包括：以接种量为0.5%
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5%的标准将凝结芽孢杆菌单菌接种至所述mrs液体培养基中，并于37℃条件下对其恒温静置培养24h
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36h，得到所述凝结芽孢杆菌种子液。4.根据权利要求3所述的降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌菌株的驯化培育方法，其特征在于，还包括提供一种菌种保存培养基，将所述降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌菌生产菌种保存于所述菌种保存培养基中。5.根据权利要求4所述的降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌菌株的驯化培育方法，其特征在于，制备所述菌种保存培养基的步骤包括：将蛋白胨 10.0g、牛肉浸取物 10.0g、酵母提取液 5.0g、葡萄糖 20.0g、乙酸钠 5.0g、柠檬酸二胺 2.0g、吐温-80 1.0g、磷酸氢二钾 0.4g、硫酸镁 0.58g、硫酸锰0.29、碳酸钙20.0g、琼脂15-20g、加入蒸馏水定容至100ml，ph调至6.3，121℃，0.1mpa，灭菌20min，制得所述菌种保存培养基。

技术总结
本发明涉及一种降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌菌株的驯化培育方法，是以公司保存的各株凝结芽孢杆菌为基础菌种，菌种保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号GDMCC.GIM1.645。该菌种是公知公用菌种，方便获得。将其接种于含不同玉米赤霉烯酮浓度的MRS培养液中进行逐级传代培养；得到的新凝结芽孢杆菌AMNJ008，菌株AMNJ008具有发酵水平高、产芽孢率高、耐高温、抗逆性强、降解玉米赤霉烯酮降解率高等特点。霉烯酮降解率高等特点。


技术研发人员：孙育荣 鲁陈 王燕
受保护的技术使用者：江苏奥迈生物科技有限公司
技术研发日：2021.12.13
技术公布日：2022/3/15